• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    超聲波協同酶法提取菊苣根多糖工藝優(yōu)化

    2017-06-05 15:10:47吳雨龍王俏娜付愛葉汪振炯王仁雷
    食品工業(yè)科技 2017年9期
    關鍵詞:菊苣液料超聲波

    許 芳,吳雨龍,王俏娜,付愛葉,汪振炯,王仁雷,華 春,*

    (1.南京師范大學生命科學學院,江蘇南京 210046; 2.南京曉莊學院食品科學學院,江蘇南京 211171; 3.江蘇第二師范學院生命科學與化學化工學院,江蘇南京 210013)

    超聲波協同酶法提取菊苣根多糖工藝優(yōu)化

    許 芳1,2,吳雨龍2,王俏娜2,付愛葉1,2,汪振炯2,王仁雷3,華 春2,*

    (1.南京師范大學生命科學學院,江蘇南京 210046; 2.南京曉莊學院食品科學學院,江蘇南京 211171; 3.江蘇第二師范學院生命科學與化學化工學院,江蘇南京 210013)

    目的:優(yōu)化超聲波協同酶法提取菊苣根多糖的工藝條件。方法:采用中心組合設計方法(Box-Behnken Design),建立以超聲溫度、超聲時間、加酶量、酶解時間和液料比對菊苣根多糖得率的影響的二次回歸模型。結果:菊苣根多糖提取的最佳工藝條件為超聲溫度45 ℃、超聲時間35 min、加酶量1.6%、酶解時間1.8 h、液料比44∶1 (mL/g),在此條件下,菊苣根多糖的得率為46.75%,與預測得率47.71%接近。結論:該回歸模型有極顯著性,可以作為菊苣根多糖提取工藝的回歸分析和參數優(yōu)化。

    菊苣根,多糖,超聲波,纖維素酶,中心組合設計方法

    菊苣(CichoriumintybusL.)為菊科菊苣屬多年生藥食兩用草本植物,根肉質、短粗。菊苣主要分布在歐洲、亞洲、北非,我國北京、遼寧、新疆、江西等省市也有分布[1],是維吾爾族和蒙古族常用藥材。菊苣根富含多糖、生物堿、萜類等多種生物活性物質[2-5],而菊苣多糖在降血糖[6-7]、降血脂[8]、抗氧化[9]、保肝[10]、延緩衰老[11-12]、提高機體免疫力[14]等方面都表現出了較好的生物活性。陳立閣等[13]更是發(fā)現奇可力多糖(菊苣多糖)具有抗腫瘤作用,主要體現在菊苣多糖能明顯抑制S180荷瘤小鼠腫瘤的生長,延長S180荷瘤小鼠的生存時間,另對肝癌、胃癌細胞生長亦具有一定抑制作用。菊苣多糖的開發(fā)與應用也已成為食品、醫(yī)藥、生物工程等領域的重要研究方向。

    關于植物多糖的提取方法有很多種,如熱水浸提法、酸提、堿提、超濾膜法提取、CO2超臨界萃取法等,但傳統(tǒng)的熱水浸提法提取的效率較低且耗時;酸提法和堿提法的酸堿度和作用時間需嚴格控制,否則會引起多糖的糖苷鍵斷裂,影響多糖的提取率;超濾膜法必須知道多糖的相對分子質量,對于未知的多糖則無法控制;CO2超臨界萃取法成本相對較高。目前,菊苣多糖的提取通常采用熱水浸提法[15],近年來還出現了超聲波提取法、微波提取法以及膜分離集成技術等[16-17],但有關超聲波協同酶法提取菊苣根多糖的研究尚未見報道。超聲波法在植物活性成分提取中具有提高提取率,縮短提取時間,增強提取物活性,節(jié)約能源等優(yōu)勢,具有常規(guī)提取方法難以達到的提取效果[18]。植物細胞的細胞壁主要由纖維素組成,而植物細胞中的活性成分被包裹在細胞壁內,利用纖維素酶特異性水解纖維素,破壞細胞壁,有利于胞內活性成分溶出,從而提高了植物活性成分的提取率[19]。有研究表明,在植物多糖的提取中,超聲波與纖維素酶同時使用,具有協同作用,能顯著提高多糖的提取率[20]。本實驗利用中心組合設計方法(Box-Behnken Design),采用五因素三水平的響應曲面分析法優(yōu)化了超聲波協同酶法提取菊苣根多糖的工藝條件,不僅大大的提高了菊苣根多糖的得率,降低了成本,而且不影響菊苣根多糖的結構與生物活性,為合理開發(fā)利用菊苣資源,提高其附加值以及綜合應用提供可靠的技術支持。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器

    菊苣根 黃石市潤生農業(yè)科技發(fā)展有限公司,烘干后粉碎備用;纖維素酶(酶比活力>400 U/mg) 南京奧多福尼生物科技有限公司;其它試劑均為分析純。

    超聲波清洗儀KQ.250B 江蘇省昆山市超聲儀器有限公司;RE-3000旋轉蒸發(fā)器、SHZ-Ⅲ型循環(huán)水真空泵 上海亞榮生化儀器廠;T6紫外-可見分光光度計 北京普析通用儀器有限責任公司;IEC1010-1臺式冷凍干燥機 美國Labconco公司;BR4I高速冷凍離心機 美國熱電公司。

