低氮對不同茶樹品種葉綠素?zé)晒馓匦缘挠绊?/h1>
2017-08-27 02:40:36林鄭和鐘秋生郝志龍游小妹陳志輝陳常頌單睿陽阮其春
茶葉科學(xué) 2017年4期
林鄭和，鐘秋生，郝志龍，游小妹，陳志輝，陳常頌*，單睿陽，阮其春
1. 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所，福建 福安 355015；2. 福建農(nóng)林大學(xué)園藝學(xué)院，福建 福州 350002
低氮對不同茶樹品種葉綠素?zé)晒馓匦缘挠绊?/p>
林鄭和1，鐘秋生1，郝志龍2，游小妹1，陳志輝1，陳常頌1*，單睿陽1，阮其春1
1. 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所，福建 福安 355015；2. 福建農(nóng)林大學(xué)園藝學(xué)院，福建 福州 350002
葉綠素?zé)晒鈪?shù)經(jīng)常用來評價植物抗逆脅迫強弱，反應(yīng)植物脅迫的生理狀態(tài)等。為靈敏檢測和判斷茶樹品種低氮脅迫的差異，科學(xué)指導(dǎo)施肥，本研究以前期篩選的相對氮高效茶樹品種黃旦與相對氮敏感茶樹品種本山為試驗材料，檢測不同供氮處理下葉綠素?zé)晒鈪?shù)及生物量的變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)低氮條件下茶樹葉片氮含量顯著偏低，但該條件下黃旦品種葉片氮含量明顯高于本山品種；低氮條件下茶樹葉片最小熒光 Fo、調(diào)節(jié)性能量耗散的量子產(chǎn)額Y(NPQ)、非光化學(xué)淬滅系數(shù)（NPQ）、非調(diào)節(jié)性能量耗散的量子產(chǎn)額Y(NO)等顯著增加，黃旦品種在低氮條件下Fo、Y(NPQ)、Y(NO)及NPQ參數(shù)都要小于本山品種；而參數(shù)最大熒光（Fm）、光系統(tǒng)Ⅱ最大光合效率（Fv/Fm）、光化學(xué)淬滅系數(shù)（qP與qL）、實際光合效率Y(Ⅱ)顯著下降，其中本山品種低氮下明顯小于黃旦?？傊?，氮高效茶樹品種黃旦能減緩低氮脅迫對植株造成的損害，并維持相對較高的光合效率，保證了低氮條件下有較高的產(chǎn)量。
低氮；茶樹品種；光合效率；葉綠素?zé)晒?/p>
進入21世紀(jì)以來，我國茶產(chǎn)業(yè)呈快速發(fā)展的勢態(tài)。截止2016年底，我國茶園面積超過 266.67萬 hm2，接近世界茶園的 50%，茶葉產(chǎn)量達(dá)到220多萬t，均居世界第一位。目前很多茶農(nóng)片面追求茶葉產(chǎn)量，毫無節(jié)制地施用大量氮肥，雖然提高了茶葉產(chǎn)量，但是也造成了氮素資源嚴(yán)重浪費、茶園氮利用率下降、生態(tài)環(huán)境條件惡化等不良后果[1]。隨著茶樹抗逆生理機制研究的深入，人們在重視氮肥增產(chǎn)效用的同時，越來越關(guān)注氮肥在調(diào)節(jié)作物抗逆中的作用，氮肥的合理施用一直是調(diào)控茶樹生長發(fā)育的重要措施[2-3]。
氮素是蛋白質(zhì)和核酸的重要組成元素之一[4-5]，缺氮對茶樹光合特性及葉綠素?zé)晒庥兄@著的影響[6]。葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)可以快速、靈敏和非破壞性地分析逆境因子對光系統(tǒng)Ⅱ的破壞影響，其中包括光能的吸收、捕獲光的能力、能量的分配比率和電子傳遞分配等。與傳統(tǒng)的氣體交換參數(shù)相比，葉綠素?zé)晒鈪?shù)更能直接反映植物的“內(nèi)在性”特征[7]。當(dāng)外界條件發(fā)生變化時，葉綠素?zé)晒鈪?shù)可以在一定程度上反映出逆境因子對植物光系統(tǒng)的內(nèi)在影響。葉綠素?zé)晒鈪?shù)作為光合作用的探針，已被應(yīng)用到研究和探測植物體內(nèi)光合器官轉(zhuǎn)運光能狀況、電子傳遞及植物對環(huán)境脅迫的響應(yīng)機理等領(lǐng)域[8]。
盡管調(diào)制葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)出現(xiàn)較晚，但由于其測定快速可靠、分析度靈敏且對檢測的樣品無損傷等特點，使其快速受到植物光合研究領(lǐng)域的科研人員的青睞[9]。調(diào)制葉綠素?zé)晒獬上癫粌H可以檢測葉片光合作用的橫向異質(zhì)性，還可早期檢測肉眼不可見的脅迫損傷，甚至是闡明損傷機理和調(diào)節(jié)機制。近年來，許多國內(nèi)學(xué)者將葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)應(yīng)用于棉花[3]、玉米[4]、小麥[8,10]、甜菜[7]等作物的氮素營養(yǎng)研究中，發(fā)現(xiàn)施氮能增大光系統(tǒng) II實際光量子產(chǎn)量Y(II)、光系統(tǒng)II最大光化學(xué)效率（Fv/Fm）、光化學(xué)猝滅系數(shù)（qP），而非光化學(xué)猝滅系數(shù)（qN）則隨氮缺乏程度的加劇而升高。然而關(guān)于茶樹葉片葉綠素?zé)晒鈪?shù)與氮素脅迫之間關(guān)系的研究鮮見報道。本研究利用IMAGING-PAM型便攜式熒光儀（PAM,Germany），測定了不同濃度的氮脅迫對不同氮效率的茶樹品種葉綠素?zé)晒鈪?shù)的影響，為今后茶園氮肥的施用提供理論依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 試驗材料培養(yǎng)
2016年 3月 5日開始進行茶樹盆栽沙培試驗，在福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所試驗地完成。試驗所采用前期初步篩選的相對耐低氮（黃旦）與氮較敏感品種（本山）為材料，盆栽于6 L的裝滿河沙的陶土花盆中，每盆2株，每處理20盆，于自然溫、光條件下培養(yǎng)。營養(yǎng)液參照文獻(xiàn)[2,11]配制，完全營養(yǎng)液配方見表 1。
