• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    HMGB1和TNFAIP3在狼瘡性腎炎系膜細(xì)胞增殖中的作用

    2017-07-25 07:37:51郭惠芳封曉娟王奕卓李金澤劉淑霞
    關(guān)鍵詞:系膜泛素孵育

    張 瑋,楊 冉,郭惠芳,封曉娟,魏 群,張 玉,王奕卓,李金澤,劉淑霞

    (1. 河北醫(yī)科大學(xué)病理學(xué)教研室,河北 石家莊 050017;2.河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院免疫風(fēng)濕科,河北 石家莊 050000;3. 河北省人民醫(yī)院醫(yī)院感染管理科,河北 石家莊 050000)

    HMGB1和TNFAIP3在狼瘡性腎炎系膜細(xì)胞增殖中的作用

    張 瑋1,楊 冉1,郭惠芳2,封曉娟1,魏 群3,張 玉2,王奕卓1,李金澤1,劉淑霞1

    (1. 河北醫(yī)科大學(xué)病理學(xué)教研室,河北 石家莊 050017;2.河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院免疫風(fēng)濕科,河北 石家莊 050000;3. 河北省人民醫(yī)院醫(yī)院感染管理科,河北 石家莊 050000)

    目的 初步探討高遷移率族蛋白1(high mobility group protein B1,HMGB1)和腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3(tumor necrosis factor α-induced protein-3, TNFAIP3)在狼瘡性腎炎(lupus nephritis,LN)患者和人類腎小球系膜細(xì)胞(human mesangial cell, HMC)增殖中的作用及機(jī)制。方法 收集Ⅳ型LN患者的腎穿樣本,采用免疫熒光和免疫組化技術(shù)檢測(cè)腎小球細(xì)胞中HMGB1、TNFAIP3及IκBα蛋白表達(dá)水平;運(yùn)用人重組HMGB1為刺激物刺激HMC,采用BrdU參入技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞增殖水平,并用Western blot技術(shù)檢測(cè)TNFAIP3、IκBα及p65表達(dá)水平。結(jié)果 與對(duì)照組相比,LN患者腎小球細(xì)胞中HMGB1及TNFAIP3蛋白表達(dá)升高,IκBα表達(dá)水平降低;體外實(shí)驗(yàn)證實(shí),人重組HMGB1刺激HMC后,細(xì)胞增殖水平明顯升高,同時(shí)在HMGB1刺激30 min后,與對(duì)照組相比,TNFAIP3的蛋白表達(dá)水平明顯升高(P<0.05),而IκBα蛋白表達(dá)水平降低(P<0.05),隨后p65蛋白表達(dá)明顯升高(P<0.05)。結(jié)論 HMGB1和TNFAIP3可能通過活化NF-κB信號(hào)通路促進(jìn)LN系膜細(xì)胞的過度增殖。

    狼瘡性腎炎;HMGB1;TNFAIP3;細(xì)胞增殖;人系膜細(xì)胞;蛋白表達(dá)

    狼瘡性腎炎(lupus nephritis,LN)是系統(tǒng)性紅斑狼瘡常見并發(fā)癥之一,也是其主要的致死原因,其在國(guó)內(nèi)的發(fā)病率逐年攀升,但因具體作用機(jī)制并不清楚,治愈率很低[1]。因此,對(duì)其作用機(jī)制的研究尤為重要。

    高遷移率族蛋白1(high mobility group protein B1, HMGB1)是一種非組蛋白染色質(zhì)結(jié)合蛋白,參與DNA的轉(zhuǎn)錄及修飾等生物學(xué)功能。新近研究發(fā)現(xiàn),HMGB1作為炎癥因子參與了呼吸系統(tǒng)、肝臟、腫瘤及自身免疫性疾病如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、干燥綜合征等多種疾病的發(fā)生[2-4],其在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中的作用也得到越來越多的重視[5],但HMGB1在LN中發(fā)揮了何種作用尚不明確。

    之前我們的研究發(fā)現(xiàn)在小鼠系膜細(xì)胞中,HMGB1能夠活化NF-κB信號(hào)通路,從而促進(jìn)系膜細(xì)胞的增殖[6],但在LN患者及人類系膜細(xì)胞中是否也存在相似作用仍是未知。此外,我們近來研究發(fā)現(xiàn),在LN患者外周血中腫瘤壞死因子-α-誘導(dǎo)蛋白- 3(tumor necrosis factor α-induced protein 3,TNFAIP3)mRNA表達(dá)水平明顯升高。TNFAIP3作為炎癥反應(yīng)負(fù)向調(diào)節(jié)的關(guān)鍵分子,是一種表達(dá)于多個(gè)免疫器官的誘導(dǎo)性胞質(zhì)蛋白,該基因既具有泛素化酶又具有去泛素化酶的功能[7],以往研究發(fā)現(xiàn)其表達(dá)水平異??赡芘cNF-κB的功能異常有關(guān)。然而,TNFAIP3是否與HMGB1共同參與調(diào)控NF-κB的活性,從而參與LN的發(fā)生發(fā)展目前仍不清楚。

    因此,本實(shí)驗(yàn)擬以Ⅳ型LN患者及人腎小球系膜細(xì)胞(human mesangial cell, HMC)為研究對(duì)象,通過對(duì)HMGB1及TNFAIP3相關(guān)信號(hào)通路的研究,探討HMGB1和TNFAIP3在LN腎小球系膜細(xì)胞過度增殖中的作用。

