奶牛血漿和乳清 BUN含量調(diào)查及乳清應用于臨床檢測的可行性

張培軍，胡俊菁，黃云飛，于諱茹，王 鵬，涂 軍，杜玉蘭，何寶祥

(廣西大學動物科技學院，廣西 南寧 530005)

奶牛血漿和乳清 BUN含量調(diào)查及乳清應用于臨床檢測的可行性

張培軍，胡俊菁，黃云飛，于諱茹，王 鵬，涂 軍，杜玉蘭，何寶祥

(廣西大學動物科技學院，廣西 南寧 530005)

為探究臨床普檢中乳樣代替血樣檢測的可行性，調(diào)查了奶牛乳清與血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Crea)、尿酸(UA)水平及其相關性。試驗采集南寧市某奶牛場奶牛血樣和乳樣，使用全自動生化分析儀測定這3個指標，結(jié)果該牛場Crea值普遍低于正常范圍，其余指標均在正常范圍內(nèi)，相關性分析發(fā)現(xiàn)，血漿和乳清中BUN水平高度相關(R=0.854，P＜0.01，n=50)、Crea水平低度相關(R=0．411，P＜0．01，n=50)，UA指標無顯著相關性。箱線圖和散點圖分析分別發(fā)現(xiàn)血漿和乳清中BUN含量相近且呈線性關系。表明在臨床普檢中乳清替代血漿樣本檢測BUN是可行的，對奶牛產(chǎn)后腎功能和飼料蛋白質(zhì)營養(yǎng)供應監(jiān)控具有重要意義。今后應進一步擴大樣本量進行臨床驗證。

尿素氮(BUN);肌酐(Crea);尿酸(UA);奶牛;乳清

腎臟的健康狀況和動物機體的代謝息息相關，臨床檢測奶牛腎臟的健康狀況常用方法是檢測血清中尿素氮、肌酐和尿酸水平［1］。通過這3個指標的變化來反應腎小球的濾過作用和腎小管的重吸收作用強弱，當3個指標中的1個或多個升高時，往往預示著該動物的腎臟功能出現(xiàn)異常［2］。血液和乳汁之間存在血乳屏障，血液中的某些物質(zhì)(如藥物，抗體等)能夠進入乳汁，因此乳汁中某些物質(zhì)含量與對應血液中含量存在對應關系，在一定程度上能夠反應血液中的水平［3］。此外，飼料的蛋白質(zhì)水平與這些指標有關。本試驗通過對血液和乳汁中這3個指標含量進行測定、分析。探索乳汁來代替血液檢測這3個指標的可行性及是否具有臨床價值。

1 材料與方法

1.1 樣品采集和處理 選取南寧市某奶牛場頭胎荷斯坦奶牛25頭，體況評分2．5左右，體重500 kg左右，產(chǎn)后2周左右。在試驗第1天和第21天收集血樣和乳樣，血樣采集采用肝素鈉抗凝，空腹頸靜脈釆血10 mL，3 500 r/min離心10 min，當天完成檢測;乳樣采集先用碘酊消毒乳房，擦洗干凈后，棄去前3把，收集乳樣50 mL，12 000 r/min 4℃離心30 min，抽取中層清亮液繼續(xù)離心30 min，取上清置于－80℃盡快完成檢測。

1.2 儀器和方法 日立7020全自動生化分析儀，株式會社日立高新技術;Thermo超低溫冰箱，美國Thermo公司;GL-20GLⅡ型高速冷凍離心機，上海安亭科學儀器廠;TD4臺式離心機，湖南凱達;Sigma低溫超高速離心機，Sigma公司。

BUN采用脲酶法、Crea采用肌氨酸氧化酶法、UA采用URO-PAP法，試劑盒均購自四川邁克生物科技股份有限公司。

1.3 統(tǒng)計學分析 采用EXCEL和SPSS22對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析，統(tǒng)計結(jié)果用平均數(shù)±標準差(M± SD)表示，BUN含量變化用箱線圖，相關性檢驗用Pearson法以及散點圖。

2 結(jié)果與分析

奶牛血漿和乳清中BUN、Crea、UA水平檢測結(jié)果見表1。奶牛血漿和乳清中各指標的相關性分析結(jié)果見表2。血漿和乳清中的BUN散點圖與血漿和乳清中BUN箱線見圖1和圖2。

表1 奶牛血漿和乳清BUN、Crea、UA測定值統(tǒng)計(Mean±SD)

表2 奶牛血漿和乳清中BUN、Crea、UA相關性(n=50)

圖1 血漿和乳清的BUN散點圖(n=50)

圖2 血漿和乳清中BUN含量箱線圖(n=50)

