• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    一個嗜藍孢孔菌屬新菌株的分離、鑒定與菌種培養(yǎng)基質(zhì)研究

    2017-08-08 19:37郭尚周林徐莉娜
    安徽農(nóng)學(xué)通報 2017年14期
    關(guān)鍵詞:新種形態(tài)學(xué)分類

    郭尚 周林 徐莉娜

    摘 要:采自山西右玉地區(qū)沙棘樹腐木中的野生嗜藍孢孔菌屬一新菌株,其形態(tài)學(xué)特征為具有馬蹄形擔子果,蓋狀無柄,有時平伏反卷生長,單系菌絲系統(tǒng);骨架菌絲在Melzer試劑和棉藍試劑中呈負反應(yīng);擔孢子近球形或球形,無色,厚壁等。將Fomitiporia yanbeiensis的ITS序列與其他已經(jīng)報道的嗜藍孢孔菌屬真菌ITS進行比對分析。分析結(jié)果表明Fomitiporia yanbeiensis與嗜藍孢孔菌屬親緣關(guān)系較近,因此可定該屬的一個新種,名為 Fomitiporia yanbeiensis S. Guo & L. Zhou(GenBank: KT861405,F(xiàn)ungal name: FN570360)。

    關(guān)鍵詞:嗜藍孢孔菌;新種;形態(tài)學(xué);分類;培養(yǎng)基質(zhì)

    中圖分類號 R285 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731(2017)14-0035-04

    Abstract:A new Fomitiporia fungus,F(xiàn)omitiporia sp. nov.,was collected from the Datong area (Youyu) Shanxi Province China in the wild sea buckthorn trees rot wood. The morphological feature is that it has a horseshoe shaped cover basidiocarps,sessile,sometimes procumbent backscroll mycelium growth,single system;skeletal hyphae showed a negative reaction in the Melzer reagent and cotton blue reagent;basidiospore near spherical or spherical,colorless,thick wall etc..The ITS sequence of Fomitiporia yanbeiensis was compared with the other species of ITS,which were reported. The results showed that Fomitiporia yanbeiensis had a close genetic relationship with the Fomitiporia species. It was an new species and was named Fomitiporia yanbeiensis S. Guo & L. Zhou (GenBank: KT861405,F(xiàn)ungal name: FN570360).

    Key words:Fomitiporia;New species;Morphology;Classification;Culture medium

    嗜藍孢孔菌(Fomitiporia)是擔子菌門 Basidiomycota,傘菌亞門 Agaricomycotina,傘菌綱 Agaricomycetes,銹革孔菌目 Hymenochaetales 銹革孔菌科 Hymenochaetaceae 的一個屬,隨著形態(tài)學(xué)與分子生物學(xué)相結(jié)合研究技術(shù)的進步,對嗜藍孢孔菌屬Fomitiporia的研究也有了很大的進展,發(fā)現(xiàn)了許多新的分類單元[1-3]。

    我們在研究山西省食藥用菌種質(zhì)資源的工作中,在山西大同地區(qū)的右玉縣發(fā)現(xiàn)并采集到了一種生長在沙棘樹上的木生真菌。通過對采集標本進行的形態(tài)學(xué)和ITS序列比對的分析研究發(fā)現(xiàn),該菌是屬于Fomitiporia屬的一個種,并對該菌種的培養(yǎng)基質(zhì)進行了試驗,現(xiàn)將其結(jié)果概述如下。

    1 材料和方法

    1.1 材料的采集和菌株的保存 課題組在山西右玉采集到了一種生長在沙棘樹上的嗜藍孢孔菌屬真菌,采集人郭尚等,采集時間2015年10月,寄主為沙棘樹(Hippophae rhamnoides Linn.),標本編號SXSYJBB1510,保存于山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所內(nèi)。該標本采集地點海拔1352m,北緯39°98′、東經(jīng)112°47′,這個地區(qū)的山脈是山西地區(qū)針闊葉林和混交林地帶的生長處。以采集的新鮮沙棘腐木上的子實體,進行組織分離得到純菌株,保存于山西省農(nóng)科院食用菌所內(nèi)(SXSYJJZ No.1510)和中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC No.13380)。

    1.2 菌絲分離與培養(yǎng) 采用組織分離法,子實體整體用75%乙醇擦拭消毒后,在無菌條件下,用手術(shù)刀分別在菌蓋、菌柄、菌褶、根部切取小塊組織,分別接種于121℃滅菌30min的PDA培養(yǎng)基(馬鈴薯200g,葡萄糖20g,瓊脂15g,水1L)。將接種的培養(yǎng)基放置于27℃恒溫培養(yǎng)箱中,每隔24h檢查一次菌絲的生長情況。

