新型免疫調(diào)節(jié)劑（增益素）對豬偽狂犬疫苗免疫增效的試驗(yàn)

王有維,田國泰,李崇婕,黃建新

（1.西安泰樂星生物科技有限公司，西安710075；2.西北大學(xué)生命科學(xué)院，西安710075）

新型免疫調(diào)節(jié)劑（增益素）對豬偽狂犬疫苗免疫增效的試驗(yàn)

王有維1,田國泰1,李崇婕1,黃建新2

（1.西安泰樂星生物科技有限公司，西安710075；2.西北大學(xué)生命科學(xué)院，西安710075）

在畜禽傳染病的免疫預(yù)防實(shí)踐中，經(jīng)常會遇到免疫效果不好，保護(hù)率不高的情況[4]，給養(yǎng)殖業(yè)免疫帶來極大困惑，造成較大經(jīng)濟(jì)損失。實(shí)際上，要想動物免疫好，除了疫苗質(zhì)量達(dá)到有效、安全、穩(wěn)定和疫苗毒株匹配，疫苗運(yùn)輸保存科學(xué)規(guī)范，免疫程序（時間、劑量、頻率）和免疫操作（嚴(yán)謹(jǐn)、認(rèn)真、規(guī)范）這些基本條件外，還有更重要的是被免動物是否具有應(yīng)答能力和感染是否處于臨界發(fā)病狀態(tài)以下。西安泰樂星生物科技有限公司生產(chǎn)的“增益素”，是從T33#α-溶血性鏈球菌（泰樂星公司獨(dú)家研發(fā)，榮獲6項(xiàng)國家發(fā)明專利）代謝產(chǎn)物中提取的糖肽類物質(zhì)，為一種新型高效免疫調(diào)節(jié)劑。為驗(yàn)證“增益素”的免疫調(diào)節(jié)效果，我們進(jìn)行了“增益素”對豬偽狂犬疫苗免疫增效的試驗(yàn)，現(xiàn)報告如下。

偽狂犬疫苗；增益素；新型高效免疫調(diào)節(jié)劑；三道防線；協(xié)同增效

1 試驗(yàn)材料

1.1 試驗(yàn)品

“增益素”，為T33#a-溶血性鏈球菌的代謝產(chǎn)物，主要成分為α-甘露聚糖、堿性多肽、α-甘露寡糖等，1kg/袋，由西安泰樂星生物科技有限公司提供，批號01004。

1.2 疫苗

豬偽狂犬病活疫苗(BarthaK-61），系豬偽狂犬病基因缺失(TK/gE雙基因缺失)弱毒苗，購自國外某進(jìn)口品牌

1.3 試劑盒

美國IDEXX公司提供的豬偽狂犬病毒gB抗體檢測試劑盒

1.4 豬偽狂犬強(qiáng)毒株

由西北大學(xué)生命科學(xué)院自豬場分離并低溫保存。

1.5 試驗(yàn)動物

20頭25日齡斷奶杜長大三元仔豬，購自楊凌一養(yǎng)殖專業(yè)戶豬場。

2 試驗(yàn)方法

2.1 試驗(yàn)動物分組及用法用量

健康狀況相似20頭25日齡斷奶杜長大三元仔豬隨機(jī)分為2組，每組10頭，公母相同，斷奶體重接近，營養(yǎng)、疫病防控、飼養(yǎng)管理、環(huán)境一致，第Ⅰ組為正常免疫對照組，45日齡肌注豬偽狂犬病活疫苗(BarthaK-61）2mL/頭，不添加“增益素”；第Ⅱ組為疫苗增效試驗(yàn)組，45日齡肌注豬偽狂犬病活疫苗(BarthaK-61）2mL/頭，同時在飼料中添加“增益素”（1kg/t料，免疫前5天后連續(xù)添加15天）。

2.2 偽狂犬gB抗體水平監(jiān)測

在45日齡豬免疫接種偽狂犬疫苗前和免疫接種后15、30天，分別檢測各組的抗體陽性O(shè)D值，以了解豬偽狂犬免疫的初始狀況。

2.3 偽狂犬強(qiáng)毒攻毒后保護(hù)率試驗(yàn)