    1.2 實驗方法

    1.2.1 菊苣根多糖的提取工藝 菊苣根(切成片狀)→烘干(60 ℃干燥至水分含量為5%)→粉碎→過60目篩→除脂→準確稱取一定量菊苣根粉末→加蒸餾水→加纖維素酶→調節(jié)pH→酶解→滅酶→超聲波處理→離心取上清液(4500 r/min,10 min)→加5倍體積95%乙醇沉淀→4 ℃冰箱靜置過夜→離心取沉淀(4500 r/min,10 min)→收集沉淀冷凍干燥得菊苣根多糖→加水溶解→苯酚-硫酸法測吸光度[21]。

    1.2.2 菊苣根多糖含量的測定

    1.2.2.1 標準曲線的繪制 精確稱取10.00 mg葡萄糖(105 ℃干燥至質量恒重),置于100 mL容量瓶中定容。精確量取葡萄糖標準溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4 mL,分別置于比色管中,按苯酚-硫酸法測定各管吸光度,另取蒸餾水2 mL(按苯酚-硫酸法進行顯色反應),作為空白對照,于波長 490 nm 處測定吸光度,以葡萄糖濃度為橫坐標,吸光度為縱坐標,繪制標準曲線,得標準曲線回歸方程:y=7.56x+0.175,R2=0.9982。

    1.2.2.2 菊苣根多糖得率的測定 取菊苣根多糖供試液1 mL于試管中,以去離子水補加到2 mL,按苯酚-硫酸法進行操作,于490 nm處測定吸光度,按標準曲線計算菊苣根多糖含量。菊苣根多糖得率按以下公式計算:

    式中:C為菊苣根多糖濃度,mg/mL;V為菊苣根多糖溶液體積,mL;N為稀釋倍數;M為菊苣根粉末質量,g。

    1.2.3 單因素實驗 以蒸餾水為提取溶劑,超聲功率為250 W,依次固定超聲溫度40 ℃、超聲時間40 min、加酶量2%、酶解時間1.5 h、液料比40∶1 (mL/g),分別考察不同超聲溫度、超聲時間、加酶量、酶解時間和料液比對菊苣根多糖得率的影響,各實驗重復3次。

    1.2.4 中心組合設計方法優(yōu)化提取工藝設計 在單因素實驗結果的基礎上,采用Box-Behnken Design設計方法[22],以超聲溫度、超聲時間、加酶量、酶解時間和料液比為自變量,以菊苣根多糖得率為響應值設計實驗,并采用響應面分析法來分析各因素之間的交互作用,以確定最佳的工藝條件。實驗因素和水平見表1。

    表1 中心組合設計的因素與水平設計

    1.2.5 統(tǒng)計學分析 采用Graphpad prism 6對數據進行處理和分析,并采用Design-Expert 8.0軟件對響應面實驗結果進行分析,考察二次回歸模型及因素的顯著性(p<0.05)。

    2 結果與分析

    2.1 單因素實驗結果

    圖1 超聲溫度、超聲時間、加酶量、酶解時間和液料比對菊苣根多糖得率的影響Fig.1 Effect of ultrasonic temperature,ultrasonic time,enzyme dosage,enzymolysis time and liquid-to-solid ratio on extraction yield of Chicory roots polysaccharides

    由圖1A可知,菊苣根多糖得率隨著超聲溫度的增加而提高,當溫度達到40 ℃時菊苣根多糖得率達到最高(37.44%),后隨著超聲溫度的增加菊苣根多糖得率開始下降。原因可能是隨著超聲溫度的升高,水中的小氣泡(空化核)增多,對產生空化作用有利,菊苣根細胞破裂加速,菊苣根多糖溶出增加,但超聲溫度過高時,氣泡中的蒸氣壓太高,將增強氣泡閉合時的緩沖作用,導致空化作用減弱,導致菊苣根多糖的得率降低[23];另隨著超聲溫度的升高,纖維素酶的活性增強,菊苣根多糖溶出增加,但當超聲溫度過高時會導致纖維素酶失活,從而影響菊苣根多糖的得率[24]。因此,選擇40 ℃作為本實驗超聲溫度。

    由圖1B可知,菊苣根多糖得率隨著超聲時間的增加而提高,當時間達到40 min時菊苣根多糖得率達到最高(38.29%),后隨著超聲時間的增加菊苣根多糖得率開始下降。原因可能是超聲波具有的機械效應,空化效應和熱效應使得菊苣根的細胞瞬間破碎,從而使菊苣根多糖快速溶出,而超聲時間過長可能會導致多糖被破壞,影響菊苣根多糖的得率[25]。另外,因超聲時間過長耗能增加,成本升高,考慮到生產成本,暫定超聲時間為40 min。

    由圖1C可知,菊苣根多糖得率隨著添加的纖維素酶量的增加而不斷提高,當加酶量為1.5%時,菊苣根多糖含量為35.89%;當加酶量超過1.5%后,隨著加酶量的增加,菊苣根多糖得率的增加趨于平緩。原因可能是由于菊苣根細胞的細胞壁含大量纖維素,經纖維素酶酶解后導致細胞壁被破壞,從而使得菊苣根多糖快速溶出,菊苣根多糖得率增加;當加酶過多時由于沒有反應底物,從而使得菊苣根多糖得率維持在穩(wěn)定的水平[26]。考慮到增加纖維素酶對菊苣根多糖提取率的提高沒有明顯作用,故選擇纖維素酶的添加量為1.5%。