    1.3 形態(tài)學(xué)研究 標本保存于山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所。肉眼觀察標本的顏色、質(zhì)地、形狀、生長年限、平伏或有菌蓋,菌蓋是否有毛或環(huán)帶等特征,然后用標尺測量子實體的長度、寬度和厚度。

    在尼康E80i顯微鏡下利用Melzer、棉藍和5%KOH三種試劑作切片浮載劑觀察顯微形狀,包括:菌絲系統(tǒng)(單系或二系或三系、菌絲在棉藍試劑中有無嗜藍反應(yīng)、在Melzer試劑中有無淀粉質(zhì)反應(yīng)或擬糊精反應(yīng)、在5%KOH試劑中有無變化或反應(yīng)、菌髓或菌肉菌絲的排列方式);生殖菌絲(顏色、簡單分隔或鎖狀聯(lián)合、分隔常見或稀少、薄壁或厚壁、平直或彎曲、有無分支、菌髓或菌肉中生殖菌絲常見或稀少、致密或疏松、交織排列或平行排列、直徑);骨架菌絲(顏色、薄壁或厚壁或近實心、平直或彎曲、有無分枝、致密或疏松、交織排列或平行排列、直徑);囊狀體或擬囊狀體(有或無、形狀、厚壁或薄壁、是否包被結(jié)晶、大?。?;其他結(jié)構(gòu)如剛毛、樹狀菌絲或菌絲釘?shù)鹊挠袩o,擔孢子和擬擔子的形狀、顏色、厚壁或薄壁,表面光滑或有紋飾,在棉藍試劑和Melzer試劑中的反應(yīng)、大小、平均長、平均寬、長寬比等。綜合宏觀、微觀特征并結(jié)合生態(tài)習(xí)性和腐朽類型等性狀,查閱相關(guān)資料對采集的標本進行鑒定[4]。

    1.4 ITS DNA鑒定 在平板培養(yǎng)基上培養(yǎng)Fomitiporia yanbeiensis菌絲后,刮取50mg的菌絲,用CTAB的方法提取總DNA,抽提后分別用微量分光光度計和瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA純度和完整性。采用通用引物ITS5(GGA AGT AAA AGT CGT AAC AAG G)和 ITS4(TCC TCC GCT TAT TGA TAT GC),對提取的真菌菌絲基因組ITS DNA進行PCR擴增,PCR反應(yīng)條件為:95℃預(yù)變性2min,重復(fù)95℃變性30sec,57℃復(fù)性1min,72℃延伸1min這變性—復(fù)性—延伸三個過程35個循環(huán),最后在72℃保溫10min。擴增產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳檢測。

    采用天根生化科技有限公司的膠回收試劑盒對PCR產(chǎn)物進行純化,純化產(chǎn)物進行sanger測序,將測序結(jié)果中質(zhì)量較低的堿基剔除,同時將測得的ITS序列上傳NCBI,對Fomitiporia yanbeiensis的ITS DNA進行Blast同源比對后,找到所分離菌株的同源性最高物種,并作為鑒定結(jié)果。

    1.5 菌種培養(yǎng)基質(zhì)實驗 采用三種培養(yǎng)基,觀察菌絲生長情況。培養(yǎng)基成分:小麥、玉米、小米為主料,配以石膏粉和碳酸鈣。小麥(玉米、小米)100:石膏粉25%:碳酸鈣25%,即,主料2.5kg,拌入石膏粉25g,碳酸鈣25g,攪拌均勻,調(diào)至含水量60%~65%,裝袋,pH值自然。每袋裝料250個左右。接種后觀察菌種的生長狀態(tài)。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 形態(tài)鑒定及形態(tài)特征描述 嗜藍孢孔菌新種;見圖1。

    子實體:擔子果7年多生,蓋狀無柄,有時平伏反卷生長,單生覆瓦狀生,新鮮時無特殊氣味,木栓質(zhì),干燥后木質(zhì)。菌蓋馬蹄形,單個菌蓋大約7cm長,4cm寬,2cm厚。菌蓋上表面棕褐色,粗糙,無同心環(huán)帶;菌蓋邊緣鈍,黃褐色。菌蓋背表面綠褐色,菌肉黃褐色,具同心的環(huán)區(qū),木栓質(zhì),達30mm厚。菌管比菌肉顏色稍暗,棕黃色,木質(zhì),達10mm長(圖1)。

    菌絲結(jié)構(gòu):單系菌絲系統(tǒng),生殖菌絲有鎖狀聯(lián)合。骨架菌絲在Melzer試劑和棉藍試劑中呈負反應(yīng);菌絲組織在氫氧化鉀試劑中無反應(yīng),菌絲即不消解,也不膨脹。菌肉:生殖菌絲無色至淺黃色,薄壁至稍厚壁,偶爾分枝,直徑為1.4~2.5μm。骨架菌絲占多數(shù),黃褐色至銹褐色,厚壁且有一寬或窄的內(nèi)腔,通常分枝,但不分隔,有時塌陷,交織排列,直徑為1.7~3.2μm。