移栽后預(yù)培養(yǎng)6周，然后進行試驗處理，每次每盆各處理分別施含0、50、100、300、1 200、6 000 mmol·L-1N 的 NH4NO3營養(yǎng)液約500 mL，每周3次，處理18周后出現(xiàn)明顯的癥狀，進行檢測、取樣工作。
1.2 測定方法
1.2.1 植株干重的測定
植株收獲后，用自來水沖洗干凈，然后分為根、莖、葉部分，每個處理6個重復(fù)，將鮮樣先在105℃下先烘30 min，再在80℃下烘至恒重（約48 h），然而測定各部分的重量。
表1 完全營養(yǎng)液配方Table 1 Full nutrient solution formula
1.2.2 茶樹葉片氮含量的測定
茶樹葉片氮含量的測定：采用濃H2SO4-H2O2消煮，用凱氏定氮儀（FOSS）進行測定[12]。
1.2.3 葉綠素?zé)晒鈪?shù)測定
采用 IMAGING-PAM型調(diào)制葉綠素?zé)晒鈨x，所有測定工作都在室溫、植物暗適應(yīng) 3 h后進行。經(jīng)過充分暗適應(yīng)后，植物體內(nèi)電子門均處于開放狀態(tài)，當(dāng)打開測量光就得到初始熒光（Fo），此時增加一個飽和脈沖，所有的電子門就都將該用于光合作用的能量轉(zhuǎn)化為熒光和熱，此時得到的葉綠素?zé)晒鉃樽畲鬅晒猓‵m）。光照狀態(tài)下打開飽和脈沖時，電子門被完全關(guān)閉，光合作用被暫時抑制，也就是說光化學(xué)淬滅被全部抑制，測得光下最大熒光（Fm′）與光下最小熒光值（Fo′）。但此時光下最大熒光值（Fm′）還是比最大熒光（Fm）低，也就是說還存在熒光淬滅，這些剩余的熒光淬滅即為非光化學(xué)淬滅[13]。PSII的實際光合效率：Y(II)=(Fm′-F)/Fm′[14]；PSII 調(diào)節(jié)性能量耗散的量子產(chǎn)額Y(NPQ)：Y(NPQ)=1-Y(II)-1/[NPQ+1+qL(Fm/Fo-1)][15]。參數(shù) NPQ為非光化學(xué)熒光淬滅：(Fm-Fm′)/Fm′，反映 PSII耗散過剩光能進行自我保護的下調(diào)作用。PSII非調(diào)節(jié)性能量耗散的量子產(chǎn)額Y(NO)：Y(NO)=1/[NPQ+1+qL(Fm/Fo-1)][16]。光化學(xué)淬滅系數(shù)qP反映的是 PSII反應(yīng)中心的開放程度qP=(Fm′-F)/(Fm′-Fo′)。非光化學(xué)淬滅系數(shù) qN：qN=(Fm-Fm′)/(Fm-Fo′)，主要用于熱耗散等。光化學(xué)淬滅系數(shù)qL反映的是PSII反應(yīng)中心的開放程度：
1.3 數(shù)據(jù)分析
試驗數(shù)據(jù)用 DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進行差異顯著性（LSD法）分析，所有分析試驗均重復(fù)4～6次（不同盆中1株植株為1重復(fù)）。
2 結(jié)果與分析
2.1 不同供氮處理對葉片氮含量的影響
從圖1可以看出，隨著供氮濃度的增加，葉片氮含量依次增加。但供氮從300 μmol·L-1增加到 6 000 μmol·L-1時，黃旦葉片氮含量的變化趨勢較本山的更加明顯。相比發(fā)現(xiàn)，當(dāng)供氮從100 μmol·L-1增加到 6 000 μmol·L-1時，黃旦葉片氮含量都要高于本山，特別在最高氮處理下，黃旦品種葉片氮含量增加明顯高于本山品種。
2.2 不同供氮處理對生物量的影響
從圖 2可看出，當(dāng)供氮處理從 0增加到100 μmol·L-1時，茶樹根、莖、葉干重都明顯增加。當(dāng)供氮從 300 μmol·L-1增加到 6 000 μmol·L-1，除本山品種葉干重 300 μmol·L-1到1 200 μmol·L-1顯著增加外，其余茶樹根、莖、葉干重未發(fā)生顯著變化。此外大部分的熒光參數(shù)都在供氮濃度 300～6 000 μmol·L-1時無明顯變化?；诖?，本試驗把供氮濃度為0、50、100 μmol·L-1稱為低氮處理。圖 2（B、C、F與G）中發(fā)現(xiàn)，本山莖、葉片在低氮處理的相同濃度下干重明顯低于黃旦，當(dāng)供氮處理從300 μmol·L-1增加到 6 000 μmol·L-1時，黃旦葉片干重都要高于本山。圖2（D與H）中發(fā)現(xiàn)，供氮處理為 0增加到 50 μmol·L-1時，本山品種根冠比未發(fā)生明顯變化，之后隨著供氮處理增加，本山品種根冠比顯著下降。而黃旦品種根冠比在供氮為 300 μmol·L-1時最大，其余各處理未發(fā)生顯著變化。
圖1 不同供氮處理對茶樹葉片氮含量的影響Fig. 1 The effects of nitrogen supply on leaf N content in tea plants
2.3 不同供氮處理對熒光參數(shù)Fo、Fm和Fv/Fm的影響
從圖3-A看出，當(dāng)供氮濃度從為0增加到50 μmol·L-1時，本山品種的 Fo變化顯著，當(dāng)供氮濃度從 50 μmol·L-1增加到 300 μmol·L-1時，F(xiàn)o依次顯著下降，之后隨著供氮濃度的增加，高濃度處理間沒有發(fā)生顯著變化。從圖3-D中可以看出，黃旦品種的 Fo在供氮濃度為 0、50 μmol·L-1時，顯著高于供氮濃度在300～6 000 μmol·L-1的處理，供氮高于 100 μmol·L-1后未發(fā)生顯著變化。對比發(fā)現(xiàn)本山品種低氮條件下（供氮 0～100 μmol·L-1）Fo都略高于黃旦（圖3-A與圖3-D）。
當(dāng)供氮從 0增加到 50 μmol·L-1時，本山品種最大熒光 Fm略有增加，之后隨著供氮濃度的增加，F(xiàn)m值依次顯著增加。而當(dāng)供氮濃度從 0增加到 100 μmol·L-1時，黃旦的最大熒光Fm隨濃度的增加而顯著增加，供氮大于300 μmol·L-1后差異不顯著?？傮w看，本山品種的最大熒光Fm值在低氮處理時低于黃旦。
當(dāng)供氮濃度從 0增加 100 μmol·L-1時，兩品種的茶樹葉片最大光合效率 Fv/Fm依次顯著增加，之后兩品種都未發(fā)生顯著變化，且本山品種相同濃度的低氮處理下，F(xiàn)v/Fm明顯低于黃旦。
