飼糧中不同比例桑葉粉對湖羊瘤胃上皮組織結(jié)構(gòu)的影響

馮 丹 歐陽佳良 王夢芝* 侯啟瑞

(1.揚(yáng)州大學(xué)動物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，揚(yáng)州225009；2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)研究所，鎮(zhèn)江212018)

飼糧中不同比例桑葉粉對湖羊瘤胃上皮組織結(jié)構(gòu)的影響

馮 丹1歐陽佳良1王夢芝1*侯啟瑞2

(1.揚(yáng)州大學(xué)動物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，揚(yáng)州225009；2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)研究所，鎮(zhèn)江212018)

本試驗(yàn)旨在研究飼糧中不同比例的桑葉粉對育肥湖羊瘤胃上皮組織結(jié)構(gòu)的影響。選取3月齡育肥湖羊40只，隨機(jī)分為5組，每組8只。各組用桑葉粉分別替代飼糧中精料的0(A組)、15%(B組)、30%(C組)、45%(D組)、60%(E組)。預(yù)試期2周，正試期8周。結(jié)果表明：1)B組和C組瘤胃重/復(fù)胃重顯著高于A組(P<0.05)。2)各組瘤胃乳頭寬度的差異不顯著(P>0.05)。3)對于瘤胃上皮的角質(zhì)層寬度，A組高于其他各組，其中顯著高于C組和D組(P<0.05)；對于瘤胃上皮顆粒層寬度，除D組顯著高于E組(P<0.05)外，其余各組間差異不顯著(P>0.05)；對于棘突層和基底層寬度，與A組相比，桑葉粉處理能提高棘突層和基底層的寬度，但是作用不顯著(P>0.05)，D組和B組的基底層寬度顯著高于C組(P<0.05)。總之，用桑葉粉替代15%～45%的精料能在一定程度上提高湖羊復(fù)胃的重量，促進(jìn)的棘突層和基底層細(xì)胞的分裂，從而促進(jìn)瘤胃上皮組織發(fā)育，同時(shí)，也有效降低了瘤胃上皮角質(zhì)層的寬度。

