組織胚胎學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中浦肯野纖維組織切片的制作

聶竹蘭　廖秋萍　魏杰

摘要 為了提高組織胚胎學(xué)課程的教學(xué)質(zhì)量，筆者以現(xiàn)代教育思想為指導(dǎo)，以多年的教學(xué)經(jīng)驗(yàn)為基礎(chǔ)，介紹了制作實(shí)踐教學(xué)中缺少的浦肯野纖維組織切片的方法，以豐富實(shí)踐教學(xué)資源，讓學(xué)生形象地掌握普通心肌纖維與浦肯野纖維的差別，從而提高實(shí)驗(yàn)教學(xué)質(zhì)量和教學(xué)效果。

關(guān)鍵詞 浦肯野纖維；組織切片；組織胚胎學(xué)；實(shí)驗(yàn)教學(xué)

中圖分類號(hào) G642；Q954.56+1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2017）13-0280-01

捷克的科學(xué)家Purkinje于1839年在綿羊心臟心室的心內(nèi)膜下發(fā)現(xiàn)了灰色、扁平、膠狀的纖維網(wǎng)（后稱浦肯野纖維），1906年Tawara通過(guò)研究將這些纖維網(wǎng)稱為心臟的傳導(dǎo)系統(tǒng)，包括竇房結(jié)、房室結(jié)、希氏束、左右束支及其分支組成，擔(dān)負(fù)著心臟起搏和傳導(dǎo)沖動(dòng)的功能，保證心房心室協(xié)同收縮[1-2]。

組織胚胎學(xué)是農(nóng)業(yè)高等院校水產(chǎn)養(yǎng)殖學(xué)、動(dòng)物科學(xué)、動(dòng)物醫(yī)學(xué)等專業(yè)的基礎(chǔ)課程，組織學(xué)部分主要研究動(dòng)物體的組織結(jié)構(gòu)與功能，胚胎學(xué)部分主要研究動(dòng)物體器官系統(tǒng)的發(fā)生與發(fā)育規(guī)律。組織胚胎學(xué)實(shí)驗(yàn)是組織胚胎學(xué)的重要組成部分。它是在理論講授的基礎(chǔ)上，通過(guò)實(shí)驗(yàn)觀察，使學(xué)生掌握動(dòng)物體的微細(xì)結(jié)構(gòu)，并能從細(xì)胞、組織和器官3個(gè)層次上對(duì)魚類有機(jī)體的形態(tài)結(jié)構(gòu)與功能有一個(gè)總體認(rèn)識(shí)。通過(guò)胚胎實(shí)驗(yàn)課，使學(xué)生掌握普通胚胎學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)及動(dòng)物發(fā)生的一般規(guī)律。通過(guò)實(shí)驗(yàn)特別是1周的綜合實(shí)驗(yàn)，使學(xué)生掌握生物繪圖、切片、染色等基本技能或能力，為以后的生產(chǎn)實(shí)踐和科學(xué)研究打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。目前，實(shí)驗(yàn)教學(xué)以組織切片為主，因而準(zhǔn)備好動(dòng)物體的每個(gè)器官系統(tǒng)的組織切片至關(guān)重要。近年來(lái)，組織胚胎學(xué)的教學(xué)學(xué)時(shí)大幅縮減，出現(xiàn)“學(xué)時(shí)少，內(nèi)容多”的現(xiàn)象，教學(xué)中亦缺少好的示教片。這些問(wèn)題嚴(yán)重影響學(xué)生學(xué)習(xí)本課程的興趣與自覺(jué)性，教學(xué)質(zhì)量堪憂。本文旨在介紹為學(xué)生提供普通心肌纖維與浦肯野纖維的組織切片的方法，讓學(xué)生形象地掌握普通心肌纖維與浦肯野纖維的差別[3-5]。

1 實(shí)驗(yàn)方法

取健康豬心1顆，購(gòu)自阿拉爾市塔里木大學(xué)農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)。取心室左右束支大小適中的組織固定于波恩氏液中36 h，梯度酒精脫水，二甲苯透明處理，石蠟包埋，連續(xù)切片，HE染色，中性樹(shù)膠封片，在Nikon顯微鏡下觀察拍照。載玻片的清洗：將新的載玻片放入洗衣粉或肥皂水中煮沸20 min；玻片上的污物用熱水洗去；用自來(lái)水反復(fù)沖洗若干次，再用蒸餾水沖洗3遍，隨后保存于無(wú)水乙醇中；切片前用眼鏡布擦干載玻片上的無(wú)水乙醇備用。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

