油菜花色研究進(jìn)展及育種應(yīng)用前景

黃華磊+李文博+李艷花+周燕+石有明+肖長(zhǎng)明+劉濤+張曉春

摘要：隨著分子生物學(xué)和生物信息學(xué)的快速發(fā)展、學(xué)科交叉研究的深入，大量植物花色相關(guān)基因被報(bào)道，同時(shí)油菜基因組測(cè)序工作的完成，為油菜分子輔助育種提供了重要支撐。目前，對(duì)油菜花色變異進(jìn)行了大量的研究，分離克隆出一些油菜花色控制關(guān)鍵基因，并結(jié)合生物技術(shù)手段創(chuàng)制了一些油菜花色變異新材料。本文綜述了油菜花色變異來源及類型、油菜花色相關(guān)基因分離與克隆的研究進(jìn)展，并分析、展望了觀光型油菜育種的現(xiàn)狀和前景。

關(guān)鍵詞：油菜；花色控制基因；觀光型油菜；育種；應(yīng)用前景

中圖分類號(hào)： S634.303文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2017）11-0001-04

目前，育種家對(duì)油菜育種目標(biāo)主要集中在高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)（高含油量、高蛋白、低芥酸、低硫苷）、高抗（抗菌核病、抗病毒病、抗倒伏）上，并選育了一大批突破性品種。關(guān)于油菜花色的研究，目前已經(jīng)有少量報(bào)道，田露申等通過遺傳分析1個(gè)甘藍(lán)型油菜白花突變體發(fā)現(xiàn)，該性狀表現(xiàn)為數(shù)量遺傳，符合2對(duì)加性-顯性-上位性主基因+加性-顯性-上位性多基因遺傳模型[1]。同時(shí)，BnF3′H-1[2]、BnaC3.CCD4[3]等部分花色控制相關(guān)功能基因被克隆和報(bào)道，為油菜花色育種提供了部分理論依據(jù)。然而，關(guān)于這些功能基因的育種應(yīng)用和油菜花色育種卻鮮有報(bào)道。本文就油菜花色變異類型及來源、油菜花色控制基因的分離與克隆、油菜花色基因的育種應(yīng)用進(jìn)行了歸納，并對(duì)油菜花色育種前景進(jìn)行了展望。

1油菜花色的變異類型及變異來源

1.1油菜花色的變異類型

常見的栽培油菜主要表現(xiàn)為鮮黃色花，而已知的油菜花色變異主要有乳白色、白色、金黃色、橘紅色、土黃色、杏花黃、微紫絲白花、黃白嵌合體等[4]，但尚未見有藍(lán)色和紅色油菜花色報(bào)道。

油菜白花變異類型是最為豐富的，研究人員已通過自然變異選育、人工誘變、遠(yuǎn)緣雜交等多種途徑選育出白花油菜新品系。大多數(shù)研究人員對(duì)油菜白花性狀遺傳分析認(rèn)為，白花由不完全顯性基因控制[1，5]，也有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)白花為顯性上位、部分上位顯性、C基因組上單基因顯性等[6-9]；對(duì)金黃花的研究發(fā)現(xiàn)，白花對(duì)金黃花具有上位性作用，且該性狀可能受到2對(duì)主效基因控制[4]；橘紅花色為隱性基因遺傳，且花色與植物的育性具有一定的遺傳關(guān)系，但其遺傳基礎(chǔ)仍不清楚[10-11]；乳白色花受單隱性基因或2對(duì)隱性基因控制，與黃籽獨(dú)立遺傳[12-15]；檸檬黃、橘黃花色表現(xiàn)為不完全顯性，其中AABB為檸檬黃，AAbb為橘黃，aaBB為淡黃，aabb為淺橙[16-17]；黃白嵌合體材料受可局部表達(dá)的隱性白化基因控制，為可獨(dú)立于黃色遺傳的簡(jiǎn)單隱性性狀或單基因的母體效應(yīng)[18-20]。此外，研究人員通過遠(yuǎn)緣雜交轉(zhuǎn)育、合成還獲得了紫色條紋花變異類型[21]，推測(cè)這些性狀是由于基因的不完全顯性所致，表現(xiàn)為雙親的中間表型。