在免疫接種豬偽狂犬疫苗后第31天，用豬偽狂犬強(qiáng)毒株給2個組的豬人工攻毒

2.4 試驗(yàn)結(jié)果

表1 偽狂犬疫苗接種前和接種后15天、30天偽狂犬gB抗體水平（OD均值）

2.4.1 偽狂犬gB抗體水平偽狂犬疫苗接種前和接種后15天、30天，2個組豬偽狂犬gB抗體陽性（OD均值）見表1。

2.4.2 攻毒后保護(hù)率情況偽狂犬疫苗接種后第31天用豬偽狂犬強(qiáng)毒攻毒后保護(hù)率情況見表2。

3 試驗(yàn)結(jié)論

1）不用“增益素”的免疫接種豬偽狂犬強(qiáng)毒攻毒的保護(hù)率只有40%，而用“增益素”增效的保護(hù)率提高至80%，差異極顯著（P＜0.01），說明“增益素”配合豬偽狂犬疫苗使用可以顯著增強(qiáng)豬只對豬偽狂犬強(qiáng)毒的保護(hù)率。

表2 偽狂犬強(qiáng)毒攻毒后2個組保護(hù)率情況

2）不用“增益素”的gB抗體水平（OD均值）在免疫接種后15天、30天分別為0.343和0.425，而用“增益素”增效的gB抗體水平（OD均值）在免疫接種后15天、30天分別為0.182和0.218，差異極顯著（P＜0.01），說明“增益素”配合豬偽狂犬疫苗使用可以顯著增強(qiáng)豬偽狂犬疫苗接種的免疫力。

3）本試驗(yàn)由于條件所限，主要評估攻毒保護(hù)率和抗體水平，未能進(jìn)一步評估“增益素”對黏膜免疫和細(xì)胞免疫水平的改善情況，故機(jī)體田間實(shí)際免疫水平未能全面評估（在下文的討論部分將摘要部分試驗(yàn)研究的成果以作補(bǔ)充，在此對提供相關(guān)資料的作者一并致謝?。?，臨床中需要更多地結(jié)合生產(chǎn)數(shù)據(jù)進(jìn)行綜合評估。

4 試驗(yàn)討論

現(xiàn)代生物學(xué)認(rèn)為，機(jī)體防御病原體攻擊有三道防線。皮膚、黏膜是第一道防線；體液中的殺菌物質(zhì)（如溶酶體）和吞噬細(xì)胞是保衛(wèi)機(jī)體的第二道防線；體液免疫和細(xì)胞免疫為第三道防線。其中第一、二道防線并稱“非特異性免疫”，第三道防線稱為“特異性免疫”，其中非特異性免疫是特異性免疫的基礎(chǔ)，特點(diǎn)是“可遺傳、反應(yīng)快、作用范圍廣、穩(wěn)定性強(qiáng)”，對普通疾病或條件性疾?。ㄈ绱竽c桿菌病、鏈球菌病、豬副嗜血桿菌病、附紅細(xì)胞體病、支原體肺炎、副傷寒、滲出性皮炎等）具有重要天然防御作用（可有效對抗80%以上），對致病性較強(qiáng)病原可以很好協(xié)助特異性免疫（如疫苗）進(jìn)行協(xié)助對抗。