組織學(xué)觀察可見(jiàn)心內(nèi)膜由內(nèi)皮、內(nèi)皮下層、心內(nèi)膜下層組成。內(nèi)皮為單層扁平上皮，細(xì)胞界限不清，細(xì)胞核呈橢圓形，胞質(zhì)較少，核的部位隆起；內(nèi)皮下層是由一層較薄的結(jié)締組織組成；心內(nèi)膜下層則由疏松結(jié)締組織組成，其中含有豐富的血管、神經(jīng)和浦肯野纖維。浦肯野纖維（圖1～4）是心臟傳導(dǎo)系的分支，是一種特殊的心肌纖維，纖維短而粗，細(xì)胞中央有1～2個(gè)核，胞質(zhì)內(nèi)含豐富的糖原和線粒體，肌原纖維少，HE染色時(shí)，胞質(zhì)淺淡。浦肯野纖維與普通心肌纖維相連，將沖動(dòng)快速傳到心室各部。心肌膜由大量心肌纖維組成。比較心內(nèi)膜下層與心肌膜的肌纖維可見(jiàn)，心內(nèi)膜下層的浦肯野纖維的形態(tài)不同于心肌膜的普通心肌纖維，浦肯野纖維的細(xì)胞較普通心肌纖維短，但是比普通心肌纖維要粗。

3 實(shí)驗(yàn)效果

以多年教學(xué)經(jīng)驗(yàn)為基礎(chǔ)，本教學(xué)團(tuán)隊(duì)借鑒“看圖、辨圖、畫圖”的圖形教學(xué)法，該方法突顯了圖片在學(xué)習(xí)中形象、直觀的作用，培養(yǎng)學(xué)生的觀察能力和描述能力，尤其在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，圍繞圖形進(jìn)行互動(dòng)教學(xué)，效果明顯。好的教學(xué)方法需要與之匹配的教學(xué)資源。組織胚胎學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)在多媒體互動(dòng)教室上課，授課教師先利用實(shí)驗(yàn)課件向大家講解循環(huán)系統(tǒng)中心臟的結(jié)構(gòu)，以心室為例，由3層組成：心內(nèi)膜、心肌膜及心外膜。通過(guò)幻燈圖片展示心內(nèi)膜的3層結(jié)構(gòu)：內(nèi)皮、內(nèi)皮下層及心內(nèi)膜下層。先低倍鏡下查看浦肯野纖維與普通心室?。▓D1、2），再換高倍鏡比較二者的區(qū)別。理論講解完畢后，要求學(xué)生用顯微鏡觀察內(nèi)皮下層中浦肯野纖維與心肌膜層中普通心肌纖維，并比較二者的特征。如圖1～4所示，無(wú)論縱切還是橫切，浦肯野纖維均粗大，普通心肌纖維均纖細(xì)，學(xué)生通過(guò)切片觀察更形象地掌握2種心肌纖維的區(qū)別。在以往的循環(huán)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)教學(xué)過(guò)程中，學(xué)生所觀察的切片心臟的心內(nèi)膜層中沒(méi)有浦肯野纖維，在實(shí)驗(yàn)報(bào)告的繪圖環(huán)節(jié)，學(xué)生無(wú)法繪出浦肯野纖維的組織結(jié)構(gòu)，而觀察了含有浦肯野纖維的切片后，學(xué)生能把握要點(diǎn)，繪出完整的心臟切片圖，體現(xiàn)出圖形教學(xué)法的重要性的同時(shí)，也強(qiáng)調(diào)了教學(xué)資源的重要性。與此同時(shí)，學(xué)生在掌握浦肯野纖維與普通心肌纖維的區(qū)別之后，結(jié)合浦肯野纖維的分布特點(diǎn)，把握循環(huán)系統(tǒng)中心臟的組織結(jié)構(gòu)與功能，為今后相關(guān)專業(yè)課的學(xué)習(xí)奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)[6-7]。

4 參考文獻(xiàn)

[1] JAY V.The extraordinary career of Dr.Purkinje[J].Arch Pathol Lab Med，2000，124：662.

[2] TAWARA SED.Das reizleitungssystem des saugetierherzens[M].Jena：Gustav Fischer，1906.

[3] 廖秋萍，石長(zhǎng)青，饒麗娟.石蠟切片制作技術(shù)的探討[J].塔里木大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，18（1）：69-70.

[4] 高嵐，劉建春.圖形教學(xué)在組織學(xué)與胚胎學(xué)中的應(yīng)用[J].山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)（基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)教育版），2007，9（6）：616-618.

[5] 李霞.水產(chǎn)動(dòng)物組織胚胎學(xué)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2005.

[6] 劉建春，高嵐，梁銳，等.“以圖為中心”的互動(dòng)教學(xué)法在組織學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用[J].中醫(yī)教育，2008，27（6）：38-41.

[7] 吳爽，伍思琪，賈琴，等.組織胚胎學(xué)課程實(shí)驗(yàn)教學(xué)方法的探索及體會(huì)[J].解剖學(xué)研究，2012，34（1）：70-71.