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    不同烹調(diào)方法對(duì)冬季常見蔬菜亞硝酸鹽產(chǎn)生的影響

    2017-08-24 06:38:21張淼
    世紀(jì)之星·交流版 2017年4期
    關(guān)鍵詞:毒理亞硝酸鈉泡菜

    張淼

    [摘 要]我校研究性小組用實(shí)驗(yàn)的方法來檢驗(yàn)不同烹調(diào)方法(熱炒、涼拌、腌制)對(duì)冬季常見蔬菜亞硝酸鹽產(chǎn)生的影響并且用小鼠急慢性中毒實(shí)驗(yàn)來檢驗(yàn)過量的亞硝酸鹽對(duì)小鼠的毒害,并且推測(cè)亞硝酸鹽對(duì)人體可能產(chǎn)生的傷害。

    [關(guān)鍵詞]亞硝酸鹽;小鼠急慢性中毒實(shí)驗(yàn)

    一、實(shí)驗(yàn)背景及方法

    亞硝酸鹽有咸味且價(jià)錢便宜,工業(yè)用鹽中含量較多,常在制作非法食品時(shí)用作食鹽的不合理替代品,造成食物中毒,當(dāng)食物中超過0.1 g/kg時(shí),大量食用后就會(huì)引起非常嚴(yán)重的中毒后果,但是蔬菜在不同烹調(diào)方法下也會(huì)產(chǎn)生一些亞硝酸鹽,如果長(zhǎng)期食用對(duì)身體的影響也是非常大的,例如在我國(guó)東北和四川地區(qū)由于吃腌菜的習(xí)慣,消化道類癌癥的發(fā)病率就非常高。我校研究性小組采用不同烹調(diào)方法處理冬季常見蔬菜并且檢測(cè)其亞硝酸鹽含量,并且采用急慢性小鼠實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證是否可能會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生毒害。

    1.采用亞硝酸鹽試劑盒檢測(cè)法:我校采購了上海澤潤(rùn)化學(xué)科技有限公司的亞硝酸鹽試劑盒。檢驗(yàn)原理是在pH1.7以下,水中亞硝酸鹽與氮基苯磺酰胺重氮化,再與鹽酸N-(1萘)-乙二胺產(chǎn)生偶合反應(yīng),生成紫紅色的偶氮染料。根據(jù)比色表來進(jìn)行比色定量。顏色越深,亞硝酸鹽的含量就越大。該方法可以測(cè)量到100mg/L(本試劑盒一般最高40 mg/L內(nèi)較為準(zhǔn)確)。如果亞硝酸鹽過高如10g/L,則出現(xiàn)紫色后顏色很深并很快褪色,這說明樣品中亞硝酸鹽含量太高,須加大稀釋倍數(shù)重新測(cè)定。由于定量的依據(jù)是比色,因此要求樣品無論是液體還是固體,其本身不能有太重的顏色,液體最好是無色透明狀,固體在制作待測(cè)液體時(shí),不能褪色,否則將影響比色,造成結(jié)果不準(zhǔn)確。因此本實(shí)驗(yàn)選用的蔬菜為蘿卜、鮮姜、白菜、青椒、黃瓜,均為本身沒有太重顏色的蔬菜,不會(huì)造成過多比色影響,如果選用西紅柿,菠菜等蔬菜就會(huì)因?yàn)樽陨淼念伾蓴_結(jié)果。此外,在使用試劑盒之前,我們要用標(biāo)準(zhǔn)亞硝酸鈉溶液,用逐級(jí)稀釋的方法來檢驗(yàn)試劑盒,以確保實(shí)驗(yàn)的可靠性。本實(shí)驗(yàn)采用液體取樣法和固體取樣法。

    (1)液體取樣法:移液槍量取1ml待測(cè)樣本,注入檢測(cè)管中,5分鐘后觀察顯色況況。

    (2)固體取樣法:電子天平校零后,稱取1g待測(cè)樣本,加蒸餾水(不可加自來水,因?yàn)樽詠硭杏猩倭縼喯跛猁})10ml,切碎用研缽碾壓,充分使樣本組織分離,震蕩10分鐘加速提取,靜置備用。后同液體取樣法。固體取樣法所得數(shù)值應(yīng)當(dāng)乘10。

    2.采用小白鼠進(jìn)行活體急性毒理和慢性毒理實(shí)驗(yàn),來檢測(cè)亞硝酸鹽對(duì)健康的危害。

    (1)小白鼠急性毒理實(shí)驗(yàn):查資料得小鼠經(jīng)口致死劑量為180 mg/kg,按照普通成年小鼠的體重40克來計(jì)算,給于大約小鼠72 mg總量的亞硝酸鈉,致死后解剖觀察。我們考慮到學(xué)生的安全不采用灌胃針的方法,而采用較為簡(jiǎn)單的腹腔注射法。

