2015年齊齊哈爾市第一醫(yī)院細菌耐藥性監(jiān)測

劉 麗， 白光銳， 馮春曉， 左晶晶

2015年齊齊哈爾市第一醫(yī)院細菌耐藥性監(jiān)測

劉 麗， 白光銳， 馮春曉， 左晶晶

目的 了解齊齊哈爾市第一醫(yī)院臨床分離菌的分布及耐藥性，為臨床合理使用抗菌藥物提供依據(jù)。方法 采用自動化儀器對2015年1月1日－12月31日該院臨床分離菌進行藥敏試驗，采用CLSI 2014年版標準判斷藥敏結果及WHONET 5.6軟件進行數(shù)據(jù)分析。結果 2015年1月1日－12月31日收集臨床分離菌5 162株，其中革蘭陽性菌1 450株，占28.1%，革蘭陰性菌3 712株，占71.9%。葡萄球菌屬中甲氧西林耐藥金黃色葡萄球菌和凝固酶陰性葡萄球菌的檢出率分別為36.5%（255 / 698）和81.4% （180 / 221），未發(fā)現(xiàn)對萬古霉素和利奈唑胺耐藥的金黃色葡萄球菌。腸球菌屬對萬古霉素和利奈唑胺耐藥率較低，其中檢出1株對萬古霉素耐藥的屎腸球菌。大腸埃希菌、克雷伯菌屬細菌和奇異變形桿菌產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶（ESBL）株平均檢出率分別為39.9%（298 / 747）、26.1%（294 / 1 127）和15.6%（12 / 77），腸桿菌科細菌對碳青霉烯類、含β內(nèi)酰胺酶抑制劑的復合制劑、阿米卡星耐藥率相對較低。泛耐藥鮑曼不動桿菌與泛耐藥銅綠假單胞菌的檢出率分別為36.6%（163 / 445）和1.8%（13 / 715）。結論 細菌耐藥性仍對臨床構成嚴重威脅，應引起高度重視，臨床微生物室應繼續(xù)加強細菌耐藥性監(jiān)測，為臨床提供更好的數(shù)據(jù)支持。

抗菌藥物； 細菌耐藥性監(jiān)測； 藥物敏感性

隨著抗菌藥物的廣泛使用，細菌耐藥率日趨升高，耐藥形勢日趨嚴峻。為了解齊齊哈爾市第一醫(yī)院臨床分離細菌對抗菌藥物的敏感性及其耐藥特點，為感控部門和臨床醫(yī)師經(jīng)驗性用藥和合理使用抗生素提供依據(jù)，對我院2015年1－12月臨床標本分離細菌的耐藥性監(jiān)測結果進行統(tǒng)計分析，報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 細菌來源 收集我院2015年1月1日－12月31日臨床分離的細菌（剔除同一患者相同部位分離的細菌）共5 162株。

1.1.2 培養(yǎng)基 分離用哥倫比亞血瓊脂、中國藍瓊脂均為OXOID公司商品。

1.1 方法

1.2.1 細菌鑒定及藥敏試驗 采用MicroScan WalkAway40全自動細菌鑒定及藥敏檢測系統(tǒng)進行鑒定與藥敏分析，肺炎鏈球菌鑒定及藥敏采用梅里埃公司的VITEK 2-Compact儀器。如為萬古霉素不敏感株進行復核鑒定，并采用萬古霉素E試驗條測定最低抑菌濃度（MIC）值進行確認。藥敏結果按照美國CLSI 2014版[1]標準判定。

1.2.2 質控菌 采用標準菌株大腸埃希菌ATCC 25922、銅綠假單胞菌ATCC 27853、金黃色葡萄球菌ATCC25923、肺炎鏈球菌ATCC 49619進行質量控制。

1.2.3 統(tǒng)計分析 使用WHONET 5.6 版本的軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，并按2014年CLSI標準判讀結果[1]。

2 結果

2.1 細菌構成

在所分離的5 162株細菌中革蘭陽性菌占28.1%，革蘭陰性菌占71.9%。呼吸道標本占64.0%，血液及腦脊液標本占9.3%，尿液標本占7.2%，傷口膿液占9.4%，10.2%來自于其他標本。

