濾除白細(xì)胞對(duì)懸浮紅細(xì)胞不同貯存期溶血率的影響

董勤敏

·論著·

濾除白細(xì)胞對(duì)懸浮紅細(xì)胞不同貯存期溶血率的影響

董勤敏

目的 對(duì)懸浮紅細(xì)胞濾除白細(xì)胞后，其不同貯存期溶血率受到的影響情況展開分析。方法 將80名健康志愿者捐獻(xiàn)的血液制備成80份懸浮紅細(xì)胞，并根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法將其分為兩組，一組為對(duì)照組，未將白細(xì)胞濾除；另一組為觀察組，濾除白細(xì)胞。將兩組懸浮紅細(xì)胞樣品保存在4℃的環(huán)境中，并在保存當(dāng)天，以及保存1周、2周、3周、4周、5周這幾個(gè)時(shí)間點(diǎn)取樣，并對(duì)保存液中的鉀離子、鈉離子以及游離血紅蛋白(FHb)的含量進(jìn)行檢測(cè)與對(duì)比。結(jié)果 兩組懸浮紅細(xì)胞樣品中的鉀離子及鈉離子含量隨著貯存時(shí)間的延長(zhǎng)而不斷下降，但兩組數(shù)據(jù)差異無(wú)明顯差異(P>0.05)；兩組的FHb隨著貯存時(shí)間的延長(zhǎng)而不斷上升，且觀察組各時(shí)間段的水平明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。此外，兩組樣品的溶血率也隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而不斷增加，自貯存至3周起，觀察組的溶血率與對(duì)照組相比發(fā)生明顯升高，但均符合標(biāo)準(zhǔn)要求。結(jié)論 對(duì)于貯存期不超過(guò)5周的懸浮紅細(xì)胞，在貯存前將白細(xì)胞濾除，不會(huì)對(duì)其溶血率及質(zhì)量產(chǎn)生明顯影響。

懸浮紅細(xì)胞 濾除白細(xì)胞 溶血率

在血液及紅細(xì)胞制品中，游離血紅蛋白(FHb)為一項(xiàng)非常重要的質(zhì)控指標(biāo)，當(dāng)FHb含量過(guò)高時(shí)，很有可能導(dǎo)致受血者出現(xiàn)急性腎功能衰竭的情況[1]。當(dāng)前，臨床已經(jīng)正式通過(guò)將血液制品中的白細(xì)胞濾除，可有效預(yù)防因人類白細(xì)胞抗原系統(tǒng)同種抗體而造成的一系列免疫性輸血反應(yīng)，如非溶血性發(fā)熱反應(yīng)、輸血相關(guān)的移植物抗宿主病等。然而，國(guó)內(nèi)不少濾白(也即濾除白細(xì)胞)血制品的保質(zhì)期不長(zhǎng)，容易造成浪費(fèi)，并對(duì)臨床應(yīng)用及普及產(chǎn)生不利影響[2]?；诖?，本文就懸浮紅細(xì)胞濾除白細(xì)胞后，其不同貯存期溶血率受到的影響情況展開探究?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1.材料與方法

1.1 樣品來(lái)源 以2016年10月15日來(lái)我院獻(xiàn)血的80名健康志愿者為例，每人捐獻(xiàn)400ml血液，并置于CPDA-1的保養(yǎng)液中進(jìn)行保存。隨后，在采血的8小時(shí)內(nèi)，將血液標(biāo)本中的血漿分離，制備成80份懸浮紅細(xì)胞，并采取隨機(jī)數(shù)字表法將其分為兩組，一組為對(duì)照組(40份)，未將白細(xì)胞濾除；另一組為觀察組(40份)，濾除白細(xì)胞。將兩組懸浮紅細(xì)胞樣品保存在4℃的儲(chǔ)血冰箱中。實(shí)驗(yàn)均獲得獻(xiàn)血志愿者的知情同意。

1.2 試劑及儀器 試劑主要包括本科室自主配置的血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)工作液，血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)貯存液，以及濃度為1%的雙氧水溶液。使用的儀器包括型號(hào)為Multiskan MK3的酶標(biāo)儀，型號(hào)為羅氏COBAS 80000的生化分析儀，DU640型紫外分光光度計(jì)，NIHon Ko HDEN血細(xì)胞自動(dòng)分析儀，由ROCHE 診斷公司生產(chǎn)的各項(xiàng)生化診斷試劑、加樣槍以及血液分裝五聯(lián)袋等。

