生物藥物分析方法的質(zhì)量控制

劉雪松

摘 要：目的：討論應(yīng)用于藥代動力學(xué)和生物利用度研究的生物藥物分析方法的質(zhì)量控制。方法：分析近年來國際學(xué)術(shù)會議資料，基于此基礎(chǔ)系統(tǒng)地介紹分析質(zhì)量研究方法的主要指標：精密度、準確度、檢測限、定量限、標準曲線、方法選擇性和穩(wěn)定性等。結(jié)果：生物藥物分析方法的質(zhì)量控制是藥代動力學(xué)和生物利用度研究中必不可少的重要手段。結(jié)論：本文對生物藥物分析方法的質(zhì)量控制可供評價和控制分析方法參考用。

關(guān)鍵詞：生物藥物；分析方法

1 生物藥物的分析

生物藥物的分析在實際生產(chǎn)中是十分必要的，通過藥物分析手段來測定原料和制劑中藥物及有關(guān)雜質(zhì)的含量，控制藥物生產(chǎn)至臨床應(yīng)用前藥物的質(zhì)量，生物藥物分析是藥物體內(nèi)研究和臨床應(yīng)用期間測定生物材料中藥物的含量的主要依據(jù)。生物藥物分析的目的是保證用藥的安全有效，鑒于分析方法本身質(zhì)量的重要性，近年對藥物分析方法質(zhì)量控制的研究相當普及。

1.1生物藥物分析的應(yīng)用范圍

生物藥物分析主要應(yīng)用于：？治療藥物監(jiān)測，血藥濃度測定數(shù)據(jù)是否準確將直接影響藥物療效和毒副作用；？藥代動力學(xué)和生物利用度研究已列入衛(wèi)生部《新藥審批辦法》中，規(guī)定中有關(guān)于申報內(nèi)容、數(shù)據(jù)的可靠性、獲得的參數(shù)等要求。如同藥物分析一樣，生物藥物分析方法的質(zhì)量控制也是必要的。

1.2生物藥物分析的研究進展

國內(nèi)外研究者應(yīng)用于藥代動力學(xué)和生物利用度的分析方法的質(zhì)量控制已經(jīng)很成熟。其中有文獻對生物藥物分析方法給予了“評價”[1]，還有一些研究從法定角度出發(fā)應(yīng)進行“認證”[2]。另外，國內(nèi)學(xué)者測定藥代動力學(xué)參數(shù)和生物利用度的新藥非常規(guī)檢驗藥物，得到了普遍認可[3]。近年見諸國內(nèi)雜志的生物藥物分析方法研究論文，雖然都進行了一些方法學(xué)評價，但缺乏系統(tǒng)研究，明顯滯后于生物藥物分析目前已在新藥體內(nèi)研究中廣泛應(yīng)用的現(xiàn)況。

2須考核的方法和內(nèi)容

新藥申報資料應(yīng)用的分析方法，都應(yīng)當考核[4]，包括：①儀器分析法；②生物學(xué)方法：免疫分析法和微生物測定法。考核內(nèi)容應(yīng)包括：①書面詳細報告測定方法：包括樣品采集、處理和貯存，測定時樣品預(yù)處理方法、測定操作、儀器及其參數(shù)，數(shù)據(jù)處理與結(jié)果計算等；②提供方法建立時對方法質(zhì)量全面考核結(jié)果與數(shù)據(jù)；③提供方法應(yīng)用階段的質(zhì)控數(shù)據(jù)。

3考核的指標

3.1精密度和準確度

同藥物分析一樣，精密度和準確度也是生物藥物分析方法考核的重要指標，但考核的內(nèi)容和方法有其特殊性。分析方法建立時的考核[5]：①準確度和精密度測定可同時進行；②分析方法應(yīng)用中的考核，測定樣品時，加入質(zhì)控樣品作隨行分析，可照標準曲線各濃度配制法；③樣品測定次數(shù)與重復(fù)測定，一般只需作單樣分析，只有少數(shù)不穩(wěn)定樣品或免疫分析方法才作雙樣分析，并應(yīng)在方法考核中說明。