從以上研究結(jié)果中可以發(fā)現(xiàn)，油菜花色種類較多且遺傳較為復(fù)雜，由于研究材料的不同故研究結(jié)果不盡相同，但是共同認(rèn)為油菜花色受1～3對(duì)基因控制，同時(shí)受細(xì)胞質(zhì)因素和諸多數(shù)量性狀微效基因的影響。

1.2油菜花色變異來源

油菜花色變異來源廣泛，包括由自然條件下產(chǎn)生的自然突變，通過EMS等化學(xué)誘變或物理誘變并結(jié)合人工選育產(chǎn)生的變異，還有通過遠(yuǎn)緣雜交引入近緣種基因并進(jìn)行基因合成產(chǎn)生的花色變異等。

1.2.1自然變異產(chǎn)生自然變異是物種進(jìn)化的主要?jiǎng)恿?，是許多重要農(nóng)藝性狀的遺傳基礎(chǔ)。現(xiàn)階段，許多物種已有大量的自然遺傳突變體被報(bào)道，并闡釋了遺傳變異對(duì)物種功能的影響[22-23]。通過挖掘有利的自然變異可為培育優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的品種打下堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)，目前已獲得大量的自然遺傳油菜花色突變體。

張潔夫等在甘藍(lán)型油菜中發(fā)現(xiàn)了金黃色花材料，并以甘藍(lán)型油菜白花和金黃色花突變體及正常黃花親本為材料對(duì)油菜花色遺傳表現(xiàn)進(jìn)行解析[4]。發(fā)現(xiàn)白花對(duì)黃花受1對(duì)不完全顯性基因控制（WW），雜合體（Ww）表現(xiàn)為中間色呈乳白色；而黃花對(duì)金黃花則受2對(duì)重疊顯性基因控制（Y1Y1Y2Y2）；白花基因?qū)S花和金黃花具有上位性作用。李莓等從CMS恢復(fù)系自交后代中選育得到橘紅色花變異株系R18，并證實(shí)該性狀可作為恢復(fù)系純度鑒定的標(biāo)記性狀，進(jìn)一步對(duì)其遺傳基礎(chǔ)解析發(fā)現(xiàn)，該性狀受2對(duì)隱性核基因控制[10]。田露申等在白菜型油菜Sarson和人工合成甘藍(lán)型油菜中發(fā)現(xiàn)了乳白色花突變體，并對(duì)其遺傳效應(yīng)進(jìn)行了剖析[1，24]。此外，張雪梅等報(bào)道了不同材料中黃白嵌合體花瓣，初步推測(cè)黃白花色嵌合可能是由某個(gè)隱性白化基因局部表達(dá)引起的[25-27]。同時(shí)，筆者所在課題組也從甘藍(lán)型油菜育種材料中發(fā)現(xiàn)了一些白花、乳白花、杏黃花、土黃花等自然突變育種新材料，正開展一些花色控制關(guān)鍵功能基因的分離、克隆，并結(jié)合育種工作進(jìn)行觀光型油菜新品種的選育和開發(fā)工作。

1.2.2人工誘變選育雖然自然變異廣泛存在，但其變異頻率較低不能大規(guī)模獲得目標(biāo)性狀的突變體材料，而采用甲基磺酸乙酯（EMS）化學(xué)處理或射線輻射等物理誘變成為獲取大量突變體的有效方法。目前，在多種農(nóng)作物物種中已有大量關(guān)于人工誘變突變體庫(kù)構(gòu)建和篩選的報(bào)道[28-33]。研究人員在對(duì)油菜的誘變工作中發(fā)現(xiàn)了大量的花色突變材料。周永明等通過輻射誘變較早地發(fā)現(xiàn)了油菜的花色變異材料，但表現(xiàn)為花器官異常[34]。孫加焱等通過理化方法處理構(gòu)建了甘藍(lán)型油菜突變體庫(kù)，從M3突變體庫(kù)中篩選到白花和白斑花變異材料[35]。石從廣等用EMS處理甘藍(lán)型油菜，從M2代中分離出淺色花和白斑花突變體，并伴隨有花瓣數(shù)量的變異[36]。