呼吸道標本分離細菌主要為肺炎克雷伯菌（29.1%）、銅綠假單胞菌（16.3%）、金黃色葡萄球菌（13.1%）、大腸埃希菌（6.2%）。尿液標本分離細菌主要為大腸埃希菌（61.0%）、肺炎克雷伯菌（9.1%）、腸球菌屬（6.6%）、銅綠假單胞菌（3.7%）。血和腦脊液標本分離細菌主要為大腸埃希菌（25.7%）、凝固酶陰性葡萄球菌（23.0%）、肺炎克雷伯菌（16.0%）。傷口膿液分離細菌主要為大腸埃希菌（23.7%）、金黃色葡萄球菌（18.8%）、肺炎克雷伯菌（10.2%）、銅綠假單胞菌（9.7%）。

革蘭陽性菌檢出最多的依次為金黃色葡萄球菌（13.5%）、凝固酶陰性葡萄球菌（4.3%）、腸球菌屬（1.8%）、肺炎鏈球菌（1.0%）。腸桿菌科細菌占革蘭陰性菌的72.1%，細菌排名依次為肺炎克雷伯菌（21.1%）、大腸埃希菌（14.5%）、腸桿菌屬（9.0%）、黏質沙雷菌（1.7%）。不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌占革蘭陰性菌的27.9%，細菌排名依次為銅綠假單胞菌（13.9%）、鮑曼不動桿菌（8.6%）、嗜麥芽窄食單胞菌（2.5%）。臨床分離病原菌構成情況見表1。

表 1 臨床分離病原菌構成Table 1 Species distribution of bacterial isolates

2.2 細菌對抗菌藥物的耐藥性和敏感性

2.2.1 葡萄球菌屬 698株金黃色葡萄球菌中甲氧西林耐藥株（MRSA）占36.5%（255 / 698），凝固酶陰性葡萄球菌中耐甲氧西林株（MRCNS）占81.4%（180 / 221）。利福平對MRCNS具有較好的抗菌活性，其中有84.4%MRCNS對利福平敏感。MRCNS對甲氧芐啶-磺胺甲唑的耐藥率（63.7%）顯著高于MRSA的耐藥率（10.6%）。金黃色葡萄球菌和凝固酶陰性葡萄球菌中均未發(fā)現(xiàn)對萬古霉素、利奈唑胺、達托霉素、奎奴普丁-達福普汀耐藥菌株。見表2。

2.2.2 腸球菌屬 95株腸球菌中糞腸球菌占51.6%，屎腸球菌占44.2%。除高濃度慶大霉素和鏈霉素外屎腸球菌對各種抗菌藥物的耐藥率顯著高于糞腸球菌。未發(fā)現(xiàn)對利奈唑胺耐藥的腸球菌，檢出1株對萬古霉素耐藥的屎腸球菌。見表3。

表2 葡萄球菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 2 Susceptibility of Staphylococcus strains to antimicrobial agents（%）

表3 腸球菌屬對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 3 Susceptibility of Enterococcus species to antimicrobial agents（%）

2.2.3 肺炎鏈球菌 50株肺炎鏈球菌中，腦膜炎分離株1株，為18歲以上患者。非腦膜炎分離株49株，其中18歲以下兒童及青少年患者31株，18歲以上18株。未發(fā)現(xiàn)青霉素耐藥的肺炎鏈球菌（PRSP），肺炎鏈球菌對紅霉素、克林霉素、四環(huán)素的耐藥率很高（97.9%、97.9%和75.5%）。見表4。

表4 肺炎鏈球菌（非腦膜炎菌株）對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 4 Susceptibility of non-meningitis Streptococcus pneumoniae strains to antimicrobial agents（%）

2.2.4 腸桿菌科細菌 大腸埃希菌、克雷伯菌屬和奇異變形桿菌ESBL的檢出率分別為39.9%（298 / 747）、26.1%（294 / 1 127）和15.6%（12 / 77）。環(huán)丙沙星和左氧氟沙星除對大腸埃希菌有較低的抗菌活性外，對其他主要腸桿菌科細菌都具有較好的抗菌活性。腸桿菌科細菌對頭孢菌素類的耐藥率普遍偏高，對阿米卡星、哌拉西林-他唑巴坦耐藥率較低。見表5。碳青霉烯類抗生素對主要腸桿菌科細菌仍有較好的抗菌活性，碳青霉烯類耐藥的腸桿菌科細菌（CRE）檢出率為3.9%（97 / 2 517）， 主要為沙雷菌屬6.1%（6 / 99）、克雷伯菌屬4.7%（53 / 1 127）、腸桿菌屬4.5%（21 / 465）、大腸埃希菌2.1%（16 / 747）。在本次所有檢出CRE菌株的科室中，ICU占19.6%（19 / 97）、神經(jīng)外科占13.4%（13 / 97）、內(nèi)科占12.4%（12 / 97）。CRE檢出率較高的科室主要為ICU 4.9%（19 / 384）、神經(jīng)外科3.5%（13 / 368）、骨科3.1%（3 / 98）、內(nèi)科2.9%（12 / 421）。

