橙皮苷抑制人舌癌Tca8113細胞體外增殖的實驗觀察

趙妮妮彭浩

（1南方醫(yī)科大學附屬深圳醫(yī)院口腔科廣東 深圳 518101；2遵義醫(yī)學院珠海校區(qū)手術學實驗室廣東 珠海 519000）

橙皮苷抑制人舌癌Tca8113細胞體外增殖的實驗觀察

趙妮妮1彭浩2

（1南方醫(yī)科大學附屬深圳醫(yī)院口腔科廣東 深圳 518101；2遵義醫(yī)學院珠海校區(qū)手術學實驗室廣東 珠海 519000）

橙皮苷；舌癌細胞；體外增殖

橙皮苷（Hesperidin）是由蕓香糖和橙皮素組成的糖苷，屬于二氫黃酮衍生物，被證實有一定的惡性腫瘤細胞殺滅作用，而未見嚴重的不良反應。張冬松等[1]報道，橙皮苷能抑制多種體外培養(yǎng)的腫瘤細胞如乳腺癌、肺癌等的生長和增殖。故本項目將橙皮苷引入南方醫(yī)科大學附屬深圳醫(yī)院口腔科抗舌癌細胞的實驗研究，旨在為臨床用藥提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料舌癌細胞株Tca-8113由西安第四軍醫(yī)大學細胞中心提供；胎牛血清購自青島生物制藥有限公司；橙皮苷由南方醫(yī)科大學生物實驗室提純。

1.2 實驗方法稀釋處于對數(shù)生長期的Tca8113細胞濃度至5.0×103/L并依次接種在96孔培養(yǎng)板內，每孔180 μl，培養(yǎng)1 d讓細胞貼壁生長后，分別加入20 μl終濃度為10、20、40、80、100 μmol/L的橙皮苷。每組各設5個平行復孔，放入培養(yǎng)箱中孵育3 d。再分別采用MTT法測定各孔吸光度值（A）。細胞的生長抑制率（IR）=（1－用藥組A值/對照組A值）×100%。

1.3 統(tǒng)計學處理采用Excel軟件進行原始數(shù)據(jù)錄入，用SPSS19.0軟件對數(shù)據(jù)進行一般描述和方差分析，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

采用作圖法得出半數(shù)抑制濃度IC50為84.42 μmol/L。線性相關分析表明隨著橙皮苷的濃度的升高，對Tca8113細胞的抑制率也越高（r=0.904，P＜0.05）。見表1。

表1 各濃度橙皮苷對舌癌Tca-8113細胞抑制率比較（±s）

表1 各濃度橙皮苷對舌癌Tca-8113細胞抑制率比較（±s）

不同濃度橙皮苷IR（%）10 μmol/L 20 μmol/L 40 μmol/L 80 μmol/L 100 μmol/L 11.24±1.25 20.78±3.56 34.11±2.60 44.93±2.91 71.72±3.33

3 討論

據(jù)WTO統(tǒng)計，2015年全球有大于60萬的頭頸部鱗狀細胞癌患者被明確診斷，85%以上為舌鱗狀細胞癌，并且近10年以來舌癌的發(fā)病率呈逐年上升趨勢。新輔助化療目前已經成為各類惡性腫瘤綜合治療方案中的重要組成部分。絕大多數(shù)化療藥物都有很強的毒副作用，年幼或高齡患者往往難以耐受，中途不得不中斷化療。而從植物中提取出的有效抗癌成分由于具有毒副作用小、價格親民而得到越來越多的重視。橙皮苷是從蕓香科、蝶形花科、白樺、豆科、唇形花科、柑橘屬植物體中提取而來，來源廣泛。Kamaraj等[2]學者研究發(fā)現(xiàn)，橙皮苷對人乳腺癌、肝癌、直腸癌、腎癌、肺癌等腫瘤細胞均存在較為顯著的抑制生長并誘導凋亡的效果。除此之外，Ohashi等[3]指出，橙皮苷還能拮抗環(huán)磷酰胺、噻替哌、呋喃氟尿嘧啶等常用化療藥物的致突變副作用，而且還可以減輕環(huán)磷酰胺所致的雄性小鼠生殖細胞損傷程度（P＜0.05），提純技術也已較為成熟，適合商業(yè)化生產，是一種非常具有發(fā)展前景的抗腫瘤中藥提取物。

本研究結果顯示，橙皮苷對舌癌細胞具有明顯的抑制效應（P＜0.05），且呈濃度依賴性，提示臨床應用時在保證毒副作用能夠耐受的前提下盡量提高應用濃度。另外有國外學者在文獻中指出，橙皮苷可以有效降低舌癌Tca8113細胞的克隆形成率，提示未來橙皮苷具有降低患者舌癌復發(fā)轉移率應用潛力，藥物價值包括控制腫瘤細胞轉移、縮小外科切除范圍、提高患者術后生存質量以及緩解手術、放化療等帶來的外觀殘缺、功能喪失所造成的負性情緒等。然而本項目屬于體外實驗，在人體內是否具有類似效果，有待下一步深入研究。

[1]張冬松,高慧嬡,吳立軍.橙皮苷的藥理活性研究進展[J].中國現(xiàn)代中藥,2006,8(7):25-27

[2]Kamaraj S,Anandakumar P,Jagan S,et a1.Modulatory effect of hesperidinonbenzo(a)pyreneinducedexperimentallung carcinogenesis with reference to COX-2,MMP-2 and MMP-9[J].Eur J Pharmacol,2010,649(1-3):320-327

[3]Ohashi T,Ohnishi M,Tanahashi S,et a1.Efficacy and toxicity of concurrent chemoradiotherapy with nedaplatin and S-1 for head and neck cancer[J].Jpn J Clin Oncol,2011,41(3):348-352

R285

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10.13638/j.issn.1671-4040.2017.03.102

2017-01-09）