魏鳳國
(遼寧省實驗中學東戴河分校 125208)
一些教師在教學中,特意強調(diào)細胞分化是多細胞生物才有的生命活動,而單細胞生物不進行細胞分化,理由是單細胞生物沒有組織和器官這兩個層次。實際上,細胞分化并非多細胞有機體獨有的特征,在單細胞生物也存在著類似的現(xiàn)象。例如,在單細胞的原生生物中(如衣藻),孢子的形成即是細胞分化的初級形式[1]。粘菌是一種介于真菌和原生動物之間的真核微生物,其在孢子形成過程中,由單細胞變形體形成蛞蝓形假原生質團,并進一步分化成為柄和孢子的過程,均涉及一系列特異基因的表達。這也是研究低等生物體細胞分化很好的材料。與多細胞生物體細胞分化的不同之處在于:單細胞生物并不是通過細胞分化構建不同的組織和器官,而是去適應不同的生活環(huán)境[2]。粘菌的特殊形態(tài)結構、整齊的同步分裂、秩序井然的聚集和細胞的分化能力都引起了生物學家的關注[3]。
一些教輔資料指出:低溫是通過抑制酶的活性來抑制紡錘體的形成的。理由是:紡錘體的本質是蛋白質,這種蛋白質的合成是在酶的催化作用下進行的。實際上,紡錘體是由微管蛋白裝配形成的一種臨時性細胞器。微管蛋白有兩種類型:α微管蛋白和β微管蛋白。α微管蛋白和β微管蛋白形成的微管蛋白異二聚體是微管裝配基本單位。體外條件下,只要微管蛋白異二聚體達到一定的臨界濃度(約為1 mg/mL)、有Mg2+而無Ca2+存在、適當?shù)膒H(pH 6.9)和溫度(37℃)的緩沖液中,異二聚體即聚合成微管。同時需要有GTP提供能量[4]。而在0℃時微管解聚為異二聚體,低溫因素直接破壞微管[2]。所以,低溫不是抑制酶的活性來抑制紡錘體的形成,而是直接破壞微管來破壞紡錘體的。另外,一些微管聚合的促進劑和解聚物質的作用也說明其直接作用于微管。例如,紫杉酚和微管緊密結合可防止微管蛋白亞基的解聚,加速微管蛋白的聚合作用;秋水仙素和乙酰甲基秋水仙堿能結合和穩(wěn)定游離的微管蛋白,使其無法聚合成微管,引起微管的解聚作用;長春花堿、長春新堿能結合微管蛋白異二聚體,抑制它們的聚合作用[4]。
很多教師都強調(diào):利用PCR技術擴增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列合成引物。那是不是只有目的基因的序列已知才能使用PCR擴增呢?
有關文獻[5]指出:目的基因的序列未知,利用反向PCR技術也是可以擴增出來的。反向PCR通過使部分序列已知的限制片段自身環(huán)化連接,然后在已知序列部位設計一對反向的引物,經(jīng)PCR而使未知序列得到擴增。重復進行反向PCR,從染色體的已知序列出發(fā),逐步擴增出未知序列,稱為染色體步移(圖1)。由圖1可知,設計出反向引物以后就可以擴增出兩引物之間的未知序列的DNA分子。所以,PCR不僅能擴增已知的DNA序列,還可以擴增未知的DNA序列。
圖1 染色體步移示意圖