2.4 不同供氮處理對 Y(Ⅱ)、Y(NPQ)與 Y(NO)的影響
從圖 4可看出，本山品種供氮濃度從 0增加 100 μmol·L-1時，葉片 PSⅡ?qū)嶋H光合效率Y(Ⅱ)依次顯著增加，之后未見明顯變化，而黃旦品種僅略有增加，未見顯著變化，僅在供氮濃度為 1 200與 6 000 μmol·L-1時，才顯著增加，總體看兩品種的Y(Ⅱ)都隨供氮濃度的增加而增加。
PSⅡ調(diào)節(jié)性能量耗散的量子產(chǎn)額Y(NPQ)在供氮濃度從 0增加到 100 μmol·L-1時，依次顯著下降，之后未發(fā)生顯變化。圖4-A、圖4-B、圖 4-D、圖4-E中發(fā)現(xiàn)，本山葉片的Y(Ⅱ)與Y(NPQ)參數(shù)變化幅度明顯大于黃旦。不同供氮處理對葉片非調(diào)節(jié)性能量耗散的量子產(chǎn)額Y(NO)變化不明顯，除本山在未供氮高于其他處理外，其余各處理不存在顯著差異。
2.5 不同供氮處理對 NPQ、qN、qP與 qL的影響
從圖5可看出，隨著供氮濃度的增加，茶樹葉片熒光參數(shù) NPQ與 qN依次下降，本山在供氮處理 0～300 μmmol·L-1時，隨濃度增加NPQ依次顯著下降，而黃旦在供氮濃度從300 μmol·L-1到 1 200 μmol·L-1時隨濃度增加顯著下降。
當(dāng)供氮濃度在 0～300 μmol·L-1時，隨濃度增加，本山品種qN值顯著下降，而黃旦品種未見顯著變化。當(dāng)供氮在 0～6 000 μmol·L-1時，黃旦品種的各處理間qN值未見顯著變化，而本山顯著增加。
對于熒光參數(shù) qL，本山品種僅在未供氮時顯著低于其他處理，而其余處理間未見顯著變化，當(dāng)供氮濃度在 0～6 000 μmol·L-1時，各處理間黃旦熒光參數(shù)qL未見顯著變化。
圖2 不同供氮處理對茶樹生物量的影響Fig. 2 The effects of nitrogen supply on biomass accumulation in tea plant
3 討論
茶樹是喜氮（喜氨）類作物，施氮量對茶樹生長發(fā)育有著顯著的影響[2,6]。本研究表明，低氮下（供氮濃度為 0、50、100 μmol·L-1時相對于供氮濃度為 300、1 200、6 000 μmol·L-1時），茶樹根、莖、葉干重都顯著下降（圖2），這與阮建云等[17]、蘇有健等[18]在茶樹低氮下的報道相一致。且本研究還發(fā)現(xiàn)低氮下，本山的根、莖、葉的干重都低于黃旦（圖2），說明低氮下本山與黃旦相比更不易生長。這與李強等[4]在低氮與耐低氮玉米品種中的報道相一致。隨著供氮濃度的增加，茶樹葉片氮含量也顯著增加，當(dāng)供氮濃度從 300 μmol·L-1增加到 6 000 μmol·L-1時，黃旦葉片氮含量始終高于本山。這在小麥上耐低氮品種與氮敏感型的結(jié)果相類似[19]。
葉綠素?zé)晒庵饕憩F(xiàn)在光系統(tǒng)Ⅱ中對光能的吸收、傳遞、耗散和分配等[20-21]，通過對作物熒光特性的檢測可以反應(yīng)作物的生長和脅迫的生理狀態(tài)等[22]。本研究發(fā)現(xiàn)低氮處理下，F(xiàn)o增加，F(xiàn)m降低，說明反應(yīng)中心受到了不易逆轉(zhuǎn)的破壞或失活，這與玉米[4]、甜菜[7]、小麥[8,10]、棉花[3]、生菜[20]等作物缺氮的報道相一致。PSⅡ的最大光化學(xué)效率（Fv/Fm）是體現(xiàn)植物對光能的利用效率，是植物在脅迫條件下光合作用受到抑制程度的重要指標(biāo)[7,22,24]。由于氮量供給不足，引起植株葉片蛋白含量的下降，導(dǎo)致光破壞的 PSⅡ反應(yīng)中心不能被有效的修復(fù)，從而產(chǎn)生光抑制現(xiàn)象。增加供氮，這種抑制就消失（圖3）。相似的結(jié)果在小麥[25]、棉花[26]、菜豆[27]的研究中也有發(fā)現(xiàn)，但也有一些研究中并未發(fā)現(xiàn)外界供氮對植株的光化學(xué)效率（Fv/Fm）產(chǎn)生影響[28-29]。本研究還發(fā)現(xiàn)，低氮下本山的Fv/Fm明顯低于黃旦，說明低氮下，黃旦品種光系統(tǒng)受到破壞的程度較本山品種輕。這與氮高效與敏感品種在低氮下的報道相一致[4]。
圖3 不同供氮處理對Fo、Fm與Fv/Fm的影響Fig. 3 The effects of nitrogen supply on Fo, Fmand Fv/Fm
圖4 不同供氮處理對Y(Ⅱ)、Y(NPQ)與Y(NO)的影響Fig. 4 The effects of nitrogen supply on Y(Ⅱ),Y(NPQ) and Y(NO)
研究發(fā)現(xiàn)，PSII的實際光合效率Y(Ⅱ)在低氮下都顯著下降（圖4），其中本山品種在低氮下Y(Ⅱ)明顯低于黃旦，說明低氮下黃旦品種較本山實際光合效率更高。非調(diào)節(jié)性能量耗散的量子產(chǎn)額 Y(NO)與PSII調(diào)節(jié)性能量耗散的量子產(chǎn)額Y(NPQ)都在低氮下顯著增加，其中本山品種低氮下，Y(NPQ)與 Y(NO)都要明顯高于黃旦。本山品種在低氮下 Y(NO)、Y(NPQ)較高，則表明該品種在低氮下保護性的調(diào)節(jié)機制（如熱耗散）和光化學(xué)能量轉(zhuǎn)換不足以將葉片吸收的所有光能完全消耗[30]，也就是說，入射光強超過了茶樹品種能接受的程度，這時茶樹可能已經(jīng)受到損傷。
圖5 不同供氮處理對NPQ、qN、qP及qL影響Fig.5 The effects of nitrogen supply on NPQ, qN, qP and qL
qP是光化學(xué)猝滅系數(shù)，它表示PSⅡ反應(yīng)中心將吸收的光能轉(zhuǎn)化為化學(xué)能，反映了植物的光合效率和光合活性的高低[31]，NPQ是非光化學(xué)猝滅系數(shù)，是過剩光能的指示計[32]，植物主要通過跨膜質(zhì)子梯度介導(dǎo)的葉黃素循環(huán)來耗散多余光能，還能夠反映類囊體膜的激發(fā)狀態(tài)。低氮下茶樹葉片qP的值下降，NPQ值顯著增加，說明低氮下茶樹葉片光合效率顯著降低。這與黃檗缺氮[31]、小麥缺氮[10,33]、甜菜缺氮[7]等報道相一致。還發(fā)現(xiàn)本山品種低氮下，NPQ值顯著大于黃旦，而qP值顯著低于黃旦，說明黃旦品種低氮下的光合效率高于本山品種。這與前人在低氮下不同氮素效率的玉米[34-35]、水稻[36]等報道相一致。