桑葉粉；湖羊；瘤胃組織

我國桑樹(MorusalbaL.)資源豐富，桑葉中含有豐富的蛋白質(zhì)、纖維素等物質(zhì)以及黃酮類化合物(3.3%)、多糖、1-脫氧野尻霉素等多種活性物質(zhì)[1]，并有相應(yīng)的多種生理功能。如，其異槲皮苷具有抑制血清脂質(zhì)增加的功能[2]；其不飽和脂肪酸還有降低血清膽固醇的作用，能保持機(jī)體的生理狀態(tài)正常[3-5]。因此，桑葉在食用、藥用、飼用等方面得到了研究與應(yīng)用。鑒于當(dāng)前蛋白質(zhì)飼料資源的緊缺和桑葉粉的高蛋白質(zhì)含量，研發(fā)其作為反芻家畜的蛋白質(zhì)飼料源具有節(jié)約蛋白質(zhì)飼料資源和充分利用桑葉粉閑置資源的生產(chǎn)實(shí)踐意義。近年來的研究表明，以干物質(zhì)為基礎(chǔ)，桑葉中含粗蛋白質(zhì)15%～30%，粗脂肪4%～10%，粗纖維8%～12%，無氮浸出物30%～35%，粗灰分8%～12%，鈣1%～3%，磷1.3%～0.6%[6-7]，可以部分替代豆餅或精料喂奶牛。馬雙馬等[8]表明，在羊的飼糧中添加干桑葉或鮮桑葉都能夠滿足其營養(yǎng)物質(zhì)的需求，加快增重速度，增加收益。另外，李昊幫等[9]研究桑葉粉不同添加水平對湘東黑山羊的瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響，結(jié)果表明飼糧中添加桑葉粉能夠改善瘤胃發(fā)酵，10%的添加量能夠顯著提高瘤胃液總揮發(fā)性脂肪酸(TVFA)濃度，而其對揮發(fā)性脂肪酸(VFA)發(fā)酵類型的影響則影響著幼畜瘤胃組織形態(tài)，包括參與VFA吸收的瘤胃乳頭的形態(tài)結(jié)構(gòu)。研究者們認(rèn)為瘤胃上皮對VFA的適應(yīng)性過程中，瘤胃乳頭的長度和寬度以及瘤胃壁的厚度是瘤胃發(fā)育的重要指標(biāo)，同時(shí)瘤胃乳頭表面積的變化也是瘤胃黏膜代謝水平的重要體現(xiàn)[10]。瘤胃發(fā)酵產(chǎn)生的VFA在為反芻動物機(jī)體提供能量的同時(shí)，作為化學(xué)刺激因素促進(jìn)瘤胃的發(fā)育。若瘤胃發(fā)酵產(chǎn)生的VFA濃度過低，滿足不了瘤胃乳頭生長需要時(shí)就會抑制瘤胃的發(fā)育。相反，瘤胃內(nèi)過高濃度的VFA通過快速促進(jìn)上皮細(xì)胞增殖和減緩細(xì)胞凋亡，導(dǎo)致瘤胃上皮角質(zhì)化過度也會影響VFA的吸收作用[11]。Beiranvand等[12]認(rèn)為瘤胃乳頭的形態(tài)變化與分支的出現(xiàn)，主要是由于瘤胃內(nèi)丁酸和丙酸對瘤胃乳頭細(xì)胞的刺激作用。相對于丙酸，丁酸在體內(nèi)不僅可以促進(jìn)瘤胃上皮細(xì)胞增殖和分化，還可以提高胃腸道敏感性和促進(jìn)胃腸道蠕動[13]，增強(qiáng)VFA在瘤胃的吸收作用；同時(shí)作為直接刺激因子不僅可以影響胃腸道的血流量還可以調(diào)節(jié)胰島素和胰高血糖素的分泌[14]，促進(jìn)VFA在細(xì)胞內(nèi)代謝作用，調(diào)節(jié)瘤胃上皮細(xì)胞對丁酸的適應(yīng)性。本課題組前期研究表明，飼糧中不同比例的桑葉粉影響育肥羊瘤胃中VFA發(fā)酵模式，但是否影響瘤胃上皮組織結(jié)構(gòu)卻不得而知。本試驗(yàn)研究飼糧中不同比例桑葉粉對湖羊瘤胃上皮組織形態(tài)的影響，以期為研究桑葉粉影響瘤胃消化和吸收的機(jī)制，以及其在反芻動物生產(chǎn)中的應(yīng)用提供一些基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

高校圖書館信息素養(yǎng)教育的改進(jìn)措施主要分為兩大部分，第一是舉辦課外學(xué)習(xí)素養(yǎng)教育活動，第二是信息素養(yǎng)教育課程的優(yōu)化。

(1) 提出了轉(zhuǎn)向架結(jié)構(gòu)彈性振動是導(dǎo)致軌道懸浮不平順的一個(gè)重要原因,因此需分析轉(zhuǎn)向架結(jié)構(gòu)的固有特性，來解決列車振動問題。

桑葉粉，從市場上購買，經(jīng)檢測營養(yǎng)水平為：水分10.46%、粗蛋白質(zhì)20.30%、粗脂肪8.15%、粗灰分7.56%、中性洗滌纖維34.30%、酸性洗滌纖維16.28%、鈣1.54%、磷0.10%。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析