    由圖1D可知,菊苣根多糖得率隨著酶解時間的增加而不斷提高,當酶解時間為2.0 h時,菊苣根多糖含量達37.58%;當酶解時間超過2.0 h時,隨著時間的延長,菊苣根多糖得率趨于平緩甚至略有下降。原因可能是剛開始酶的底物比較充足,隨著時間的延長,底物不斷減少直至酶解反應結束時,即使酶解時間繼續(xù)延長,菊苣根多糖得率也不會繼續(xù)增加,甚至可能由于酶解時間的延長,其它因素對多糖造成破壞,反而使多糖得率降低,這與玄光善等[26]提取樺褐孔菌多糖的結果類似,所以最適酶解時間為2.0 h。

    由圖1E可知,菊苣根多糖得率隨著液料比的增加而不斷提高,當液料比達40∶1 (mL/g)時,菊苣根多糖得率達最大值(35.25%),此后隨著液料比的增加菊苣根多糖得率反而降低。原因可能是液料比越大,即水溶劑用量越大,越有利于水溶性菊苣根多糖的溶出,導致菊苣根多糖得率增加,但當液料比達一定值后,隨著水溶劑用量的增加,會造成提取液中纖維素酶濃度的降低,也會造成單位提取液中菊苣根多糖濃度的降低,導致菊苣根多糖提取率的下降,同時還增加了后續(xù)濃縮工作中的能耗[26]。因此,綜合提取效果和降低成本等方面考慮,選擇液料比為40∶1 (mL/g)左右比較合適。

    2.2 中心組合設計實驗結果分析

    2.2.1 菊苣根多糖得率回歸模型的建立與分析 中心組合設計實驗結果分析見表2,運用Design-Expert 8.0軟件進行多元回歸擬合,建立以菊苣根多糖得率與各提取條件之間的響應面回歸模型,得二次多項式回歸方程:

    Y=43.12+2.22X1-2.80X2+4.21X3-1.66X4-1.06X5-3.60X1X2+0.68X1X3-1.68X1X4+8.95X1X5+1.10X2X3+4.45X2X4+0.65X2X5+1.53X3X4-0.15X3X5-4.50X4X5-7.24X12-4.21X22+1.62X32-4.09X42-6.26X52

    表2 中心組合設計實驗設計與結果

    為驗證回歸方程的有效性,對菊苣根多糖得率的回歸模型進行方差分析,結果見表3。由表3可知,菊苣根多糖得率的回歸模型具有極顯著性(p<0.0001),且失擬性具有不顯著性(p>0.05),說明該回歸模型比較好。Joglekar等[27]指出復相關系數(R2)大于0.80,且校正復相關系數(AdjR2)和預測復相關系數(PredR2)較為接近的情況下,表明方程的擬合度較好?;貧w方程中R2=0.9700,說明該模型能夠解釋97.00%響應值的變化;AdjR2=0.9460,PredR2=0.9263,二者較為接近,說明該模型具有較好的回歸性。因此,該回歸方程可以很好的對超聲波法協同酶法提取菊苣根多糖的得率進行預測與分析。從5個因素對菊苣根多糖得率的影響來看,一次項中X2、X3、X5,二次項中X12、X22、X42、X52,交互項中X1X2、X1X5、X2X4、X4X5對菊苣根多糖得率影響極顯著。由F值可知,各因素對菊苣根多糖得率的影響次序依次為X3>X2>X5>X4>X1。

    表3 菊苣根多糖得率回歸模型方差分析表

    2.2.2 菊苣根多糖得率響應面兩因素具明顯交互作用分析 由圖2A可知,當超聲時間一定時,菊苣根多糖得率隨超聲溫度的升高呈先上升后下降的趨勢;當超聲溫度一定時,菊苣根多糖得率隨超聲時間的延長呈先上升后下降趨勢。由圖2B可知,當液料比一定時,菊苣根多糖得率隨超聲溫度的升高呈先上升后下降的趨勢;當超聲溫度一定時,菊苣根多糖得率隨液料比的增加也呈先上升后下降的趨勢。由圖2C可知,當酶解時間一定時,菊苣根多糖得率隨超聲時間的增加呈先上升后下降的趨勢;當超聲時間一定時,菊苣根多糖得率隨酶解時間的延長而上升。由圖2D可知,當液料比一定時,菊苣根多糖得率隨酶解時間的延長而上升;當酶解時間一定時,菊苣根多糖得率隨液料比的增加呈先上升后下降的趨勢。

    2.2.3 菊苣根多糖最佳提取工藝條件的確定和驗證 根據二項回歸模型的預測,得出菊苣根多糖最佳提取工藝條件為超聲溫度44.24 ℃、超聲時間35.51 min、加酶量1.58%、酶解時間1.73 h、液料比43.76∶1(mL/g)??紤]到實際操作的便利性,修正菊苣根多糖最佳提取工藝條件為超聲溫度45 ℃、超聲時間35 min、加酶量1.6%、酶解時間1.8 h、液料比44∶1 (mL/g),在此條件下,菊苣根多糖的實際得率為46.75%(3次平行實驗),與預測得率47.71%接近,表明該模型與實際情況擬合較好,可以用來預測實驗結果,可以作為超聲波協同酶法提取菊苣根多糖的工藝的回歸分析和參數優(yōu)化。