qN是PSII天線色素吸收的光能，以熱耗散的形式散發(fā)的部分光能，不能用于光電子傳遞，它是植物的一種自我保護機制，對葉綠體能量狀態(tài)的改變非常敏感，而這種變化受多種因素影響[24]，比如環(huán)境脅迫因子導(dǎo)致的氣孔關(guān)閉，阻斷了CO2到O2的電子流并引起PSII能量轉(zhuǎn)化速率的下調(diào)[37]。因此，可以說qN是環(huán)境脅迫的指示計，并已經(jīng)被證明為檢測早期脅迫最敏感的參數(shù)。本研究發(fā)現(xiàn)，低氮下茶樹葉片熒光參數(shù)qN都顯著增加，說明低氮下茶樹葉片 PSII天線色素吸收的光能不能完全用于光合電子傳遞，很大部分用于熱耗散[24]。光化學(xué)淬滅系數(shù)qL反映的是PSII反應(yīng)中心的開放程度大小，從圖5可看出，低氮下本山品種的qL下降，且較黃旦品種低，說明低氮下本山品種 PSII反應(yīng)中心的開放程度較小，損傷較大。
正常情況下，植物體葉綠素吸收的光能主要通過光合電子傳遞、葉綠素?zé)晒獍l(fā)射和熱耗散三種途徑來消耗[2,38-39]。這3種途徑之間存在著此消彼長的關(guān)系，光合作用和熱耗散的變化會引起熒光發(fā)射的相應(yīng)變化[3]。因此，可以通過對熒光參數(shù) Fv/Fm、NPQ、qN、qP等的觀測來探究和評價各茶樹品種對低氮逆境的適應(yīng)性，并可以作為快速篩選耐低氮茶樹品種的參考指標(biāo)。
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Effects of Chlorophyll Fluorescence Parameters of Different Tea Cultivars in Response to Low Nitrogen
LIN Zhenghe1, ZHONG Qiusheng1, HAO Zhilong2, YOU Xiaomei1,CHEN Zhihui1, CHEN Changsong1*, SHAN Ruiyang1, RUAN Qichun1
1. Tea Research Institute, Fujian Academy of Agricultural Sciences, Fu'an 355015, China;2. College of Horticulture, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002, China
Chlorophyll fluorescence parameters are often used to evaluate stress status and plant physical respo nse to stresses. To explore guidelines for nitrogen fertilization, nitrogen deficiency degree should be measured and estimated sensitively. Therefore, items including individual plant dry matter, nitrogen content and fluorescence parameters of leaves were measured among tea cultivars with different nitrogen use efficiencies. The dry matter of roots, stems, leaves and nitrogen content in leaves were declined sharply under low nitrogen stress. Compared with the low nitrogen sensitive tea cultivar ‘Benshan’, the root, stem and leaf dry weights (DW) of ‘Huangdan’ were higher under low nitrogen stress. Fo, Y(NPQ), non-photochemical quenching coefficients (NPQ) and Y(NO)increased under low nitrogen, and the fluorescence parameters of ‘Benshan’ under low nitrogen were higher than Huangdan. The maximum (Fm), primary maximum photochemical efficiency of PSⅡ(Fv/Fm), actual photosynthetic efficiency Y(Ⅱ) and coefficient of photochemical quenching (qP and qL) decreased under low nitrogen, and the fluorescence parameters of ‘Benshan’ under low nitrogen were lower than those of ‘Huangdan’. The relative highnitrogen-utility tea cultivar can reduce the damage caused by the low nitrogen stress and maintain a relatively high photosynthetic efficiency. Therefore, tea cultivar with relative high nitrogen-utility had higher yields than cultivar with low nitrogen-utility under low nitrogen stress.