從1996年至今，中山路街區(qū)總共進(jìn)行了4次全面改造，形成了以中山路和周邊歷史建筑群為核心空間的特色商業(yè)旅游區(qū).雖然中山路街區(qū)以其特殊的地理位置與特點(diǎn)鮮明的歷史文化吸引了大量的外來游客，使得其空間活力得到一定的提升，但由于街區(qū)空間設(shè)計(jì)缺乏合理的統(tǒng)一性與針對性，中山路街區(qū)的許多公共空間(如劈柴院、天主教堂廣場等)都無法在空間品質(zhì)與舒適度上做出很好的對應(yīng).近期，中山路街區(qū)迎來新的全面改造.鑒于此，本文試圖運(yùn)用空間句法的理論對教堂廣場空間進(jìn)行分析，得到其在空間形態(tài)方面存在的問題，從問題根本處出發(fā)，提出更新建議，以期為此次提升教堂廣場區(qū)域空間品質(zhì)的更新改造活動提供一定的理論依據(jù).

精料組成及營養(yǎng)水平見表1。其中粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、鈣、磷含量參考《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)》[16]進(jìn)行測定。粗蛋白質(zhì)含量用半微量凱氏定氮法測定；粗脂肪含量用索氏乙醚抽提法測定；中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量用傳統(tǒng)抽濾方法測定；鈣、磷含量用NPC-02型鈣磷測定儀。

在泗陽偉禾湖羊養(yǎng)殖場選取40只3月齡健康狀況良好的育肥湖羊[(16.5±0.6) kg]，采用完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，試驗(yàn)羊隨機(jī)分成5組，每組8只。5組分別飼喂5種不同的飼糧，以羊場的飼糧為基礎(chǔ)飼糧，用桑葉粉分別替代精料的0(A組)、15%(B組)、30%(C組)、45%(D組)、60%(E組)，粗料為玉米青貯。保證飼糧的精粗比不變和各組飼糧等氮，飼糧的精粗比為5∶5(干物質(zhì)基礎(chǔ))，制成顆粒使用。預(yù)試期2周，正試期8周。飼糧參照NRC(2007)[15]建議的肉用綿羊營養(yǎng)需要，按照日增重200 g/d配制。

桑葉具有較好的適口性。當(dāng)家畜首次接觸桑葉時(shí)，很容易接受并無采食障礙。對反芻動物而言，采食量受消化道動態(tài)容量、靜化學(xué)、靜力學(xué)和代謝等各種生理的調(diào)節(jié)[19]，并受到飼料、動物、環(huán)境等綜合因素的影響。桑葉可改善瘤胃生態(tài)環(huán)境，增加了瘤胃內(nèi)纖維分解菌在纖維物質(zhì)顆粒上的附著，促進(jìn)其繁殖，從而提高秸稈的消化率和采食量[20]。桑葉也具有很高的消化率。嚴(yán)冰等[21]研究表明，桑葉在瘤胃內(nèi)48 h干物質(zhì)消化率高達(dá)62%。添加桑葉粉增加牛飼糧中的蛋白質(zhì)含量，改善瘤胃生態(tài)環(huán)境并可通過促進(jìn)微生物的繁殖提高干物質(zhì)、有機(jī)質(zhì)和蛋白質(zhì)等的表觀消化率[22]。

3.2 瘤胃上皮組織對營養(yǎng)物質(zhì)的利用機(jī)制

試驗(yàn)羊采取群飼舍養(yǎng)方式，試驗(yàn)前對羊舍進(jìn)行清理與消毒后，所有羊只統(tǒng)一進(jìn)行驅(qū)蟲和免疫。正試期前3周全株玉米青貯按每天每只羊1.5 kg投料，之后按1.75 kg投料。試驗(yàn)各組精料投飼方案：正試期第1周每天每只羊375 g精料，隨后每周增加25 g直至第8周試驗(yàn)結(jié)束。試驗(yàn)期間每天飼喂2次(07:00和17:00)，先粗后精，自由飲水。

三維熒光光譜獲取方法：三維熒光光譜儀的型號為日立F-7 000。熒光參數(shù)設(shè)定為：掃描電壓為700 V，掃描速度為2 400 nm/min，掃描范圍為0～10 000，激發(fā)、發(fā)射波長分別設(shè)置為250 nm～450 nm、300 nm～550 nm，各波長和狹縫的間隔都為5 nm；由于290 nm以下的散射光會使熒光圖出現(xiàn)散射，為了避免這種影響，290 nm的截止濾光片用在此儀器。