1.2.3遠(yuǎn)緣雜交和基因工程合成種質(zhì)資源是育種和功能基因研究的重要基礎(chǔ)，縱觀整個(gè)油菜花色育種工作，油菜花色性狀遺傳基礎(chǔ)較窄。因此，實(shí)施遠(yuǎn)緣雜交和基因工程技術(shù)對(duì)油菜花色性狀進(jìn)行遺傳改良是切實(shí)可行的辦法。遠(yuǎn)緣雜交可以將不同種、屬的性狀結(jié)合起來，突破種屬界限擴(kuò)大遺傳變異，進(jìn)而改良物種、創(chuàng)造新物種、利用雜種優(yōu)勢(shì)。但遠(yuǎn)緣雜交也存在雜種不育或夭亡、后代分離情況嚴(yán)重、世代不易穩(wěn)定等問題，因此關(guān)于油菜與近緣種的雜交研究為數(shù)不多。

相比油菜花色，蘿卜具有更為豐富的花色遺傳類型，包括黃色、白色、粉紅、青銅色、紫色。劉英春利用黃花甘藍(lán)型油菜和人工合成乳黃色花甘藍(lán)型油菜與紫花蘿卜進(jìn)行雜交，發(fā)現(xiàn)它們的雜種后代受精后發(fā)育存在障礙，最終通過胚珠離體培育和染色體加倍獲得了白花和紫色條紋花株系[21]。實(shí)際上，國(guó)外研究人員早在1989年就已經(jīng)開始對(duì)蘿卜和油菜的遠(yuǎn)緣雜交進(jìn)行探索，也獲得了一些花色變異材料[37]。雜種后代花色由雙親決定，而后代出現(xiàn)的白花與雙親均不一樣，推測(cè)白花基因來源于蘿卜，而蘿卜中存在胡蘿卜素合成抑制因子[38]；同時(shí)，雜種后代無(wú)紫花性狀產(chǎn)生可能是由于甘藍(lán)型油菜基因組中存在花青素合成抑制因子，這也合理地解釋了油菜無(wú)紫花性狀的原因[21]。此外，研究人員還利用Ogura CMS紫菜苔×蘿卜雜種F1（♀）與甘藍(lán)型油菜（♂）雜交獲得了乳白色和黃白鑲嵌型花[39]；趙志剛等從人工合成甘藍(lán)型油菜中也發(fā)現(xiàn)了黃白鑲嵌型花，并在形態(tài)學(xué)和基因組學(xué)水平上進(jìn)行了解析[40]。除了油菜與蘿卜雜交外，青海省農(nóng)業(yè)科學(xué)院還嘗試將白花芥藍(lán)進(jìn)行基因轉(zhuǎn)育改良油菜花色，將大黃油菜（♀）與中遲芥藍(lán)（♂）雜交，合成白花和嵌合花型油菜[41]。

近年來，伴隨著基因工程和分子生物學(xué)的快速發(fā)展，逐漸采用細(xì)胞及基因工程等技術(shù)手段人工合成新的種質(zhì)資源。梁明山等通過花粉管通道法將諸葛菜基因組導(dǎo)入甘藍(lán)型油菜，獲得了深黃花色油菜[42]；張傳利等采用PEG/Ca2+在高pH值條件下融合油菜和芝麻下胚軸細(xì)胞原生質(zhì)體，獲得的后代花色性狀介于兩者之間[43]。此外，基于轉(zhuǎn)基因技術(shù)的植物基因修飾、外緣基因?qū)?、基因組編輯等重要技術(shù)也逐步在油菜花色育種工作中體現(xiàn)出強(qiáng)大的優(yōu)勢(shì)和應(yīng)用前景。

