農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留分析的色譜峰分離問題

摘 要：本文闡述了在對(duì)農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測(cè)分析時(shí)，如果兩種或兩種以上的農(nóng)藥色譜峰不分離，無法對(duì)農(nóng)藥進(jìn)行定性定量，該如何解決。

關(guān)鍵詞：農(nóng)產(chǎn)品；農(nóng)藥殘留；色譜峰；分離

在對(duì)農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留進(jìn)行分析時(shí)，特別是在檢測(cè)菊酯類農(nóng)藥殘留時(shí)，由于菊酯類農(nóng)藥有同分異構(gòu)體，常出現(xiàn)兩種農(nóng)藥色譜峰不能完全分離的情況。對(duì)于這種情況，可采用減小進(jìn)樣量、減小載氣流速、提高汽化室溫度、降低升溫速率等措施來提高色譜峰的分離度；也可采用更換更長(zhǎng)的色譜柱，或更換不同固定相的色譜柱，來提高色譜峰的分離度。下文主要探討了如何讓色譜峰分離。

一、實(shí)驗(yàn)部分

1.儀器與試劑

布魯克氣相GC450，ECD檢測(cè)器，VF-1ms（30*0.32*0.25）、VF-5ms（30*0.25*0.25）、DB-1701（30*0.25*0.25） [5，6]。

2.實(shí)驗(yàn)方法

氣相色譜條件：進(jìn)樣體積：1uL；進(jìn)樣口溫度：250℃，不分流進(jìn)樣；ECD檢測(cè)器300℃；氮?dú)饬魉伲?0mL/min；柱流速：2mL/min。

二、結(jié)果與討論

1.聯(lián)苯菊酯與甲氰菊酯的分離問題

聯(lián)苯菊酯與甲氰菊酯出峰時(shí)間較近，相差0.05，兩峰成分叉型，為使兩峰完全分離，最簡(jiǎn)單的方法，是改變程序升溫速率。

程序升溫方式1：150℃保持1min，10℃/min升到200℃，保持3min，15℃/min升到280℃，保持12min。兩峰出峰時(shí)間相差0.05min。

程序升溫方式2：150℃保持1min，10℃/min升到240℃，保持3min，10℃/min升到280℃，保持6min。兩種農(nóng)藥出峰時(shí)間相差0.10min。

程序升溫方式3：150℃保持1min，20℃/min升到200℃，4℃/min升到240℃，保持2min，10℃/min升到280℃，保持6min。兩種農(nóng)藥出峰時(shí)間相差0.10min。

程序升溫方式4：150℃保持1min，15℃/min升到240℃，保持6min ，10℃/min升到280℃，保持5min。兩種農(nóng)藥出峰時(shí)間相差0.10min，兩峰完全分離。

分離度是農(nóng)藥殘留檢測(cè)時(shí)的重要考慮因素，只有讓兩個(gè)色譜峰獲得基線分離，才能對(duì)農(nóng)藥進(jìn)行準(zhǔn)確的定性定量。增大分離度有兩個(gè)辦法，一是調(diào)節(jié)程序升溫，使兩個(gè)峰分離，二是當(dāng)改變程序升溫也不能使兩峰分離時(shí)，只有進(jìn)行更換色譜柱，使用與農(nóng)藥同極性的色譜柱。

調(diào)節(jié)程序升溫的辦法：從程序升溫方式1的色譜圖里，可知聯(lián)苯菊酯在13min出峰，根據(jù)程序升溫來計(jì)算，大約是240℃-260℃出峰，那么將近240℃時(shí)要降低升溫速率；程序升溫方式1與程序升溫方式3在200℃時(shí)，采取保持或升溫速率減慢的辦法，但距離240℃太遠(yuǎn)，效果并不好；程序升溫方式2以10℃/min升到240℃，保持了3min，峰分離有所改善；程序升溫方式4以15℃/min升到240℃，保持了6min，保持時(shí)間比程序升溫方式2要長(zhǎng)，峰分離較為明顯。

2.四種菊酯類農(nóng)藥的分離

檢測(cè)蔬菜中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留時(shí)，其中有4種菊酯類農(nóng)藥，在色譜柱上以組峰形式出現(xiàn)，它們是氰戊菊酯、氯氰菊酯、氟氰戊菊酯、氟胺氰菊酯，一般會(huì)出兩個(gè)或三個(gè)同分異構(gòu)體色譜峰，當(dāng)組峰完全重合時(shí)，很難對(duì)農(nóng)藥殘留進(jìn)行準(zhǔn)確的定性定量。這時(shí)一般會(huì)采取幾種方法來分離它們，第一種方法是降低升溫速率或調(diào)低柱流量，但是在色譜峰完全重合時(shí)，改變升溫速率與柱流量對(duì)分離不起作用。第二種方法是用氣質(zhì)聯(lián)用來定性，這個(gè)方法最好，但對(duì)于沒有氣質(zhì)聯(lián)用的實(shí)驗(yàn)室，這種方法無法應(yīng)用。第三種方法是換不同型號(hào)不同極性的色譜柱，這是比較經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的方法，以下就是采用這種方法，如何讓不能完全分離的色譜峰進(jìn)行分離。