    1 材料與方法

    1.1 材料 采用癌旁遠(yuǎn)端正常組織和LN患者腎組織各15例,實(shí)驗(yàn)已經(jīng)過倫理委員會(huì)核準(zhǔn),由河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院提供。人系膜細(xì)胞系購(gòu)自中南大學(xué)高等研究中心。兔抗HMGB1單克隆抗體(Abcam公司,貨號(hào)ab79823),兔抗TNFAIP3多克隆抗體(ABclonal公司,貨號(hào)A2127),兔抗IkBα單克隆抗體(Abcam公司,貨號(hào)ab32518),兔抗p65多克隆抗體(Abcam公司,貨號(hào)ab90532),SP法免疫組化試劑盒(北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司,貨號(hào)SP9001),Dylight 649-山羊抗兔熒光二抗(KPL公司,貨號(hào)072051806),BrdU參入試劑盒(Merck Millipore 公司,貨號(hào)2752)。

    1.2 分組 腎穿樣本分為正常組織對(duì)照組和LN患者組。細(xì)胞分組:采用人重組HMGB1蛋白刺激HMC細(xì)胞,對(duì)細(xì)胞增殖水平影響的研究分為空白對(duì)照組和不同濃度刺激組,收集不同濃度刺激后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞;對(duì)蛋白表達(dá)水平影響的研究分為空白對(duì)照組和不同時(shí)間點(diǎn)刺激組。

    1.3 免疫組化 腎組織脫蠟至水;3%過氧化氫避光孵育20 min,0.01 mmol·L-1枸櫞酸修復(fù)液,高壓修復(fù)5 min并自然晾涼;正常山羊血清37℃封閉60 min;滴加抗TNFAIP3或IκBα抗體(1 ∶200稀釋)4℃過夜;二抗37℃孵育30 min;三抗37℃孵育30 min;DAB顯色液顯色5 min;蘇木精染色2 min;氨水返藍(lán)30 s,鹽酸酒精分化30 s;脫水透明,中性樹膠封片。

    1.4 免疫熒光 腎組織脫蠟至水;0.01 mmol·L-1枸櫞酸修復(fù)液,高壓修復(fù)5 min;正常山羊血清37℃封閉60 min;滴加抗HMGB1抗體(1 ∶200稀釋),4℃過夜;0.01 mmol·L-1PBS洗滌3次,每次5 min;TRITC-山羊抗兔IgG(1 ∶200稀釋)37℃孵育60 min(避光);DAPI復(fù)染;熒光顯微鏡下觀察結(jié)果。免疫熒光染色結(jié)果判定:HMGB1蛋白陽(yáng)性信號(hào)均呈紅色熒光。

    1.5 BrdU參入法檢測(cè)細(xì)胞增殖水平 HMC細(xì)胞以1×105/孔接種于96孔板,用50、100、200μg·L-1的人重組HMGB1蛋白刺激細(xì)胞,每組設(shè)立3個(gè)復(fù)孔。37℃、5% CO2孵箱中培養(yǎng)2、4、8、12 h;收集細(xì)胞前1 h,每孔加入100 μL BrdU參入液;收集細(xì)胞,每孔加入固定液200 μL,室溫孵育30 min;Washing Buffer沖洗3次;每孔滴加抗BrdU抗體100 μL,室溫放置1 h,Washing Buffer沖洗3次;每孔滴加二抗100 μL,室溫孵育30 min,Washing Buffer沖洗3次,滴加過氧化物酶底物每孔100 μL,室溫孵育30 min,此時(shí)增殖活躍的細(xì)胞孔呈藍(lán)色。每孔加入終止液100 μL,細(xì)胞孔由藍(lán)色變?yōu)榱咙S,酶標(biāo)儀于450 nm處檢測(cè)其OD值。

    1.6 Western blot 采用100 μg·L-1人重組HMGB1蛋白刺激HMC,收集刺激后0、10、20、30、40、50、60 min各時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞,裂解后,采用BCA試劑盒進(jìn)行蛋白定量,煮沸5 min變性。50 μg樣品進(jìn)行10% SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳,蛋白分離后濕轉(zhuǎn)至PVDF膜。5%脫脂奶粉37℃封閉1 h。加入TNFAIP3、IκBα或p65抗體(稀釋濃度均為1 ∶1 000)4℃孵育過夜。辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗(稀釋濃度為1 ∶5 000)37℃孵育2 h。Odyssey FC成像系統(tǒng)顯影,并對(duì)條帶進(jìn)行定量分析,以目的條帶和β-actin條帶積分光密度值(IOD值)的比值代表目的蛋白的相對(duì)表達(dá)量。

    2 結(jié)果

    2.1 腎組織中HMGB1、TNFAIP3和IκBα蛋白的表達(dá)水平 免疫熒光結(jié)果提示,與對(duì)照組癌旁遠(yuǎn)端正常組織相比,LN患者腎小球HMGB1蛋白(紅色)陽(yáng)性細(xì)胞比例明顯升高,且主要定位于細(xì)胞核(Fig 1A、1B)。免疫組化結(jié)果提示,與對(duì)照組相比,TNFAIP3蛋白表達(dá)水平升高(Fig 1C、1D),IκBα蛋白表達(dá)水平降低(Fig 1E、1F),二者均定位于細(xì)胞質(zhì)。

    Fig 1 HMGB1, TNFAIP3 and IκBα expression levels in glomerular cells of type Ⅳ LN patients and normal tissues by immunofluorescence and immunohistochemistry technique

    A~B:Immunofluorescence of HMGB1 expression; C~D:Immunohistochemistry of TNFAIP3 expression; E~F:Immunohistochemistry of IκBα expression