    超聲波協同酶法可以使植物組織的細胞結構被破壞,使得植物組織中的多糖成分快速溶解到提取溶劑中,使得多糖提取率明顯高于傳統(tǒng)提取法,而且對多糖的結構和活性無影響[28]。Ebringerova等[29]研究表明在一定的超聲波條件下不僅不會造成水溶性活性分子結構的破壞和分子特性的改變,而且還通過免疫細胞實驗證明超聲波有利于增強提取物的生物活性。本實驗采用超聲波協同纖維素酶法提取菊苣根中的多糖,得率達46.75%,與莊紅艷等[30]提出的關于菊苣中菊苣多糖的含量不低于43.056%相一致,且顯著高于爾西丁·買買提等[15]以及周俊等[31]用傳統(tǒng)方法提取菊苣多糖的得率(分別為3.80 mg/g和7.0745 mg/g),提示菊苣根多糖具有較好的開發(fā)潛力。

    3 結論

    采用超聲波協同酶法提取菊苣根中多糖,根據單因素實驗和中心組合設計實驗研究獲得菊苣根多糖提取的最佳工藝條件為超聲溫度45 ℃、超聲時間35 min、加酶量1.6%、酶解時間1.8 h、液料比44∶1 (mL/g),且在此條件下菊苣根多糖的最終得率為46.75%,證明該回歸模型可以優(yōu)化菊苣根多糖提取工藝的參數,提高多糖得率,節(jié)約成本,具有一定實際參考價值。

    [1]中國科學院中國植物志編輯委員會. 中國植物志(第80(1)卷)[M]. 北京:科學出版社,1997:8.

    [2]何軼,郭亞健,高云艷. 菊苣根化學成分的研究[J]. 中國中藥,2002,27(3):209-210.

    [3]Haas C,Steinwandter V,De Apodaca E D,et al. Production of PHB fromChicoryRoots-Comparison of Three Cupriavidus necator Strains[J]. Chemical and Biochemical Engineering Quarterly,2015,29(2):99-112.

    [4]Sanchez-Saenz C M,de Oliveira R A,Park K J. Evaluation ofChicoryRoots Submitted to Htst Drying Process and Its Optimization[J]. Journal of Food Process Engineering,2015,38(1):57-66.

    [5]Graziani G,Ferracane R,Sambo P,et al. Profilingchicorysesquiterpene lactones by high resolution mass spectrometry[J]. Food Research International,2015,67(1):193-198.

    [6]Pedersen A,Sandstrom B,Van Amelsvoort J M. The effect of ingestion of inulin on blood lipids and gastrointestinal symptoms in healthy females[J]. The British Journal of Nutrition,1997,78(2):215-222.

    [7]Jackson K G,Taylor G R,Clohessy A M,et al. The effect of the daily intake of inulin on fasting lipid,insulin and glucose concentrations in middle-aged men and women[J]. The British Journal of Nutrition,1999,82(1):23-30.

    [8]Kim M,K K Shin. The water-soluble extract ofchicoryinfluences serum and liver lipid concentrations,cecal short-chain fatty acid concentrations and fecal lipid excretion in rats[J]. J Nutr,1998,128:1731-1736.

    [9]Yook J S,Kim M,Pichiah P B,et al. The Antioxidant Properties and Inhibitory Effects on HepG2 Cells ofChicoryCultivated Using Three Different Kinds of Fertilizers in the Absence and Presence of Pesticides[J]. Molecules,2015,20(7):12061-12075.

    [10]Farhangi M A,Javid A Z,Dehghan P. The effect of enrichedchicoryinulin on liver enzymes,calcium homeostasis and hematological parameters in patients with type 2 diabetes mellitus:A randomized placebo-controlled trial[J]. Primary Care Diabetes,2016,10(4):265-271.

    [11]戚穎欣,曹柏營,鄭鴻雁,等. 奇可力多糖抗衰老作用的實驗研究[J]. 食品科學,2008,29(9):564-566.

    [12]Lin W Q,Liu C Q,Yang H,et al.Chicory(CichoriumintybusL.)Chicory,a typical vegetable in Mediterranean diet,exerts a therapeutic role in established atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient mice[J].Molecular Nutrition & Food Research,2015,59(9):1803-1813

    [13]陳立閣,昌友權,鄭鴻雁,等. 奇可力多糖抗腫瘤作用的實驗研究[J]. 食品科學,2004,25(11):276-280.

    [14]宮強,阮夢蝶,馬麗蘋,等. 菊粉對小鼠的免疫調節(jié)作用[J]. 食品科學,2016,37(7):204-207.

    [15]爾西丁·買買提,葛亮,劉波,等. 基于正交實驗法優(yōu)選菊苣中總多糖的提取工藝研究[J]. 光譜實驗室,2009,26(4):963-966.

    [16]T Kamada,M Nakajima,H Nabetani,et al. Availability of membrane technology for purifying and concentrating oligosaccharides[J]. European Food Research and Technology,2002,214(5):435-440.

    [17]胡超,白史且,游明鴻,等. 菊苣多糖的研究進展[J]. 草業(yè)與畜牧,2013,(2):44-48.

    [18]馬亞琴,葉興乾,吳厚玖,等. 超聲波輔助提取植物活性成分的研究進展[J]. 食品科學,2010,21(31):459-463.

    [19]劉曉晶,李田,翟增強. 纖維素酶的研究現狀及應用前景[J]. 安徽農業(yè)科學,2011,39(4):1920-1921,1924.