    菌管:生殖菌絲占少數(shù),無色,薄壁,偶爾分枝,直徑為2~3μm;骨架菌絲占多數(shù),黃褐色,厚壁,大致沿菌平行排列,直徑為2.5~4.8μm。子實層中無剛毛和有囊狀體,薄壁,大小為(4.6~8)μm×(3.8~4)μm;擔子桶狀或近球狀,不著生擔孢子梗,大小為(6~12)μm×(4~6.5)μm。擬擔子少數(shù),形狀與擔子相似,比擔子稍小。

    孢子:擔孢子近球形或球形,無色,厚壁,平滑,在Melzer試劑中呈淀粉反應(yīng),在棉藍試劑中其壁沒有嗜藍反應(yīng),大小為(4.0~5.1)μm×(5.4~6.1)μm,平均長為4.52μm,平均寬為4.18μm,長寬比約為1.08。

    菌絲培養(yǎng)性狀:培養(yǎng)的菌絲初期為白色,茸毛狀,后期顏色逐漸變?yōu)闇\黃色至黃色,菌絲變得較致密,毛氈狀,菌落邊緣的菌絲白色、稀疏,菌絲生長過程中形成的菌落沒有明顯的環(huán)帶,在整個生長過程中菌絲無特殊氣味,培養(yǎng)基的顏色不斷發(fā)生變化,不產(chǎn)生子實體。在顯微鏡下觀察,菌絲類型為單系菌絲系統(tǒng),具有生殖菌絲和骨架菌絲(圖2)。

    2.2 ITS測序比對鑒定結(jié)果 凝膠電泳結(jié)果顯示得到了條帶單一、大小較為一致的PCR結(jié)果,將PCR產(chǎn)物純化后進行Sanger測序。將測序結(jié)果上傳NCBI并獲得檢索登錄號:KT861405.1。對所得到的序列進行Blast同源比對分析,發(fā)現(xiàn)與Fomitiporia yanbeiensis ITS DNA同源性最高的物種都是嗜藍孢孔菌屬的一些種類。

    在本研究中,獲得Fomitiporia yanbeiensis sp. nov. ITS序列片段長度789bp,在GenBank中經(jīng)Blast檢索比對,與Fomitiporia sp. HC-2016a和HC-2016b,GenBank: KU364417,KU364419,KU364420,KU364421,KU364422,KU364423等親緣關(guān)系較近,這些菌株采自于中國西藏[11],相似性為95%~96%。在GenBank經(jīng)Blast檢索比對的結(jié)果中,其他的Fomitiporia sp.都具有較大親緣差距,相似性在91%以下。

    2.3 菌種培養(yǎng)基質(zhì)實驗結(jié)果 本實驗采用了3種培養(yǎng)基質(zhì),接種新菌后30d和45d進行了菌絲生長狀態(tài)調(diào)查,其結(jié)果見表1。

    菌絲培養(yǎng)基質(zhì)試驗結(jié)果表明,接種后30d時,玉米基質(zhì)中有70%長滿菌袋,有20%菌絲超過1/2袋,只有5%的個體菌絲沒有長滿1/2袋。小麥培養(yǎng)基質(zhì)中,有45%的個體長滿了菌袋,30%菌絲超過1/2袋,25%的個體的菌絲沒有長滿1/2袋。這種新菌在小米培養(yǎng)基質(zhì)中的生長狀況最為不佳,當接種30d后沒有一個菌袋長滿菌絲,將一半(45%)的菌袋只長滿了1/2左右。

    當接種后菌絲生長到45d時,3種培養(yǎng)基質(zhì)中的個體基本上都長滿了菌袋,玉米95%,小麥90%,小米基質(zhì)培養(yǎng)基為70%稍低一點,仍然有30%的個體未長滿菌袋。

    3 結(jié)論與討論

    嗜藍孢孔菌屬Fomitiporia是屬于銹革孔菌科的一個屬,目前報道包含有37個種[5],在中國報道的有13個種[2]。嗜藍孢孔菌屬Fomitiporia sp.的擔孢子是透明,厚壁狀的,似糊精狀的,嗜藍色的,這一特征明顯區(qū)別于針層孔菌Phellinus類真菌,最近的系統(tǒng)分類學(xué)研究表明嗜藍孢孔菌屬是銹革孔菌科中的一個獨立的類群[6]。本研究標本Fomitiporia yanbeiensis sp.nov. 擁有Fomitiporia sp.的典型特征,如具有近球形或球形、透明的、厚壁擔孢子,因此可以認為Fomitiporia yanbeiensis應(yīng)歸屬于Fomitiporia.屬的一個新種。

