芒柄花黃素對小鼠體內(nèi)SOD、MDA、GSH-Px和BUN的影響

梁馨元，韋姍姍，李禮順，謝為舜，黃永生，陳 健

(1.桂林醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)院，廣西 桂林 541001；2.桂林醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理教研室)

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芒柄花黃素對小鼠體內(nèi)SOD、MDA、GSH-Px和BUN的影響

梁馨元1，韋姍姍1，李禮順1，謝為舜1，黃永生1，陳 健2

(1.桂林醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)院，廣西 桂林 541001；2.桂林醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理教研室)

目的 驗證芒柄花黃素對小鼠體內(nèi)超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的活性和血尿素氮(BUN)的含量的影響。方法 將小鼠分為低、中、高劑量組及對照四個組，將芒柄花黃素按不同濃度腹腔注射到小鼠體內(nèi)，連續(xù)給藥7d后進(jìn)行小鼠游泳實驗，小鼠在水中游泳10min后將其撈起，頸椎離斷致死后立即抽取血清樣本制作肝臟勻漿，檢測血清樣本中的BUN和肝臟中的SOD、MDA、GSH-Px等指標(biāo)。結(jié)果 芒柄花黃素在濃度為32mg/kg時，能有效的降低小鼠體內(nèi)MDA活性，并且提高小鼠體內(nèi)SOD、GSH-Px的活性，還能降低小鼠體內(nèi)血清BUN的含量(P均<0.05)。結(jié)論 芒柄花黃素通過增強抗氧化酶活性、減少氧自由基生成、調(diào)節(jié)能量代謝等方面對小鼠起到明顯的抗疲勞作用。

芒柄花黃素；植物雌激素；小鼠；抗疲勞

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗藥材與動物 芒柄花黃素(純度>98%)，購自天津馬克生物技術(shù)有限公司，不同濃度用生理鹽水配制。實驗動物：選用清潔級雄性昆明種小鼠40只及基礎(chǔ)飼料，體質(zhì)量18～22g。

1.1.2 儀器與試劑 小鼠游泳箱(規(guī)格70cm×70cm×60cm)、Beckman640紫外分光光度計等。血尿素氮測定試劑盒、谷胱甘肽測定試劑盒、丙二醛測定試劑盒、超氧化物歧化酶測定試劑盒均采用南京建成生物技術(shù)研究所生產(chǎn)。

1.2 實驗方法 40只小鼠平均分成4組，低、中、高劑量組和空白對照組。按低劑量組8mg/kg,中劑量組16mg/kg,高劑量組32mg/kg分別對小鼠給藥(給藥期間應(yīng)根據(jù)全部小鼠平均體重的增加對腹腔注射量做適當(dāng)?shù)恼{(diào)整)，空白對照組給予同體積的生理鹽水腹腔注射。小鼠每天注射給藥1次，每次注射前斷食2h，連續(xù)7d?；A(chǔ)飼料自由攝食。

小鼠連續(xù)給藥7d后，每組小鼠于末次給藥前禁食12h，在末次給藥1h后將小鼠放入游泳箱內(nèi)做游泳實驗。把小鼠放入游泳箱游泳，水深約為35cm，水溫30℃,讓小鼠在水中游泳10min后將其撈起，頸椎離斷致死后，立即抽取血清樣本，同時取出肝臟制作肝臟勻漿，離心機分離取上清備用。

用肝臟勻漿上清和血清樣本,按照試劑盒的方法分別測定丙二醛(MDA)、血尿素氮(BUN)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。

2 結(jié) 果

高劑量組小鼠肝臟組織中SOD、GSH-Px活性高于對照組(P<0.05)，MDA、BUN活性低于對照組(P<0.05)，結(jié)果見表1。

表1 小鼠肝臟勻漿SOD、MDA、GSH-Px活性的變化

與對照組比較，*P<0.05

3 討 論

疲勞的發(fā)生與人體的某些生化指標(biāo)密切相關(guān)，可以應(yīng)用相關(guān)化學(xué)指標(biāo)來評價芒柄花黃素的抗疲勞作用[9-10]。SOD、GSH-Px、MDA是反映機體內(nèi)氧自由基代謝的主要指標(biāo)，其中MDA含量的高低可反映體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度，間接地反映細(xì)胞受損程度[11]。SOD的功能是有效地清除超氧自由基[12]，GSH-Px則可以有效地清除過氧化氫(H2O2) 等活性氧，從而阻止脂質(zhì)過氧化，保護(hù)細(xì)胞免受運動性損傷。BUN是反應(yīng)蛋白質(zhì)分解代謝的主要指標(biāo)，其含量可隨運動的增加而增加，若機體對運動的適應(yīng)能力越差，血清BUN含量會越高[13-14]。研究表明[15]，劇烈運動可促使氧自由基的產(chǎn)生，體內(nèi)脂質(zhì)過氧化增強,MDA水平升高而導(dǎo)致運動能力下降，產(chǎn)生運動性疲勞。