    [20]魏明,邵平,姚紅,等. 超聲波協同纖維素酶法提取霍山石斛多糖的研究[J]. 食品工業(yè)科技,2009,30(3):199-201.

    [21]張志軍,劉建華,李淑芳,等. 靈芝多糖含量的苯酚硫酸法檢測研究[J]. 食品工業(yè)科技,2006,27(2):193-195.

    [22]張馳.六西格瑪實驗設計[M].廣州:廣東經濟出版社,2003:289-307.

    [23]Shen XH,Xiong QY,Shi X,et al. Ultrasonic temperature distribution reconstruction for circular area based on Markov radial basis approximation and singular value decomposition[J]. Ultrasonics,2015,62(12):174-185.

    [24]陶濤,李立祥,張芳,等. 超聲波協同纖維素酶對黃精多糖和皂苷的提取研究[J].食品工業(yè)科技,2012,33(9):271-275.

    [25]Roosta M,Ghaedi M,Shokri N,et al. Optimization of the combined ultrasonic assisted/adsorption method for the removal of malachite green by gold nanoparticles loaded on activated carbon:experimental design[J]. Spectrochim Acta A Mol Biomol Spectrosc,2014,118(24):55-65.

    [26]玄光善,王艷波,王延龍. 纖維素酶輔助提取樺褐孔菌多糖的研究[J]. 中南藥學,2014,12(7):657-660.

    [27]Joglekar A M,May A T. Product excellence through design of experiments[J]. Cereal Food World,1987,32(12):857-868.

    [28]張燕,張樹淼,王飛,等. 近年來植物多糖提取方法研究進展[J]. 農產品加工,2015,14(6):65-68.

    [29]Ebringerova A,Hromadkova Z,Hibalova V,et al. Effect of ultrasound on the immunogenic corn cob xylan[J]. Ultrason Sonochem,1997,4(4):311-315.

    [30]莊紅艷,張冰,劉小青,等. 菊苣藥材中菊苣多糖的含量測定研究[J]. 中成藥,2011,33(1):114-117.

    [31]周俊,張冰,林志健,等. 菊苣地上部分藥材中綠原酸、多糖的含量測定研究[J]. 中華中醫(yī)藥學刊,2014(8):1864-1866.

    Optimization of extraction technology of polysaccharide from roots ofCichoriumintybusL. by ultrasound assisted with enzyme hydrolysis

    XU Fang1,2,WU Yu-long2,WANG Qiao-na2,FU Ai-ye1,2,WANG Zhen-jiong2,WANG Ren-lei3,HUA Chun2,*

    (1.College of Life Sciences,Nanjing Normal University,Nanjing 210046,China; 2.School of Food Science,Nanjing Xiaozhuang University,Nanjing 211171,China; 3.School of Life Science and Chemistry,Jiangsu Second Normal University,Nanjing 210013,China)

    Objective:Optimization of extraction technology of polysaccharide from roots ofCichoriumintybusL. by ultrasound assisted with enzyme hydrolysis. Methods:To establish the effects of ultrasonic temperature,ultrasonic time,enzyme dosage,enzyme solution time and liquid to solid ratio onChicoryroots polysaccharide yield of quadratic regression model by using Box-Behnken design. Results:The optimum extraction conditions of polysaccharide from roots ofCichoriumintybusL. were ultrasonic temperature 45 ℃,ultrasonic time 35 min,enzyme dosage 1.6%,enzymolysis time 1.8 h,liquid-to-solid ratio of 44∶1 (mL/g). Under these conditions,the extraction ofChicoryroots polysaccharide was 46.75%,closed to the predicted yield of 47.71%. Conclusion:The regression model was significant,could be used as thechicoryroots polysaccharide extraction process of regression analysis and parameter optimization.

    Chicoryroots;polysaccharide;ultrasound;cellulose;Box-Behnken Design

    2016-11-14

    許芳(1990-),女,碩士研究生,研究方向:植物生理生化,E-mail:wyl_8080@sina.com。

    *通訊作者:華春(1963-),女,本科,教授,研究方向:植物生理生化,E-mail:hc3501988@163.com。

    國家高技術研究發(fā)展計劃(2012AA021701);國家自然科學基金(21376112);江蘇省自然科學基金(BK20141081);南京市環(huán)境科學與工程重點學科建設項目(20141123);江蘇省高等學校大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓練計劃項目(201611460001Z)。

