大田軟海綿酸及快速檢測技術(shù)應(yīng)用進展

權(quán)浩然,龐林江,張宜明,*,孫 瑛,薛超波,路興花

(1. 浙江農(nóng)林大學(xué)農(nóng)業(yè)與食品科學(xué)學(xué)院，浙江臨安 311300; 2.舟山市食品藥品檢驗檢測研究院，浙江舟山 316021)

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大田軟海綿酸及快速檢測技術(shù)應(yīng)用進展

權(quán)浩然1,龐林江1,張宜明1,*,孫 瑛2,薛超波2,路興花1

(1. 浙江農(nóng)林大學(xué)農(nóng)業(yè)與食品科學(xué)學(xué)院，浙江臨安 311300; 2.舟山市食品藥品檢驗檢測研究院，浙江舟山 316021)

大田軟海綿酸是海洋毒素中腹瀉型毒素的代表。目前的檢測方法存在耗時耗力、設(shè)備昂貴、不能快速檢測的缺點。本文就大田軟海綿酸的結(jié)構(gòu)、毒理、藥理進行介紹,并對目前開發(fā)的大田軟海綿酸的快速檢測技術(shù):膠體金免疫層析技術(shù)、生物傳感器技術(shù)、化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)進行概述,并展望了大田然海綿酸快速檢測方法的未來發(fā)展。

大田軟海綿酸,貝毒,快速檢測

我國是赤潮頻發(fā)的國家,平均每年發(fā)生的頻率和累計面積都有增加的趨勢[1]。由于人類活動范圍的擴大以及社會發(fā)展的需求,導(dǎo)致海洋污染越來越嚴重。海水富營養(yǎng)、近海的氮磷量增加促進了藻類的生長[2]。這不僅對海洋生物造成了極大威脅，也對人類的身體健康構(gòu)成了較大的危害,同時阻礙了我國海鮮產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。

大田軟海綿酸(Okadaic acid簡稱OA)作為常見的一種主要存在于藻類植物中的小分子腹瀉型貝類毒素。其分布較廣,幾乎在每片海域都有存在。如今已被確定的能產(chǎn)生OA毒素的產(chǎn)毒藻主要包括鰭藻屬(Dinophysisspp.)和原甲藻屬(Prorocentrumspp.)的甲藻,如:倒卵形鰭藻(D. fortii)、尖銳鰭藻(D. acuta)、帽狀鰭藻(D.mitra)、三角鰭藻(D. triposs)、具尾鰭藻(D. caudata)、圓形鰭藻(D. rotundata)、漸尖鰭藻(D. acuminata)、微小原甲藻(P. minimum)、利瑪原甲藻(P. lima)等[3]。貝類,魚類攝食后多富集于體內(nèi)。海鮮類食品被OA污染后食用會引起急性中毒,雖沒有致死報道,但威脅人類的身體健康。本文通過簡要介紹OA結(jié)構(gòu)性質(zhì),毒理藥理,國內(nèi)外限定含量以及快速檢測技術(shù)進行闡述,并展望OA的快速檢測。

1 大田軟海綿酸結(jié)構(gòu)以及性質(zhì)

OA(Okadaic acid)又名軟海綿酸,岡田酸,黑海綿酸。分子式為C44H68O13(如圖1)。其擁有17個手性中心及3個螺環(huán)縮酮前體基團[6],分子量為805.00。OA是一種脂溶性物質(zhì),對于一般性的加熱烹調(diào)處理較穩(wěn)定[5]。OA是DSP(Diarrhetic Shellfish Poisoning)的主要組成部分,無色晶體，能溶于甲醇、乙醇、氯仿和乙醚等有機溶劑,不溶于水[4],輻射光對組織內(nèi)的OA影響甚小,但對飲用水中的OA具有顯著效果[7]。OA中毒患者出現(xiàn)的中毒癥狀主要是腸胃失調(diào),如腹瀉、腹痛、惡心、嘔吐等。潛伏期短,一般在 48 h內(nèi)基本康復(fù)[5]。