3.2檢測限和定量限

近年有藥物分析文獻詳細介紹檢測限和定量限的定義和測定方法，生物藥物分析也使用LOD和LOQ表示方法的靈敏度，但因生物樣品量少，不能以增加取樣量方式提高靈敏度，因此更強調(diào)LOQ，它反映了標準曲線低濃度端的可靠性，測定時記錄各濃度每次測定得到的藥物信號強度S與噪音強度N。

3.3標準曲線

所有生物藥物分析方法都必須作標準曲線。濃度與響應(yīng)值的函數(shù)關(guān)系可作成坐標圖或用回歸方程表示?？己藰藴是€可以使用以下方法：①每次測定樣品應(yīng)同時作標準曲線，作法與考核時應(yīng)完全一致；②標準濃度點5-8個，每個濃度測定1次或2次；③濃度上限為樣品最高濃度的120%，下限為最低濃度的80%；④線性度r=0.9900，截距與最高濃度響應(yīng)值之比應(yīng)略高。

3.4選擇性

選擇性又稱專屬性，目前很多文獻均列為考核指標，但考核的內(nèi)容和方法尚未統(tǒng)一，下面為目前公認的應(yīng)考核內(nèi)容：生物基質(zhì)的影響：可取3個以上不同個體的空白樣品，考察正常生理情況下樣品中生物基質(zhì)的影響。藥物代謝物和配伍用藥物的影響：應(yīng)針對可能存在的藥物代謝物和合并用藥，可將代謝物標準品和藥物標準品加入空白樣品以及加入供分析樣品后再測定，觀察是否有干擾。

3.5穩(wěn)定性與萃取回收率

考核藥物標準品溶液的穩(wěn)定性，即在貯存條件下可穩(wěn)定的時間。包括：①在室溫中的穩(wěn)定性；②冷凍條件下的穩(wěn)定性；③此外還應(yīng)考察加入穩(wěn)定劑，考察樣品提取物的穩(wěn)定性。萃取回收率指預(yù)處理能夠?qū)⑸飿悠穬?nèi)含藥物多少比例分離出來供分析，它與分析方法的LOQ密切相關(guān)，可指導(dǎo)樣品預(yù)處理。

3.6免疫分析、藥物代謝分析與立體異構(gòu)分析

免疫分析應(yīng)著重考察結(jié)構(gòu)相近化合物的交叉免疫干擾，并盡可能用色譜法核對結(jié)果。藥物代謝物的分析應(yīng)根據(jù)文獻要求，對于測定代謝物或同時測定藥物和代謝物的分析方法，應(yīng)按照前述相同要求考核。藥物立體異構(gòu)體的分析，由于具立體異構(gòu)的藥物，其左、右旋體在體內(nèi)的處置和生理活性都可能存在差異，分析生物樣品中不同的藥物立體異構(gòu)體。

4 討論

目前國內(nèi)、外生物藥物分析方法取得了很大的進展，本文目的在于討論應(yīng)用于藥代動力學(xué)和生物利用度研究的生物藥物分析方法的質(zhì)量控制。采用分析近年來國際學(xué)術(shù)會議資料，基于此基礎(chǔ)系統(tǒng)地介紹分析質(zhì)量研究方法的主要指標：精密度、準確度、檢測限、定量限、標準曲線、方法選擇性和穩(wěn)定性等方法，結(jié)果表明生物藥物分析方法的質(zhì)量控制是藥代動力學(xué)和生物利用度研究中必不可少的重要手段。希望本文可以為質(zhì)量控制和分析方法提供參考。

參考文獻：

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[3]李美玲，徐銘凱.生物藥物的研究發(fā)展及其分析方法的質(zhì)量控制[J].工程技術(shù)：引文版， 2016（9）：00298-00298.

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[5]劉國圣.微生物制藥及微生物藥物分析[J]. 南方農(nóng)業(yè)， 2016， 10（3）：156-157.endprint