3 討論

3.1 血漿指標測定結(jié)果分析 在本試驗中，報道了奶牛BUN、Crea和UA的血漿和乳清含量。BUN含量在血漿和乳清間無顯著差異，而Crea和UA含量均存在極顯著差異(P＜0．01)。BUN是衡量腎小球濾過和腎小管重吸收功能的重要指標，當BUN值高于正常范圍時，預示著腎臟等相關疾病的發(fā)生。此外，BUN是衡量奶牛體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝(體內(nèi)蛋白質(zhì)降解與飼料蛋白質(zhì)攝入)的重要指標［4－5］，當高產(chǎn)奶牛BUN的含量低于15 mg/dl(5．34 mmol/L)時，說明飼料中的蛋白不足［6］。本次測定血漿中BUN平均值為6．54 mmol/L(范圍4～10 mmol/L)，均在正常范圍(3．55～10．71 mmol/L)［7］內(nèi)，但略高于李改英［8］測定奶牛血漿(5．21±0．087 mmol/L)，遠高于Rasooli［9］等(1．84±0．04 mmol/L)、本實驗室之前(2．24±0．65 mmol/L)的檢測結(jié)果［10］，可能與奶牛飼料中蛋白質(zhì)比例有關，今后應繼續(xù)研究。肌酐(Crea)是肌酸代謝產(chǎn)生、經(jīng)腎小球濾過作用排出，受外界環(huán)境影響較小，能夠較準確地反應腎臟功能狀態(tài)。本次檢出血漿中Crea平均值為31．4 mmol/L，范圍12～51 mmol/L，均低于正常范圍(88～177 mmol/L)下限，其原因有待研究。尿酸是臨床醫(yī)學診斷腎病的指標，其血漿水平與動物體內(nèi)嘌呤代謝紊亂有關，攝入含嘌呤高的飼料會引發(fā)動物痛風，UA檢測發(fā)現(xiàn)，乳清水平遠遠高于血漿水平，其臨床意義有待繼續(xù)研究。

3.2 血漿和乳清中各指標間相關性分析 本試驗發(fā)現(xiàn)，乳清BUN和血漿BUN高度相關(R=0．854，P＜0．01)，乳清 Crea和血漿 Crea低度相關［11］(R=0．411，P＜0．01)。不同批次分析發(fā)現(xiàn)，第1批樣品中乳清和血漿中BUN高度相關(R=0．877，P＜0.01)，第2批樣品呈中度相關(R=0．697，P＜0.01)。乳清和血漿中Crea中度相關(R=0．530，P＜0．01)，乳清和血漿中UA低度相關(R=0．414，P＜0．05);血漿中BUN、Crea、UA水平之間相關性差異顯著，BUN和Crea中度相關，BUN和UA低度相關，乳清中BUN、Crea、UA水平之間相關性差異極顯著，BUN和Crea、UA之間均中度相關。說明血液和乳汁中3個指標之間的關系很相似，本試驗發(fā)現(xiàn)血漿和乳清BUN高度相關，這與孫德成［12］報道的相關性(R=0．897 4，P＜0．01)結(jié)果相近。

3.3 乳清BUN作為檢測指標的可行性分析 由圖2可見，乳清和血漿中BUN含量箱線圖基本一致，說明乳清和血漿BUN水平相似，變異系數(shù)也相近。由圖1和表2可見，二者呈現(xiàn)線性關系且高度正相關(R=0．854，P=0．01)，(R2=0．729)。由此證實乳清BUN可以替代血漿進行臨床普檢，評價奶牛產(chǎn)后腎功水平和飼料蛋白質(zhì)供應水平，必要時可對可疑個例行血清樣本檢測證實。本試驗相關性稍低于Promkot［5］等的報道(R2=0．90)，但遠高于Moharrery［13］等的報道(R2=0．457 3)。

4 小結(jié)

本試驗證明BUN在乳清和血漿水平上相近且呈高度線性相關(R=0854，P=0．00，n=50)，提示臨床普檢時用乳清可以替代血漿檢測BUN。該指標在評價奶牛機體腎功狀態(tài)和機體蛋白攝入上具有重要參考價值。其余指標(Crea與UA)，乳清和血漿水平相關性較低，臨床普檢中不宜替代。由于本試驗樣本量有限，BUN的臨床診斷應用有待進一步深入研究。

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The plasma and whey BUN surveys and feasibility study on whey used in clinical examination of dairy cattle

ZHANG Pei-jun，HU Jun-jing，HUANG Yun-fei，YU Hui-ru，WANG Peng，TU Jun，

DU Yu-lan，HE Bao-xiang

(College of Animal Science and Technology Guangxi University，Nanning 530005，China)

To investigate the feasibility of whey instead of blood in clinic general survey，the relationship between whey and serum urea nitrogen(BUN)，and creatinine(Crea)and uric acid(UA)were investigated．The blood and milk samples were collected from a dairy farm in nanning，and automatic biochemical analyzer was used to detect three parameters．The results showed that Crea values were generally lower compared with the normal value，and the other parameters were normal．Correlation analysis showed that between plasma and whey，the BUN had high correlation(r=0．854，P＜0．01，n=50)，and Crea had low correlation(r=0．411，P＜0．01，n=50)．UA had no significant correlation．The box plots and the scatter plots analysis revealed that the urea nitrogen levels between plasma and whey were similar and linear．These findings show that the whey BUN can be used in Clinical examination，and it is important for cows postpartum renal function and monitoring the dietary protein supply．

blood urea nitrogen(BUN);creatinine(Crea);uric acid(UA);Dairy Cattle;whey

HE Bao-xiang

S858.23

A

0529-6005(2017)06-0028-03

2016-08-24．

國家自然科學基金(31260631)

張培軍(1989-)，男，碩士生，研究方向為動物營養(yǎng)代謝和中毒疾病，E-mail:630286991@qq．com

何寶祥，E-mail:hebaox@gxu．edu．com