表1 精料組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of concentrates (DM basis)

續(xù)表1項(xiàng)目Items組別GroupsABCDE食鹽NaCl0.500.500.500.500.50預(yù)混料Premix1)0.500.500.500.500.50合計(jì)Total100.00100.00100.00100.00100.00營養(yǎng)水平Nutrientlevels/(g/kg)2)消化能DE/(MJ/kg)14.2813.8513.9213.9213.54粗蛋白質(zhì)CP359.50374.00381.50331.50299.50粗脂肪EE18.7220.8129.0527.1137.46中性洗滌纖維NDF205.15234.95283.14392.95446.62酸性洗滌纖維ADF100.71151.39210.37281.98342.22鈣Ca9.639.949.959.9410.57磷P6.756.376.145.596.75

1)每千克預(yù)混料含有 One kg of premix provides the following：Cu 200～500 mg，F(xiàn)e (as ferrous sulfate) 1 500～2 500 mg，Mn (as manganese sulfate) 1 000～2 000 mg，Zn (as zinc sulfate) 1 000～2 500 mg，VA 200 000～370 000 IU，VD3250 000～1 250 000 IU，VE≥750 mg，賴氨酸 Lys>49 g，P 5～50 mg，Se (as sodium selenite) 5～15 mg，Co (as cobalt sulfate) 5～15 mg，Ca (as calcium sulfate) 100～160 g，食鹽 NaCl 100～160 g。

2)消化能根據(jù)原料組成計(jì)算，其余為實(shí)測值。DE is calculated according to ingredient composition, while the other nutrient levels are measured values.

飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束前1天選取3只試驗(yàn)羊開始絕食24 h，次日稱重屠宰，稱取復(fù)胃及其各部分(瘤胃、網(wǎng)胃、瓣胃、皺胃)的重量，并取1塊生長均勻的瘤胃用于制作石蠟切片。

1.4 石蠟切片制作

將取下的瘤胃組織用預(yù)冷的磷酸緩沖鹽溶液(phosphate buffer saline，PBS)沖洗干凈后，立即投入4%甲醛溶液中固定至少48 h。固定好修剪成5 mm厚的組織塊。采用石蠟切片、蘇木精-伊紅(HE)方法染色觀察羔羊瘤胃形態(tài)結(jié)構(gòu)。參照Wang等[17]闡述的方法制作組織切片，步驟如下：沖洗組織塊并將其依次放置在80%乙醇溶液中1次、90%乙醇溶液中2次、100%乙醇溶液中脫水3次，二甲苯透明2次，浸蠟，包埋。切片、貼片、烤片。參照王龍[18]HE方法染色，步驟如下：將切片一次放入二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ各30 min至透明，放入乙醇溶液(依次放入100%乙醇溶液10 min 2次、90%乙醇溶液5 min、70%乙醇溶液1 min、50%乙醇溶液1 min、30%乙醇溶液1 min)中復(fù)蘇，浸泡于PBS溶液5 min，放入蘇木精染液中避光5 min，水浸洗片；PBS浸泡5 min，伊紅中浸泡30 s，再于PBS中浸泡5 min,60 ℃烘箱20 min，100%乙醇中2次，每次2 min，中性樹脂滴膠封片。

1.5 測定指標(biāo)