    DNA條碼技術(shù)是一個行之有效的生物鑒定手段,ITS序列分析被廣泛應(yīng)用于為微生物種類鑒定[7-8]。在本研究中,獲得Fomitiporia yanbeiensis sp. nov. ITS序列片段長度789bp,在GenBank中經(jīng)Blast檢索比對,與Fomitiporia sp. HC-2016a和HC-2016b,GenBank: KU364417,KU364419,KU364420,KU364421,KU364422,KU364423等親緣關(guān)系較近,這些菌株采自于中國西藏[9],相似性為95%~96%。在GenBank經(jīng)Blast檢索比對的結(jié)果中,其他的Fomitiporia sp.都具有較大親緣差距,相似性在為91%以下。

    本研究報道的Fomitiporia yanbeiensis sp.nov.與Fomitiporia hippopha?icola (H. Jahn) Fiasson & Niemel? 具有相同種類的寄主植物——沙棘樹,有較近的親緣關(guān)系。Fomitiporia hippopha?icola采集于New York Botanical Garden,分離于沙棘腐木上,在中國也報道了西藏、青海、西北、內(nèi)蒙古等地的沙棘樹上有這個種生存[9-11],與本研究中的Fomitiporia yanbeiensis sp.nov.具有相同的分離源,但是根據(jù)ITS序列分析,在GenBank的Blast比對結(jié)果表明,序列相似度只有88%[12],這意味著兩個類型可能不屬于相同種類。再者,從形態(tài)學(xué)特征上看,F(xiàn)omitiporia hippopha?icola 在子實體的假復(fù)層沒有囊狀體,菌肉灰褐色至深褐色,遇氫氧化鉀變黑,二系菌絲系統(tǒng),生殖菌絲無鎖狀聯(lián)合,擔子近球形至桶型,著生4個擔孢子梗,擔孢子在Melzer試劑中呈黃褐色(擬糊精反應(yīng)),在棉藍試劑中呈嗜藍反應(yīng)[13],而Fomitiporia yanbeiensis子實體復(fù)層一側(cè)膨出囊狀體,單系菌絲系統(tǒng),這是Fomitiporia hippopha?icola與Fomitiporia yanbeiensis的主要區(qū)別,此外Fomitiporia yanbeiensis的生殖菌絲有鎖狀聯(lián)合,擔孢子在Melzer試劑中變黑,具有淀粉質(zhì)反應(yīng);菌絲在Melzer試劑中黃褐色,具有擬糊精反應(yīng),在5%氫氧化鉀試劑中無任何變化,在棉藍試劑中,擔孢子、菌絲沒有嗜藍反應(yīng)。因此本研究結(jié)論認為Fomitiporia yanbeiensis是屬于Fomitiporia.屬的一個新種。在山西北部地區(qū)沙棘樹上發(fā)現(xiàn)有嗜藍孢孔菌屬的活標本,這對山西北部地區(qū)食用菌資源的研究填補了一項空白。

    參考文獻

    [1]戴玉成,徐梅卿,吳興亮. 中國亞熱帶地區(qū)闊葉樹上一種新的立木腐朽病[J].林業(yè)科學(xué)研究,2001,14(1):47-49.

    [2]戴玉成.中國多孔菌名錄[J].菌物學(xué)報,2009,28(3):315-327

    [3]崔寶凱,孫向前,陳建新,等. 浙江天目山兩種新的闊葉樹心材腐朽病[J].林業(yè)科學(xué)研究,2007,20(1):97-100.

    [4]張曉青,戴玉成. 中國真菌志—銹革孔菌科[M].北京:科學(xué)出版社,2005.

    [5]Wikipedia. Fomitiporia [OL] https//en.wikipedia.org/wiki,2016-11-26.

    [6]昝立峰. 粗毛纖孔菌與橢圓嗜藍孢孔菌子實體的化學(xué)成分及其藥理活性研究[D].長春:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué),2012.

    [7]林惠嬌,蔣 湘,王新國,等. DNA條形碼技術(shù)及其在真菌研究中的應(yīng)用[J].植物檢疫,2013,27(2):11-18

    [8]王壽南,陳青君,張國慶,等.一株野生桑黃的分離鑒定與生物學(xué)特性[J].應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報,2016,22(40):0667-0674.

    [9]Si J,Dai YC. Wood-decaying fungi in eastern Himalayas 5. Polypore diversity[J]. Mycosystema,2016,35 (3): 252-278.

    [10]Dai YC,Zhang M. Fomotiporia tibetica,a new species of Hymenochaetaceae (Basidiomycota) from China [J]. Mycotaxon,2002,83: 217-222.

    [11]李玉,李泰輝,楊祝良,圖力古爾,戴玉成. 中國大型菌物資源圖鑒[M].鄭州:中原農(nóng)民出版社,2015:381-390.