表5 大腸埃希菌、克雷伯菌屬、腸桿菌屬、變形桿菌屬、沙雷菌屬對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 5 Susceptibility of E. coli， Klebsiella， Enterobacter， Proteus， and Serratia strains to antimicrobial agents（%）

2.2.5 不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌 銅綠假單胞菌的泛耐藥株檢出率為1.8%（13 / 715），銅綠假單胞菌對阿米卡星的敏感率最高為85.6%。鮑曼不動桿菌中泛耐藥株檢出率為36.6%（163 / 445），碳青霉烯類耐藥的鮑曼不動桿菌檢出率為43.1%（192 / 445），鮑曼不動桿菌對常用抗菌藥物的耐藥率都為50%左右。甲氧芐啶-磺胺甲唑與左氧氟沙星對嗜麥芽窄食單胞菌有較高的抗菌活性，敏感率分別為87.7%和86.9%。見表6。

3 討論

2015年我院分離出的5 162株細菌中革蘭陰性菌檢出率為71.9%，革蘭陽性菌為28.1%。排名前5位的分別為肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌和鮑曼不動桿菌。本次監(jiān)測結果顯示本年度我院MRSA和MRCNS檢出率分別為36.5%和81.4%，MRSA主要檢出科室為ICU、神經(jīng)外科和急診內(nèi)科，MRCNS主要從急診和外科患者檢出，MRSA因其具有多重耐藥性[2]、致病力強，是醫(yī)院感染的主要病原菌，萬古霉素等糖肽類抗生素仍是治療MRSA的首選，雖然我國未發(fā)現(xiàn)萬古霉素耐藥菌株，但近些年已有多國報道發(fā)現(xiàn)萬古霉素耐藥的金黃色葡萄球菌[3]，應引起高度重視。腸球菌屬中糞腸球菌和屎腸球菌的檢出率分別為51.6%和44.2%，對各類抗生素的敏感率糞腸球菌遠高于屎場球菌，檢出1株對萬古霉素耐藥的屎腸球菌，雖然在2013年CHINET監(jiān)測中已報道過對利奈唑胺耐藥的屎腸球菌和糞腸球菌[4]，本次監(jiān)測中未檢出對利奈唑胺耐藥的腸球菌。肺炎鏈球菌是社區(qū)獲得性肺炎的主要病原菌，我院2015年度所檢出的肺炎鏈球菌也主要來自呼吸道標本，特別是兒童送檢標本，有資料顯示，我國兒童及青少年患者中分離的肺炎鏈球菌對青霉素耐藥率高于成人[5]，我院2015年所分離出的50株肺炎鏈球菌中，未發(fā)現(xiàn)對青霉素耐藥的菌株，因此青霉素可作為臨床經(jīng)驗性治療該菌感染的首選藥物。腸桿菌科細菌中大腸埃希菌、克雷伯菌屬和奇異變形桿菌ESBL的檢出率占各自菌的39.9%、26.1%和15.6%，在ESBL的耐藥機制中最主要的是質粒介導的ESBL，其中最常見的是TEM、SHV和CTX型，在我國以CTX-M型最流行，其對頭孢噻肟水解能力強，而對頭孢他啶水解能力較弱[6]，本次監(jiān)測結果也顯示頭孢他啶對ESBL菌株的抗菌活性普遍高于頭孢噻肟。大腸埃希菌對喹諾酮類抗菌藥物環(huán)丙沙星和左氧氟沙星的耐藥率較高，分別為67.3%和62.5%，細菌對喹諾酮類的耐藥機制主要包括喹諾酮類作用靶位的改變、外膜通透性降低和細菌外排泵系統(tǒng)過度表達，以上機制均可使進入細菌的藥物減少，導致細菌產(chǎn)生耐藥性[7]，喹諾酮類為臨床經(jīng)常使用的經(jīng)驗性用藥，且本院所在地區(qū)為北方畜牧區(qū)，喹諾酮類在畜牧業(yè)中大量使用，對其高耐藥率應引起高度重視。碳青霉烯類抗生素對腸桿菌科細菌具有較強的抗菌活性，細菌對其敏感率都在90%以上；CRE菌株主要集中在ICU、神經(jīng)外科等科室，我國CRE的常見攜酶類型為A類KPC酶（KPC-2），金屬酶IMP及VIM，NDM-1偶見[8]，本次監(jiān)測結果顯示，碳青霉烯類抗生素仍是治療腸桿菌科細菌感染最有效的藥物之一。不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌中鮑曼不動桿菌對主要抗菌藥物的敏感率為40%～60%，耐藥形勢非常嚴峻，碳青霉烯類耐藥鮑曼不動桿菌檢出率為43.1%，泛耐藥鮑曼不動桿菌檢出率為36.6%，主要集中在ICU，是醫(yī)護人員手最常見的病原菌[9]，因此接觸隔離、醫(yī)護人員的手衛(wèi)生仍是控制醫(yī)院感染的關鍵因素。隨著國內(nèi)泛耐藥鮑曼不動桿菌的檢出率有上升趨勢[10]，連續(xù)監(jiān)測鮑曼不動桿菌的分離情況，對指導臨床使用抗生素具有重要意義。泛耐藥銅綠假單胞菌檢出率為1.8%，明顯低于鮑曼不動桿菌，對銅綠假單胞菌抗菌活性最好的為阿米卡星，細菌的敏感率為85.6%。嗜麥芽窄食單胞菌對甲氧芐啶-磺胺甲唑和左氧氟沙星的敏感率均大于85%，分別為87.7%和86.9%。