2油菜花色控制基因的分離與克隆

自然界中，花色主要由類胡蘿卜素、類黃酮、甜菜紅堿3類色素的成分決定[3]，目前大量花色相關(guān)基因和代謝通路相關(guān)基因已經(jīng)被克隆及被大規(guī)模的生物信息學(xué)所分析。這些信息將為基因工程修飾油菜基因組，創(chuàng)制新的油菜花色育種材料、品種提供重要的理論依據(jù)。油菜遺傳基礎(chǔ)較為復(fù)雜，甘藍(lán)型油菜基因組為異源四倍體（AACC，2n=38），由來源于白菜的A基因組與甘藍(lán)的C基因組組成。目前，對(duì)油菜花色性狀的研究經(jīng)過各國(guó)科研人員的共同努力，大致明確了部分材料中花色的遺傳模式，并結(jié)合突變體材料對(duì)一些主效數(shù)量性狀基因座（簡(jiǎn)稱QTL）進(jìn)行定位和關(guān)鍵功能基因的分離與克隆，并結(jié)合生物信息學(xué)對(duì)花色苷代謝信號(hào)通路預(yù)測(cè)進(jìn)行功能基因挖掘。同時(shí)，在模式植物和其他植物中已報(bào)道，有部分花色控制基因可通過同位克隆方法驗(yàn)證它們?cè)谟筒酥械墓δ堋?/p>

目前，研究人員以自然變異材料為基礎(chǔ)，結(jié)合人工誘變、遠(yuǎn)緣雜交、基因工程等手段拓寬了油菜花色變異，獲得了大量的花色變異材料，利用這些材料對(duì)油菜花色的遺傳機(jī)制進(jìn)行初步分析。柳麗分析認(rèn)為，白花油菜遺傳遵循數(shù)量遺傳規(guī)律，包括2對(duì)具有加性、顯性、上位性效應(yīng)的主效基因，多基因效應(yīng)較小，并篩選和開發(fā)出多個(gè)與花色緊密連鎖的分子標(biāo)記，為進(jìn)一步精細(xì)定位和克隆花色相關(guān)基因奠定了基礎(chǔ)[44]。然而，對(duì)于花色形成的分子機(jī)制卻不清楚。Xu等從甘藍(lán)型油菜中克隆了1個(gè)黃烷酮羥化酶基因，與擬南芥 BnF3′H-1 基因高度同源，編碼1個(gè)定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的細(xì)胞色素P450蛋白[2]。進(jìn)一步研究表明，該基因的非翻譯區(qū)（簡(jiǎn)稱UTR）對(duì)基因的表達(dá)具有關(guān)鍵調(diào)控作用。對(duì)基因的表達(dá)模式分析發(fā)現(xiàn)，該基因在花器官中優(yōu)勢(shì)表達(dá)，在果莢、種皮上也有一定表達(dá)，但該基因并不參與控制油菜籽粒顏色形成。另外，Zhang等從甘藍(lán)型油菜中發(fā)現(xiàn)了4個(gè)類胡蘿卜素裂解酶Ⅳ基因，其中只有BnaC3.CCD4在花瓣中優(yōu)勢(shì)表達(dá)參與白色花的形成，這種現(xiàn)象與番茄、菊花等物種花色控制十分相似[3，45]。通過在編碼區(qū)插入1個(gè)CACTA-like轉(zhuǎn)座子元件（簡(jiǎn)稱TE1）擾亂基因的表達(dá)，最終獲得白花油菜，說明BnaC3.CCD4對(duì)油菜花色形成確實(shí)具有重要功能。在甘藍(lán)型油菜中，黃色花瓣的類胡蘿卜素含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于白色花瓣，而紫黃素是類胡蘿卜素的主要成分。通過高效氣相色譜分析發(fā)現(xiàn)，白色花瓣油菜能釋放α-紫羅蘭酮，主成分為揮發(fā)性脫輔基類胡蘿卜素，推測(cè)BnaC3.CCD4以δ-胡蘿卜素、α-胡蘿卜素為酶促反應(yīng)底物。