圖1 大田軟海綿酸結(jié)構(gòu)圖Fig.1 Structure of okadaic acid

由于其標準品昂貴,難以獲得,且多為國外產(chǎn)品,因此檢測和提取都相當困難。目前針對OA中毒并無有效的藥物治療方法,但有研究表明茶多酚能夠顯著改善OA誘導(dǎo)的大鼠海馬神經(jīng)元損傷[9],這也為針對OA藥物的研發(fā)奠定了基礎(chǔ)。

2 大田軟海綿酸的毒理與藥理特性

OA是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶抑制劑[8]。OA對不同的蛋白磷酸酶抑制程度不同:PP2A(蛋白磷酸酶2A)抑制最強烈,其次是PP1(蛋白磷酸酶1)和PP2B(蛋白磷酸酶2B)[10]。OA具有促進多種細胞凋亡的作用[11]。張銳[12]發(fā)現(xiàn),OA對還原性谷胱甘肽(GSH),超氧化物歧化酶(SOD),過氧化氫酶(CAT)均有顯著抑制作用。但也有研究證明OA 具有誘導(dǎo)癌變和促進凋亡雙重效應(yīng)。OA能夠引起人肝癌細胞,人肺癌細胞凋亡[11,13]。近期發(fā)現(xiàn)calyculin-A(CA)與okadaic acid(OA)聯(lián)合作用能夠抑制類乳腺癌細胞MCF-7和MDA-MB-231[14]。呂麗麗[15]運用多種方法已初步驗證OA對人肺腺癌A549細胞系具有明顯的殺傷作用?？梢钥闯鯫A對癌細胞具有一定的殺傷力,因此可考慮潛在的藥用價值。

3 各國對海洋產(chǎn)品中OA濃度的限制

隨著腹瀉性貝毒危害發(fā)生頻率的不斷增加,物流行業(yè)的不斷發(fā)展,OA分布區(qū)域從沿海不斷擴大到內(nèi)陸,對人們的生活造成嚴重影響,也對各國海產(chǎn)品進出口造成嚴重影響。如今已成為國際上高度關(guān)注的食品安全問題。在日本,OA的檢測方法是生物法,其最低檢出限是0.05 MU/g。在歐洲,根據(jù)(EC)853號/2004法規(guī),已經(jīng)建立最大允許水平160 μg/kg貝肉[16]。但歐洲食品安全局(EFSA)提出了將OA的最大允許水平從160 μg/kg減少至45 μg/kg(歐洲食品安全局,2008)[17]。我國通過參考各國的標準,并運用小鼠生物檢測的方法確定OA含量大于0.05 MU/g的樣品即被認為是有害的[18]。

4 快速檢測方法

傳統(tǒng)測定OA濃度的方法有很多,包括小鼠生物測定、高效液相色譜(HPLC)技術(shù)、蛋白磷酸酶抑制(PPI)檢測等方法[19-22]。由于缺乏特異性、費時、其他物質(zhì)的干擾產(chǎn)生假陽性以及生物倫理問題,因此其他的方法很受期待。例如高效液相色譜耦合其他各種檢測器,包括質(zhì)譜,串聯(lián)質(zhì)譜(MS/MS)都是有效識別和定量OA的方法[23-24],但是其樣品準備費時費力,而且需要昂貴的設(shè)備和熟練的操作人員。因此需要發(fā)展快速檢測的方法以及現(xiàn)場檢測。

4.1 膠體金免疫層析技術(shù)(Colloidal gold immuno chromatography)