    [12]National Center for Biotechnology Information(NCBI)[OL]. https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi

    [13]徐梅卿,戴玉成.沙棘木腐病菌的新記錄種—沙棘針層孔菌[J].林業(yè)科學(xué)研,1997,10(4):380-382.

    (責編:張長青)

    猜你喜歡
    新種形態(tài)學(xué)分類
    一株分離自四川溫泉的嗜熱鞘絲藻新種鑒定
    我國科學(xué)家發(fā)現(xiàn)蕎麥屬新種
    西藏發(fā)現(xiàn)植物新種
    分類算一算
    中科院海洋所命名5個深海生物新物種
    分類討論求坐標
    數(shù)據(jù)分析中的分類討論
    醫(yī)學(xué)微觀形態(tài)學(xué)在教學(xué)改革中的應(yīng)用分析
    數(shù)學(xué)形態(tài)學(xué)濾波器在轉(zhuǎn)子失衡識別中的應(yīng)用
    巨核細胞數(shù)量及形態(tài)學(xué)改變在四種類型MPN中的診斷價值
    777久久人妻少妇嫩草av网站| 成人av一区二区三区在线看| 精品国产一区二区三区四区第35| 搡老妇女老女人老熟妇| aaaaa片日本免费| 最近最新中文字幕大全电影3 | 中文字幕av电影在线播放| 成人特级黄色片久久久久久久| 久久国产乱子伦精品免费另类| 啦啦啦 在线观看视频| 国产成人精品久久二区二区91| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 国产一级毛片七仙女欲春2 | 亚洲成av人片免费观看| www.熟女人妻精品国产| 无限看片的www在线观看| а√天堂www在线а√下载| 国产成人影院久久av| 99久久国产精品久久久| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 757午夜福利合集在线观看| 最好的美女福利视频网| 男女之事视频高清在线观看| 性少妇av在线| 久久青草综合色| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 欧美黄色片欧美黄色片| 国产成人影院久久av| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 韩国av一区二区三区四区| 国产精品综合久久久久久久免费 | 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 欧美不卡视频在线免费观看 | 日韩免费av在线播放| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 久久精品91无色码中文字幕| 正在播放国产对白刺激| 欧美成人午夜精品| 久久中文看片网| 日韩av在线大香蕉| 成人18禁在线播放| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 他把我摸到了高潮在线观看| 一边摸一边抽搐一进一小说| 国产人伦9x9x在线观看| 一边摸一边做爽爽视频免费| 免费高清视频大片| 午夜老司机福利片| 亚洲中文日韩欧美视频| 亚洲全国av大片| 国产精品一区二区三区四区久久 | 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 淫妇啪啪啪对白视频| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 香蕉国产在线看| 黑人欧美特级aaaaaa片| 色哟哟哟哟哟哟| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 午夜精品久久久久久毛片777| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 国产真人三级小视频在线观看| 精品久久久久久久毛片微露脸| 极品人妻少妇av视频| 黑人操中国人逼视频| 午夜视频精品福利| 亚洲中文av在线| 麻豆国产av国片精品| 最近最新中文字幕大全电影3 | 国产av在哪里看| 久久精品人人爽人人爽视色| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 91九色精品人成在线观看| 久久久久久人人人人人| or卡值多少钱| 成人亚洲精品av一区二区| 亚洲最大成人中文| 丰满的人妻完整版| 久久性视频一级片| 黑人欧美特级aaaaaa片| 18禁观看日本| 久久中文字幕一级| 老司机午夜十八禁免费视频| 黑人操中国人逼视频| 日韩欧美国产一区二区入口| 亚洲九九香蕉| 中文字幕色久视频| 亚洲av五月六月丁香网| 免费av毛片视频| 免费看十八禁软件| 91大片在线观看| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 国产一区二区在线av高清观看| 好男人在线观看高清免费视频 | 久久久久久免费高清国产稀缺| 黄色女人牲交| 在线观看午夜福利视频| 黄色a级毛片大全视频| 麻豆成人av在线观看| 国产av一区二区精品久久| 老鸭窝网址在线观看| 美女扒开内裤让男人捅视频| 一级黄色大片毛片| 国产91精品成人一区二区三区| 久久精品成人免费网站| 日韩欧美在线二视频| 亚洲五月色婷婷综合| 88av欧美| 欧美色欧美亚洲另类二区 | 日韩高清综合在线| 男男h啪啪无遮挡| 涩涩av久久男人的天堂| 久久精品91无色码中文字幕| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 韩国精品一区二区三区| 黑丝袜美女国产一区| 亚洲一区高清亚洲精品| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 国产精品免费一区二区三区在线| 国产国语露脸激情在线看| 亚洲中文日韩欧美视频| 婷婷精品国产亚洲av在线| 日韩欧美免费精品| 色综合欧美亚洲国产小说| 女性被躁到高潮视频| 久久婷婷人人爽人人干人人爱 | 自线自在国产av| 国产精品av久久久久免费| 欧美丝袜亚洲另类 | 成年人黄色毛片网站| 欧美国产日韩亚洲一区| 少妇粗大呻吟视频| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 成人18禁在线播放| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 国产片内射在线| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 法律面前人人平等表现在哪些方面| av免费在线观看网站| 好男人在线观看高清免费视频 | 精品人妻1区二区| 91av网站免费观看| 日本在线视频免费播放| 亚洲国产高清在线一区二区三 | 国产成人精品在线电影| 欧美国产日韩亚洲一区| 成人国产一区最新在线观看| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 制服人妻中文乱码| 男女午夜视频在线观看| 1024视频免费在线观看| 亚洲精品av麻豆狂野| 欧美av亚洲av综合av国产av| 这个男人来自地球电影免费观看| 麻豆一二三区av精品| 丁香欧美五月| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 啦啦啦韩国在线观看视频| 精品电影一区二区在线| 18禁美女被吸乳视频| 国产av一区在线观看免费| 中文亚洲av片在线观看爽| 国产亚洲欧美在线一区二区| 十分钟在线观看高清视频www| 欧美不卡视频在线免费观看 | 久久婷婷人人爽人人干人人爱 | 亚洲国产精品sss在线观看| av超薄肉色丝袜交足视频| 亚洲精品国产色婷婷电影| 悠悠久久av| 国产精品爽爽va在线观看网站 | 日韩大尺度精品在线看网址 | 伦理电影免费视频| 波多野结衣av一区二区av| 国产成人精品久久二区二区91| 国产片内射在线| 日本免费一区二区三区高清不卡 | 久久久久久免费高清国产稀缺| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 国产亚洲精品一区二区www| 亚洲自拍偷在线| 麻豆av在线久日| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 午夜福利欧美成人| bbb黄色大片| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 99riav亚洲国产免费| 色综合婷婷激情| 午夜a级毛片| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 真人做人爱边吃奶动态| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 久久久国产成人免费| 一本综合久久免费| 亚洲激情在线av| 99香蕉大伊视频| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 一区二区日韩欧美中文字幕| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | videosex国产| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 国产精品影院久久| 又大又爽又粗| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 91成人精品电影| 又大又爽又粗| 热re99久久国产66热| 国产精品久久久av美女十八| 麻豆国产av国片精品| 国产亚洲精品一区二区www| 精品乱码久久久久久99久播| 老司机午夜十八禁免费视频| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 满18在线观看网站| 精品卡一卡二卡四卡免费| 在线永久观看黄色视频| 99久久精品国产亚洲精品| 免费无遮挡裸体视频| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 国产激情久久老熟女| 亚洲专区中文字幕在线| 午夜福利在线观看吧| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产真人三级小视频在线观看| 大香蕉久久成人网| 中文字幕精品免费在线观看视频| 一二三四社区在线视频社区8| e午夜精品久久久久久久| 老司机在亚洲福利影院| 黑丝袜美女国产一区| 久久人妻av系列| 人人妻,人人澡人人爽秒播| cao死你这个sao货| 日日夜夜操网爽| 亚洲自拍偷在线| 久久久久九九精品影院| 日韩精品中文字幕看吧| 亚洲熟妇熟女久久| 亚洲国产中文字幕在线视频| 韩国精品一区二区三区| 电影成人av| 91精品国产国语对白视频| 男女做爰动态图高潮gif福利片 | 一进一出抽搐gif免费好疼| 亚洲av第一区精品v没综合| 看免费av毛片| 欧美激情 高清一区二区三区| 欧美黄色淫秽网站| 妹子高潮喷水视频| 丝袜人妻中文字幕| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 亚洲成人精品中文字幕电影| 可以在线观看的亚洲视频| 国产精品一区二区精品视频观看| 黄色视频不卡| 午夜成年电影在线免费观看| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 99在线视频只有这里精品首页| 一个人免费在线观看的高清视频| 国产高清videossex| 黄色 视频免费看| 久久久久久久精品吃奶| 搞女人的毛片| 大陆偷拍与自拍| 怎么达到女性高潮| 国产成年人精品一区二区| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 色在线成人网| 99久久国产精品久久久| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 日韩视频一区二区在线观看| 午夜免费鲁丝| 国产高清视频在线播放一区| 亚洲成av人片免费观看| 成人特级黄色片久久久久久久| 99国产精品一区二区蜜桃av| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 在线天堂中文资源库| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 18禁观看日本| tocl精华| 亚洲av五月六月丁香网| 乱人伦中国视频| 色精品久久人妻99蜜桃| 香蕉久久夜色| videosex国产| 一级毛片高清免费大全| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 精品欧美一区二区三区在线| 国产av在哪里看| 69精品国产乱码久久久| 欧美日本视频| 一个人免费在线观看的高清视频| 看片在线看免费视频| 亚洲av美国av| www.