記錄正試期采食量，計(jì)算干物質(zhì)采食量;記錄初始和終末體重，計(jì)算平均日增重。

每個(gè)樣品制作3片切片，厚度為7 μm；相鄰切片之間至少距離100 μm。用廣州明美成像系統(tǒng)軟件進(jìn)行形態(tài)計(jì)量分析，利用光學(xué)顯微鏡(Olympus，日本)觀察切片的結(jié)構(gòu)，利用Olympus Ⅸ71顯微鏡軟件cellSens Dimension測量并記錄數(shù)據(jù)，包括瘤胃乳頭的寬度、瘤胃上皮的角質(zhì)層(stratum corneum，SC)、顆粒層(stratum granulosum，SC)、棘突層(stratum spinosum，SS)和基底層(stratum basale，SB)的寬度。瘤胃細(xì)胞層厚度的測量采用20×物鏡觀察，瘤胃乳頭寬度的測量采用4×物鏡觀察。所有的形態(tài)計(jì)量分析均由同一人操作，每個(gè)切片測定6個(gè)視野計(jì)算平均值。

復(fù)胃指數(shù)(%)=100×復(fù)胃/宰前活重。

1.2 試驗(yàn)動物及飼糧

試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2013初步整理后，采用SPSS 19.0軟件中的ANOVA過程進(jìn)行單因素方差分析，使用Duncan氏法進(jìn)行多重比較，結(jié)果以平均值和標(biāo)準(zhǔn)誤(SEM)表示，以P<0.05作為差異顯著的判斷標(biāo)準(zhǔn)。

高于D組、E組(P<0.05)；而復(fù)胃重和復(fù)胃指數(shù)都以B組、C組為高，分別顯著高于D組、E組和A組、D組、E組(P<0.05)。另外，瘤胃重/復(fù)胃重也以B組、C組較高，顯著高于A組(P<0.05)，與D組、E組沒有顯著差異(P>0.05)；而皺胃重/復(fù)胃重則以A組的最高，顯著高于B組、C組(P<0.05)。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧中不同比例桑葉粉對湖羊復(fù)胃發(fā)育的影響

從表1可以看出，干物質(zhì)采食量和平均日增重皆以D組和E組顯著低于A組、B組和C組(P<0.05)，而B組、C組與A組差異不顯著(P>0.05)。宰前活重以A組、B組、C組的較高，顯著

我國水資源嚴(yán)重不足，年人均占有水量2 200 m3，只有世界平均水平的1/3。水資源分布不均衡，南方人均水資源占有量高于北方地區(qū)。城市缺水相當(dāng)嚴(yán)重。全國669座城市中有400座供水不足，110座嚴(yán)重不足。國務(wù)院辦公廳2004年下發(fā)關(guān)于推進(jìn)水價(jià)改革促進(jìn)節(jié)約用水保護(hù)水資源的通知，2011年中央1號文件明確提出把嚴(yán)格水資源管理作為加快轉(zhuǎn)變經(jīng)濟(jì)發(fā)展方式的戰(zhàn)略舉措，實(shí)行最嚴(yán)格的水資源管理制度，積極推進(jìn)水價(jià)改革。落實(shí)最嚴(yán)格水資源管理制度，大力推進(jìn)水價(jià)工作，是水資源工作的當(dāng)務(wù)之急、重中之重。

媽媽說：快要卸貨的我心里有幾分激動，這是計(jì)劃中的最后一次產(chǎn)檢，我期待著一切順利，可檢查完被婦產(chǎn)科醫(yī)生告知：孩子頭太大，骨盆太窄，有些頭盆不稱，建議我剖宮產(chǎn)。一直堅(jiān)持順產(chǎn)的我聽到如此消息后，最關(guān)心的就是剖宮產(chǎn)會在肚子上切一刀，這個(gè)切口有多長，是橫切還是豎切？術(shù)后該如何護(hù)理，有疤痕怎么辦？

表2 飼糧中不同比例桑葉粉對湖羊復(fù)胃發(fā)育的影響Table 2 Effects of different proportions of mulberry leaf powder in diet on development of compound stomach of Hu sheep