    2.2 HMGB1對(duì)HMC細(xì)胞增殖的影響 LN患者體內(nèi)存在HMGB1的上調(diào),該上調(diào)是否與細(xì)胞增殖有關(guān)呢?我們進(jìn)一步采用HMGB1重組蛋白對(duì)人類的系膜細(xì)胞(HMC)進(jìn)行刺激,BrdU參入結(jié)果提示,與對(duì)照組相比,100、200 μg·L-1HMGB1刺激HMC 8、12 h后,HMC增殖水平均明顯升高(P<0.05),二者之間無明顯差異(Fig 2)。

    2.3 TNFAIP3在HMGB1參與的NF-κB信號(hào)通路中的作用 是否由于HMGB1的上調(diào)引起TNFAIP3表達(dá)量的變化,從而影響了NF-κB信號(hào)通路的活化水平呢?我們采用HMGB1重組蛋白對(duì)HMC在不同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行刺激,研究TNFAIP3的表達(dá)情況。結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,人重組HMGB1刺激10 min后,HMC中TNFAIP3蛋白表達(dá)水平明顯增加(P<0.05),見Fig 3。而IκBα蛋白表達(dá)水平與TNFAIP3正好相反,與對(duì)照組相比,人重組HMGB1刺激30 min后, HMC中 IκBα蛋白表達(dá)明顯降低(P<0.05),見Fig 4。p65蛋白表達(dá)水平與IκBα相反,與對(duì)照組相比,刺激40 min后,明顯升高(P<0.05)。提示TNFAIP3可能參與HMGB1誘導(dǎo)的HMC中NF-κB信號(hào)通路的活化,從而促進(jìn)細(xì)胞增殖。

    Fig 2 HMC proliferation levels increased significantly after HMGB1 stimulation using BrdU incorporation technology

    *P<0.05vscontrol

    Fig 3 TNFAIP3 protein expression level increased 10, 20, 30 min after HMGB1 stimulation

    *P<0.05vscontrol

    3 討論

    LN是系統(tǒng)性紅斑狼瘡最常見、最嚴(yán)重的并發(fā)癥,但其發(fā)病機(jī)制尚未清楚。細(xì)胞免疫及體液免疫功能紊亂導(dǎo)致多種細(xì)胞因子分泌失衡,并通過相互協(xié)同或拮抗作用參與多種組織和器官的損傷[8],其中HMGB1的作用得到越來越多的關(guān)注。HMGB1是一種非組蛋白染色質(zhì)結(jié)合蛋白,我們的前期實(shí)驗(yàn)證實(shí)了HMGB1在小鼠狼瘡性腎炎中異常表達(dá)[6,9],提示HMGB1可能參與了LN的發(fā)病過程,但是具體機(jī)制如何仍不十分清楚。

    Fig 4 IκBα protein expression level decreased,while p65 increased significantly 30 min and 40 min after HMGB1 stimulation

    *P<0.05vscontrol

    腎小球細(xì)胞的增殖是LN的主要病理特征之一,也是其腎臟病理的活動(dòng)性指標(biāo)。我們以往研究發(fā)現(xiàn),在小鼠系膜細(xì)胞中HMGB1可能促進(jìn)腎小球細(xì)胞增殖,參與疾病發(fā)生[6,10]。本研究也證實(shí)了HMGB1在LN患者腎小球細(xì)胞中,尤其是系膜區(qū)細(xì)胞中存在表達(dá)水平的上調(diào);體外實(shí)驗(yàn)則證實(shí)了人重組HMGB1能夠誘導(dǎo)HMC增殖水平的升高。這些結(jié)果提示HMGB1可能在LN的發(fā)病過程中發(fā)揮了重要作用,而這一作用是通過促增殖作用實(shí)現(xiàn)的。那么,HMGB1又是如何發(fā)揮作用的呢?

    HMGB1可能是通過激活細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路發(fā)揮其功能的。其中,NF-κB信號(hào)通路與免疫性疾病的關(guān)系最為密切[11-12]。正常情況下,NF-κB與IκB組成三聚體處于失活狀態(tài)。IκB蛋白的降解使NF-κB從三聚體中得以釋放,并被轉(zhuǎn)移至細(xì)胞核中發(fā)揮其核轉(zhuǎn)錄因子作用。在這個(gè)過程中,IκBα的降解是整個(gè)信號(hào)通路的中心環(huán)節(jié)之一。在本研究中,我們證實(shí)了在LN患者腎小球細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)確實(shí)存在著IκBα蛋白表達(dá)水平的降低,提示IκBα有可能遭到降解,泛素化是常見的蛋白降解途徑之一。我們對(duì)多種泛素連接酶進(jìn)行了篩選,結(jié)果發(fā)現(xiàn)TNFAIP3在LN患者中表達(dá)水平明顯升高。TNFAIP3是一種表達(dá)于多個(gè)免疫器官的誘導(dǎo)性胞質(zhì)蛋白,該基因既具有泛素化酶又具有去泛素化酶的功能,因而在免疫調(diào)節(jié)、抑制腫瘤、TNF介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡等方面均具有重要作用[7]。有研究證實(shí)其與NF-κB-IκB三聚體的關(guān)系密切[13],能夠抑制NF-κB的活化,是重要的炎癥抑制因子,而且TNFAIP3與風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等多種自身免疫性疾病的關(guān)系也十分密切[14]。但是TNFAIP3在LN進(jìn)展中的作用仍不十分明了,我們?cè)谘芯恐邪l(fā)現(xiàn),與對(duì)照組相比,TNFAIP3在LN患者腎小球中的表達(dá)出現(xiàn)上調(diào),推測(cè)TNFAIP3表達(dá)水平的變化可能是由HMGB1所介導(dǎo)的。