圖2 免疫層析試紙條結(jié)構(gòu)圖Fig.2 Structure of Immune chromatography test strip

膠體金免疫層析技術(shù)就是運用免疫學(xué)中抗原抗體特異性結(jié)合的原理,在層析過程中實現(xiàn)這一反應(yīng),從而能夠定量或半定量[29-30]檢測,其準確性高,特異性強,穩(wěn)定性好。與傳統(tǒng)的小鼠生物法和 HPLC方法相比，其成本大大降低,且易于制備,價格低廉,樣品只要簡單的提取即可用于檢測,具有檢測時間短、且易于觀察,也不需要專業(yè)人員操作等優(yōu)點。胡樂琴[31]使用自制的腹瀉性貝毒OA單克隆抗體與BSA偶聯(lián)物為膠體金標記底物研究OA膠體金免疫檢測術(shù)。使用粒徑為30 nm的膠體金標記OA抗體依據(jù)免疫競爭法原理,建立了快速檢測OA的免疫層析試紙條方法,該方法在3～5 min 即可目測判斷結(jié)果,靈敏度為6.25 ng/mL。

膠體金免疫層析技術(shù)作為一種新型快速檢測與診斷技術(shù),通過不斷地改進和完善,控制膠體金的穩(wěn)定性與存放時間,提高整體檢驗的靈敏度或?qū)λa(chǎn)品中OA的檢測得到快速的發(fā)展。

4.2 生物傳感器技術(shù)(Biosensor technology)

生物傳感器是一門由生物、化學(xué)、物理、醫(yī)學(xué)、電子技術(shù)等多種學(xué)科互相融合發(fā)展起來的高新技術(shù),在生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境檢測、食品、醫(yī)藥以及軍事醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域有著重要應(yīng)用價值。生物傳感器通過固定化的生物活性物質(zhì)(酶、抗原、抗體等)作為生物敏感單元,對待測物質(zhì)具有高度選擇性的檢測工具。生物傳感器主要通過兩個單元組成:識別元件與轉(zhuǎn)換元件。識別元件通常為生物體分子,組織或者個體細胞分子辨認組件作為信號接收或產(chǎn)生部分。轉(zhuǎn)換元件屬于硬件儀器組件,主要是物理信號轉(zhuǎn)換組件(電信號或光信號等)。其通過物理、化學(xué)型信號轉(zhuǎn)換器捕獲目標物與酶感基元之間的反應(yīng),再用離散或連續(xù)的電信號將反應(yīng)程度表達出來,從而得出被測物的濃度。當待測物質(zhì)與識別元件特異性結(jié)合后,形成復(fù)合物或產(chǎn)生光、電、熱、聲、電位等，通過換能器將轉(zhuǎn)變?yōu)榕c待測物濃度有關(guān)的電信號或光信號輸出,達到分析檢測目的,如圖3[32]。

圖3 生物傳感器的基本原理Fig.3 Basic principles of biosensors

酶電極是最早的生物傳感器原型,是在20世紀60年代由Clark教授最先提出的酶電極設(shè)想[33]。但酶電極的壽命一般比較短暫,且高純度的酶也相當昂貴。因此,人們開始對酶電極進行衍生,如微生物電極、細胞器電極以及新型的傳感器。隨后生物傳感器技術(shù)作為不斷發(fā)展的對象,生物傳感器也日新月異。如今在OA檢測上也得到了巨大的發(fā)展。Xi Z[34]研制出一種基于Love波的HepG2細胞傳感器,結(jié)果表明,該傳感器對OA的檢測具有廣泛的線性檢測范圍(10～100 μg/L),并且能夠?qū)崟r便捷的檢測OA。Hayat A[35]以超順磁珠納米技術(shù)為基礎(chǔ)研制一種間接競爭酶聯(lián)免疫傳感器。其檢測限為0.38 μg/L,檢測時間也只需要60 min,達到快速、高效檢測的效果。Kaiqi Su[36]利用酶聯(lián)免疫吸附實驗ELISA定量檢測的方法,研制了一種定量檢測試劑盒-生物酶傳感器,并研發(fā)出配套的現(xiàn)場快速檢測儀器-仿生電子眼(Bionic e-Eye),研制出擁有我國自主知識產(chǎn)權(quán)的 OA 定量檢測試劑盒,其檢測限為0.19 μg/L,檢測范圍為0.2～5.0 μg/L,達到了國外同類試劑盒的技術(shù)指標,同時配套研發(fā)的基于移動終端的 Bionic e-Eye用于OA毒素的現(xiàn)場檢測,能夠達到商用酶標儀在實驗室環(huán)境下的檢測水平。填補了OA毒素現(xiàn)場檢測儀器的空白,因此具有良好的研究價值和實際應(yīng)用前景。