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。下表同。

In the same row, values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

2.2 飼糧中不同比例桑葉粉對瘤胃上皮組織的影響

通過顯微鏡對瘤胃上皮組織切片進(jìn)行觀察，瘤胃上皮顯微結(jié)構(gòu)如圖1所示，瘤胃乳頭顯微結(jié)構(gòu)如圖2所示。從圖1可以看出，A組瘤胃上皮角質(zhì)層寬度大于其他各組，其他各細(xì)胞層寬度差別不大。從圖2可以看出，各組瘤胃乳頭寬度差別不大。通過軟件對瘤胃乳頭的寬度及瘤胃上皮的角質(zhì)層、顆粒層、棘突層和基底層的寬度的測量結(jié)果(表3)可以看出，飼糧中不同比例的桑葉粉對瘤胃乳頭寬度的影響不顯著(P>0.05)，除C組外，其余各組的瘤胃乳頭寬度均在數(shù)值上高于A組。對于瘤胃上皮的角質(zhì)層寬度，A組高于其他各組，其中顯著高于C組和D組(P<0.05)，其他各組間差異不顯著(P>0.05)。對于瘤胃上皮顆粒層寬度，除D組顯著高于E組(P<0.05)外，其余各組間差異不顯著(P>0.05)。桑葉粉替代精料在數(shù)值上提高了棘突層的寬度，但是影響不顯著(P>0.05)。D組和B組的基底層寬度顯著高于C組(P<0.05)。

表3 飼糧中不同比例桑葉粉對瘤胃上皮結(jié)構(gòu)的影響Table 3 Effects of different proportions of mulberry leaf powder in diet on rumen epithelium structure of Hu sheep

SC：角質(zhì)層 stratum corneum；SG：顆粒層stratum granulosum；SS：棘突層 stratum spinosum；SB：基底層 stratum basale。

圖1 湖羊瘤胃上皮顯微結(jié)構(gòu)圖

Fig.1 Morphological structure of rumen epithelium ofHuSheep (20×)

圖2 湖羊瘤胃乳頭顯微結(jié)構(gòu)圖Fig.2 Morphological structure of rumen papillae of Hu Sheep (4×)

3 討 論

3.1 飼糧中不同比例桑葉粉對湖羊采食與消化的影響

1.3 飼養(yǎng)管理

系統(tǒng)功能語言學(xué)視野下的篇章結(jié)構(gòu)個(gè)性化研究 …………………………………………………… 陸丹云（3.11）

瘤胃上皮組織由外向內(nèi)可分為4層，分別為：角質(zhì)層、顆粒層、棘突層和基底層。角質(zhì)層曾被認(rèn)為不利于瘤胃的吸收，而之后的研究發(fā)現(xiàn)，正常情況下，在瘤胃內(nèi)容物的連續(xù)磨損下，角質(zhì)化細(xì)胞層只有3～4層細(xì)胞，對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收作用影響不大，卻具有明顯的保護(hù)作用；顆粒細(xì)胞層具有緊密的連接，但該層為不連續(xù)層，沒有皮脂腺分泌，水分可自由通過；棘突層是瘤胃上皮組織中短鏈脂肪酸代謝的部位。由此可見，瘤胃上皮對營養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)吸收在很大程度上有賴于角質(zhì)層細(xì)胞的角質(zhì)化程度和角質(zhì)層的完整性[23]。角質(zhì)層的細(xì)胞層數(shù)是角質(zhì)化程度的直接體現(xiàn)，與飼糧的組成及形式高度相關(guān)，即：高精料飼糧能夠使角質(zhì)層厚度達(dá)到15個(gè)細(xì)胞層；而高粗料飼糧條件下，瘤胃上皮角質(zhì)層僅由4層細(xì)胞組成。過厚的角質(zhì)層不利于營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。瘤胃角質(zhì)化不全是瘤胃鱗狀上皮細(xì)胞產(chǎn)生堅(jiān)硬的角蛋白層，它是瘤胃乳頭的物理屏障，使得乳頭表面覆膜，降低了瘤胃表層血液流動，引起乳頭的退化，并在邊緣部分形成腐肉，最后乳頭發(fā)生結(jié)塊現(xiàn)象[10]，主要由于飼料粒度不夠不能夠摩擦去除不斷老化的上皮細(xì)胞所引起。