    因此,我們以人重組的HMGB1刺激HMC,結(jié)果發(fā)現(xiàn)TNFAIP3表達(dá)水平迅速升高,隨后我們檢測(cè)到了IκBα蛋白表達(dá)水平的下調(diào),p65蛋白表達(dá)水平明顯增加。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果均提示,HMGB1可能通過上調(diào)TNFAIP3蛋白表達(dá)水平,影響IκBα的表達(dá)水平,誘發(fā)NF-κB信號(hào)通路的活化,介導(dǎo)系膜細(xì)胞過度增殖,從而參與LN的發(fā)病。以往研究認(rèn)為TNFAIP3為NF-κB的負(fù)調(diào)節(jié)因子[15],但是在LN中TNFAIP3的具體作用尚不明確,因此,是否有其他的因素影響其負(fù)調(diào)控作用仍是未知[16]。總之,TNFAIP3是如何影響IκBα表達(dá)水平,其具體作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

    綜上所述,本研究證實(shí)了HMGB1和TNFAIP3在LN腎小球系膜細(xì)胞過度增殖中的重要作用,為揭示LN的發(fā)病過程提供了新的依據(jù),同時(shí)為其靶向治療提供了新的思路。

    (致謝:本實(shí)驗(yàn)在河北省腎臟病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、河北醫(yī)科大學(xué)病理實(shí)驗(yàn)室完成,特此致謝! )

    [1] Gatto M,Iaccarino L,Ghirardello A, et al. Clinical and pathologic considerations of the qualitative and quantitative aspects of lupus nephritogenic autoantibodies: a comprehensive review[J].JAutoimmun, 2016, 69:1-11.

    [2] Pistoia V, Pezzolo A. Involvement of HMGB1 in resistance to tumor vessel-targeted, monoclonal antibody-based immunotherapy[J].JImmunolRes, 2016, 2016:3142365.

    [3] 莫思燕, 韋明中, 邱金慧, 等. 基于高遷移率族蛋白B1對(duì)老鼠生物堿A抗肝纖維化作用機(jī)制的研究[J]. 中國(guó)藥理學(xué)通報(bào), 2016, 32(11): 1553-8.

    [3] Mo S Y, Wei M Z,Qiu J H, et al. Anti-hepatic fibrotic mechanism of Acanthus ilicifolius alkaloid A involved in high mobility group box 1[J].ChinPharmacolBull,2016, 32(11):1553-8.

    [4] 李留成, 高 建,李 俊.HMGB1在呼吸系統(tǒng)疾病中的作用及其機(jī)制[J]. 中國(guó)藥理學(xué)通報(bào), 2015, 31(1):15-8.

    [4] Li L C, Gao J, Li J. Role and mechanisms of HMGB1 in respiratory diseases[J].ChinPharmacolBull, 2015, 31(1):15-8.

    [5] Abdulahad D A,Westra J,Limburg P C, et al. HMGB1 in systemic lupus erythematosus: its role in cutaneous lesions development[J].AutoimmunRev, 2010, 9(10): 661-5.

    [6] Feng X J,Liu S X,Wu C, et al. The PTEN/PI3K/Akt signaling pathway mediates HMGB1-induced cell proliferation by regulating the NF-kappaB/cyclin D1 pathway in mouse mesangial cells[J].AmJPhysiolCellPhysiol, 2014, 306(12): C1119-28.

    [7] Catrysse L,Vereecke L,Beyaert R, et al. A20 in inflammation and autoimmunity[J].TrendsImmunol, 2014, 35(1): 22-31.

    [8] Rekvig O P,Thiyagarajan D,Pedersen H L, et al. Future perspectives on pathogenesis of lupus nephritis: facts, problems, and potential causal therapy modalities[J].AmJPathol, 2016, 186(11): 2772-82.

    [9] Feng X,Hao J,Liu Q, et al. HMGB1 mediates IFN-gamma-induced cell proliferation in MMC cells through regulation of cyclin D1/CDK4/p16 pathway[J].JCellBiochem, 2012, 113(6): 2009-19.

    [10]Seret G,Le Meur Y,Renaudineau Y, et al. Mesangial cell-specific antibodies are central to the pathogenesis of lupus nephritis[J].ClinDevImmunol, 2012, 2012:579670.

    [11]Karuppagounder V,Arumugam S,Thandavarayan R A, et al. Modulation of HMGB1 translocation and RAGE/NFkappaB cascade by quercetin treatment mitigates atopic dermatitis in NC/Nga transgenic mice[J].ExpDermatol, 2015, 24(6): 418-23.

    [12]Sun J,Shi S,Wang Q, et al. Continuous hemodiafiltration therapy reduces damage of multi-organs by ameliorating of HMGB1/TLR4/NFkappaB in a dog sepsis model[J].IntJClinExpPathol, 2015, 8(2):1555-64.

    [13]Kanayama M,Inoue M,Danzaki K, et al. Autophagy enhances NFkappaB activity in specific tissue macrophages by sequestering A20 to boost antifungal immunity[J].NatCommun, 2015, 6: 5779.

    [14]Majumdar I,Paul J. The deubiquitinase A20 in immunopathology of autoimmune diseases[J].Autoimmunity, 2014, 47(5): 307-19.

    [15]Shembade N,Harhaj E. A20 inhibition of NFkappaB and inflammation: targeting E2:E3 ubiquitin enzyme complexes[J].Cellcycle, 2010, 9(13): 2481-2.