low nitrogen, tea cultivar, photochemical efficiency, chlorophyll fluorescence
S571.1；S147.3
A
1000-369X（2017）04-363-10
2017-04-28
2017-05-19
國家自然科學(xué)基金（31570690）、國家茶葉產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系（nycytx-23）、中國烏龍茶產(chǎn)業(yè)協(xié)同創(chuàng)新中心專項（閩教科〔2015〕75號）、福建省公益科研院所專項（2015R1012-4、2015R1012-10）、福建省自然科學(xué)基金（2016J01119）
林鄭和，男，博士，主要從事茶樹營養(yǎng)生理方面的研究。*通訊作者：ccs6536597@163.com
林鄭和，鐘秋生，郝志龍，游小妹，陳志輝，陳常頌*，單睿陽，阮其春
1. 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所，福建 福安 355015；2. 福建農(nóng)林大學(xué)園藝學(xué)院，福建 福州 350002
低氮對不同茶樹品種葉綠素?zé)晒馓匦缘挠绊?/p>
林鄭和1，鐘秋生1，郝志龍2，游小妹1，陳志輝1，陳常頌1*，單睿陽1，阮其春1
1. 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所，福建 福安 355015；2. 福建農(nóng)林大學(xué)園藝學(xué)院，福建 福州 350002
葉綠素?zé)晒鈪?shù)經(jīng)常用來評價植物抗逆脅迫強弱，反應(yīng)植物脅迫的生理狀態(tài)等。為靈敏檢測和判斷茶樹品種低氮脅迫的差異，科學(xué)指導(dǎo)施肥，本研究以前期篩選的相對氮高效茶樹品種黃旦與相對氮敏感茶樹品種本山為試驗材料，檢測不同供氮處理下葉綠素?zé)晒鈪?shù)及生物量的變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)低氮條件下茶樹葉片氮含量顯著偏低，但該條件下黃旦品種葉片氮含量明顯高于本山品種；低氮條件下茶樹葉片最小熒光 Fo、調(diào)節(jié)性能量耗散的量子產(chǎn)額Y(NPQ)、非光化學(xué)淬滅系數(shù)（NPQ）、非調(diào)節(jié)性能量耗散的量子產(chǎn)額Y(NO)等顯著增加，黃旦品種在低氮條件下Fo、Y(NPQ)、Y(NO)及NPQ參數(shù)都要小于本山品種；而參數(shù)最大熒光（Fm）、光系統(tǒng)Ⅱ最大光合效率（Fv/Fm）、光化學(xué)淬滅系數(shù)（qP與qL）、實際光合效率Y(Ⅱ)顯著下降，其中本山品種低氮下明顯小于黃旦?？傊?，氮高效茶樹品種黃旦能減緩低氮脅迫對植株造成的損害，并維持相對較高的光合效率，保證了低氮條件下有較高的產(chǎn)量。
低氮；茶樹品種；光合效率；葉綠素?zé)晒?/p>
進入21世紀(jì)以來，我國茶產(chǎn)業(yè)呈快速發(fā)展的勢態(tài)。截止2016年底，我國茶園面積超過 266.67萬 hm2，接近世界茶園的 50%，茶葉產(chǎn)量達(dá)到220多萬t，均居世界第一位。目前很多茶農(nóng)片面追求茶葉產(chǎn)量，毫無節(jié)制地施用大量氮肥，雖然提高了茶葉產(chǎn)量，但是也造成了氮素資源嚴(yán)重浪費、茶園氮利用率下降、生態(tài)環(huán)境條件惡化等不良后果[1]。隨著茶樹抗逆生理機制研究的深入，人們在重視氮肥增產(chǎn)效用的同時，越來越關(guān)注氮肥在調(diào)節(jié)作物抗逆中的作用，氮肥的合理施用一直是調(diào)控茶樹生長發(fā)育的重要措施[2-3]。
氮素是蛋白質(zhì)和核酸的重要組成元素之一[4-5]，缺氮對茶樹光合特性及葉綠素?zé)晒庥兄@著的影響[6]。葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)可以快速、靈敏和非破壞性地分析逆境因子對光系統(tǒng)Ⅱ的破壞影響，其中包括光能的吸收、捕獲光的能力、能量的分配比率和電子傳遞分配等。與傳統(tǒng)的氣體交換參數(shù)相比，葉綠素?zé)晒鈪?shù)更能直接反映植物的“內(nèi)在性”特征[7]。當(dāng)外界條件發(fā)生變化時，葉綠素?zé)晒鈪?shù)可以在一定程度上反映出逆境因子對植物光系統(tǒng)的內(nèi)在影響。葉綠素?zé)晒鈪?shù)作為光合作用的探針，已被應(yīng)用到研究和探測植物體內(nèi)光合器官轉(zhuǎn)運光能狀況、電子傳遞及植物對環(huán)境脅迫的響應(yīng)機理等領(lǐng)域[8]。
盡管調(diào)制葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)出現(xiàn)較晚，但由于其測定快速可靠、分析度靈敏且對檢測的樣品無損傷等特點，使其快速受到植物光合研究領(lǐng)域的科研人員的青睞[9]。調(diào)制葉綠素?zé)晒獬上癫粌H可以檢測葉片光合作用的橫向異質(zhì)性，還可早期檢測肉眼不可見的脅迫損傷，甚至是闡明損傷機理和調(diào)節(jié)機制。近年來，許多國內(nèi)學(xué)者將葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)應(yīng)用于棉花[3]、玉米[4]、小麥[8,10]、甜菜[7]等作物的氮素營養(yǎng)研究中，發(fā)現(xiàn)施氮能增大光系統(tǒng) II實際光量子產(chǎn)量Y(II)、光系統(tǒng)II最大光化學(xué)效率（Fv/Fm）、光化學(xué)猝滅系數(shù)（qP），而非光化學(xué)猝滅系數(shù)（qN）則隨氮缺乏程度的加劇而升高。然而關(guān)于茶樹葉片葉綠素?zé)晒鈪?shù)與氮素脅迫之間關(guān)系的研究鮮見報道。本研究利用IMAGING-PAM型便攜式熒光儀（PAM,Germany），測定了不同濃度的氮脅迫對不同氮效率的茶樹品種葉綠素?zé)晒鈪?shù)的影響，為今后茶園氮肥的施用提供理論依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 試驗材料培養(yǎng)