（1）VF-1ms（30*0.32*0.25）的試驗(yàn)。

氣相色譜條件：色譜柱：VF-1ms（30m×0.32mm×0.25um）；溫度：150℃保持1min，以15℃速度上升到280℃，保持10min。共22min.進(jìn)樣體積：1uL；進(jìn)樣品：250℃，不分流進(jìn)樣；檢測(cè)器300℃；進(jìn)樣口溫度：250℃，氮?dú)饬魉伲?0mL/min；柱流速：2mL/min。

從出峰情況來看，氯氰菊酯的第3峰與氟氰戊菊酯的第2峰重合，氟氰戊菊酯的第3峰與氟胺氰菊酯的第1峰重合，氰戊菊酯的第2峰與氟胺氰菊酯的第2峰重合，如果樣品中同時(shí)含有這四種菊酯類農(nóng)藥，很難計(jì)算出結(jié)果。

將程序升溫速率降低，升溫速率降為2℃/min，色譜圖中的色譜峰仍是重合的，說明無法分離。

（2）VF-5ms（30*0.25*0.25）的試驗(yàn)。

氣相色譜條件：色譜柱：VF-5ms（30m×0.25mm×0.25um）；溫度：150℃保持1min，以15℃速度上升到240℃，保持30min。共37min.進(jìn)樣體積：1uL；進(jìn)樣品：250℃，不分流進(jìn)樣；檢測(cè)器300℃；進(jìn)樣口溫度：250℃，氮?dú)饬魉伲?0mL/min；柱流速：2mL/min。

從四種菊酯類農(nóng)藥出峰情況來看，氟胺氰菊酯與氰戊菊酯重合，并未完全分離。

（3） DB-1701（30*0.25*0.25）的試驗(yàn)。

氣相色譜條件：色譜柱：DB-1701（30m×0.25mm×0.25um）；溫度：150℃保持1min，以15℃/min速度上升到240℃，保持1min，再以10℃/min 升到260℃/min ，保持18min，共28min。進(jìn)樣體積：1uL；進(jìn)樣品：250℃，不分流進(jìn)樣；檢測(cè)器300℃；進(jìn)樣口溫度：250℃，氮?dú)饬魉伲?0mL/min；柱流速：2mL/min。

這四種菊酯類農(nóng)藥在DB1701柱上完全分離，當(dāng)樣品中這四種菊酯類農(nóng)藥有檢出時(shí)，可用DB1701柱來分離。

三、結(jié)語

從以上可以看出，調(diào)節(jié)程序升溫，一是要根據(jù)農(nóng)藥大概出峰溫度來調(diào)節(jié)，在將近出峰溫度處調(diào)節(jié)，太近太遠(yuǎn)都不行，二是除了將升溫速率調(diào)慢還可以通過增加保留時(shí)間來促使兩峰分離。

當(dāng)幾種菊酯類農(nóng)藥的同分異構(gòu)體重合時(shí)，可利用不同極性的色譜柱來進(jìn)行分離，這是最有效最快捷的方法。在經(jīng)常更換色譜柱時(shí)，需要注意以下問題：

一是不同色譜柱的最高工作溫度是不同的，不要照搬其它色譜柱的程序升溫，如DB-1701最高溫度是280℃，DB-1最高溫度是350℃，只要能保證標(biāo)液出峰，盡量不要讓色譜柱在溫度上限工作，如果換上DB1701柱卻用了DB-1柱的最高溫度，會(huì)燒壞色譜柱。

二是色譜柱的內(nèi)徑不同，膜厚不同，柱流量不同，需要在氣相的面板上輸入色譜柱的型號(hào)，以便儀器計(jì)算柱壓與流量。

在實(shí)驗(yàn)室里，要準(zhǔn)備不同型號(hào)不同極性的色譜柱，才能保證多種農(nóng)藥的色譜峰完全分離，進(jìn)行準(zhǔn)確的定性定量。用更換色譜柱的方法讓不分離的色譜峰進(jìn)行分離，有效而快捷。

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作者簡(jiǎn)介：宋保軍（1974—），男，本科，農(nóng)藝師，河南鶴壁市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)中心，主要從事農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)工作。