    [16]Verstrepen L, Verhelst K,van Loo G, et al. Expression, biological activities and mechanisms of action of A20(TNFAIP3)[J].BiochemPharmacol, 2010, 80(12):2009-20.

    Role of HMGB1 and TNFAIP3 involved in mesangial cell proliferation of lupus nephritis

    ZHANG Wei1, YANG Ran1,GUO Hui-fang2,FENG Xiao-juan1,WEI Qun3,ZHANG Yu2,WANG Yi-zhuo1, LI Jin-ze1, LIU Shu-xia1
    (1.DeptofPathology,HebeiMedicalUniversity,Shijiazhuang050017,China;2.DeptofRheumatology,theSecondHospitalofHebeiMedicalUniversity,Shijiazhuang050000,China;3.DeptofNosocomialInfectionControl,HebeiGeneralHospital,Shijiazhuang050000,China)

    Aim To investigate the mechanism of high mobility group protein B1(HMGB1) and tumor necrosis factor α-induced protein-3(TNFAIP3) involved in cell proliferation in lupus nephritis(LN) patients and human mesangial cells(HMC).Methods Immunofluorescence and immunohistochemistry technique were employed to detect HMGB1, TNFAIP3 and IκBα expression levels in glomerular cells of type Ⅳ LN patients. BrdU incorporation technology was used to detect cell proliferation level in HMC after stimulated by recombinant HMGB1.TNFAIP3 and IκBα expression levels in HMC were detected after HMGB1 stimulation by Western blot.Results The expression levels of HMGB1 and TNFAIP3 were increased in LN patients, while IκBα was decreased. HMC proliferation levels increased significantly after HMGB1 stimulation. At the same time, 30 minutes after HMGB1 stimulation, the expression level of TNFAIP3 was significantly increased(P<0.05), while IκBα decreased(P<0.05) and then p65 increased significantly(P<0.05),compared with control group.Conclusion HMGB1 and TNFAIP3 are probably involved in mesangial cell proliferation by activating of NF-κB signaling pathways in LN pathogenesis.

    lupus nephritis; HMGB1; TNFAIP3; cell proliferation; human mesangial cells; protein expression

    2017-03-18,

    2017-04-16

    河北省自然科學(xué)基金青年基金資助項(xiàng)目(No H2015206449);河北省衛(wèi)生廳重點(diǎn)科技研究計(jì)劃(No ZD20140034);河北省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃(No 201510089038)

    張 瑋(1983-),女,博士,講師,研究方向:泛素化與去泛素化在狼瘡性腎炎發(fā)病中的作用,E-mail:zwbl201309@126.com; 楊 冉(1990-),女,碩士生,研究方向:狼瘡性腎炎的發(fā)病機(jī)制,共同第一作者,E-mail:767388259@qq.com; 劉淑霞(1975-),女,博士,教授,研究方向:狼瘡性腎炎的發(fā)病機(jī)制,通訊作者,E-mail: susanliu1976@163.com

    時(shí)間:2017-7-7 11:04 網(wǎng)絡(luò)出版地址:http://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20170707.1104.028.html