    (2)小白鼠慢性毒理實(shí)驗(yàn):給于濃度為100 mg/l亞硝酸鈉溶液(對(duì)人體危害濃度)替代清水飼養(yǎng)小鼠,飼料與正常小鼠一樣提供,每天稱體重,觀察小鼠糞便和身體精神狀況,來判斷亞硝酸鈉對(duì)人體的危害。

    二、實(shí)驗(yàn)過程及結(jié)論

    1.不同的烹調(diào)方法來制作冬季常見蔬菜。

    用精密電子天平稱取蒸餾水清洗控干的五種蔬菜(蘿卜、鮮姜、白菜、青椒、黃瓜)各三份切成條狀,每份50克,分別進(jìn)行熱炒、涼拌、腌制。

    (1)熱炒方法:花生油20克,電磁爐控溫200℃,炒制5分鐘,放鹽2.5克,盛入滅菌密封玻璃罐中,冷涼后密封;

    (2)涼拌方法:放入150ml白醋和5克鹽,放入蔬菜拌勻,盛入滅菌密封玻璃罐中密封。

    (3)腌制方法:滅菌蒸餾水150ml中加入鹽50克, 溶解后放入蔬菜,盛入滅菌密封玻璃罐中密封。

    2.在室溫(冬季青島有供暖條件下平均室溫18℃)于不同時(shí)間段吸取菜汁進(jìn)行液體取樣法檢測(cè)和稱取各種蔬菜固體取樣法進(jìn)行亞硝酸鹽的檢測(cè)。

    (1)熱炒菜:只在剛炒制涼透量取初始值和分別于24小時(shí)、48小時(shí)進(jìn)行測(cè)量,48小時(shí)檢查時(shí),熱炒菜已經(jīng)酸腐發(fā)臭,失去食用價(jià)值,丟棄不再測(cè)量。

    結(jié)論一:各種蔬菜的亞硝酸鹽含量初始濃度都為零,在24小時(shí)后,塊莖塊根類蔬菜蘿卜和鮮姜的亞硝酸鹽含量分別是10 mg/kg和5 mg/kg,葉菜和果實(shí)菜類白菜、青椒和黃瓜的亞硝酸鹽含量分別是40 mg/kg,20mg/kg和40 mg/kg。48小時(shí)后熱炒菜腐敗不可食用,亞硝酸鹽含量超出試劑盒量程,顏色均為深棕色,估計(jì)超過100 mg/kg。因此得出結(jié)論熱炒菜最好現(xiàn)做現(xiàn)吃,不可吃隔夜菜,與其他做法相比較,熱炒菜植物細(xì)胞受損嚴(yán)重,細(xì)胞內(nèi)的亞硝酸鹽釋放非???,量大,對(duì)身體的危害大,其中發(fā)現(xiàn)幼嫩的植物組織其汁水比較豐富的菜比如白菜和黃瓜在24小時(shí)后都釋放出高達(dá)40 mg/kg的亞硝酸鹽,相比較而言,蘿卜和鮮姜釋放的亞硝酸鹽較少,但仍不建議吃隔夜剩菜。

    (2)涼拌菜:在剛腌制后測(cè)量初始值,后分別于24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)進(jìn)行測(cè)量,72小時(shí)后涼拌菜腐敗失去食用價(jià)值,丟棄不再測(cè)量。

    結(jié)論二:涼拌菜中由于放入白醋的原因,醋酸可以中和亞硝酸鹽,所以樣品中基本上沒有亞硝酸鹽的產(chǎn)生,蘿卜和鮮姜會(huì)產(chǎn)生少量亞硝酸鹽是因?yàn)槠浣M織致密,24小時(shí)內(nèi)沒有腌透,所以內(nèi)部細(xì)胞產(chǎn)生少量亞硝酸鹽(5.0 mg/kg以內(nèi))。HNO2是比CH3COOH更弱的酸,可發(fā)生強(qiáng)酸制弱酸反應(yīng),如下公式