隨著生物傳感器的不斷發(fā)展,多科學(xué)相互融合,生物傳感器具備選擇性好,靈敏度高,特異性強,分析速度快,成本低廉,能在復(fù)雜的體系中進行連續(xù)監(jiān)測,具有高度的自動化,微型化,集成化,減少對使用環(huán)境和技術(shù)的要求,也適合在現(xiàn)場分析,在多科學(xué)領(lǐng)域都有相當大的應(yīng)用價值,也在食品檢測行業(yè)得到顯著的發(fā)展。

4.3 化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)(chemiluminescence immunoassay,CLIA)

化學(xué)發(fā)光免疫分析是由免疫分析技術(shù)和化學(xué)發(fā)光技術(shù)融合而成的一種快速檢測技術(shù),是利用儀器分析化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生光的強度來確定待測物的濃度?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)是化學(xué)發(fā)光物質(zhì)標記抗原抗體物質(zhì),在與待測的抗原或抗體結(jié)合后,將被標記的結(jié)合物提取出來,再與相關(guān)物產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光,從而對抗原或抗體進行定量或定性檢測[37]。目前在食品行業(yè)多檢測生物毒素[38],微生物[39],獸藥殘留[40],農(nóng)藥殘留[41]等。

化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)根據(jù)方法可分為三類:化學(xué)發(fā)光標記免疫分析、酶標化學(xué)發(fā)光免疫分析以及電化學(xué)發(fā)光免疫分析?；瘜W(xué)發(fā)光標記免疫分析是在抗原或抗體上直接標記化學(xué)發(fā)光物質(zhì),再與待測抗原或抗體結(jié)合,通過檢測發(fā)光物質(zhì)的光強度進行定性或定量分析。通常用魯米諾類,吖啶類和銥復(fù)合物物質(zhì)作為發(fā)光物[42]。酶標化學(xué)發(fā)光免疫分析是用酶作為標記物,標記在抗原抗體上,在酶與發(fā)光底物的作用下產(chǎn)生光信號。一般使用的酶主要是堿性磷酸酶(ALP)以及辣根過氧化物酶(HRP)。這兩種酶均有相應(yīng)的化學(xué)發(fā)光底物,利用一些胺類,酚類以及他們的衍生物能夠增強發(fā)光的作用[43]。王權(quán)[44]等人建立了酶促化學(xué)發(fā)光檢測技術(shù)并初步研制出試劑盒,樣品檢測限為1.232 ng/kg。劉威等[45]人建立了更加可靠的DSP細胞F-肌動蛋白熒光檢測法,其利用鬼比環(huán)肽標記F-肌動蛋白,通過酶標儀檢測熒光強度檢測樣品樣品中的OA,通過發(fā)光強度定量地檢測毒素的含量。并與ELISA結(jié)果進行比較。該方法比ELISA方法的檢出率高出5%。電化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)是由電化學(xué)反應(yīng)引起的化學(xué)發(fā)光過程。是在電流或電壓的條件下,在電極上發(fā)生電化學(xué)反應(yīng)而產(chǎn)生激發(fā)態(tài),當激發(fā)態(tài)轉(zhuǎn)變成基態(tài)時所產(chǎn)生的發(fā)光現(xiàn)象。電化學(xué)發(fā)光的底物一般多為釕聯(lián)吡啶[Ru(bpy)3]2+,能與抗原抗體結(jié)合成標記抗原抗體。電化學(xué)發(fā)光技術(shù)具有靈敏度高,準確快速而且可進行重復(fù)檢測,自動化等優(yōu)點[46]。

