通心絡(luò)膠囊對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠血管內(nèi)皮功能和炎癥機(jī)制影響研究

李大鵬，孫黨輝，張春茹，魏 林，那世敬

(1．哈爾濱市第一醫(yī)院 a．心內(nèi)科重癥監(jiān)護(hù)室;b．心內(nèi)一科;c．心內(nèi)四科，黑龍江 哈爾濱 150010;2．哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院心內(nèi)五科，黑龍江 哈爾濱 150010)

通心絡(luò)膠囊對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠血管內(nèi)皮功能和炎癥機(jī)制影響研究

李大鵬1a，孫黨輝2，張春茹1b，魏 林1b，那世敬1c△

(1．哈爾濱市第一醫(yī)院 a．心內(nèi)科重癥監(jiān)護(hù)室;b．心內(nèi)一科;c．心內(nèi)四科，黑龍江 哈爾濱 150010;2．哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院心內(nèi)五科，黑龍江 哈爾濱 150010)

目的 探討通心絡(luò)膠囊對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠血管內(nèi)皮功能和炎癥機(jī)制的影響。方法自發(fā)性高血壓大鼠50只，分為模型組、陽(yáng)性對(duì)照組、通心絡(luò)低劑量組、通心絡(luò)中劑量組、通心絡(luò)高劑量組各10只。模型組大鼠給予等劑量生理鹽水灌胃，每日1次;陽(yáng)性對(duì)照組給予替米沙坦50 mg/(kg·d)，每日1次;通心絡(luò)低、中、高劑量組分別給予通心絡(luò)0.5、1.0、2.0 mg/(kg·d)，每日1次。各組大鼠均連續(xù)灌胃12周。觀察給藥8周末各組血管內(nèi)皮功能指標(biāo)、炎癥指標(biāo)及血壓變化。結(jié)果陽(yáng)性對(duì)照組和通心絡(luò)各劑量組內(nèi)皮素(ET)、白介素－6(IL-6)、腫瘤壞死因子－α(TNF-α)、C反應(yīng)蛋白(CRP)及收縮壓水平低于模型組，NO水平高于模型組;通心絡(luò)中劑量組和高劑量組ET、IL-6、TNF-α、CRP及收縮壓低于陽(yáng)性對(duì)照組和通心絡(luò)低劑量組，NO水平高于陽(yáng)性對(duì)照組及通心絡(luò)低劑量組;且高劑量組ET、IL-6、TNF-α、CRP及收縮壓低于中劑量組，NO水平高于中劑量組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論通心絡(luò)膠囊對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠降壓效果明顯，其作用機(jī)制可能與改善血管內(nèi)皮功能、炎癥因子相關(guān)。

通心絡(luò)膠囊;自發(fā)性高血壓;血管內(nèi)皮功能;炎癥因子

高血壓是常見的一種疾病，主要以動(dòng)脈血壓持續(xù)上升為主要表現(xiàn)的慢性疾病，且其發(fā)病率呈不斷上升趨勢(shì)，常會(huì)引起腎、腦、心等重要器官的病變且出現(xiàn)嚴(yán)重的后果［1～3］。通心絡(luò)膠囊是按照中醫(yī)理論研制的一種中藥復(fù)方制劑，具有益氣活血通絡(luò)功效，可改善內(nèi)皮功能、抗動(dòng)脈粥樣硬化等作用［4，5］。本研究旨在探討通心絡(luò)膠囊對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠血管內(nèi)皮功能和炎癥機(jī)制的影響，旨在能夠?yàn)榕R床和基礎(chǔ)研究提供一定參考價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物2014年1月至2016年1月，自發(fā)性高血壓大鼠50只，購(gòu)于上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司，動(dòng)物許可證號(hào):SCXK(滬)2007-0005，清潔級(jí)，雌雄各半，體質(zhì)量(200.48±20.18)g，，自由飲食、飲水，維持室溫為23～25℃，相對(duì)濕度70%，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周。分為模型組、陽(yáng)性對(duì)照組、通心絡(luò)低劑量組、通心絡(luò)中劑量組及通心絡(luò)高劑量組各10只。

1.2 主要試劑和儀器內(nèi)皮素(ET)和一氧化氮(NO)試劑盒(購(gòu)于上海酶聯(lián)生物技術(shù)有限公司)，白介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、C 反應(yīng)蛋白(CRP)試劑盒(購(gòu)于武漢博士德生物工程有限公司)。通心絡(luò)膠囊(石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司，規(guī)格:每粒裝0.26 g);替米沙坦片(宜昌長(zhǎng)江藥業(yè)有限公司，規(guī)格:40 mg)。BSA6202 S精密電子天平(北京賽多利斯天平有限公司)，7180型全自動(dòng)生化分析儀(日本日立公司)，ST-40型低溫冷凍離心機(jī)(美國(guó)Thermo公司)。

1.3 方法模型組大鼠給予等劑量生理鹽水灌胃，每日1次;陽(yáng)性對(duì)照組給予替米沙坦50 mg/(kg·d)，每日1次;通心絡(luò)低、中、高劑量組分別給予通心絡(luò) 0.5、1.0、2.0 mg/(kg·d)，每日 1 次。連續(xù)給藥8周。血清標(biāo)本采集于給藥8周末:采用烏拉坦麻醉，腹主動(dòng)脈取血6 ml置入 EP管中，低溫以3000 r/min離心10 min，分離血清，于－20℃保存待測(cè)。