    10.3969/j.issn.1001-1978.2017.08.014

    A

    1001-1978(2017)08-1109-05

    R322.61;R329.24;R593.242;R977.6

    猜你喜歡
    系膜泛素孵育
    白藜蘆醇改善高糖引起腎小球系膜細(xì)胞損傷的作用研究
    三物黃芩湯組分(群)配伍在大鼠肝微粒體孵育模型中的相互作用
    中成藥(2017年9期)2017-12-19 13:34:27
    Identifying vital edges in Chinese air route network via memetic algorithm
    大鼠肝微粒體孵育體系中2種成分的測(cè)定及其代謝
    中成藥(2017年5期)2017-06-13 13:01:12
    腹腔鏡下直腸癌系膜全切除和盆腔自主神經(jīng)的關(guān)系
    蛋白泛素化和類泛素化修飾在植物開花時(shí)間調(diào)控中的作用
    腎小球系膜細(xì)胞與糖尿病腎病
    泛RNA:miRNA是RNA的“泛素”
    泛素結(jié)合結(jié)構(gòu)域與泛素化信號(hào)的識(shí)別
    大鼠子宮壁及子宮系膜微循環(huán)的觀察方法
    热re99久久精品国产66热6| 另类亚洲欧美激情| 日韩成人av中文字幕在线观看| 亚洲精品日韩av片在线观看| 寂寞人妻少妇视频99o| 免费看光身美女| 国产精品人妻久久久久久| 极品少妇高潮喷水抽搐| 国产在视频线精品| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 男女边吃奶边做爰视频| 十分钟在线观看高清视频www| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 国产有黄有色有爽视频| 欧美变态另类bdsm刘玥| 久久久久久久亚洲中文字幕| 嘟嘟电影网在线观看| 51国产日韩欧美| av卡一久久| 国国产精品蜜臀av免费| 久久久久久伊人网av| 国产 一区精品| 午夜日本视频在线| 欧美xxⅹ黑人| 成年人免费黄色播放视频| 丁香六月天网| 久久久久久人妻| 欧美日韩av久久| 久久韩国三级中文字幕| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| av一本久久久久| 高清av免费在线| 日日撸夜夜添| 国产国语露脸激情在线看| 国产一区二区三区av在线| 国产永久视频网站| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 大话2 男鬼变身卡| 免费av不卡在线播放| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 日本黄色日本黄色录像| 麻豆成人av视频| 国产伦理片在线播放av一区| 18+在线观看网站| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 日韩一本色道免费dvd| 精品酒店卫生间| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 午夜免费男女啪啪视频观看| 18+在线观看网站| a级片在线免费高清观看视频| 国产精品国产av在线观看| h视频一区二区三区| 午夜视频国产福利| 国产午夜精品一二区理论片| 欧美97在线视频| 午夜影院在线不卡| 国产成人精品一,二区| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | 麻豆乱淫一区二区| 婷婷色av中文字幕| 超碰97精品在线观看| 18禁动态无遮挡网站| 国产精品久久久久久久久免| 婷婷成人精品国产| 亚洲成人一二三区av| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 97精品久久久久久久久久精品| 一级黄片播放器| 韩国高清视频一区二区三区| 婷婷色av中文字幕| 极品少妇高潮喷水抽搐| 亚洲图色成人| 亚洲精品一区蜜桃| videos熟女内射| 国产成人精品一,二区| 国产亚洲精品第一综合不卡 | 久久精品国产亚洲av天美| 少妇熟女欧美另类| 欧美日韩av久久| 九色亚洲精品在线播放| 亚洲五月色婷婷综合| 亚洲人与动物交配视频| 少妇 在线观看| 嫩草影院入口| 午夜老司机福利剧场| 国产老妇伦熟女老妇高清| 国产免费一区二区三区四区乱码| 日日摸夜夜添夜夜爱| 黄色毛片三级朝国网站| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 99九九在线精品视频| videossex国产| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 欧美日韩国产mv在线观看视频| 国模一区二区三区四区视频| 国内精品宾馆在线| 欧美精品亚洲一区二区| 水蜜桃什么品种好| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 欧美3d第一页| 欧美日韩亚洲高清精品| 亚洲精品456在线播放app| 妹子高潮喷水视频| 欧美成人午夜免费资源| 亚洲三级黄色毛片| 久久亚洲国产成人精品v| 一个人看视频在线观看www免费| 亚洲精品美女久久av网站| 91精品三级在线观看| 亚洲久久久国产精品| 91精品三级在线观看| 久久久国产精品麻豆| 三级国产精品欧美在线观看| 伊人亚洲综合成人网| 哪个播放器可以免费观看大片| 国产伦精品一区二区三区视频9| 成人国语在线视频| 黑人高潮一二区| 有码 亚洲区| 91在线精品国自产拍蜜月| 嫩草影院入口| 老司机影院成人| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 99久久人妻综合| 久久久国产欧美日韩av| 欧美精品高潮呻吟av久久| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 亚洲第一av免费看| 国产不卡av网站在线观看| 亚洲成色77777| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 一级毛片 在线播放| 亚州av有码| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 美女国产高潮福利片在线看| 国产精品久久久久久精品电影小说| 99热全是精品| 国产视频内射| 91成人精品电影| 考比视频在线观看| 国产av一区二区精品久久| 亚洲中文av在线| 午夜福利网站1000一区二区三区| 91aial.com中文字幕在线观看| 亚洲国产av影院在线观看| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 国产精品女同一区二区软件| 最近手机中文字幕大全| 亚洲人与动物交配视频| 免费黄网站久久成人精品| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 久久久久久久久久久免费av| 欧美精品一区二区大全| 亚洲熟女精品中文字幕| 久久久久久伊人网av| 91久久精品国产一区二区三区| 精品国产国语对白av| 日韩 亚洲 欧美在线| 国产深夜福利视频在线观看| av专区在线播放| 伦理电影大哥的女人| 中文欧美无线码| 国产男女内射视频| 久久97久久精品| 亚洲综合精品二区| 久久久久国产精品人妻一区二区| 在线观看人妻少妇| 国产精品国产av在线观看| 日本免费在线观看一区| 亚洲av中文av极速乱| 最近最新中文字幕免费大全7| 国产成人av激情在线播放 | 