3.3 飼糧中不同比例桑葉粉對湖羊瘤胃上皮組織結(jié)構(gòu)的影響

我安靜地坐在船中，望向岸邊，一派繁華的景象，市井的男人熟絡(luò)著生意買賣，花枝招展的女人圍在一起討論胭脂水粉，八卦新聞。還有一些讀書人，把詩寫在一張張紙疊的小船中，希望能順?biāo)h蕩到我們面前。我是誰？我在明朝的怡香院上班，就是這里的“天上人間”。 但不要誤會，明朝的天上人間也就是陪著客人吟一下詩，喝一下酒，哼兩個(gè)小曲，頂多算陪聊。

瘤胃組織形態(tài)的發(fā)育可分為2個(gè)方面：容量的增加和黏膜的發(fā)育。對于容量的增加，即瘤胃組織重量的增加，在健康的前提下對于成年羊只對粗料的利用有著至關(guān)重要的作用。倪俊芬等[24]研究發(fā)現(xiàn)，桑葉粉不但能夠替代部分精料，而且一定的添加水平(15%、30%和45%水平)還能夠顯著改善育肥湖羊的體況發(fā)育；而當(dāng)替代比例繼續(xù)增加(60%)時(shí)，不但沒有增加湖羊的體況發(fā)育，反而產(chǎn)生了負(fù)面影響，可能過多地添加桑葉粉會影響飼糧的適口性以及很容易使羊產(chǎn)生飽腹感，從而降低了營養(yǎng)和能量的攝入水平。本研究中，桑葉粉替代15%和30%的精料其宰前活重和復(fù)胃重量都與未替代精料的一致，而桑葉粉替代45%和60%精料則顯著低于未替代精料組，表明用桑葉粉替代15%和30%的精料并不影響試驗(yàn)羊的生長性能，但該2組的復(fù)胃指數(shù)顯著高于未替代精料組，提示這2組可能促進(jìn)了復(fù)胃的發(fā)育；進(jìn)一步分析其4個(gè)胃的比例表明，復(fù)胃發(fā)育的區(qū)別是由于這2組瘤胃重/復(fù)胃重的提高；同時(shí)，未替代精料組的皺胃重/復(fù)胃重低于這2組，這從另一個(gè)角度進(jìn)一步說明了沒有桑葉粉替代精料，羊只的皺胃發(fā)育較替代組為好，這可能是飼糧的適應(yīng)性所致。

瘤胃黏膜的發(fā)育在反芻動物的胚胎時(shí)期就已開始分化。瘤胃乳頭是其黏膜上皮的小突起，與吸收功能有關(guān)，該突起可增加瘤胃壁吸收揮發(fā)性脂肪酸的表面積，一個(gè)瘤胃壁上約有25萬個(gè)瘤胃乳頭，使黏膜表面積擴(kuò)大6～7倍，因此乳頭黏膜的表面積是評價(jià)瘤胃及其黏膜代謝水平的重要標(biāo)準(zhǔn)[25]。瘤胃黏膜的乳頭是上皮和固有膜向胃腔內(nèi)突出形成的舌狀或葉片狀突起。乳頭的表面由復(fù)層扁平上皮細(xì)胞組成，淺層上皮角質(zhì)化，乳頭可以活動，在瘤胃的機(jī)械性消化中起著揉搓、磨碎作用，并可以增加吸收的表面積。有研究表明，飼料的物理形式可顯著影響犢牛瘤胃的組織形態(tài)學(xué)發(fā)育：用磨碎的飼料飼喂?fàn)倥?，犢牛瘤胃的乳頭較短，其表面積較小[10]。本研究發(fā)現(xiàn)，瘤胃乳頭寬度受飼糧中精料桑葉粉影響較大，而對于乳頭寬度受桑葉粉添加比例的影響不明顯，需進(jìn)一步研究。另外，各上皮細(xì)胞層差異性不完全一致，說明飼糧組成及營養(yǎng)物質(zhì)成分雖然對瘤胃乳頭寬度、瘤胃上皮4層寬度有一定的影響，但它不是唯一的決定因素。