2016年 3月 5日開始進行茶樹盆栽沙培試驗，在福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所試驗地完成。試驗所采用前期初步篩選的相對耐低氮（黃旦）與氮較敏感品種（本山）為材料，盆栽于6 L的裝滿河沙的陶土花盆中，每盆2株，每處理20盆，于自然溫、光條件下培養(yǎng)。營養(yǎng)液參照文獻(xiàn)[2,11]配制，完全營養(yǎng)液配方見表 1。
移栽后預(yù)培養(yǎng)6周，然后進行試驗處理，每次每盆各處理分別施含0、50、100、300、1 200、6 000 mmol·L-1N 的 NH4NO3營養(yǎng)液約500 mL，每周3次，處理18周后出現(xiàn)明顯的癥狀，進行檢測、取樣工作。
1.2 測定方法
1.2.1 植株干重的測定
植株收獲后，用自來水沖洗干凈，然后分為根、莖、葉部分，每個處理6個重復(fù)，將鮮樣先在105℃下先烘30 min，再在80℃下烘至恒重（約48 h），然而測定各部分的重量。
表1 完全營養(yǎng)液配方Table 1 Full nutrient solution formula
1.2.2 茶樹葉片氮含量的測定
茶樹葉片氮含量的測定：采用濃H2SO4-H2O2消煮，用凱氏定氮儀（FOSS）進行測定[12]。
1.2.3 葉綠素?zé)晒鈪?shù)測定
采用 IMAGING-PAM型調(diào)制葉綠素?zé)晒鈨x，所有測定工作都在室溫、植物暗適應(yīng) 3 h后進行。經(jīng)過充分暗適應(yīng)后，植物體內(nèi)電子門均處于開放狀態(tài)，當(dāng)打開測量光就得到初始熒光（Fo），此時增加一個飽和脈沖，所有的電子門就都將該用于光合作用的能量轉(zhuǎn)化為熒光和熱，此時得到的葉綠素?zé)晒鉃樽畲鬅晒猓‵m）。光照狀態(tài)下打開飽和脈沖時，電子門被完全關(guān)閉，光合作用被暫時抑制，也就是說光化學(xué)淬滅被全部抑制，測得光下最大熒光（Fm′）與光下最小熒光值（Fo′）。但此時光下最大熒光值（Fm′）還是比最大熒光（Fm）低，也就是說還存在熒光淬滅，這些剩余的熒光淬滅即為非光化學(xué)淬滅[13]。PSII的實際光合效率：Y(II)=(Fm′-F)/Fm′[14]；PSII 調(diào)節(jié)性能量耗散的量子產(chǎn)額Y(NPQ)：Y(NPQ)=1-Y(II)-1/[NPQ+1+qL(Fm/Fo-1)][15]。參數(shù) NPQ為非光化學(xué)熒光淬滅：(Fm-Fm′)/Fm′，反映 PSII耗散過剩光能進行自我保護的下調(diào)作用。PSII非調(diào)節(jié)性能量耗散的量子產(chǎn)額Y(NO)：Y(NO)=1/[NPQ+1+qL(Fm/Fo-1)][16]。光化學(xué)淬滅系數(shù)qP反映的是 PSII反應(yīng)中心的開放程度qP=(Fm′-F)/(Fm′-Fo′)。非光化學(xué)淬滅系數(shù) qN：qN=(Fm-Fm′)/(Fm-Fo′)，主要用于熱耗散等。光化學(xué)淬滅系數(shù)qL反映的是PSII反應(yīng)中心的開放程度：
1.3 數(shù)據(jù)分析
試驗數(shù)據(jù)用 DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進行差異顯著性（LSD法）分析，所有分析試驗均重復(fù)4～6次（不同盆中1株植株為1重復(fù)）。
2 結(jié)果與分析
2.1 不同供氮處理對葉片氮含量的影響
從圖1可以看出，隨著供氮濃度的增加，葉片氮含量依次增加。但供氮從300 μmol·L-1增加到 6 000 μmol·L-1時，黃旦葉片氮含量的變化趨勢較本山的更加明顯。相比發(fā)現(xiàn)，當(dāng)供氮從100 μmol·L-1增加到 6 000 μmol·L-1時，黃旦葉片氮含量都要高于本山，特別在最高氮處理下，黃旦品種葉片氮含量增加明顯高于本山品種。
2.2 不同供氮處理對生物量的影響
從圖 2可看出，當(dāng)供氮處理從 0增加到100 μmol·L-1時，茶樹根、莖、葉干重都明顯增加。當(dāng)供氮從 300 μmol·L-1增加到 6 000 μmol·L-1，除本山品種葉干重 300 μmol·L-1到1 200 μmol·L-1顯著增加外，其余茶樹根、莖、葉干重未發(fā)生顯著變化。此外大部分的熒光參數(shù)都在供氮濃度 300～6 000 μmol·L-1時無明顯變化?；诖?，本試驗把供氮濃度為0、50、100 μmol·L-1稱為低氮處理。圖 2（B、C、F與G）中發(fā)現(xiàn)，本山莖、葉片在低氮處理的相同濃度下干重明顯低于黃旦，當(dāng)供氮處理從300 μmol·L-1增加到 6 000 μmol·L-1時，黃旦葉片干重都要高于本山。圖2（D與H）中發(fā)現(xiàn)，供氮處理為 0增加到 50 μmol·L-1時，本山品種根冠比未發(fā)生明顯變化，之后隨著供氮處理增加，本山品種根冠比顯著下降。而黃旦品種根冠比在供氮為 300 μmol·L-1時最大，其余各處理未發(fā)生顯著變化。
圖1 不同供氮處理對茶樹葉片氮含量的影響Fig. 1 The effects of nitrogen supply on leaf N content in tea plants
2.3 不同供氮處理對熒光參數(shù)Fo、Fm和Fv/Fm的影響
從圖3-A看出，當(dāng)供氮濃度從為0增加到50 μmol·L-1時，本山品種的 Fo變化顯著，當(dāng)供氮濃度從 50 μmol·L-1增加到 300 μmol·L-1時，F(xiàn)o依次顯著下降，之后隨著供氮濃度的增加，高濃度處理間沒有發(fā)生顯著變化。從圖3-D中可以看出，黃旦品種的 Fo在供氮濃度為 0、50 μmol·L-1時，顯著高于供氮濃度在300～6 000 μmol·L-1的處理，供氮高于 100 μmol·L-1后未發(fā)生顯著變化。對比發(fā)現(xiàn)本山品種低氮條件下（供氮 0～100 μmol·L-1）Fo都略高于黃旦（圖3-A與圖3-D）。
當(dāng)供氮從 0增加到 50 μmol·L-1時，本山品種最大熒光 Fm略有增加，之后隨著供氮濃度的增加，F(xiàn)m值依次顯著增加。而當(dāng)供氮濃度從 0增加到 100 μmol·L-1時，黃旦的最大熒光Fm隨濃度的增加而顯著增加，供氮大于300 μmol·L-1后差異不顯著?？傮w看，本山品種的最大熒光Fm值在低氮處理時低于黃旦。
當(dāng)供氮濃度從 0增加 100 μmol·L-1時，兩品種的茶樹葉片最大光合效率 Fv/Fm依次顯著增加，之后兩品種都未發(fā)生顯著變化，且本山品種相同濃度的低氮處理下，F(xiàn)v/Fm明顯低于黃旦。
2.4 不同供氮處理對 Y(Ⅱ)、Y(NPQ)與 Y(NO)的影響