亚洲美女搞黄在线观看| 久久婷婷青草| 看十八女毛片水多多多| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 国产成人精品婷婷| 成人漫画全彩无遮挡| 51国产日韩欧美| 日本91视频免费播放| 亚洲久久久国产精品| 欧美精品一区二区大全| 色婷婷av一区二区三区视频| 欧美另类一区| 日本欧美国产在线视频| 亚洲国产成人一精品久久久| 日韩在线高清观看一区二区三区| 日韩一本色道免费dvd| 亚洲av国产av综合av卡| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 欧美 日韩 精品 国产| 秋霞伦理黄片| 免费观看在线日韩| 又大又黄又爽视频免费| 综合色丁香网| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 国产一区有黄有色的免费视频| 女性生殖器流出的白浆| 国产精品偷伦视频观看了| 激情五月婷婷亚洲| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 天天影视国产精品| 国产成人精品在线电影| 欧美日韩视频精品一区| 一级a做视频免费观看| 曰老女人黄片| 日韩视频在线欧美| 成人亚洲欧美一区二区av| 日韩伦理黄色片| 多毛熟女@视频| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 自线自在国产av| 国产精品99久久久久久久久| freevideosex欧美| 日韩av免费高清视频| 91精品伊人久久大香线蕉| 国产精品久久久久久久久免| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 日韩一本色道免费dvd| 爱豆传媒免费全集在线观看| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 韩国高清视频一区二区三区| av视频免费观看在线观看| 免费观看在线日韩| 日韩制服骚丝袜av| 久久 成人 亚洲| 国产69精品久久久久777片| 成年女人在线观看亚洲视频| 寂寞人妻少妇视频99o| 亚洲国产精品专区欧美| 精品国产国语对白av| 亚洲精品国产av蜜桃| 91精品一卡2卡3卡4卡| 美女大奶头黄色视频| 我的女老师完整版在线观看| 免费观看无遮挡的男女| 在线观看www视频免费| 午夜福利,免费看| 最新的欧美精品一区二区| 男女边吃奶边做爰视频| 国产精品99久久99久久久不卡 | 精品一区二区三卡| 久久久久久久久久久免费av| 成人黄色视频免费在线看| 在线观看美女被高潮喷水网站| 人妻系列 视频| 亚洲丝袜综合中文字幕| 寂寞人妻少妇视频99o| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 在线观看免费高清a一片| 制服诱惑二区| 免费观看性生交大片5| 少妇熟女欧美另类| 免费少妇av软件| 人体艺术视频欧美日本| 人人妻人人澡人人看| 中文字幕av电影在线播放| 韩国高清视频一区二区三区| 久久久精品免费免费高清| 高清午夜精品一区二区三区| 精品国产乱码久久久久久小说| 一级二级三级毛片免费看| 亚洲精品成人av观看孕妇| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 亚洲欧美色中文字幕在线| 久久国产精品大桥未久av| 午夜av观看不卡| 一级二级三级毛片免费看| 亚洲五月色婷婷综合| 一区二区日韩欧美中文字幕 | 国产高清三级在线| 在线天堂最新版资源| 美女国产视频在线观看| 国产综合精华液| 嘟嘟电影网在线观看| 女人久久www免费人成看片| 亚洲av国产av综合av卡| 精品久久久久久久久av| 国产在视频线精品| 成年av动漫网址| 成年人免费黄色播放视频| 午夜日本视频在线| 精品久久国产蜜桃| 精品一区二区三区视频在线| 亚洲欧美色中文字幕在线| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 亚洲av.av天堂| 我要看黄色一级片免费的| 伊人久久国产一区二区| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 一区在线观看完整版| 中文字幕最新亚洲高清| 黄色视频在线播放观看不卡| 免费黄频网站在线观看国产| 性高湖久久久久久久久免费观看| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 在线观看美女被高潮喷水网站| 51国产日韩欧美| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 男女边吃奶边做爰视频| 99热6这里只有精品| 国产在线视频一区二区| 国产熟女午夜一区二区三区 | 国产毛片在线视频| 日本av免费视频播放| 国产免费视频播放在线视频| 伊人久久国产一区二区| 97超碰精品成人国产| 一级,二级,三级黄色视频| 国产亚洲最大av| 麻豆精品久久久久久蜜桃| av视频免费观看在线观看| 日韩人妻高清精品专区| 国产高清国产精品国产三级| 国产精品一二三区在线看| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 亚洲精品自拍成人| 欧美少妇被猛烈插入视频| 久久精品国产亚洲网站| 18+在线观看网站| 亚洲精品视频女| 人人澡人人妻人| 亚洲图色成人| 国产熟女欧美一区二区| 成人国语在线视频| 午夜激情av网站| 国产成人一区二区在线| 午夜av观看不卡| 91精品伊人久久大香线蕉| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 久久人妻熟女aⅴ| 久久久久人妻精品一区果冻| 久热久热在线精品观看| 免费av不卡在线播放| 777米奇影视久久| 久久久久国产精品人妻一区二区| 两个人免费观看高清视频| 成人手机av| 亚洲高清免费不卡视频| 老女人水多毛片| 亚洲精品视频女| av在线播放精品| 亚洲欧美色中文字幕在线| 日韩一本色道免费dvd| 多毛熟女@视频| 香蕉精品网在线| 制服丝袜香蕉在线| 亚洲综合色网址| 97精品久久久久久久久久精品| 97超碰精品成人国产| 婷婷色综合大香蕉| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 亚洲精品久久成人aⅴ小说 | 一级毛片 在线播放| 亚洲av免费高清在线观看| 免费少妇av软件| 国产极品天堂在线| 91久久精品国产一区二区成人| 午夜影院在线不卡| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 卡戴珊不雅视频在线播放| 亚洲三级黄色毛片| 国产免费一级a男人的天堂| 精品久久久久久久久亚洲| 少妇高潮的动态图| 国精品久久久久久国模美| 亚洲国产精品999| 好男人视频免费观看在线| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 三级国产精品片| 久久久久国产网址| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| av女优亚洲男人天堂| 国产一区二区三区综合在线观看 | 一区在线观看完整版| 乱人伦中国视频| 伦精品一区二区三区| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 成人综合一区亚洲| 2022亚洲国产成人精品| 国产免费一区二区三区四区乱码| 免费人成在线观看视频色| 2022亚洲国产成人精品| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 