本實驗中，在小鼠游泳10min后，取血清樣本和肝組織進(jìn)行實驗分析顯示,高劑量組小鼠體內(nèi)SOD、GSH-Px活性高于對照組(P<0.05)，清除氧自由基的能力較高，能有效地阻止脂質(zhì)過氧化，使細(xì)胞受損程度較小。而高劑量組小鼠體內(nèi)MDA含量顯著低于對照組(P<0.05),說明高劑量小組體內(nèi)脂質(zhì)過氧化程度較低，表明細(xì)胞受損程度低，間接反映高劑量組小鼠體內(nèi)氧自由基含量較低。對照組小鼠的血清BUN含量高于高劑量組(P<0.05)，說明高劑量組隊對運動的負(fù)荷能力比對照組好，有較好的抗疲勞作用。本實驗的唯一變量是芒柄花黃素的濃度，實驗結(jié)果證明了芒柄花黃素在體內(nèi)對自由基的清除具有良性影響。但在低濃度組時并沒有清除自由基起到抗疲勞的作用，其對體內(nèi)自由基的清除在高濃度組才具有較好的效果。聯(lián)系到芒柄花黃素在體外以鄰苯三酚自氧化實驗來測定其對自由基的清除的具有明顯的劑量依賴性，這可能與體外實驗的反應(yīng)條件較易控制，過程簡單，而體內(nèi)的生化反應(yīng)及新陳代謝復(fù)雜，反應(yīng)的變量不易控制導(dǎo)致。故芒柄花黃素在體內(nèi)清除自由基起抗疲勞作用的劑量關(guān)系，以及最佳濃度有待進(jìn)一步研究。

[2]ZHANG S，TANG X，TIAN J，et al．Cardloprotective effect of sulphonated formononetin on acute myocardial infarction in rats[J]．Basic Clincal Pharmacol Toxicol，2011,108(6)：390

[3]HYEKYUNG H，HOYOUNG L,JEHYUN L,et al.Formononetin prevents ovariectomy-induced bone loss in rats[J]．Arch Pharm Res,2010,33(4)：625

[4]HUH J E,KWON N H,BAEK Y H,et al.Formononetin promotes early fracture healing through stimulating angiogenesis by up-regulating VEGFR-2/FIk-1 in a rat fracture model[J].Int Immunopharmacol,2009,9(12)：1357

[5]CHEN J，ZENG J，XIN M，et al.Formononetin induces cell cycle arrest of human breast cancer cells via IGFl/P13K/Akt pathways in vitro and in vivo[J]．Horm Metab Res,2011，43(10)：681

[6]葉雨,陳健.芒柄花黃素對超氧陰離子及羥自由基清除作用的研究[J].四川生理科學(xué)雜志，2012,34(2)：53

[7]盧美燕,董文斌.氧化應(yīng)激在高體積分?jǐn)?shù)氧肺損傷中的作用[J].實用兒科臨床雜志,2012,27(22):1763

[8]魏燕,辛?xí)匝?活性氧調(diào)控的細(xì)胞凋亡信號[J].現(xiàn)代腫瘤學(xué),2011,19(2):371

[9]劉忠民,高喆,牛娜,等.不同負(fù)荷的游泳運動對大鼠認(rèn)知能力及海馬神經(jīng)疲勞的影響[J].中國實驗診斷學(xué),2014,18(3):377

[10]CASTELL I M，NEWSHOLME E A.The relation between glutamine and the immunodepression observed in exercise[J].Amino Acids，2001，20(1):49

[11]朱梅菊,熊靜宇,高順生，等.螺旋藻及其復(fù)方對運動小鼠體內(nèi)氧自由基代謝的影響[J].體育科學(xué),2001,21(5):55

[12]CHI A,HONG L,KANG C,et al.Anti-fatigue activity of a novel polysaccharide conjugates from Ziyang green tea[J].Int J Biol Macromol,2015,80:566

[13]黃誠胤,潘建華,李慧.表沒食子兒茶素沒食子酸酯對小鼠運動疲勞的拮抗作用[J].中國應(yīng)用生理學(xué)雜志,2015,31(1):85

[14]畢珣,劉愛兵,孫達(dá).棗環(huán)磷酸腺苷提取液對小鼠抗疲勞作用的藥效學(xué)研究[J].腸外與腸內(nèi)營養(yǎng),2015,22(1):46

[15]CLARKSON P M，HUBAL M J.Exercise-induced muscle damage in humans[J].Am J Phys Med Rehabil,2002,81(11):52

Experimental Study on Effects of Formononetin on SOD、MDA、GSH-Px and BUN in Mice

LIANG Xin-yuan,WEI Shan-shan，LI Li-shun,et al

(ClinicMedicalCollege,GuilinMedicalCollege,GuilinGuangxi541001，China)

Objective To explore the effects of formononetin on the activities of SOD and GSH-Ps as well as the content of MDA and BUN in mice. Methods Mice were randomly divided into four groups.After seven days of administration of formononetin,the swimming test was performed.The content of BUN in serum samples and SOD,MDA,GSH-Px in liver were also detected.Results Formononetin at a concentration of 32mg/kg can effectively reduce the content of MDA(P<0.05),and increase the activity of SOD and GSH-Px(P<0.05),but reduce the content of serum BUN in mice(P<0.05).Conclusion Formononetin plays an obvious anti fatigue effect on mice via enhancing antioxidant enzyme activity,reducing oxygen free radicals and regulating energy metabolism.

Formononetin;Phytoestrogens;Mice;Anti-fatigue

R965

A

2095-4646(2017)03-0188-03

10.16751/j.cnki.2095-4646.2017.03.0188

2017-01-06)