    TS201.1

    B

    1002-0306(2017)09-0168-07

    10.13386/j.issn1002-0306.2017.09.024

    猜你喜歡
    菊苣液料超聲波
    快樂環(huán)游記
    新型多功能飲品復合調配分離瓶的研發(fā)
    科技視界(2018年22期)2018-10-08 01:41:38
    基于Niosll高精度超聲波流量計的研究
    電子制作(2018年17期)2018-09-28 01:56:38
    蝙蝠的超聲波
    超聲波流量計的研究
    電子制作(2016年21期)2016-05-17 03:52:47
    超聲波流量計在蘭干渠上的應用
    菊苣無公害栽培技術及利用
    紅旗農場菊苣高產栽培
    混砂機液料流量的精確控制
    流量反饋控制在呋喃樹脂混砂機上的應用
    又粗又硬又长又爽又黄的视频 | 丰满的人妻完整版| 91久久精品国产一区二区成人| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 特级一级黄色大片| 久久欧美精品欧美久久欧美| 深夜精品福利| 国产精华一区二区三区| 亚洲第一电影网av| 在线a可以看的网站| 少妇被粗大猛烈的视频| 青青草视频在线视频观看| 国产精品一区www在线观看| 丝袜喷水一区| av在线蜜桃| 久久久久久久久大av| 欧美激情在线99| 美女高潮的动态| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 国产精品一区二区性色av| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 最近中文字幕高清免费大全6| 日韩一区二区三区影片| 欧美激情国产日韩精品一区| 日本与韩国留学比较| 成年女人永久免费观看视频| 99热全是精品| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 午夜老司机福利剧场| 国产精品久久久久久久久免| 大香蕉久久网| 精品人妻视频免费看| 国产精品精品国产色婷婷| 最近的中文字幕免费完整| 亚洲三级黄色毛片| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| АⅤ资源中文在线天堂| 少妇人妻精品综合一区二区 | 国产精品久久久久久精品电影| 日日摸夜夜添夜夜爱| 男人狂女人下面高潮的视频| 亚洲国产精品合色在线| 日本黄大片高清| 亚洲欧美精品专区久久| 99热网站在线观看| 一夜夜www| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 国产成人精品一,二区 | 亚洲国产精品成人综合色| 韩国av在线不卡| 日韩大尺度精品在线看网址| 内射极品少妇av片p| 女同久久另类99精品国产91| 精品熟女少妇av免费看| 国产三级在线视频| 最新中文字幕久久久久| 一个人观看的视频www高清免费观看| 晚上一个人看的免费电影| 欧美激情国产日韩精品一区| 男女下面进入的视频免费午夜| а√天堂www在线а√下载| 在线免费观看不下载黄p国产| 三级毛片av免费| 不卡视频在线观看欧美| 国内精品一区二区在线观看| 国产高清不卡午夜福利| 看非洲黑人一级黄片| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 一级毛片久久久久久久久女| 免费观看的影片在线观看| 中文字幕制服av| 欧美人与善性xxx| 22中文网久久字幕| 五月玫瑰六月丁香| 亚洲精品影视一区二区三区av| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 一个人观看的视频www高清免费观看| 日韩亚洲欧美综合| 免费看日本二区| 欧美高清性xxxxhd video| 可以在线观看毛片的网站| 国内精品美女久久久久久| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 国产熟女欧美一区二区| 亚洲真实伦在线观看| 麻豆国产97在线/欧美| 亚洲最大成人手机在线| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 亚洲国产精品久久男人天堂| 直男gayav资源| 99久久精品一区二区三区| 亚洲国产精品合色在线| 此物有八面人人有两片| 91av网一区二区| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 麻豆乱淫一区二区| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 国产精品无大码| 色综合站精品国产| 三级毛片av免费| 午夜精品一区二区三区免费看| 麻豆一二三区av精品| 国语自产精品视频在线第100页| 日韩av不卡免费在线播放| 在线免费观看的www视频| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 一级黄片播放器| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 精品久久久久久久久久免费视频| 熟女电影av网| 一区福利在线观看| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 99热这里只有是精品在线观看| 国产激情偷乱视频一区二区| 国产熟女欧美一区二区| 蜜臀久久99精品久久宅男| 免费观看a级毛片全部| 久久精品国产自在天天线| 国产av不卡久久| 精品久久久久久久末码| 国产精品一二三区在线看| 日韩视频在线欧美| 亚洲经典国产精华液单| 日韩欧美精品v在线| 久久久久久国产a免费观看| 97热精品久久久久久| 亚洲精品456在线播放app| 免费一级毛片在线播放高清视频| 亚洲最大成人中文| 久久久午夜欧美精品| 国产私拍福利视频在线观看| 欧美zozozo另类| 一级av片app| 久久久久免费精品人妻一区二区| 插逼视频在线观看| 91久久精品国产一区二区三区| 青春草国产在线视频 | 国产一区二区亚洲精品在线观看| 午夜精品国产一区二区电影 | 色播亚洲综合网| 久久久a久久爽久久v久久| 91麻豆精品激情在线观看国产| 一个人观看的视频www高清免费观看| 国产 一区 欧美 日韩| 91久久精品电影网| 欧美在线一区亚洲| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 日韩中字成人| 欧美精品国产亚洲| 一个人免费在线观看电影| 人妻系列 视频| 国产精品99久久久久久久久| 午夜福利在线在线| 激情 狠狠 欧美| 在线观看午夜福利视频| 色尼玛亚洲综合影院| 久久鲁丝午夜福利片| 只有这里有精品99| 床上黄色一级片| 国内精品宾馆在线| 亚洲国产精品久久男人天堂| 