綜上所述，醫(yī)院要加強細菌耐藥性監(jiān)測，通過加入全國細菌耐藥性監(jiān)測網(wǎng)為契機，了解本地區(qū)及全國細菌耐藥情況，關注細菌流行及耐藥趨勢，加強院感控制及抗生素管理，通過一系列措施使臨床更加合理使用抗生素，控制泛耐藥菌在醫(yī)院內(nèi)的流行。

表6 不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 6 Susceptibility of nonfermenting gram-negative bacilli to antimicrobial agents（%）

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Surveillance of antibiotic resistance in the bacterial strains isolated from the First Hospital of Qiqihar in 2015

LIU Li, BAI Guangrui, FENG Chunxiao, ZUO Jingjing. （Department of Laboratory Medicine, the First Hospital of Qiqihar, Qiqihar Heilongjiang 161000, China）

Objective To investigate the distribution and antibiotic resistance prof i le of clinical isolates in the First Hospital of Qiqihar during 2015. Methods Antimicrobial susceptibility test was carried out according to a unif i ed protocol using automated system from January 1, 2015 to December 31, 2015. The results were analyzed with WHONET 5.6 software according to the 2014 breakpoints of Clinical and Laboratory Standards Institute. Results A total of 5 162 clinical isolates were collected, of which 28.1% (1 450 / 5 162) were gram-positive cocci and 71.9% (3 712 / 5 162) were gram-negative bacilli. About 36.5% (255 / 698) of S. aureus isolates and 81.4% (180 / 221) of coagulase negative Staphylococcus isolates were resistant to methicillin. No S. aureus and coagulase negative Staphylococcus isolate were found resistant to vancomycin or linezolid. Enterococcus isolates showed low resistance to vancomycin and linezolid. One strain of E. faecium was found resistant to vancomycin. ESBLs were produced in 39.9% (298 / 747) of E. coli, 26.1% (294 / 1 127) of Klebsiella spp., and 15.6% (12 / 77) of P. mirabilis strains. The Enterobacteriaceae strains were less resistant to imipenem, beta-lactam / beta-lactamase inhibitor combination and amikacin. About 36.6% (163 / 445) of A. baumannii isolates and 1.8% (13 / 715) of P. aeruginosa isolates were extensively drug-resistant strains. Conclusions Antibiotic resistance poses a serious threat to clinical practice, to which more attention should be paid. Clinical microbiology lab should make more efforts to provide better support to clinical therapy.

antimicrobial agent; antibiotic resistance surveillance; antimicrobial susceptibility

R378

A

1009-7708 ( 2017 ) 04-0433-06

10.16718 / j.1009-7708.2017.04.015

2016-11-17

2016-11-30

齊齊哈爾市第一醫(yī)院檢驗科，黑龍江齊齊哈爾161000。

劉麗（1962—），女，學士，主任技師，主要從事細菌耐藥性監(jiān)測和耐藥機制研究。

馮春曉，E-mail：464866866@qq.com。