精华液| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 国产成人精品久久二区二区免费| 亚洲精品美女久久av网站| 正在播放国产对白刺激| 午夜a级毛片| 国产成人欧美在线观看| 人人妻人人澡欧美一区二区 | 国产真人三级小视频在线观看| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 免费在线观看影片大全网站| 午夜免费激情av| 亚洲色图av天堂| 免费观看人在逋| 黄色毛片三级朝国网站| 国产午夜精品久久久久久| av天堂久久9| 男人舔女人下体高潮全视频| 欧美成人免费av一区二区三区| 国产男靠女视频免费网站| 操出白浆在线播放| 亚洲精品中文字幕在线视频| 久久性视频一级片| 亚洲欧美激情在线| 夜夜爽天天搞| 又黄又爽又免费观看的视频| 99国产精品一区二区蜜桃av| 免费无遮挡裸体视频| 精品免费久久久久久久清纯| 757午夜福利合集在线观看| 精品国产乱码久久久久久男人| 脱女人内裤的视频| 日韩欧美三级三区| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 国产免费av片在线观看野外av| 十分钟在线观看高清视频www| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 极品人妻少妇av视频| 自线自在国产av| 在线观看免费午夜福利视频| 亚洲一区二区三区色噜噜| 久久久久国内视频| 久久国产精品影院| 亚洲五月天丁香| 欧美不卡视频在线免费观看 | 丝袜美腿诱惑在线| 精品久久久久久久人妻蜜臀av | 最新美女视频免费是黄的| 一区二区日韩欧美中文字幕| 亚洲avbb在线观看| 日韩成人在线观看一区二区三区| 成人国语在线视频| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| x7x7x7水蜜桃| 国产av在哪里看| 极品人妻少妇av视频| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 国产熟女午夜一区二区三区| 18禁观看日本| 欧美色欧美亚洲另类二区 | 亚洲国产精品久久男人天堂| 国产一区在线观看成人免费| 欧美另类亚洲清纯唯美| 一级a爱片免费观看的视频| 日本vs欧美在线观看视频| 久久欧美精品欧美久久欧美| 最新在线观看一区二区三区| 亚洲精品在线观看二区| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 国产成人免费无遮挡视频| 亚洲精品在线美女| 国产成人啪精品午夜网站| 757午夜福利合集在线观看| 亚洲男人天堂网一区| 久9热在线精品视频| 国产亚洲精品av在线| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 精品国产一区二区久久| 欧美不卡视频在线免费观看 | 久久热在线av| 精品电影一区二区在线| 1024视频免费在线观看| 男男h啪啪无遮挡| 亚洲欧美日韩无卡精品| www.www免费av| 国产亚洲精品av在线| 他把我摸到了高潮在线观看| 国产亚洲欧美98| 日韩中文字幕欧美一区二区| av在线播放免费不卡| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 国产精品国产高清国产av| 午夜福利免费观看在线| 亚洲精品国产一区二区精华液| 亚洲一区二区三区色噜噜| or卡值多少钱| 国产在线精品亚洲第一网站| 人人妻人人澡欧美一区二区 | 日日夜夜操网爽| 此物有八面人人有两片| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 操美女的视频在线观看| 精品国产国语对白av| 男人舔女人下体高潮全视频| 久久精品成人免费网站| 亚洲精品国产色婷婷电影| 亚洲精品一区av在线观看| 制服诱惑二区| 97人妻天天添夜夜摸| 日韩欧美免费精品| 91老司机精品| 亚洲第一av免费看| 午夜老司机福利片| 女同久久另类99精品国产91| 欧美日韩乱码在线| 久久青草综合色| 国产一卡二卡三卡精品| 桃色一区二区三区在线观看| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 电影成人av| 咕卡用的链子| 十八禁网站免费在线| 色综合欧美亚洲国产小说| 中文亚洲av片在线观看爽| 欧美成人性av电影在线观看| 九色亚洲精品在线播放| 久久性视频一级片| 999久久久精品免费观看国产| 给我免费播放毛片高清在线观看| 日本免费一区二区三区高清不卡 | 男女下面进入的视频免费午夜 | 麻豆一二三区av精品| 大陆偷拍与自拍| 欧美国产精品va在线观看不卡| 黄色视频不卡| 欧美最黄视频在线播放免费| 久久久久久大精品| 超碰成人久久| 亚洲精华国产精华精| 在线观看66精品国产| 国产色视频综合| 身体一侧抽搐| 两人在一起打扑克的视频| 欧美日本亚洲视频在线播放| 成人国语在线视频| 少妇被粗大的猛进出69影院| 91老司机精品| 国产亚洲欧美在线一区二区| 咕卡用的链子| 电影成人av| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 午夜免费激情av| ponron亚洲| 日本vs欧美在线观看视频| 精品国产一区二区三区四区第35| 两个人看的免费小视频| 精品久久久久久久毛片微露脸| 