免疫比濁法PGI/PGII試劑在全自動(dòng)生化分析儀上檢測(cè)性能驗(yàn)證分析

黃新城 南昌市第一醫(yī)院 （江西 南昌 330008）

免疫比濁法PGI/PGII試劑在全自動(dòng)生化分析儀上檢測(cè)性能驗(yàn)證分析

黃新城 南昌市第一醫(yī)院 （江西 南昌 330008）

目的：在臨床開(kāi)展血清胃蛋白酶原I和II（PGI/PGII）檢測(cè)前，對(duì)PGI/PGII 試劑盒在全自動(dòng)生化分析儀上檢測(cè)性能進(jìn)行評(píng)價(jià)。方法：以廠(chǎng)家配套的高、低值濃度樣品為樣本，進(jìn)行批內(nèi)精密度和批間精密度驗(yàn)證。以廠(chǎng)家配套的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)品為樣本，進(jìn)行正確度驗(yàn)證。將質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?zhuān)琍G I范圍為2.5～160.0 ng/mL，PG II范圍為2.0～70.0 ng/mL，將結(jié)果做回歸與相關(guān)分析。以廠(chǎng)商提供干擾物進(jìn)行抗干擾能力驗(yàn)證。結(jié)果：PG I和PGII的低值濃度樣品批內(nèi)精密度的分別為3.23%CV和2.93%CV，批間精密度分別為2.87%CV和2.80CV%。PG I和PGII的高值濃度樣品批內(nèi)精密度的分別為1.75%CV和2.60%CV，批間精密度分別為1.75%CV和2.46%CV。PG I和PGII準(zhǔn)確度偏倚均在±5%以?xún)?nèi)。在PG I范圍為2.5～160.0 ng/mL，線(xiàn)性系數(shù)r=0.999；PG II范圍為2.0～70.0 ng/mL，線(xiàn)性系數(shù)r=0.996，均到達(dá)要求。結(jié)論：免疫比濁法PGI/PGII 檢測(cè)試劑盒在日立7600-010全自動(dòng)生化分析儀上檢測(cè)性能符合臨床要求。

胃蛋白酶原 驗(yàn)證 全自動(dòng)生化分析儀

全自動(dòng)生化分析儀已經(jīng)成為當(dāng)前醫(yī)院常用的生化檢驗(yàn)儀器之一。為保證全自動(dòng)生化分析儀臨床檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，在一種新的檢測(cè)方法應(yīng)用之前，根據(jù)《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》[1]和《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力的專(zhuān)用要求》[2]應(yīng)該對(duì)該方法進(jìn)行驗(yàn)證，通常包括儀器的準(zhǔn)確度、精密度、線(xiàn)性范圍等[3]。本院將采用胃蛋白酶原I/II（PGI/ II）測(cè)定試劑盒和日立7600全自動(dòng)生化分析儀組成檢測(cè)系統(tǒng)用于臨床檢驗(yàn)，本研究對(duì)其準(zhǔn)確度、精密度、線(xiàn)性范圍、樣本針的攜帶污染、抗干擾能力和參考范圍進(jìn)行驗(yàn)證。

1.材料與方法

1.1 儀器與試劑

儀器為日立7600-010全自動(dòng)生化分析儀。實(shí)驗(yàn)所需材料均由北京世紀(jì)沃德生物科技有限公司提供：PGI/PGII測(cè)定試劑盒（Lot:B054103)；標(biāo)準(zhǔn)血清（Lot:NA-18)；高、低值濃度質(zhì)控品（Lot:LADK-18-1、LADK-18-2)；高、低值血清樣品；干擾物：MP biomedicals公司血紅蛋白（Lot:M4017)、北京欣經(jīng)科公司抗壞血酸（Lot:4770J)、Frontier Scientifc公司膽紅素（Lot:JH16-10999)。

1.2 方法

1.2.1 精密度驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)方案

以廠(chǎng)家提供的高、低值濃度血清樣品為樣本，在最短時(shí)間內(nèi)分別對(duì)兩個(gè)高、低值濃度樣品測(cè)量20次，由此計(jì)算出批內(nèi)精密度。以廠(chǎng)家提供的高、低值濃度樣品為樣本，連續(xù)檢測(cè)20 d，每天測(cè)定2批次，每批次測(cè)定2次，由此計(jì)算出批間精密度。批內(nèi)精密度的要求：批內(nèi)CV≤5%；批間精密度的要求：批間CV≤10%。檢驗(yàn)方法：終點(diǎn)法（上升），檢驗(yàn)波長(zhǎng)700 nm，比色杯光徑1cm，R1162 μL，R230 μL，樣本量6 μL，反應(yīng)時(shí)間10 min，下同。