從圖 4可看出，本山品種供氮濃度從 0增加 100 μmol·L-1時，葉片 PSⅡ?qū)嶋H光合效率Y(Ⅱ)依次顯著增加，之后未見明顯變化，而黃旦品種僅略有增加，未見顯著變化，僅在供氮濃度為 1 200與 6 000 μmol·L-1時，才顯著增加，總體看兩品種的Y(Ⅱ)都隨供氮濃度的增加而增加。
PSⅡ調(diào)節(jié)性能量耗散的量子產(chǎn)額Y(NPQ)在供氮濃度從 0增加到 100 μmol·L-1時，依次顯著下降，之后未發(fā)生顯變化。圖4-A、圖4-B、圖 4-D、圖4-E中發(fā)現(xiàn)，本山葉片的Y(Ⅱ)與Y(NPQ)參數(shù)變化幅度明顯大于黃旦。不同供氮處理對葉片非調(diào)節(jié)性能量耗散的量子產(chǎn)額Y(NO)變化不明顯，除本山在未供氮高于其他處理外，其余各處理不存在顯著差異。
2.5 不同供氮處理對 NPQ、qN、qP與 qL的影響
從圖5可看出，隨著供氮濃度的增加，茶樹葉片熒光參數(shù) NPQ與 qN依次下降，本山在供氮處理 0～300 μmmol·L-1時，隨濃度增加NPQ依次顯著下降，而黃旦在供氮濃度從300 μmol·L-1到 1 200 μmol·L-1時隨濃度增加顯著下降。
當(dāng)供氮濃度在 0～300 μmol·L-1時，隨濃度增加，本山品種qN值顯著下降，而黃旦品種未見顯著變化。當(dāng)供氮在 0～6 000 μmol·L-1時，黃旦品種的各處理間qN值未見顯著變化，而本山顯著增加。
對于熒光參數(shù) qL，本山品種僅在未供氮時顯著低于其他處理，而其余處理間未見顯著變化，當(dāng)供氮濃度在 0～6 000 μmol·L-1時，各處理間黃旦熒光參數(shù)qL未見顯著變化。
圖2 不同供氮處理對茶樹生物量的影響Fig. 2 The effects of nitrogen supply on biomass accumulation in tea plant
3 討論
茶樹是喜氮（喜氨）類作物，施氮量對茶樹生長發(fā)育有著顯著的影響[2,6]。本研究表明，低氮下（供氮濃度為 0、50、100 μmol·L-1時相對于供氮濃度為 300、1 200、6 000 μmol·L-1時），茶樹根、莖、葉干重都顯著下降（圖2），這與阮建云等[17]、蘇有健等[18]在茶樹低氮下的報道相一致。且本研究還發(fā)現(xiàn)低氮下，本山的根、莖、葉的干重都低于黃旦（圖2），說明低氮下本山與黃旦相比更不易生長。這與李強等[4]在低氮與耐低氮玉米品種中的報道相一致。隨著供氮濃度的增加，茶樹葉片氮含量也顯著增加，當(dāng)供氮濃度從 300 μmol·L-1增加到 6 000 μmol·L-1時，黃旦葉片氮含量始終高于本山。這在小麥上耐低氮品種與氮敏感型的結(jié)果相類似[19]。
葉綠素?zé)晒庵饕憩F(xiàn)在光系統(tǒng)Ⅱ中對光能的吸收、傳遞、耗散和分配等[20-21]，通過對作物熒光特性的檢測可以反應(yīng)作物的生長和脅迫的生理狀態(tài)等[22]。本研究發(fā)現(xiàn)低氮處理下，F(xiàn)o增加，F(xiàn)m降低，說明反應(yīng)中心受到了不易逆轉(zhuǎn)的破壞或失活，這與玉米[4]、甜菜[7]、小麥[8,10]、棉花[3]、生菜[20]等作物缺氮的報道相一致。PSⅡ的最大光化學(xué)效率（Fv/Fm）是體現(xiàn)植物對光能的利用效率，是植物在脅迫條件下光合作用受到抑制程度的重要指標(biāo)[7,22,24]。由于氮量供給不足，引起植株葉片蛋白含量的下降，導(dǎo)致光破壞的 PSⅡ反應(yīng)中心不能被有效的修復(fù)，從而產(chǎn)生光抑制現(xiàn)象。增加供氮，這種抑制就消失（圖3）。相似的結(jié)果在小麥[25]、棉花[26]、菜豆[27]的研究中也有發(fā)現(xiàn)，但也有一些研究中并未發(fā)現(xiàn)外界供氮對植株的光化學(xué)效率（Fv/Fm）產(chǎn)生影響[28-29]。本研究還發(fā)現(xiàn)，低氮下本山的Fv/Fm明顯低于黃旦，說明低氮下，黃旦品種光系統(tǒng)受到破壞的程度較本山品種輕。這與氮高效與敏感品種在低氮下的報道相一致[4]。
圖3 不同供氮處理對Fo、Fm與Fv/Fm的影響Fig. 3 The effects of nitrogen supply on Fo, Fmand Fv/Fm
圖4 不同供氮處理對Y(Ⅱ)、Y(NPQ)與Y(NO)的影響Fig. 4 The effects of nitrogen supply on Y(Ⅱ),Y(NPQ) and Y(NO)
研究發(fā)現(xiàn)，PSII的實際光合效率Y(Ⅱ)在低氮下都顯著下降（圖4），其中本山品種在低氮下Y(Ⅱ)明顯低于黃旦，說明低氮下黃旦品種較本山實際光合效率更高。非調(diào)節(jié)性能量耗散的量子產(chǎn)額 Y(NO)與PSII調(diào)節(jié)性能量耗散的量子產(chǎn)額Y(NPQ)都在低氮下顯著增加，其中本山品種低氮下，Y(NPQ)與 Y(NO)都要明顯高于黃旦。本山品種在低氮下 Y(NO)、Y(NPQ)較高，則表明該品種在低氮下保護性的調(diào)節(jié)機制（如熱耗散）和光化學(xué)能量轉(zhuǎn)換不足以將葉片吸收的所有光能完全消耗[30]，也就是說，入射光強超過了茶樹品種能接受的程度，這時茶樹可能已經(jīng)受到損傷。
圖5 不同供氮處理對NPQ、qN、qP及qL影響Fig.5 The effects of nitrogen supply on NPQ, qN, qP and qL
qP是光化學(xué)猝滅系數(shù)，它表示PSⅡ反應(yīng)中心將吸收的光能轉(zhuǎn)化為化學(xué)能，反映了植物的光合效率和光合活性的高低[31]，NPQ是非光化學(xué)猝滅系數(shù)，是過剩光能的指示計[32]，植物主要通過跨膜質(zhì)子梯度介導(dǎo)的葉黃素循環(huán)來耗散多余光能，還能夠反映類囊體膜的激發(fā)狀態(tài)。低氮下茶樹葉片qP的值下降，NPQ值顯著增加，說明低氮下茶樹葉片光合效率顯著降低。這與黃檗缺氮[31]、小麥缺氮[10,33]、甜菜缺氮[7]等報道相一致。還發(fā)現(xiàn)本山品種低氮下，NPQ值顯著大于黃旦，而qP值顯著低于黃旦，說明黃旦品種低氮下的光合效率高于本山品種。這與前人在低氮下不同氮素效率的玉米[34-35]、水稻[36]等報道相一致。