5 展望

隨著科學(xué)的發(fā)展,對OA的毒理、藥理研究不斷的深入,對OA檢測發(fā)展有重要的意義。高靈敏,高通量,現(xiàn)場檢測是OA檢測發(fā)展趨勢,如今在OA檢測中多用酶作為顯色媒介,由于酶具有不穩(wěn)定性,研制取代酶的發(fā)光媒介是未來OA檢測的發(fā)展方向。

[1]石琛,劉美玲,王麗坤. 赤潮的產(chǎn)生和對環(huán)境的影響[J]. 綠色科技,2015(11):210-210.

[2]楊斌,石華先,鐘秋平,等. 中國邊緣海生態(tài)環(huán)境演變及其影響因素研究[J]. 欽州學(xué)院學(xué)報,2016,31(1):1-10.

[3]馮振洲. 腹瀉性貝毒OA與DTX1制備方法的初步研究[D]. 青島：中國科學(xué)院研究生院(海洋研究所),2010.

[4]李晨望. 基于GNPs-SiNRs試紙條的大田軟海綿酸快速檢測技術(shù)研究[D]. 福州：福建農(nóng)林大學(xué),2016.

[5]李琳. 大田軟海綿酸免疫親和柱的開發(fā)及初步應(yīng)用[D]. 吉林：吉林大學(xué),2015.

[6]李美慧,李愛峰,曹際娟,等. 我國常見的幾種脂溶性貝毒的研究進展[J]. 生命科學(xué),2016(1):33-43.

[7]王合葉,趙永富,崔彥兵,等.γ輻照對水和扇貝中大田軟海綿酸降解效果的研究[J]. 核農(nóng)學(xué)報,2016,30(4):704-709.

[8]Broetto N,Hansen F,Brolese G,et al. Intracerebroventricular administration of okadaic acid induces hippocampal glucose uptake dysfunction and tau phosphorylation[J]. Brain Research Bulletin,2016,124:136-143.

[9]Li H,Wu X,Wu Q,et al. Green tea polyphenols protect against okadaic acid-induced acute learning and memory impairments in rats[J]. Nutrition,2014,30(3):337-342.

[10]Pivovarov A,Murzina G,Tret’Yakova M,et al. The Role of Serine/Threonine and Tyrosine Protein Phosphatases in Common Snail Command Neurons in a Cellular Analog of Habituation[J]. Neuroscience & Behavioral Physiology,2014,44(6):640-648.

[11]Wang R,Lv L,Zhao Y,et al. Okadaic acid inhibits cell multiplication and induces apoptosis in a549 cells,a human lung adenocarcinoma cell line[J]. International Journal of Clinical & Experimental Medicine,2014,7(8):2025-2030.

[12]張銳,蘭文升,賀秀媛,等. 貝類毒素大田軟海綿酸OA對小鼠肝臟還原型谷胱甘肽GSH、過氧化氫酶CAT、超氧化物岐化酶SOD的影響[J]. 生物學(xué)雜志,2014,31(1):11-14.

[13]Ikema S,Takumi S,Maeda Y,et al. Okadaic acid is taken-up into the cells mediated by human hepatocytes transporter OATP1B3.[J]. Food & Chemical Toxicology An International Journal Published for the British Industrial Biological Research Association,2015,83:229-236.

[14]Surmeli Z,Gursoy P,Erdogan A P,et al. Combination of zoledronic acid and serine/threonine phosphatase inhibitors induces synergistic cytotoxicity and apoptosis in human breast cancer cells via inhibition of PI3K/Akt pathway[J]. Tumor Biology,2015,37(3):3665-3673.

[15]呂麗麗. 大田軟海綿酸對人肺腺癌細胞A549增殖的影響及凋亡誘導(dǎo)作用研究[D]. 曲阜：曲阜師范大學(xué),2014.