4 結(jié) 論

用桑葉粉替代15%～45%的精料能在一定程度上提高復(fù)胃的重量，促進(jìn)棘突層和基底層細(xì)胞的分裂，從而促進(jìn)瘤胃上皮組織發(fā)育，同時(shí)，也有效降低了瘤胃上皮角質(zhì)層的寬度。

其中u=u(x,y,t)=vx，α,β,γ1,γ2,γ3是任意常數(shù)。最近馬文秀教授等人利用Hirota雙線性形式獲得了方程(1)的Lump形式解[17]。接下來我們將利用Hirota雙線性形式討論方程(1)的混合型孤子解。

致謝：

非常感謝揚(yáng)州大學(xué)高健對試驗(yàn)研究方法指導(dǎo)和論文修改的幫助。特別感謝泗陽偉禾湖羊養(yǎng)殖基地提供試驗(yàn)場地與試驗(yàn)動物。

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*Corresponding author, associate professor, E-mail: mengzhiwangyz@126.com

(責(zé)任編輯 王智航)

Effects of Different Proportions of Mulberry Leaf Powder in Diet on Rumen Epithelium Structure ofHuSheep

FENG Dan1OUYANG Jialiang1WANG Mengzhi1*HOU Qirui2

(1.CollegeofAnimalScienceandTechnology,YangzhouUniversity,Yangzhou225009,China; 2.SericultureResearchInstitute,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Zhenjiang212018,China)

This experiment was conducted to investigate the effects of different proportions of mulberry leaf powder in diet on rumen epithelium structure of fattingHusheep. Forty fattingHusheep at the age of 3 months were randomly divided into 5 groups with 8 sheep in each group. The sheep were fed a fattening diet containing 0 (group A), 15% (group B), 30% (group C), 45% (group D) and 60% (group E) of mulberry leaf powder instead of concentrate, respectively. The feeding experiment comprised 2-week adaption and 8-week experimental period. The results showed as follows: 1) rumen weight/compound stomach weight in groups B and C was significantly higher than that in group A (P<0.05). 2) There was no significant difference of width of rumen papillae among groups (P>0.05). 3) The width of stratum corneum of rumen epithelium in group A was higher than that in other groups, and was significantly higher than that in groups C and D (P<0.05); about the width of stratum granulosum of rumen epithelium, there was no significant difference among groups (P>0.05), except that group D was significantly higher than that in group E (P<0.05); compared with group A, mulberry leaf powder could improve the width of stratum spinosum and stratum basale, but the effects were not significant (P>0.05), and the width of stratum basale in groups D and B was significantly higher than that in group C (P<0.05). In conclusion, the supplementation of mulberry leaf powder from 15% to 45% instead of concentrate can increase compound stomach weight ofHusheep, promote the division of cells of stratum spinosum and stratum basale at some extent, which promote the development of rumen epithelial tissue, besides, adding mulberry leaf powder also can effectively reduce the width of stratum corneum.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2017, 29(6)：2196-2203]

mulberry leaf powder;Husheep; rumen epithelium

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.06.043

2016-12-01

江蘇省2016年蘇北專項(xiàng)“富民強(qiáng)縣項(xiàng)目”(BN2016096)；現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)(CARS-22)；揚(yáng)州大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新訓(xùn)練項(xiàng)目(x20160691)

馮 丹(1995—)，女，江蘇鹽城人，本科生，從事動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)研究。E-mail: 1024326750@qq.com

*通信作者:王夢芝，副教授，碩士生導(dǎo)師，E-mail: mengzhiwangyz@126.com

S826

A

1006-267X(2017)06-2196-08