不同濃度NAA對(duì)甘薯莖尖誘導(dǎo)植株再生的影響

邱鵬飛 柳璇 商麗麗

摘要[目的]研究不同濃度NAA對(duì)甘薯莖尖誘導(dǎo)植株再生的影響。[方法]以甘薯品種煙薯25號(hào)、煙薯26號(hào)和煙紫薯3號(hào)的莖尖為材料，采用不同濃度NAA處理，對(duì)甘薯莖尖組織的誘導(dǎo)培養(yǎng)及高效植株再生進(jìn)行了研究。[結(jié)果] 煙薯25號(hào)較適宜的莖尖誘導(dǎo)培養(yǎng)基為1.0 mg/L NAA+MS，植株再生率為91%；煙薯26號(hào)和煙紫薯3號(hào)較適宜的莖尖誘導(dǎo)培養(yǎng)基為1.5 mg/L NAA +MS，植株再生率分別為88%和80%。[結(jié)論]該研究可為今后開展規(guī)?；适砻摱久缟a(chǎn)提供基礎(chǔ)資料。

關(guān)鍵詞 甘薯；莖尖；植株再生

中圖分類號(hào) S503.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611（2017）03-0159-02

Abstract[Objective]To research inducing plant regeneration from tip meristem of sweetpotato.[Method] The tip meristems of Yanshu No.25，Yanshu No.26 and Yanzishu No.3 were used to study the induction and efficient plant regeneration on the MS medium supplemented with different NAA concentrations. [Result] It was indicated that the suitable tip meristem induction medium for Yanshu No.25 was 1.0 mg/L NAA+MS，the plant regeneration rate was 91%；the suitable tip meristem induction mediums for Yanshu No.26 and Yanzishu No.3 were 1.5 mg/L NAA+MS，the plant regeneration rates were 88% and 80%.[Conclusion] The research can provide basic data for carrying out largescale virusfree sweetpotato production in the future.

Key words Sweetpotato；Tip meristem；Plant regeneration

近年來，在我國(guó)各個(gè)薯區(qū)接連發(fā)生甘薯病毒病害（SPVD），受災(zāi)面積逐年增大，有些地方甘薯田達(dá)到絕產(chǎn)程度，而利用莖尖分生組織培育甘薯脫毒苗是防治甘薯病毒病最有效的方法[1]。筆者以甘薯品種煙薯25號(hào)、煙薯26號(hào)和煙紫薯3號(hào)的莖尖為材料，采用不同濃度NAA處理，對(duì)甘薯莖尖組織誘導(dǎo)培養(yǎng)及高效植株再生進(jìn)行研究，篩選出適合煙薯25號(hào)、煙薯26號(hào)和煙紫薯3號(hào)莖尖誘導(dǎo)植株再生的培養(yǎng)基，以期建立一套高效的植株再生體系，為今后開展規(guī)?；适砻摱久缟a(chǎn)提供基礎(chǔ)資料。

1 材料與方法

1.1 材料

甘薯品種是煙薯25號(hào)、煙薯26號(hào)和煙紫薯3號(hào)，由煙臺(tái)市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院提供。

1.2 方法

試驗(yàn)于2015年4月—2016年9月在煙臺(tái)市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院組培實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。將煙薯25號(hào)、煙薯26號(hào)和煙紫薯3號(hào)進(jìn)行水培。取生長(zhǎng)旺盛、長(zhǎng)約2 cm的莖尖，用75%乙醇表面消毒15 s[2-4]，立即轉(zhuǎn)入0.1%升汞溶液中殺菌10 min，用無菌水充分洗滌3次。按照劉慶昌等[5]的方法在解剖鏡下剝?nèi)￠L(zhǎng)約0.5 mm的莖尖分生組織，將莖尖分生組織培養(yǎng)在添加不同濃度NAA（表1）的MS培養(yǎng)基（pH 5.8）上，28 ℃光照培養(yǎng)[6-7]42～70 d，使體細(xì)胞胚發(fā)育成熟并發(fā)芽。將分化出的芽轉(zhuǎn)移到MS培養(yǎng)基上，28 ℃光照培養(yǎng)，以獲得完整植株（圖1）。