欧美国产精品va在线观看不卡| 视频在线观看一区二区三区| 悠悠久久av| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 久久国产乱子伦精品免费另类| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 老汉色av国产亚洲站长工具| 热re99久久国产66热| 久久精品国产亚洲av高清一级| 精品国产国语对白av| 大陆偷拍与自拍| 色播在线永久视频| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 国产亚洲欧美98| 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲久久久国产精品| 九色国产91popny在线| 天堂动漫精品| 亚洲天堂国产精品一区在线| 国产91精品成人一区二区三区| 久久久久精品国产欧美久久久| 色综合亚洲欧美另类图片| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 亚洲第一青青草原| 亚洲av电影不卡..在线观看| 日韩欧美一区视频在线观看| 久久伊人香网站| 亚洲国产看品久久| 亚洲欧美精品综合久久99| 国产一区在线观看成人免费| 精品午夜福利视频在线观看一区| 美女免费视频网站| 91麻豆av在线| 亚洲国产精品sss在线观看| 国产亚洲欧美精品永久| av欧美777| 欧美另类亚洲清纯唯美| 亚洲自拍偷在线| 国产国语露脸激情在线看| 午夜影院日韩av| 亚洲精品国产一区二区精华液| 国产又色又爽无遮挡免费看| 日本在线视频免费播放| 精品一品国产午夜福利视频| 伦理电影免费视频| 宅男免费午夜| 精品第一国产精品| 国产主播在线观看一区二区| 欧美成人免费av一区二区三区| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 在线播放国产精品三级| 99精品欧美一区二区三区四区| xxx96com| 国产亚洲欧美在线一区二区| 99国产精品99久久久久| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 亚洲色图综合在线观看| 91成年电影在线观看| 色播在线永久视频| 淫秽高清视频在线观看| 国产亚洲精品一区二区www| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 成人国产综合亚洲| 这个男人来自地球电影免费观看| av免费在线观看网站| 免费搜索国产男女视频| 成人永久免费在线观看视频| or卡值多少钱| 一本综合久久免费| 欧美激情高清一区二区三区| 国产精品亚洲美女久久久| 亚洲一码二码三码区别大吗| 一二三四在线观看免费中文在| 日本免费a在线| 精品福利观看| 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲三区欧美一区| 日本 欧美在线| 亚洲熟女毛片儿| 成年人黄色毛片网站| 亚洲精品国产区一区二| 久久九九热精品免费| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| tocl精华| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 午夜久久久在线观看| 午夜免费观看网址| 最新美女视频免费是黄的| 久久精品影院6| 看免费av毛片| 淫秽高清视频在线观看| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 欧美乱色亚洲激情| 亚洲性夜色夜夜综合| 欧美性长视频在线观看| 亚洲av熟女| 女同久久另类99精品国产91| 好男人在线观看高清免费视频 | 黄片播放在线免费| 久久婷婷人人爽人人干人人爱 | 18禁观看日本| 欧美色视频一区免费| 亚洲专区国产一区二区| 亚洲七黄色美女视频| 91九色精品人成在线观看| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 波多野结衣巨乳人妻| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 亚洲av成人一区二区三| 免费av毛片视频| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 国产成年人精品一区二区| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 亚洲av美国av| 国产av一区在线观看免费| 色综合亚洲欧美另类图片| √禁漫天堂资源中文www| 国产又爽黄色视频| 人妻久久中文字幕网| 精品久久久久久,| 欧美中文日本在线观看视频| 一a级毛片在线观看| 国产成人啪精品午夜网站| 日本 av在线| 日本在线视频免费播放| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 国产麻豆成人av免费视频| 丝袜在线中文字幕| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 国产99白浆流出| 久久中文看片网| 一区二区三区精品91| 国产亚洲精品久久久久久毛片| a在线观看视频网站| 曰老女人黄片| 久久中文字幕一级| 看片在线看免费视频| 国产精品日韩av在线免费观看 | av天堂在线播放| 国产成人欧美在线观看| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 精品久久久久久久久久免费视频| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 一本大道久久a久久精品| 色精品久久人妻99蜜桃| 亚洲国产高清在线一区二区三 | 免费看十八禁软件| 色哟哟哟哟哟哟| 亚洲免费av在线视频| 国产精品久久久av美女十八| 久久久久精品国产欧美久久久| 在线天堂中文资源库| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 黑人欧美特级aaaaaa片| 日韩av在线大香蕉|