1.4 觀察指標(biāo)①血管內(nèi)皮功能指標(biāo):取上述血清標(biāo)本，采用放射免疫法測(cè)定ET含量，采用硝酸還原酶比色法檢測(cè)大鼠血清中亞硝酸鹽和硝酸鹽含量來間接反映NO含量;②炎癥因子:采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA 法)測(cè)定 IL-6、TNF-α、CRP 含量;③采用智能無創(chuàng)血壓測(cè)量大鼠尾動(dòng)脈血壓，以3次測(cè)量的平均值為血壓值。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。正態(tài)分布的計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示;兩兩比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料的比較采用卡方檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠血管內(nèi)皮功能指標(biāo)水平比較陽(yáng)性對(duì)照組和通心絡(luò)各劑量組 ET、IL-6、TNF-α、CRP水平低于模型組，NO水平高于模型組;通心絡(luò)中劑量組和高劑量組 ET、IL-6、TNF-α、CRP低于陽(yáng)性對(duì)照組和通心絡(luò)低劑量組，NO水平高于陽(yáng)性對(duì)照組及通心絡(luò)低劑量組;且高劑量組 ET、IL-6、TNF-α、CRP低于中劑量組，NO水平高于中劑量組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 各組大鼠血管內(nèi)皮功能和炎癥因子指標(biāo)水平比較

2.2 各組大鼠收縮壓比較通心絡(luò)低劑量組和陽(yáng)性對(duì)照組收縮壓比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);陽(yáng)性對(duì)照組和通心絡(luò)各劑量組收縮壓低于模型組;中劑量組和高劑量組收縮壓低于陽(yáng)性對(duì)照組和低劑量組;且高劑量組收縮壓低于中劑量組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表3。

表4 各組大鼠收縮壓比較

3 討論

通心絡(luò)膠囊是一種中成藥，其組成主要為水蛭、全蝎、蟬蛻、蜈蚣、赤芍、人參、冰片以及土鱉蟲等，具有擴(kuò)張血管、抗凝、降脂、維護(hù)血管通暢等作用。通心絡(luò)膠囊能夠在一定程度上抑制自發(fā)性高血壓大鼠血壓，延緩高血壓的發(fā)病進(jìn)程，其作用可能與以下幾方面相關(guān)［6，7］:血管內(nèi)皮功能異常在高血壓發(fā)病中具有重要作用，自發(fā)性高血壓大鼠因多種病理因素致使血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，NO分泌減少，ET分泌增加，促進(jìn)且加重高血壓的發(fā)生，現(xiàn)代藥理研究表明［8］，通心絡(luò)膠囊可改善血管內(nèi)皮功能、改善血液流變學(xué)及緩解血管痙攣等;②腎素-血管緊張素系統(tǒng)異常是高血壓發(fā)生、發(fā)展獨(dú)立影響因素，研究表明通心絡(luò)膠囊可調(diào)節(jié)血管中血管活性物質(zhì)［9］。目前，臨床上尚無有關(guān)通心絡(luò)膠囊對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠研究報(bào)道，本研究旨在初步探討通心絡(luò)膠囊對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠可能作用機(jī)制，為通心絡(luò)膠囊藥理作用提供一定參考意義。

血管內(nèi)皮是血管壁和血液間的屏障，能夠維持血管通暢和血管壁的光滑，介導(dǎo)免疫反應(yīng)和炎癥，調(diào)節(jié)血管平滑肌的細(xì)胞。血管內(nèi)皮功能障礙被認(rèn)為是高血壓的病因，并且其功能混亂是高血壓病早期表現(xiàn)和始動(dòng)環(huán)節(jié)的重要特征。臨床大量研究顯示，高血壓患者幾乎均伴血管內(nèi)皮功能減退。血管內(nèi)皮對(duì)高血壓影響通過分泌多種血管活性物質(zhì)，從而達(dá)到調(diào)節(jié)血管壁的舒縮和平滑肌細(xì)胞的增殖等，這些活性物質(zhì)主要包括ET、NO、Ang II。其中NO是內(nèi)皮細(xì)胞釋放的一種主要舒血管物質(zhì)，可維持調(diào)節(jié)血壓的穩(wěn)定和維持血管張力的恒定;ET是由血管內(nèi)皮分泌的縮血管多肽，當(dāng)血管內(nèi)皮損傷時(shí)，血管內(nèi)皮ET水平增加;Ang II血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌細(xì)胞因子，能夠促使血管平滑肌發(fā)生劇烈收縮，從而引起血管動(dòng)脈壓上升及外周阻力增加［10］。本研究結(jié)果表明，通心絡(luò)膠囊可通過降低ET水平和增加NO，改善血管內(nèi)皮功能。

炎癥反應(yīng)在原發(fā)性高血壓發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用，且致使原發(fā)性高血壓的血管損傷和靶器官損害［11］。臨床研究表明，高血壓與炎性因子IL-6、TNF-α、CRP 相關(guān)，持續(xù)高水平的 IL-6、TNF-α、CRP可能是高血壓的病理生理基礎(chǔ)［12］。本研究結(jié)果表明，通心絡(luò)膠囊可降低血清IL-6、TNF-α、CRP水平，減輕炎癥反應(yīng)。

綜上所述，通心絡(luò)膠囊對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠降壓效果明顯，其作用機(jī)制可能與改善血管內(nèi)皮功能、炎癥因子水平相關(guān)。

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Effect of Tong Xin Luo Capsule on the vascular endothelial function and inflammatory factor mechanism of spontaneously hypertensive rats

LI Da-peng，SUN Dang-hui，ZHANG Chun-ru，WEI Lin，NA Shi-jing

R544.1;R332

B

1672-6170(2017)04-0241-03

2016-09-26;

2017-03-16)

△通訊作者