此外，科學(xué)家們也試圖從基因組學(xué)中找到一些與花色形成密切相關(guān)的代謝途徑。Casimiro等對(duì)不同花色的蠅子草進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序（簡(jiǎn)稱RNA-seq），結(jié)果顯示至少有12類（PAL、C4H、4CL、CHS、CHI、F3′H、DFR、ANS、FLS、UF3GT、AT、FNS）結(jié)構(gòu)基因和3類調(diào)控基因（MYB、bHLH、WD40）參與花色苷的生物合成途徑[46]。該結(jié)果與Holton等總結(jié)的花色苷合成相關(guān)基因（酶）結(jié)果[47-48]一致。其中，F(xiàn)3′H1基因表達(dá)差異可達(dá)到42倍左右，推測(cè)可能是由于白花中的Myb1a表達(dá)下調(diào)引起。結(jié)合這些線索，田露申使用RACE技術(shù)克隆分離出甘藍(lán)型油菜類胡蘿卜素代謝途徑相關(guān)酶基因-八氫番茄紅素合成酶（簡(jiǎn)稱BnPSY）、八氫番茄紅素脫氫酶（簡(jiǎn)稱BnPDS）、δ-類胡蘿卜素脫氫酶（簡(jiǎn)稱BnZDS）、番茄紅素e-環(huán)化酶（簡(jiǎn)稱BnLYCE）、番茄紅素β-環(huán)化酶（簡(jiǎn)稱BnLYCB）、胡蘿卜素β-環(huán)羥化酶（簡(jiǎn)稱BnBCH）、玉米黃質(zhì)環(huán)氧化酶（簡(jiǎn)稱BnZEP）、順式-環(huán)氧類胡蘿卜素雙氧合酶（簡(jiǎn)稱BnNCED3）、類胡蘿卜素裂解雙氧合酶（簡(jiǎn)稱BnCCD1）[49]?；虮磉_(dá)分析結(jié)果顯示，這些基因的相對(duì)表達(dá)量黃花油菜均遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于白花油菜，而乳黃色油菜這些基因的表達(dá)介于兩者之間；分析花瓣在不同發(fā)育階段的花色變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)花色變化主要是由BnPSY、BnPDS、BnZDS、BnLYCB、BnLYCE、BnNCED3、BnCCD1等基因共同調(diào)控的結(jié)果[50]。

3觀光型油菜育種現(xiàn)狀及展望

近年來，通過科學(xué)家和育種家們不斷的努力，油菜花色基礎(chǔ)研究取得了長(zhǎng)足進(jìn)步，結(jié)合現(xiàn)代生態(tài)觀光農(nóng)業(yè)主題，油菜花色育種也逐步得到發(fā)展。目前，通過研究一些突變體取得了較多成果，研究的技術(shù)手段更為精細(xì)可靠，特別是克隆了多個(gè)白花性狀相關(guān)的功能基因。然而，品種選育方面卻始終面臨著重大的瓶頸問題，選育的可直接應(yīng)用于生產(chǎn)的品種（系）較少。究其主要原因包括相比其他花卉植物，油菜花色變異種類較少，豐富油菜花色突變體類型和導(dǎo)入近緣物種的花色基因是目前亟須解決的問題。油菜花色與其他農(nóng)藝性狀的連鎖遺傳或遺傳互作，如高芥酸、雄性不育等，如Liu等研究發(fā)現(xiàn)甘藍(lán)型油菜白花性狀與高芥酸緊密連鎖[5]；李莓等發(fā)現(xiàn)含有純合隱性橘紅花色植株的雄配子生活力比較低的現(xiàn)象，從而難以選育出高品質(zhì)、高產(chǎn)量的穩(wěn)定觀光型油菜新品種[10]；相比水稻、擬南芥等，油菜遺傳背景相對(duì)復(fù)雜，基因組測(cè)序近年才完成，油菜的遺傳解析工作正處于迅速突破期[51-52]；在推廣應(yīng)用方面存在投入不足，沒有完善的配套栽培技術(shù)體系，限制了“多彩花色”油菜的市場(chǎng)化步伐。