    NaNO2+CH3COOH==CH3COONa+HNO2,

    而HNO2極易分解有如下反應(yīng):2HNO2==H2O+NO↑+NO2↑

    因此在菜肴制作過程中適當(dāng)放一點(diǎn)醋,可以使菜肴中產(chǎn)生的亞硝酸鹽被中和,對(duì)身體健康大有裨益。

    (3)腌泡菜:在剛腌制好測(cè)量初始值,之后一個(gè)周內(nèi)每天進(jìn)行測(cè)量,從第二周開始每個(gè)周進(jìn)行一到兩次測(cè)量,匯總?cè)∑骄担L制曲線,橫坐標(biāo)為時(shí)間,縱坐標(biāo)為亞硝酸鹽的含量。分別在第四周給于更換腌汁處理,第五周給于流動(dòng)清水沖洗10分鐘處理。

    ①腌泡菜一周內(nèi)每天取樣檢測(cè)亞硝酸鹽變化趨勢(shì),發(fā)現(xiàn)不同的蔬菜亞硝酸鹽的產(chǎn)生各有不同,其中白菜產(chǎn)生最多的亞硝酸鹽,其次是黃瓜,蘿卜、鮮姜和青椒產(chǎn)生的最少,原因大概是葉菜或者是水分充足幼嫩的蔬菜含氮量較高,因此產(chǎn)生較高濃度的亞硝酸鹽。這個(gè)結(jié)果對(duì)愛吃腌菜的人來說,應(yīng)當(dāng)注意盡量不要腌制葉菜和黃瓜,腌姜和蘿卜相對(duì)安全,當(dāng)然在有新鮮蔬菜吃的時(shí)候盡量不要吃腌菜。從數(shù)據(jù)上看一周內(nèi)亞硝酸鹽產(chǎn)生雖然有波動(dòng),但是隨著時(shí)間的推移,亞硝酸鹽總量在菜汁中積累,在96小時(shí)到達(dá)到最高100mg/l,這個(gè)濃度就已經(jīng)是國(guó)標(biāo)規(guī)定的不安全濃度。

    ②腌泡菜一周以上的亞硝酸鹽變化趨勢(shì)(每周測(cè)3次,取平均值),第五周給于流動(dòng)清水沖洗10分鐘處理,再取樣檢測(cè),盡量找到可以減少亞硝酸鹽含量的途徑。腌泡菜在7天以上亞硝酸鹽的產(chǎn)生逐漸平緩,不同品種的蔬菜中亞硝酸鹽的含量基本相同,證明蔬菜細(xì)胞已經(jīng)浸透鹽水,含氮物已經(jīng)充分溶入泡菜水中,并且已經(jīng)不在產(chǎn)生較多新的亞硝酸鹽了,總菜汁積累的量維持在100mg/l,在37天后慢慢衰減,如果泡菜水不更換的話仍然會(huì)維持在一個(gè)較高水平,建議如果制作泡菜在30天左右,最好將泡菜撈處,再擠壓泡菜,倒掉舊泡菜水更換腌汁,這樣做可以大幅度減少亞硝酸鹽的積累。

    ③結(jié)論三:將實(shí)驗(yàn)所得亞硝酸鹽濃度數(shù)據(jù)進(jìn)一步處理:將熱炒菜、涼拌菜和腌泡菜的菜汁濃度匯總,得到曲線圖。

    3.亞硝酸鈉的小鼠急性毒理實(shí)驗(yàn)與慢性毒理實(shí)驗(yàn)。

    (1)急性毒理實(shí)驗(yàn):小鼠的致死劑量為經(jīng)口180mg/kg,小鼠一般體重30-40克,一次給于50-100mg足以致死,我們將進(jìn)行小鼠注射實(shí)驗(yàn),取1克亞硝酸鈉溶于10ml水中,取0.5ml,給于50mg亞硝酸鈉總量注射,觀察小鼠急性毒性反應(yīng)。對(duì)照組給于生理鹽水0.5ml注射。

    三、結(jié)語

    實(shí)驗(yàn)組小鼠5分鐘內(nèi)死亡,痛苦掙扎,大小便失禁。對(duì)照組依然活潑。解剖發(fā)現(xiàn)注射中毒死亡的小鼠內(nèi)臟顏色灰暗偏深,尤其是心肺部位有缺氧發(fā)黑的現(xiàn)象,中毒小鼠的肝臟也有腫大發(fā)黑,正常乙醚麻醉致死的小鼠內(nèi)臟顏色鮮明。

    1.慢性毒理實(shí)驗(yàn):給于小鼠口服100 mg/l的水,不限量供應(yīng),根據(jù)資料成年小鼠飲水量4-7ml/天,小鼠每天會(huì)獲得0.4-0.7mg亞硝酸鹽鈉,長(zhǎng)期觀察小鼠慢性積累中毒的情況。

    參考文獻(xiàn):

    [1]郭延令.《高中生物實(shí)驗(yàn)大全》電子工業(yè)出版社 1993年 110-111.

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