[16]EU Regulation 853/2004. Regulation(EC)No 853/2004 of the European Parliament and of the Council of 29 April 2004 laying down specific hygiene rules for food of animal origin[J]. Off J Europ Union,2004,226:22-82.

[17]Chain E P O C I. Marine biotoxins in shellfish - Yessotoxin group - Scientific Opinion of the Panel on Contaminants in the Food chain[J]. Efsa Journal,2009,7(2):n/a-n/a.

[18]GB/T 5009.212-2008 《貝類中腹瀉性貝類毒素的測定》[S].2008.

[19]Prassopoulou E,Katikou P G D,Kyritsakis A. Detection of okadaic acid and related esters in mussels during diarrhetic shellfish poisoning(DSP)episodes in Greece using the mouse bioassay,the PP2A inhibition assay and HPLC with fluorimetric detection.[J]. Toxicon,2009,53(2):214-227.

[20]Wu ZQ,Wang BC,Sun YB,et al. Improvement of determination method of okadaic acid in shellfish by liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. J Food Saf Qual,2015(1):265-271.

[21]Uchida H,Watanabe R,Matsushima R,et al. A convenient HPLC method for detection of okadaic acid analogs as 9-anthrylmethyl esters with automated sample cleanup by column switching.[J]. Journal of Aoac International,2014,97(2):391-397.

[22]朱昱. 貝類毒素檢測技術(shù)現(xiàn)狀與進展[J]. 科技風,2015(6):114-114.

[23]Li XJ,Peng RF,Yu H,et al. Simultaneous determination of azaspiracid and okadaicacid in shellfish by ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry[J]. Chin J Health Lab Technol,2014,19:2757-2758.

[24]李曉晶,彭榮飛,于鴻,等. 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時測定貝類水產(chǎn)品中原多甲藻酸類和大田軟海綿酸類毒素[J]. 中國衛(wèi)生檢驗雜志,2014(19):2757-2758.

[25]Lu F,Doane T L,Zhu J J,et al. Gold nanoparticles for diagnostic sensing and therapy[J]. Inorganica Chimica Acta,2012,393(12):142-153.

[26]Faulk W,Taylorn GM.An irmnunocolloidal gold method for thee lectron microscope. Immunochemistry,1971,8:1081-1087

[27]Romano EL,Stolinski C,Hughes-Jones NC.An antiglobalin reagent labelled with colloidal gold for use in electron microscopy.Immunochem,1974,11(8):521-522.

[28]楊鼎,趙世華,孫海蓮,等. 膠體金免疫層析技術(shù)研究進展[J]. 畜牧與飼料科學(xué),2013(12):31-33.

[29]Qu X,Lin H,Du S,et al. Development of a Nano-Gold Capillary Immunochromatographic Assay for Rapid and Semi-Quantitative Detection of Clenbuterol Residues[J]. Food Analytical Methods,2016,9(9):1-10.

[30]Zeng N,Wang Z,Zhang H,et al. Deep Belief Networks for Quantitative Analysis of a Gold Immunochromatographic Strip[J]. Cognitive Computation,2016,8(4):684-692.

[31]胡樂琴,馬曉康,吳春燕. 抗腹瀉性貝毒軟海綿酸膠體金免疫快速檢測技術(shù)研究[J]. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2015,37(5):909-913.

[32]司士輝.生物傳感器[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2002:12.

[33]史建國,李一葦,張先恩. 我國生物傳感器研究現(xiàn)狀及發(fā)展方向[J]. 山東科學(xué),2015,28(1):28-35.

[34]Xi Z,Fang J,Ling Z,et al. A novel sensitive cell-based Love Wave biosensor for marine toxin detection[J]. Biosensors & Bioelectronics,2016,77:573-579.