亚洲丝袜综合中文字幕| 国产永久视频网站| 色哟哟·www| 国模一区二区三区四区视频| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 成人亚洲精品一区在线观看| 精品国产一区二区久久| 国产精品一区www在线观看| 赤兔流量卡办理| 草草在线视频免费看| 97精品久久久久久久久久精品| 伊人久久精品亚洲午夜| 一本色道久久久久久精品综合| 秋霞在线观看毛片| 性高湖久久久久久久久免费观看| 国产亚洲欧美精品永久| 99热这里只有是精品在线观看| 九草在线视频观看| 色哟哟·www| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产av码专区亚洲av| 中国国产av一级| 日本91视频免费播放| 91国产中文字幕| 午夜91福利影院| 久久久精品免费免费高清| 日韩伦理黄色片| av女优亚洲男人天堂| 女人久久www免费人成看片| 久久久国产一区二区| 久久久久久久国产电影| 日本-黄色视频高清免费观看| 在线精品无人区一区二区三| 亚洲精品一区蜜桃| 久久女婷五月综合色啪小说| 各种免费的搞黄视频| 青春草国产在线视频| 国产男女超爽视频在线观看| 日韩强制内射视频| 极品少妇高潮喷水抽搐| 国产黄频视频在线观看| 国产精品嫩草影院av在线观看| 性高湖久久久久久久久免费观看| 各种免费的搞黄视频| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 99九九线精品视频在线观看视频| 高清在线视频一区二区三区| 久久久久久久久久久久大奶| av在线播放精品| 国产免费又黄又爽又色| 婷婷色综合大香蕉| 欧美精品亚洲一区二区| 成人亚洲精品一区在线观看| 亚洲欧洲日产国产| 国产日韩欧美亚洲二区| 欧美xxⅹ黑人| 在线观看美女被高潮喷水网站| 国产午夜精品一二区理论片| 99视频精品全部免费 在线| 国产成人av激情在线播放 | av在线播放精品| 91精品伊人久久大香线蕉| 亚洲av综合色区一区| 午夜老司机福利剧场| 18禁动态无遮挡网站| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 韩国av在线不卡| 欧美日韩成人在线一区二区| 在线观看www视频免费| 亚洲美女黄色视频免费看| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | av黄色大香蕉| 欧美精品国产亚洲| kizo精华| 亚洲色图综合在线观看| 国产av精品麻豆| 国产片特级美女逼逼视频| 中文天堂在线官网| 国产日韩欧美视频二区| 国产一区二区在线观看日韩| 免费黄频网站在线观看国产| 国产视频首页在线观看| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 久久韩国三级中文字幕| 色网站视频免费| 春色校园在线视频观看| 亚洲精品视频女| 久热久热在线精品观看| 国产一区二区在线观看日韩| 十八禁高潮呻吟视频| 最近最新中文字幕免费大全7| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 成人国语在线视频| 亚洲三级黄色毛片| 久久ye,这里只有精品| 亚洲性久久影院| 日本爱情动作片www.在线观看| 国产精品一区二区在线观看99| 春色校园在线视频观看| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 香蕉精品网在线| 日本色播在线视频| 香蕉精品网在线| 国产伦精品一区二区三区视频9| 日日啪夜夜爽| 国产精品人妻久久久影院| 成年女人在线观看亚洲视频| 国产视频首页在线观看| 黄色配什么色好看| 亚洲高清免费不卡视频| 亚洲第一区二区三区不卡| 亚洲人与动物交配视频| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 美女视频免费永久观看网站| 草草在线视频免费看| videos熟女内射| 欧美精品国产亚洲| 亚洲,欧美,日韩| 国产免费视频播放在线视频| 亚洲成色77777| 亚洲欧美清纯卡通| a级毛片在线看网站| 国产乱来视频区| 免费观看a级毛片全部| av线在线观看网站| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 国产一区二区三区av在线| 亚洲图色成人| 在线观看三级黄色| 97超碰精品成人国产| 国产黄片视频在线免费观看| 国产高清不卡午夜福利| 成年人午夜在线观看视频| 最新的欧美精品一区二区| 飞空精品影院首页| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 成年女人在线观看亚洲视频| 99九九线精品视频在线观看视频| 国产精品.久久久| 国内精品宾馆在线| 2022亚洲国产成人精品| 亚洲精品国产av蜜桃| 国产成人免费观看mmmm| 一区二区日韩欧美中文字幕 | 有码 亚洲区| 99re6热这里在线精品视频| 午夜福利影视在线免费观看| 国产精品国产三级专区第一集| 国产精品蜜桃在线观看| 久久久久久久久大av| 日韩欧美一区视频在线观看| 天美传媒精品一区二区| 国产精品久久久久久久电影| 99热6这里只有精品| 一区在线观看完整版| av在线app专区| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 伦精品一区二区三区| 国产免费视频播放在线视频| 亚洲欧美精品自产自拍| 99热这里只有是精品在线观看| 亚洲av成人精品一二三区| 天天影视国产精品| 黄片播放在线免费| 免费高清在线观看日韩| 午夜激情av网站| 国产熟女午夜一区二区三区 | 日日撸夜夜添| av视频免费观看在线观看| 国产成人免费无遮挡视频| 中文字幕人妻丝袜制服| 久久精品久久久久久久性| 亚洲综合色惰| 人妻 亚洲 视频| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 热99国产精品久久久久久7| 久久99精品国语久久久| 亚洲av在线观看美女高潮| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 亚洲欧美成人精品一区二区| 99九九在线精品视频| 22中文网久久字幕| 中文字幕免费在线视频6| 日韩中文字幕视频在线看片| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 精品国产国语对白av| 久久热精品热| 亚洲不卡免费看| av天堂久久9| 国产熟女欧美一区二区| 欧美丝袜亚洲另类| av又黄又爽大尺度在线免费看| 不卡视频在线观看欧美| a级毛片黄视频| 五月伊人婷婷丁香| 久久久精品免费免费高清| 亚洲高清免费不卡视频| 国产精品成人在线| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产av国产精品国产| 久久免费观看电影| 亚洲国产精品国产精品| 久久午夜综合久久蜜桃| 三级国产精品欧美在线观看| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 色哟哟·www| 最近中文字幕2019免费版| 亚洲成人一二三区av| 九色成人免费人妻av| 成人亚洲精品一区在线观看| 韩国av在线不卡| 777米奇影视久久| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 国产乱来视频区| 2018国产大陆天天弄谢| 国产成人精品在线电影| 韩国高清视频一区二区三区| 一级片'在线观看视频| 亚洲av二区三区四区| 久久久精品区二区三区| 国产男女内射视频|