qN是PSII天線色素吸收的光能，以熱耗散的形式散發(fā)的部分光能，不能用于光電子傳遞，它是植物的一種自我保護機制，對葉綠體能量狀態(tài)的改變非常敏感，而這種變化受多種因素影響[24]，比如環(huán)境脅迫因子導(dǎo)致的氣孔關(guān)閉，阻斷了CO2到O2的電子流并引起PSII能量轉(zhuǎn)化速率的下調(diào)[37]。因此，可以說qN是環(huán)境脅迫的指示計，并已經(jīng)被證明為檢測早期脅迫最敏感的參數(shù)。本研究發(fā)現(xiàn)，低氮下茶樹葉片熒光參數(shù)qN都顯著增加，說明低氮下茶樹葉片 PSII天線色素吸收的光能不能完全用于光合電子傳遞，很大部分用于熱耗散[24]。光化學(xué)淬滅系數(shù)qL反映的是PSII反應(yīng)中心的開放程度大小，從圖5可看出，低氮下本山品種的qL下降，且較黃旦品種低，說明低氮下本山品種 PSII反應(yīng)中心的開放程度較小，損傷較大。
正常情況下，植物體葉綠素吸收的光能主要通過光合電子傳遞、葉綠素?zé)晒獍l(fā)射和熱耗散三種途徑來消耗[2,38-39]。這3種途徑之間存在著此消彼長的關(guān)系，光合作用和熱耗散的變化會引起熒光發(fā)射的相應(yīng)變化[3]。因此，可以通過對熒光參數(shù) Fv/Fm、NPQ、qN、qP等的觀測來探究和評價各茶樹品種對低氮逆境的適應(yīng)性，并可以作為快速篩選耐低氮茶樹品種的參考指標(biāo)。
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Effects of Chlorophyll Fluorescence Parameters of Different Tea Cultivars in Response to Low Nitrogen
LIN Zhenghe1, ZHONG Qiusheng1, HAO Zhilong2, YOU Xiaomei1,CHEN Zhihui1, CHEN Changsong1*, SHAN Ruiyang1, RUAN Qichun1
1. Tea Research Institute, Fujian Academy of Agricultural Sciences, Fu'an 355015, China;2. College of Horticulture, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002, China
Chlorophyll fluorescence parameters are often used to evaluate stress status and plant physical respo nse to stresses. To explore guidelines for nitrogen fertilization, nitrogen deficiency degree should be measured and estimated sensitively. Therefore, items including individual plant dry matter, nitrogen content and fluorescence parameters of leaves were measured among tea cultivars with different nitrogen use efficiencies. The dry matter of roots, stems, leaves and nitrogen content in leaves were declined sharply under low nitrogen stress. Compared with the low nitrogen sensitive tea cultivar ‘Benshan’, the root, stem and leaf dry weights (DW) of ‘Huangdan’ were higher under low nitrogen stress. Fo, Y(NPQ), non-photochemical quenching coefficients (NPQ) and Y(NO)increased under low nitrogen, and the fluorescence parameters of ‘Benshan’ under low nitrogen were higher than Huangdan. The maximum (Fm), primary maximum photochemical efficiency of PSⅡ(Fv/Fm), actual photosynthetic efficiency Y(Ⅱ) and coefficient of photochemical quenching (qP and qL) decreased under low nitrogen, and the fluorescence parameters of ‘Benshan’ under low nitrogen were lower than those of ‘Huangdan’. The relative highnitrogen-utility tea cultivar can reduce the damage caused by the low nitrogen stress and maintain a relatively high photosynthetic efficiency. Therefore, tea cultivar with relative high nitrogen-utility had higher yields than cultivar with low nitrogen-utility under low nitrogen stress.
low nitrogen, tea cultivar, photochemical efficiency, chlorophyll fluorescence
S571.1；S147.3
A
1000-369X（2017）04-363-10
2017-04-28
2017-05-19
國家自然科學(xué)基金（31570690）、國家茶葉產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系（nycytx-23）、中國烏龍茶產(chǎn)業(yè)協(xié)同創(chuàng)新中心專項（閩教科〔2015〕75號）、福建省公益科研院所專項（2015R1012-4、2015R1012-10）、福建省自然科學(xué)基金（2016J01119）
林鄭和，男，博士，主要從事茶樹營養(yǎng)生理方面的研究。*通訊作者：ccs6536597@163.com