豐富的油菜花色變異類型具有極高的美學(xué)和觀賞價(jià)值，觀光型油菜育種前景廣闊，具備良好的經(jīng)濟(jì)效益、生態(tài)效益、社會(huì)效益。綜合分析油菜花色研究進(jìn)展和觀光型油菜育種的現(xiàn)狀，未來可嘗試從以下幾個(gè)方面入手開展油菜花色育種：（1）拓寬油菜花色遺傳基礎(chǔ)，從矮牽牛、月季、金魚草、觀賞水稻成功案例來看，藍(lán)紫色、粉紅色是可以在油菜中實(shí)現(xiàn)的[53]；（2）扎實(shí)基礎(chǔ)研究，明確花色形成的分子機(jī)制，挖掘更多的花色相關(guān)功能基因；（3）轉(zhuǎn)變研究方法和育種思路，雜交轉(zhuǎn)育和基因工程技術(shù)手段相結(jié)合[54]，傳統(tǒng)的遠(yuǎn)緣雜交獲得的后代存在育性不穩(wěn)、株型矮小等缺陷，而采用基因工程手段，特別是基于基因定點(diǎn)編輯技術(shù)（簡(jiǎn)稱CRISPIR/Cas9）在多種作物中的成功案例，為創(chuàng)造更多的油菜花色提供了重要思路，一方面可以導(dǎo)入不同花色素基因及液泡pH值調(diào)節(jié)基因，另一方面抑制油菜內(nèi)源黃色色素（類胡蘿卜素）的積累，進(jìn)而獲得新的花色油菜品種[55]；（4）選育綜合農(nóng)藝性狀優(yōu)良的多彩花色油菜，結(jié)合高產(chǎn)、高抗、優(yōu)質(zhì)等育種目標(biāo)選育，促進(jìn)農(nóng)業(yè)增產(chǎn)增效；（5）配套良好的栽培技術(shù)體系和推廣示范規(guī)程，為表現(xiàn)優(yōu)異的觀光型油菜新品種提供展示平臺(tái)；（6）油菜花色可作為田間標(biāo)記性狀在種子生產(chǎn)、保障種子純度方面發(fā)揮更大的作用。

總之，“油菜花?！弊鳛樾滦偷穆糜斡^光資源，開發(fā)優(yōu)異花色種質(zhì)資源和品種對(duì)支撐地方經(jīng)濟(jì)、發(fā)展特色旅游產(chǎn)業(yè)舉足輕重，應(yīng)用前景廣闊。同時(shí)，該項(xiàng)工作也面臨著巨大的挑戰(zhàn)，需要更多的育種家們一起努力。

參考文獻(xiàn)：

[1]田露申，牛應(yīng)澤，余青青，等. 甘藍(lán)型油菜白花性狀的主基因+多基因遺傳分析[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，42（11）：3987-95.

[2]Xu B B，Li J N，Zhang X K，et al.Cloning and molecular characterization of a functional flavonoid 3′-hydroxylase gene from Brassica napus[J]. Journal of Plant Physiology，2007，164（3）：350-63.

[3]Zhang B，Liu C，Wang Y，et al.Disruption of a carotenoid cleavage dioxygenase 4 gene converts flower colour from white to yellow in Brassica species[J]. New Phytologist，2015，206（4）：1513-1526.

[4]張潔夫，浦惠明，戚存扣，等. 甘藍(lán)型油菜花色性狀的遺傳研究[J]. 中國(guó)油料作物學(xué)報(bào)，2000，22（3）：1-4.

[5]Liu X P，Tu J X.Chen B Y，et al. Idetification of the linkage relationship between the flower color and the content of erucic acid in the resynthesized Brassica napus L.[J] Acta Genetica Sinica，2004，31（4）：357-362.

[6]Kato M，Tokumasu S.The mechanism of increased seed fertility accompanied with the change of flower colour in Brassicoraphanus[J]. Euphytica，1976，25（1）：761-767.

[7]Woods D L，Séguin-Swartz G. An investigation on linkage between white flower colour and erucic acid in summer rape[J]. Canadian Journal of Plant Science，1998，78（1）：109-111.

[8]Chen B Y，Heneen W K，Jonsson R. Resynthesis of Brassies napus L.through interspecific hybridization between B. alboglabra bailey and B. ampestris L. with special emphasis on seed color[J]. Plant Breeding，1988，101（1）：52-59.

[9]Chen B Y，Jonsson R.Monogenic dominant white flower （petal） in resynthesized Brassica napus[J]. Cruciferae Newslett，1987（12）：25.

[10]李莓，陳衛(wèi)江，易冬蓮. 甘藍(lán)型油菜CMS橘紅花色恢復(fù)系R18遺傳研究[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，1999，32（增刊1）：27-30.

[11]張德雙，張鳳蘭，徐家炳. 大白菜花色和球色遺傳規(guī)律的研究[J]. 華北農(nóng)學(xué)報(bào)，2003，18（2）：81-84.

[12]吳新杰，胡寶成，陳鳳祥，等. 甘藍(lán)型油菜乳白花突變體的發(fā)現(xiàn)[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006，34（2）：203-204.