“增益素”能很好的保護(hù)、修復(fù)上皮細(xì)胞及各種黏膜、提升白細(xì)胞，增強(qiáng)巨嗜細(xì)胞和單核細(xì)胞吞噬作用，提升第一、二道防線的防御作用。同時對T、B淋巴細(xì)胞有很好的調(diào)節(jié)和增強(qiáng)作用，可以緩解或解除由于毒素等原因?qū)е碌拿庖咭种疲ＷC第三道防線發(fā)揮功效，全面解決免疫失調(diào)問題，提高機(jī)體的抗病力，降低死亡率及促進(jìn)生長、降低料耗[5]。此外，還可有效防止畜禽在關(guān)鍵生產(chǎn)階段或時機(jī)（如斷奶、轉(zhuǎn)欄、營養(yǎng)和環(huán)境變化、產(chǎn)蛋期等）所造成的嚴(yán)重應(yīng)激，降低發(fā)病率和死亡率，提高飼料利用率和生長速度，對保證畜禽業(yè)持續(xù)、穩(wěn)定、高效發(fā)展具有比較重要的作用。特別適用于種畜禽、幼畜禽、免疫期（含緊急免疫）、疾病康復(fù)期畜禽抵抗力較差時的保健調(diào)理。

本試驗(yàn)中“增益素”對偽狂犬疫苗有協(xié)同增效作用主要有兩個重要原因：①“增益素”免疫調(diào)節(jié)功效，在改善豬群健康的同時提高非特性免疫水平；②“增益素”中α-甘露聚糖和堿性多肽可以與病毒競爭進(jìn)入細(xì)胞的通道（影響病毒吸附宿主細(xì)胞），從而降低病毒感染壓力。這也就是很多養(yǎng)殖場反映“增益素”用的時間越長，疫苗的抗體水平越好，野毒陽性率越低的主要原因。對其它病毒性疾病疫苗（如藍(lán)耳病疫苗[1]、豬瘟疫苗[2]、腹瀉疫苗等）也有類似偽狂犬疫苗的協(xié)助增效作用。以下是部分相關(guān)“增益素”試驗(yàn)研究成果摘要，一并供讀者參閱：

1）浙江大學(xué)李雷斌等試驗(yàn)研究表明：斷奶仔豬日糧中添加0.10%的“α-甘露聚糖肽”使血清中IgG提高23.35%（P＜0.01）；使IgA（血清黏膜抗體）提高了52.75%（P＜0.01）。并且斷奶仔豬日糧中添加0.10%“α-甘露聚糖肽”使T-淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率提高了55.41%（P＜0.01)；豬瘟抗體水平明顯提升；飼料轉(zhuǎn)化率提高11.45%；死亡率降低13.33%[2]。

2）伊利諾大學(xué)Che博士和Pettigrew教授研究顯示：在未受到PRRSV疾病挑戰(zhàn)的豬只當(dāng)中，甘露寡聚糖能夠讓細(xì)胞受體基因以及與免疫相關(guān)的基因的表達(dá)增多。然而，對于已感染PRRSV的豬，甘露寡聚糖卻能夠減少參與炎性反應(yīng)的細(xì)胞激素和趨化素的基因的表達(dá)。甘露寡聚糖還會改善接種PRRS病毒后7～14 d之間豬只的飼料轉(zhuǎn)化效率。總之，飼喂甘露寡聚糖可以對豬的免疫系統(tǒng)進(jìn)行微調(diào)，從而更好地對抗PRRS[1]。

3）山東臨沭縣畜牧局李守現(xiàn)等試驗(yàn)研究表明：在飼料中添加0.1%“α-甘露聚糖肽”可使斷奶仔豬成活率提高8.34%（P＜0.05）；料重比和腹瀉率分別降低5.39%和5.6；T-淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率（反映細(xì)胞免疫的重要指標(biāo)）提高56.46%（P＜0.01）[3]。

4）西北農(nóng)林科技大學(xué)張彥明等進(jìn)行了“增益素”對雞新城疫免疫效果的試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果表明，不用“增益素”的免疫接種雞對新城疫強(qiáng)毒攻毒的保護(hù)率只有85%，而用“增益素”后則保護(hù)率提高到100%，血凝抑制(HI)抗體水平也說明“增益素”可明顯增強(qiáng)雞對新城疫疫苗接種的免疫力[4]。

5）西北農(nóng)林科技大學(xué)郭抗抗等進(jìn)行了“增益素”對雛雞抗大腸埃希氏菌感染和增重的影響的試驗(yàn)，結(jié)果表明，飲服“增益素”的雞對致病性大腸埃希氏素具有一定的抵抗力，可降低發(fā)病率，并對雞的生長有一定促進(jìn)作用[5]。