[35]Hayat A,Barthelmebs L,Marty J L. Enzyme-linked immunosensor based on super paramagnetic nanobeads for easy and rapid detection of okadaic acid[J]. Analytica Chimica Acta,2011,690(2):248-252.

[36]Su K,Qiu X,Fang J,et al. An improved efficient biochemical detection method to marine toxins with a smartphone-based portable system-Bionic e-Eye[J]. Sensors & Actuators B Chemical,2016(2).

[37]金茂俊,王靜,楊麗華,等. 化學(xué)發(fā)光免疫分析方法在食品安全檢測中的研究進展[J]. 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報,2014(3):840-845.

[38]Lin C,Liu Z S,Wang D X,et al. Sensitive and reliable micro-plate chemiluminescence enzyme immunoassay for okadaic acid in shellfish[J]. Analytical Methods,2014,6(18):1.

[39]Zhang Y,Tan C,Fei R,et al. Sensitive chemiluminescenceimmunoassay for E. coli O157∶H7 detection with signal dual-amplification using glucose oxidase and laccase.[J]. Analytical Chemistry,2014,86(2):1115-1122.

[40]Tao X,Zhou S,Yuan X,et al. Determination of chloramphenicol in milk by ten chemiluminescent immunoassays:influence of assay format applied[J]. Analytical Methods,2016,8(22):4445-4451.

[41]Liu Z J,Wei X,Xu H,et al. Sensitive detection of thiacloprid in environmental and food samples by enhanced chemiluminescent enzyme immunoassay[J]. Rsc Advances,2016,6(35):29460-29465.

[42]張燕,楊金易,曾道平,等. 化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)及其在食品安全檢測中的研究進展[J]. 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報,2013(5):1421-1427.

[43]于秀霞. 化學(xué)發(fā)光功能化納米材料在新型生物傳感器中的應(yīng)用[D]. 合肥：中國科學(xué)技術(shù)大學(xué),2014.

[44]王權(quán). 海產(chǎn)品中大田軟海綿酸和水產(chǎn)品中藥物殘留快速檢測新技術(shù)的研究及應(yīng)用[D]. 南京：南京農(nóng)業(yè)大學(xué),2011.

[45]劉威,孟繁霞,黃海燕,等. 腹瀉性貝類毒素細胞F-肌動蛋白熒光檢測法條件優(yōu)化[J]. 衛(wèi)生研究,2015,44(5):857-859.

[46]代潤澤,鄧建成. 化學(xué)發(fā)光免疫分析方法與應(yīng)用進展[J]. 化工設(shè)計通訊,2016,42(1):106-106.

Progress in application of okadaic acid and rapid detection technology

QUAN Hao-ran1,PANG Lin-jiang1,ZHANG Yi-ming1,*,SUN Ying2,XUE Chao-bo2,LU Xing-hua1

(1.School of Agricultural and Food Science,Zhejiang A & F University,Lin’an 311300,China; 2.Zhoushan Institute for Food and Drug Control,Zhoushan 316021,China)

The okadaic acid is the representative of the diarrhetic shellfish poisoning in Marine toxin.Currently,detection methods of okadaic acid have drawbacks that consuming time and energy,expensive equipment,being incapable of rapid detection.This paper introduces the structure,toxicity and pharmacology of okadaic acid.The author introduces rapid detection technology of okadaic acid:colloidal gold immuno chromatography,biosensor technology,chemiluminescence immunoassay,and looks forward to the future development of rapid detection method of okadaic acid.

okadaic acid;shellfish toxins;rapid detection

2016-10-19

權(quán)浩然(1993-)，男，在讀碩士研究生，研究方向：食品檢測與安全研究，E-mail：450782713@qq.com。

*通訊作者:張宜明(1973-)，男，博士，副教授，主要從事食品檢測與安全研究，E-mail：40293866@qq.com。

浙江省科技計劃項目(2016C32082)。

TS201.1

A

1002-0306(2017)11-0391-05

10.13386/j.issn1002-0306.2017.11.067