[13]Rahman M H. Inheritance of petal colour and its independent segregation from seed colour in Brassica rapa[J]. Plant Breeding，2001，120（3）：19-200.

[14]Anstey T H，Moore J F. Inheritance of glossy foliage and cream petals in green sprouting broccol[J]. Journal of Heredity，1954，45（1）：39-41.

[15]Singh D，Pokhriyal S C，Mangath K S. Inheritance of some characters in Brassica juncea[J]. Indian Journal of Genetics and Plant Breeding，1964，24（3）：288-290.

[16]Sylvén N. Kreuzungsstudien beim raps（Brassica napus oleifera）[J]. Hereditas，1927，9（1/2/3）：380-390.

[17]Séguin-Swartz G.Inheritance of a pale yellow patal mutant of summer rape[J]. Cruciferae Newslett，1988，13：24-25.

[18]于澄宇，胡勝武，張春紅，等. 一種花色突變雄性不育油菜的發(fā)現(xiàn)[J]. 遺傳，2004，26（3）：330-332.

[19]Pandey B P. Brief description of a new type of flower color mutation in brown seed Sarson （Brassica campestris L.var. dichotoma Watt.）[J]. Indian Journal of Agricultural Science，1971，41（12）：1115-1116.

[20]Cours B J. Genetic studies in Brassica campestris L.[M]. Wisconsin：University of Wisconsin，1977.

[21]劉英春. 甘藍(lán)型油菜與蘿卜遠(yuǎn)緣雜交的研究[D]. 重慶：西南大學(xué)，2014.

[22]張林，何祖華. 水稻重要農(nóng)藝性狀自然變異研究進(jìn)展及其應(yīng)用策略[J]. 科學(xué)通報(bào)，2015，60（12）：1066-1078.

[23]Gasch A P，Payseur B A，Pool J E. The power of natural variation for model organism biology[J]. Trends in Genetics，2016，32（3）：147-154.

[24]Rahman M H. Inheritance of petal color and its independent segregation from seed color in Brassica rapa[J]. Plant Breeding，2001，120（3）：197-200.

[25]張雪梅，董振生，郭永華. 甘藍(lán)型油菜隱性上位互作核不育材料的選育[J]. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2009，18（2）：103-107.

[26]于澄宇，胡勝武，張春紅，等. 一種花色突變雄性不育油菜的發(fā)現(xiàn)[J]. 遺傳，2004，26（3）：330-332.

[27]田露申，牛應(yīng)澤，余青青，等. 甘藍(lán)型油菜白花性狀的主基因+多基因遺傳分析[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，42（11）：3987-3995.

[28]盧銀，劉夢(mèng)洋，趙建軍，等. 大白菜突變體庫(kù)的構(gòu)建及M2葉片表型變異的研究[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2014，41（8）：1609-1619.

[29]黃永娟，張鳳啟，楊甜甜，等. EMS誘變甘藍(lán)型油菜獲得高油酸突變體[J]. 分子植物育種，2011，9（5）：611-616.

[30]陳天龍，王彥榮，王宇，等. 蒺藜苜蓿EMS誘變突變體庫(kù)的構(gòu)建及突變體表型的分析[J]. 草業(yè)科學(xué)，2015，32（1）：71-77.

[31]黃冬福，付文婷，韓世玉，等. 農(nóng)作物EMS誘變研究進(jìn)展[J]. 北方園藝，2015（24）：188-94.

[32]龍湍，安保光，李新鵬，等. 秈稻93-11輻射誘變突變體庫(kù)的創(chuàng)建及其篩選[J]. 中國(guó)水稻科學(xué)，2016，30（1）：44-52.

[33]彭振英，王興軍，田海瑩，等. 花生 60Co-γ輻射誘變和突變體庫(kù)的構(gòu)建[J]. 核農(nóng)學(xué)報(bào)，2016，30（3）：422-429.

[34]周永明，譚亞玲，劉蒙，等. 甘藍(lán)型油菜輻射誘變研究[J]. 中國(guó)油料作物學(xué)報(bào)，1998，20（4）：1-5.

[35]孫加焱，涂進(jìn)東，范叔味，等. 甘藍(lán)型油菜理化誘變和突變體庫(kù)的構(gòu)建[J]. 遺傳，2007，29（4）：475-482.