試驗(yàn)設(shè)計(jì)6個(gè)處理，每個(gè)處理3次重復(fù)，每次重復(fù)10瓶，每瓶接種2個(gè)莖尖，誘導(dǎo)42～56 d時(shí)[8]分別調(diào)查各處理莖尖組織的分化情況，70 d后調(diào)查植株再生率，植株再生率=植株再生數(shù)/接種莖尖數(shù)×100%。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度NAA對(duì)莖尖分生組織培養(yǎng)的影響

莖尖在轉(zhuǎn)入含NAA的培養(yǎng)基56 d后有部分分化出芽，70 d后統(tǒng)計(jì)植株再生率。不同甘薯品種的莖尖組織在不同濃度NAA培養(yǎng)基上獲得再生植株的頻率如圖2所示。由圖2可知，莖尖分生組織在不同濃度NAA培養(yǎng)基上培養(yǎng)，植株再生情況有很大差異。煙薯25號(hào)在1.0 mg/L NAA +MS培養(yǎng)基上植株再生率最高（91%），煙薯26號(hào)和煙紫薯3號(hào)在1.5 mg/L NAA +MS培養(yǎng)基上植株再生率最高，分別達(dá)88%和80%。這表明由于不同甘薯品種莖尖分生組織的內(nèi)源激素水平可能存在差異，因此不同品種分生組織在培養(yǎng)時(shí)對(duì)NAA濃度的要求也就不完全一致。試驗(yàn)結(jié)果表明，添加0.5～1.5 mg/L NAA，可以明顯促進(jìn)根系生長(zhǎng)，發(fā)達(dá)的根系有利于試管苗吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，使得植株生長(zhǎng)迅速，縮短了生長(zhǎng)周期，提高了植株再生率。NAA濃度超過1.5 mg/L時(shí)，會(huì)刺激愈傷組織大量生長(zhǎng)，過度生長(zhǎng)的愈傷組織抑制了芽的生長(zhǎng)，因此降低了植株再生率。

2.2 無機(jī)鹽對(duì)莖尖分生組織成苗的影響

從圖2可以看出，各個(gè)品種在6號(hào)培養(yǎng)基上的植株再生率要高于5號(hào)培養(yǎng)基，這2個(gè)處理NAA濃度相同，表明大量元素和蔗糖濃度均減半的MS培養(yǎng)基比MS培養(yǎng)基更適合甘薯胚狀體正常萌發(fā)及植株再生，可能由于高濃度的無機(jī)鹽和蔗糖會(huì)造成培養(yǎng)基中滲透勢(shì)過高，從而不利于胚狀體再生。

3 結(jié)論與討論

試驗(yàn)表明，不同濃度NAA對(duì)甘薯莖尖分生組織培養(yǎng)的影響有很大差異，添加適當(dāng)濃度的NAA，可以提前生根，且明顯促進(jìn)根系生長(zhǎng)，發(fā)達(dá)的根系有利于植株吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，使得植株生長(zhǎng)迅速，縮短了生長(zhǎng)周期，提高了植株再生率。但NAA濃度較高（超過1.5 mg/L），會(huì)刺激愈傷組織的大量生長(zhǎng)，過度生長(zhǎng)的愈傷組織抑制了芽的生長(zhǎng)，因此降低了再生率，NAA的作用可能與它調(diào)控植物內(nèi)源激素的水平有關(guān)，這與蘇文瑾等[9]研究結(jié)果基本一致。

不同甘薯品種莖尖分生組織培養(yǎng)時(shí)，對(duì)外源激素的濃度要求不同，這可能與不同品種內(nèi)源激素水平不同有關(guān)，這與閆明明等[10]研究結(jié)果一致。

該研究建立了3個(gè)甘薯新品種的植株再生體系，其中煙薯25號(hào)、煙薯26號(hào)和煙紫薯3號(hào)的最高植株再生率分別達(dá)91%、88%和80%。煙薯25號(hào)適宜的莖尖培養(yǎng)基為1.0 mg/L NAA +MS，煙薯26號(hào)和煙紫薯3號(hào)適宜的莖尖培養(yǎng)基為1.5 mg/L NAA +MS。

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