1.2.2 正確度驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)方案

表1. 精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

參考美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)（CLSI）EP15-A2文件進(jìn)行準(zhǔn)確度驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。以廠(chǎng)家配套的質(zhì)控品為樣本，連續(xù)測(cè)量20次，由此計(jì)算出批內(nèi)平均值。正確度要求：測(cè)定結(jié)果均值與質(zhì)控靶值的偏倚≤15%。

1.2.3 線(xiàn)性范圍驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)方案

將質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?zhuān)琍G I范圍為2.5～160.0 ng/mL，PG II范圍為2.0～70.0 ng/mL，將結(jié)果做回歸與相關(guān)分析。線(xiàn)性范圍要求：線(xiàn)性相關(guān)系數(shù)≥0.99。

1.2.4 抗干擾能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)方案

將試劑廠(chǎng)商提供的定值干擾物按NCCLS EP-72A文件要求，將廠(chǎng)家提供的高、低值血清樣品與血紅蛋白、抗壞血酸、膽紅素按9:1比例充分混勻，分別測(cè)量3次取平均值與預(yù)期值進(jìn)行對(duì)比。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

利用Excel 2003進(jìn)行相關(guān)與回歸分析。

2.結(jié)果

2.1 精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1，不精密度小于廠(chǎng)商規(guī)定的批內(nèi)CV≤5%、批間CV≤10%，均符合標(biāo)準(zhǔn)。

2.2 正確度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

正確度實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2，小于允許偏差范圍15%，均符合標(biāo)準(zhǔn)。

2.3 線(xiàn)性范圍實(shí)驗(yàn)結(jié)果

在PG I范圍為2.5～160.0 ng/mL，線(xiàn)性系數(shù)r=0.999；PG II范圍為2.0～70.0 ng/mL，線(xiàn)性系數(shù)r=0.996，均到達(dá)要求。

表2. 正確度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.4 抗干擾能力實(shí)驗(yàn)結(jié)果

比對(duì)結(jié)果顯示加干擾物（膽紅素：50mg/dL；抗壞血酸：50mg/dL；血紅蛋白：500mg/dL）樣本結(jié)果與原樣本結(jié)果偏差小于5%，達(dá)到臨床要求。

3.討論

隨著檢驗(yàn)技術(shù)的不斷發(fā)展和全自動(dòng)生化分析儀在各醫(yī)院的應(yīng)用普及，大大提高了臨床生化檢驗(yàn)的速度，從而服務(wù)于疾病診斷，療效評(píng)價(jià)和預(yù)后判斷中[4,5]。近年來(lái)，各種檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品層出不窮，顯著簡(jiǎn)化了檢驗(yàn)科工作人員的工作強(qiáng)度，提高了工作效率，也使得生化指標(biāo)的檢驗(yàn)效率大大提高[6-8]。按照國(guó)家醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可委員會(huì)和醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法的要求，新的儀器或方法在臨床應(yīng)用前要進(jìn)行系統(tǒng)驗(yàn)證，檢驗(yàn)是否符合相關(guān)檢驗(yàn)所要求的規(guī)格[9,10]?；谏鲜鲆螅狙芯繉?duì)胃蛋白酶原I/II的檢驗(yàn)試劑盒采用本院日立7600-010全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。

本組數(shù)據(jù)顯示，北京世紀(jì)沃德生物科技有限公司所生產(chǎn)的PGI/PGII測(cè)定試劑盒于日立7600-010全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)PGI/PGII經(jīng)精密度、準(zhǔn)確度、線(xiàn)性范圍和抗干擾實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，均符合其要求標(biāo)準(zhǔn)。該P(yáng)GI/PGII檢測(cè)試劑盒檢測(cè)方法是基于免疫濁度法的原理，與日立7600-010全自動(dòng)生化分析儀組成的檢測(cè)系統(tǒng)，上述驗(yàn)證指標(biāo)符合臨床使用的要求。

[1] CL38 C. 醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床化學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用說(shuō)明[S]. 2012.

[2] 2008 GBT. 醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力的專(zhuān)用要求[S]. 2010.

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Verifcation of Detection Performance of PGI/PGII Reagent on Automatic Biochemical Analyzer by Immunoturbidimetry

HUANG Xin-cheng The First Hospital of Nanchang (Jiangxi Nanchang 330008)

1006-6586(2017)11-0027-02

R735.2

A

2017-04-15

黃新城，研究方向：臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)。