6）劉輝等進(jìn)行了“增益素”對肉雞免疫的影響試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果表明，“增益素”可有效地降低應(yīng)激因子對機(jī)體的影響，并對注射自制大腸桿菌滅活菌苗引起的應(yīng)激反應(yīng)有較好的緩解作用，其抗應(yīng)激作用較顯著?！霸鲆嫠亍睂Υ碳C(jī)體產(chǎn)生抗體、提高抗體滴度、使抗體水平較為均勻且維持較高的水平，都有較明顯作用[6]。

5 展望

隨著養(yǎng)殖規(guī)模和集約化、全球化程度的不斷提高，過分追求高產(chǎn)的品種改良，以及動物和動物產(chǎn)品流通的日趨頻繁，動物疾病越來越復(fù)雜和多樣化，再加上抗生素作為飼料添加劑將被逐漸限制使用，故采取各種措施以提高機(jī)體抗病力在豬病控制方面顯得日益重要[2]?！霸鲆嫠亍弊鳛橐环N綠色、環(huán)保、安全（本品通過第四軍醫(yī)大學(xué)動物5 136倍急毒、676倍慢毒、致畸致癌實(shí)驗(yàn)證明，無任何毒性反應(yīng)）的新型高效糖肽免疫調(diào)節(jié)劑，在發(fā)揮免疫系統(tǒng)抗病機(jī)能的同時可以很好改善畜禽健康水平、降低養(yǎng)殖風(fēng)險、大大減少抗生素使用頻率和劑量[2]、減輕畜禽產(chǎn)品中藥物留量、減少耐藥株和變異株的產(chǎn)生、增強(qiáng)畜禽產(chǎn)食品安全性、提高畜禽養(yǎng)殖能效，還可以作為新型疫苗佐劑[7]，對降低疫苗應(yīng)激、提高疫苗免疫應(yīng)答水平[4]（兼有提升黏膜免疫、細(xì)胞免疫和體液免疫的作用）和延長疫苗保護(hù)時間[7]有很好的效果?！霸鲆嫠亍爆F(xiàn)已經(jīng)廣泛用于豬、禽、水產(chǎn)、皮毛、寵物等各種動物，對保證人類健康、環(huán)境保護(hù)和畜牧業(yè)可持續(xù)健康發(fā)展將會產(chǎn)生深遠(yuǎn)而重要的意義?！?/p>

[1]James Pettigrew,Tung Che,等.在試驗(yàn)條件下感染豬繁殖呼吸綜合征病毒的患豬當(dāng)中甘露寡聚糖能夠調(diào)節(jié)基因表達(dá)輪廓和甘露寡聚糖改善試驗(yàn)條件下感染豬繁殖呼吸綜合征病毒的斷奶仔豬的免疫反應(yīng)和生長效率[J].動物科學(xué)雜志

[2]李雷斌,傅仕洪,施偉領(lǐng).多抗甲素的研究進(jìn)展及其在養(yǎng)豬生產(chǎn)上的應(yīng)用前景[J].飼料工業(yè),2004,6(3):33-35

[3]李守現(xiàn),等."α-甘露聚糖肽”功效及對斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響[J].試驗(yàn)研究,2013,10

[4]張彥明,等.增益素對雞新城疫免疫效果的試驗(yàn)[J].獸藥與飼料添加劑,2000(5):5-5

[5]郭抗抗,等.增益素對雞免疫功能和生長性能的影響[J].西北農(nóng)林科技大學(xué),2003

[6]劉輝,等.增益素對肉雞免疫的影響試驗(yàn)[J].養(yǎng)禽與禽病防治, 2002(12):6-7

[7]馮素玲,等.“α-甘露聚糖肽”作為甲型流感疫苗佐劑的免疫效果[J].西安交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版),2013,34(5)

10.3969/j.issn.1008-4754.2017.05.048