1.3 留樣過(guò)程 將觀察組懸浮紅細(xì)胞血液樣品中的白細(xì)胞濾除以后，立即用五聯(lián)袋將兩組的樣品分裝起來(lái)，并置于4℃的專用冰箱中進(jìn)行貯存。將每份采血袋中剩余的50ml樣品看作是保存當(dāng)天樣品，并在保存當(dāng)天，以及保存1周、2周、3周、4周、5周這幾個(gè)時(shí)間點(diǎn)取樣，對(duì)保存液中的鉀離子、鈉離子、游離血紅蛋白(FHb)的含量進(jìn)行檢測(cè)與對(duì)比，并在保存2周、3周、4周、5周檢測(cè)兩組的溶血率。

1.4 樣品檢測(cè) 取出標(biāo)本并搖勻，從每袋中抽取2ml血液送往生化科檢測(cè)鉀離子及鈣離子含量。并用血細(xì)胞自動(dòng)分析儀將剩余樣品中的紅細(xì)胞比容(Hct)及血紅蛋白(Hb)直接測(cè)定出來(lái)，采取鄰甲聯(lián)苯胺法測(cè)定FHb的含量，并根據(jù)溶血率=[上清液或血漿游離血紅蛋白濃度×(1-血細(xì)胞比容)]÷總血紅蛋白濃度×100%的公式，計(jì)算出懸浮紅細(xì)胞的溶血率。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 利用SPPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析實(shí)驗(yàn)中的數(shù)據(jù)，并用平均數(shù)與標(biāo)準(zhǔn)差表示計(jì)量數(shù)據(jù)，用t進(jìn)行檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料則用百分比表示，用χ2檢驗(yàn)，當(dāng)P<0.05時(shí)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 兩組懸浮紅細(xì)胞樣品中鉀離子、鈉離子及FHb含量比較 兩組樣品中的鉀離子含量隨著貯存時(shí)間的延長(zhǎng)不斷上升，鈉離子隨時(shí)間延長(zhǎng)不斷下降，但兩組數(shù)據(jù)差異無(wú)明顯差異(P>0.05)；兩組的FHb隨著貯存時(shí)間的延長(zhǎng)而不斷上升，且觀察組各時(shí)間段的水平明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。詳見表1。

表1 兩組樣品中鉀離子、鈉離子及FHb含量比較

注：與對(duì)照組相比，*P<0.05。

2.2 兩組樣品溶血率比較 兩組樣品的溶血率隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而不斷增加，自貯存至3周起，觀察組的溶血率與對(duì)照組相比發(fā)生明顯升高(P<0.05)，但均符合標(biāo)準(zhǔn)要求，詳見表2。

表2 兩組樣品溶血率比較(%)

注：與對(duì)照組相比，*P>0.05，#P<0.05。

3.結(jié)論

近些年來(lái)，隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷進(jìn)步與發(fā)展，血液制品在臨床中也得到了更加廣泛的應(yīng)用。而血液制品中的白細(xì)胞不但會(huì)作為病原載體傳播各種病毒，而且還可能引起一系列的發(fā)熱性輸血反應(yīng)[3]。因此，為有效減少輸血傳染病及輸血副反應(yīng)的發(fā)生，不少發(fā)達(dá)國(guó)家紛紛采取全面濾除白細(xì)胞(ULR)的措施，以期充分促進(jìn)血液安全性的提高[4]。然而在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中，就有報(bào)道稱血液濾除白細(xì)胞后，出現(xiàn)了肉眼可見的溶血情況，究其原因，可能與過(guò)濾時(shí)對(duì)血液中的紅細(xì)胞產(chǎn)生了機(jī)械性損傷存在緊密聯(lián)系[5]。但也有學(xué)者認(rèn)為，濾除血液中的白細(xì)胞后，有效防止了白細(xì)胞死亡后釋放水解酶，極大程度上降低紅細(xì)胞在貯存期以內(nèi)的溶血率[6]?？紤]到輸血的安全性及有效性會(huì)受到紅細(xì)胞溶血情況的而影響，因而歐盟及AABB均規(guī)定血液溶血程度的標(biāo)準(zhǔn)為貯存期末溶血率不超過(guò)0.8%，但國(guó)內(nèi)尚未明確規(guī)定紅細(xì)胞制品的溶血率標(biāo)準(zhǔn)[7]。