[36]石從廣，孟華兵，姜宇曉，等. 甘藍(lán)型油菜EMS誘變二代農(nóng)藝與籽粒品質(zhì)性狀的變異與TILLING庫(kù)的構(gòu)建[J]. 核農(nóng)學(xué)報(bào)，2010，24（6）：1132-1140.

[37]Lange W，Toxopeus H，Lubberts J H，et al. The development of Raparadish （×Brassicoraphanus，2n=38），a new crop in agriculture[J]. Euphytica，1989，40（1）：1-14

[38]Sernyk J. White flower color in rape（Brassica napus） associated with a radish（Raphanus sativus） chromosome[J]. Genome，2011，24（6）：729-734.

[39]黃邦全，劉幼琪，吳文華，等. Ogura CMS紫菜薹×蘿卜×甘藍(lán)型油菜雜種的獲得及細(xì)胞遺傳學(xué)研究[J]. 遺傳學(xué)報(bào)，2002，29（5）：467-470.

[40]趙志剛，富貴，鄧昌蓉. 人工合成甘藍(lán)型油菜早期世代基因組變異的AFLP和MSAP標(biāo)記[J]. 作物學(xué)報(bào)，2013，39（7）：1231-1239.

[41]鄧昌蓉，趙志剛，余青蘭. 人工合成甘藍(lán)型油菜花色變異后代的遺傳研究[J]. 北方園藝，2014（18）：14-17.

[42]梁明山，吳書惠，潘駿玲. 外源DNA導(dǎo)入油菜的研究[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，1994，7（4）：37-42.

[43]張傳利，楊志新，桂雪梅，等. 甘藍(lán)型油菜與芝麻菜體的細(xì)胞雜交[J]. 生物工程學(xué)報(bào)，2008，24（5）：793-802.

[44]柳麗. 甘藍(lán)型油菜遺傳連鎖圖譜的構(gòu)建及花色基因的QTL初步定位[D]. 雅安：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，2009.

[45]Wessinger C A. A genetic route to yellow flowers[J]. The New Phytologist，2015，206（4）：1193-1195.

[46]Casimiro-Soriguer I，Narbona E，Buide M L，et al. Transcriptome and biochemical analysis of a flower color polymorphism in Silene littorea （Caryophyllaceae）[J]. Frontiers in Plant Science，2016，7：204.

[47]Holton T A，Cornish E C. Genetics and biochemistry of anthocyanin biosynthesis[J]. The Plant Cell，1995，7（7）：1071-1083.

[48]劉仕蕓，黃艷嵐，張樹珍. 植物花青素生物合成中的調(diào)控基因[J]. 植物生理學(xué)報(bào)，2006，42（4）：747-754.

[49]田露申. 甘藍(lán)型油菜異源白花性狀的遺傳及相關(guān)基因的克隆與分析[D]. 成都：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，2011.

[50]Zhao D，Tao J. Recent advances on the development and regulation of flower color in ornamental plants[J]. Frontiers in Plant Science，2015，6：261.

[51]Chalhoub B，Denoeud F，Liu S，et al. Plant genetics. Early allopolyploid evolution in the post-Neolithic Brassica napus oilseed genome[J]. Science，2014，345（6199）：950-953.

[52]Wang X，Wang H，Wang J，et al. The genome of the mesopolyploid crop species Brassica rapa[J]. Nature Genetics，2011，43（10）：1035-1039.

[53]Tanaka Y，Brugliera F，Chandler S. Recent progress of flower colour modification by biotechnology[J]. International Journal of Molecular Sciences，2009，10（12）：5350-5369.

[54]Tanaka Y，Brugliera F，Kalc G，et al. Flower color modification by engineering of the flavonoid biosynthetic pathway：practical perspectives[J]. Bioscience，Biotechnology，and Biochemistry，2010，74（9）：1760-1769.

[55]Yin L，Maddison L A，Li M. Multiplex conditional mutagenesis using transgenic expression of Cas9 and sgRNAs[J]. Genetics，2015，200（2）：431-441.高宇，高軍萍，李寒，等. 植物表型監(jiān)測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展及發(fā)展對(duì)策[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2017，45（11）：5-10.