亚洲欧美日韩东京热| av国产免费在线观看| 一级毛片久久久久久久久女| 国产精品一区www在线观看| 99热这里只有是精品50| 亚洲在久久综合| 久久精品人妻少妇| 亚洲综合色惰| 成人午夜高清在线视频| 最近2019中文字幕mv第一页| 乱码一卡2卡4卡精品| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 精华霜和精华液先用哪个| 国产视频首页在线观看| 国产片特级美女逼逼视频| 亚洲av成人精品一区久久| 美女脱内裤让男人舔精品视频 | 国产精品一区二区三区四区久久| 久久午夜福利片| 99热这里只有精品一区| 欧美不卡视频在线免费观看| 精品国产三级普通话版| 日日干狠狠操夜夜爽| 亚洲国产精品久久男人天堂| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 国模一区二区三区四区视频| 国产成人一区二区在线| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 亚洲图色成人| 久久久久久九九精品二区国产| 免费看美女性在线毛片视频| 免费观看精品视频网站| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 久99久视频精品免费| 黄色一级大片看看| 国产精品精品国产色婷婷| 一本精品99久久精品77| 少妇被粗大猛烈的视频| 人妻系列 视频| 人体艺术视频欧美日本| 一区二区三区四区激情视频 | 黄色视频,在线免费观看| 亚洲天堂国产精品一区在线| 久久精品国产自在天天线| 亚洲国产精品成人久久小说 | 午夜精品在线福利| .国产精品久久| 成年女人永久免费观看视频| 午夜久久久久精精品| 波多野结衣高清无吗| 97热精品久久久久久| 在线播放无遮挡| 久久精品国产清高在天天线| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 欧美一区二区精品小视频在线| 久久6这里有精品| 成人综合一区亚洲| 精华霜和精华液先用哪个| 久久久国产成人免费| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 色综合站精品国产| 天堂网av新在线| 看非洲黑人一级黄片| 人妻少妇偷人精品九色| 99视频精品全部免费 在线| 最近视频中文字幕2019在线8| 精品人妻一区二区三区麻豆| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 国产精品嫩草影院av在线观看| 不卡视频在线观看欧美| 黄色视频,在线免费观看| 国产在线精品亚洲第一网站| 久久久成人免费电影| 国产日本99.免费观看| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 69人妻影院| 国产精品野战在线观看| 婷婷六月久久综合丁香| 如何舔出高潮| 亚洲真实伦在线观看| 99久久精品国产国产毛片| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 夫妻性生交免费视频一级片| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 91麻豆精品激情在线观看国产| 久久久国产成人精品二区| 亚洲成人久久性| 亚洲五月天丁香| 国产伦理片在线播放av一区 | 又爽又黄a免费视频| 久久99蜜桃精品久久| 精品一区二区三区视频在线| 国产精品久久久久久久电影| 六月丁香七月| 岛国毛片在线播放| 一个人免费在线观看电影| 成人欧美大片| av又黄又爽大尺度在线免费看 | 国产av麻豆久久久久久久| 久久99热这里只有精品18| 亚洲成a人片在线一区二区| 色哟哟哟哟哟哟| 嫩草影院入口| 亚洲欧美成人精品一区二区| 国国产精品蜜臀av免费| 国产日韩欧美在线精品| 我的女老师完整版在线观看| 中出人妻视频一区二区| 2022亚洲国产成人精品| 久久精品夜色国产| 中文字幕av成人在线电影| 99久久精品国产国产毛片| 99久久九九国产精品国产免费| 最近视频中文字幕2019在线8| 亚洲三级黄色毛片| 国产高清视频在线观看网站| 国产高清三级在线| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 极品教师在线视频| 深夜a级毛片| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 免费观看精品视频网站| 深夜a级毛片| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 免费观看在线日韩| 禁无遮挡网站| 国产精品1区2区在线观看.| 午夜亚洲福利在线播放| 国产午夜精品论理片| 哪里可以看免费的av片| 男女那种视频在线观看| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 欧美高清性xxxxhd video| 精品人妻视频免费看| 在线免费观看不下载黄p国产| 亚洲欧美精品自产自拍| 一个人观看的视频www高清免费观看| 精品久久久久久成人av| 天堂中文最新版在线下载 | 噜噜噜噜噜久久久久久91| 国产色爽女视频免费观看| 国产精品av视频在线免费观看| 欧美3d第一页| 免费看a级黄色片| 精品一区二区三区视频在线| 亚洲成人久久性| 99久久精品国产国产毛片| av天堂中文字幕网| 国模一区二区三区四区视频| 国产老妇女一区| 夜夜爽天天搞| 一个人看的www免费观看视频| 免费大片18禁| 亚洲,欧美,日韩| 我的女老师完整版在线观看| 午夜老司机福利剧场| 精品午夜福利在线看| 老司机影院成人| 久久久久久久久中文| 草草在线视频免费看| 日本av手机在线免费观看| 亚洲美女搞黄在线观看| 看十八女毛片水多多多| 又粗又硬又长又爽又黄的视频 | 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 午夜亚洲福利在线播放| 亚洲久久久久久中文字幕| 国产一级毛片七仙女欲春2| 欧美性感艳星| 直男gayav资源| 在线观看av片永久免费下载| 亚洲av熟女| 美女被艹到高潮喷水动态| 国产一区二区三区av在线 | 波野结衣二区三区在线| 丰满乱子伦码专区| 亚洲av电影不卡..在线观看| 亚洲欧美精品自产自拍| 日本免费a在线| 国产成人精品一,二区 | 成人二区视频| 国产午夜福利久久久久久| 综合色av麻豆| 色尼玛亚洲综合影院| 12—13女人毛片做爰片一| 成人漫画全彩无遮挡| 欧美另类亚洲清纯唯美| 身体一侧抽搐| 观看美女的网站| 精品久久久噜噜| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 午夜精品在线福利| 天天一区二区日本电影三级| 国产成人精品婷婷| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 欧美区成人在线视频| 久久精品综合一区二区三区| 亚洲av不卡在线观看| 边亲边吃奶的免费视频| 日本爱情动作片www.