具體分析，紅細(xì)胞質(zhì)量一項(xiàng)非常重要的評(píng)估參數(shù)即為溶血，而血液中的鉀離子、鈉離子以及FHb均可作為溶血的關(guān)鍵指標(biāo)[8]。由于臨床用的濾白血液均需要盡可能快地輸畢，因而本文對(duì)濾除白細(xì)胞與否的懸浮紅細(xì)胞在不同貯存期的鉀離子、鈉離子、FHb及溶血率進(jìn)行測(cè)量與對(duì)比。結(jié)果顯示，隨著貯存期的不斷延長(zhǎng)，兩組懸浮紅細(xì)胞鉀離子及鈉離子含量隨著貯存時(shí)間的延長(zhǎng)而不斷下降，但兩組數(shù)據(jù)差異無(wú)明顯差異(P>0.05)，表明懸浮紅細(xì)胞中的鉀、鈉離子不會(huì)受到濾白與否的影響；兩組的FHb隨著貯存時(shí)間的延長(zhǎng)而不斷上升，在貯存當(dāng)天，由于觀察組的懸浮紅細(xì)胞在濾除白細(xì)胞過(guò)程中受到了機(jī)械性損傷，因而其FHb水平明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。此外，兩組樣品的溶血率也隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而不斷增加，自貯存至3周起，觀察組的溶血率與對(duì)照組相比發(fā)生明顯升高，但均符合歐盟就AABB制定的紅細(xì)胞制品的溶血率標(biāo)準(zhǔn)要求。

綜上所述，在貯存前將白細(xì)胞濾除不會(huì)對(duì)貯存期不超過(guò)5周的懸浮紅細(xì)胞的溶血率及質(zhì)量產(chǎn)生明顯影響。

1 夏維英,張網(wǎng)蘭,蔣瓊.不同白細(xì)胞濾除方式對(duì)去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞溶血的影響[J].中國(guó)輸血雜志,2013,26(7):646-647.

2 趙穎,曾嬌，鐘利，等.濾除白細(xì)胞的懸浮紅細(xì)胞制劑保存24小時(shí)質(zhì)量評(píng)價(jià)[J].現(xiàn)代臨床醫(yī)學(xué),2012,38(4):264-266.

3 龔裕春,邱穎婕,金魏名，等.去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞與懸浮紅細(xì)胞儲(chǔ)存期內(nèi)溶血率的比較[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2013,26(3):151-152.

4 尤兆雄,隋素琴,張瑞君,等.去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞在保存期內(nèi)生化指標(biāo)的變化[J].中國(guó)臨床研究,2015,28(3):301-302.

5 王超英.濾除白細(xì)胞對(duì)懸浮紅細(xì)胞保存期質(zhì)量的影響[J].安徽醫(yī)學(xué),2014,35(5):658-661.

6 王紅,賀曾,吳瑕,等.濾除白細(xì)胞對(duì)全血保存質(zhì)量的影響[J].中國(guó)輸血雜志,2013,26(6):525-529.

7 陳菊芬,黃文光,溫程榮,等.儲(chǔ)存前去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞在保存期內(nèi)質(zhì)量變化的研究[J].中國(guó)輸血雜志,2013,26(7):612-615.

8 羅圓圓,桂萍,潘繼春,等.濾除白細(xì)胞對(duì)懸浮紅細(xì)胞不同貯存期溶血率的影響[J].中國(guó)輸血雜志,2013,26(8):728-729.

The effect of removing white blood cells on hemolysis rate of red blood cells in different storage periods

(DONGQinmin.Nanyangdowntownbloodbank,Nanyang473000,China.)

Objectives To analyze the effect of different red blood cells on the hemolysis rate after the removal of white blood cells.Methods 80 healthy volunteers donated blood to prepare 80 copies of suspended red blood cells were divided into two groups according to random number table method will be divided into two groups，a group for the control group，the leukocyte filtration; another group for the observation group，leukocyte filtration.Two groups of suspended red blood cell samples stored at 4℃ in the environment，and to save the day，and saved 1，2，3，4，5 weeks this time a few samples，and ions，preservation solution of potassium and sodium ions and free hemoglobin(FHb) were detected and compared the content of.Results Potassium ion and sodium ion content of two groups of suspended red blood cells in the sample decreased continuously with the extension of storage time，but no significant difference between the two groups(P>0.05); the two group of FHb increased with the extension of storage time，and the observation group each time the water were significantly higher than that of the control group(P<0.05).In addition，the hemolysis rate of the two groups increased with the extension of time，and the hemolysis rate of the observation group was significantly higher than that of the control group，but all of them were in accordance with the standard requirements.Conclusion The red blood cells were stored for no more than 5 weeks，and the white blood cells were removed before storage.

WBC,RBC,hemolysis rate

河南省南陽(yáng)市中心血站 成分科 473000

10.3969/j.issn.1672-4860.2017.03.013

2017-3-31