在线观看| 亚洲av成人精品一区久久| 五月伊人婷婷丁香| 最近2019中文字幕mv第一页| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 乱人视频在线观看| 国产成人精品一,二区 | 亚洲最大成人中文| 99国产精品一区二区蜜桃av| 久久久久久久久久久免费av| 性色avwww在线观看| 高清午夜精品一区二区三区 | 只有这里有精品99| 99久国产av精品| 黄片wwwwww| 晚上一个人看的免费电影| 3wmmmm亚洲av在线观看| 亚洲图色成人| 国产私拍福利视频在线观看| 国内精品久久久久精免费| 国产高清视频在线观看网站| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 欧美性猛交黑人性爽| 久久久久久久久中文| 中国国产av一级| 欧美+日韩+精品| 在线观看美女被高潮喷水网站| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 久久精品国产亚洲av天美| 国产伦精品一区二区三区视频9| 国产久久久一区二区三区| 免费av毛片视频| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 国产高潮美女av| 国产麻豆成人av免费视频| 国产极品天堂在线| 性欧美人与动物交配| 欧美日韩精品成人综合77777| 99热这里只有精品一区| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 黄色欧美视频在线观看| 欧美性猛交黑人性爽| 久久久久免费精品人妻一区二区| av视频在线观看入口| 免费av不卡在线播放| 中国美女看黄片| 亚洲第一区二区三区不卡| 老司机影院成人| 插逼视频在线观看| 久久韩国三级中文字幕| 久久鲁丝午夜福利片| 乱人视频在线观看| 亚洲人成网站高清观看| 在线观看一区二区三区| 桃色一区二区三区在线观看| 国产午夜福利久久久久久| 色播亚洲综合网| 在线播放无遮挡| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国产乱人偷精品视频| 亚洲真实伦在线观看| 99久国产av精品国产电影| 小说图片视频综合网站| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 成人综合一区亚洲| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 亚洲欧美清纯卡通| 岛国毛片在线播放| 久久综合国产亚洲精品| 国产激情偷乱视频一区二区| 97超视频在线观看视频| 久久精品国产亚洲av天美| 日日啪夜夜撸| 亚洲国产精品成人综合色| 欧美激情久久久久久爽电影| 一本久久精品| 亚洲精品自拍成人| 午夜福利成人在线免费观看| 亚州av有码| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 超碰av人人做人人爽久久| 成年版毛片免费区| 国产精华一区二区三区| 亚洲精品日韩在线中文字幕 | 日韩欧美一区二区三区在线观看| 亚洲在线自拍视频| 激情 狠狠 欧美| 国产毛片a区久久久久| 午夜老司机福利剧场| 成人毛片a级毛片在线播放| 青春草国产在线视频 | 麻豆av噜噜一区二区三区| 国产一区二区在线观看日韩| 国产大屁股一区二区在线视频| 99久久中文字幕三级久久日本| 成人欧美大片| 一区二区三区四区激情视频 | 人妻少妇偷人精品九色| 两个人的视频大全免费| 亚洲最大成人手机在线| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 嫩草影院入口| 国产精品国产高清国产av| 综合色丁香网| 免费av观看视频| 精品久久国产蜜桃| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 我的女老师完整版在线观看| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 最新中文字幕久久久久| 欧美3d第一页| av在线观看视频网站免费| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 男的添女的下面高潮视频| 久久久色成人| 国产午夜福利久久久久久| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 一个人看的www免费观看视频| 91久久精品国产一区二区成人| 国产精品99久久久久久久久| 青青草视频在线视频观看| 伦精品一区二区三区| 午夜亚洲福利在线播放| 欧美日韩国产亚洲二区| 久久久久久大精品| 国产伦在线观看视频一区| 免费观看人在逋| 国产精品乱码一区二三区的特点| 亚洲av第一区精品v没综合| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 午夜亚洲福利在线播放| 亚洲,欧美,日韩| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 日韩在线高清观看一区二区三区| 亚洲精品国产成人久久av| 午夜免费男女啪啪视频观看| 久久久久久国产a免费观看| 成人午夜精彩视频在线观看| 欧美一区二区国产精品久久精品| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 成年女人永久免费观看视频| 国产精品野战在线观看| 色哟哟·www| 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产视频首页在线观看| 亚洲成av人片在线播放无| 激情 狠狠 欧美| 国产午夜精品论理片| 日韩成人av中文字幕在线观看| 国产探花极品一区二区| 两个人视频免费观看高清| 国产精品.久久久| 亚洲精品影视一区二区三区av| 国产精品一区二区在线观看99 | 国语自产精品视频在线第100页| 卡戴珊不雅视频在线播放| 免费av不卡在线播放| 午夜免费激情av| 99视频精品全部免费 在线| 午夜免费激情av| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 春色校园在线视频观看| 欧美三级亚洲精品| 毛片女人毛片| 寂寞人妻少妇视频99o| av女优亚洲男人天堂| 国产爱豆传媒在线观看| 午夜精品在线福利| 国产高潮美女av| 三级毛片av免费| av在线观看视频网站免费| 干丝袜人妻中文字幕| 深夜a级毛片| 欧美另类亚洲清纯唯美| 色综合亚洲欧美另类图片| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 国产精品一区二区三区四区久久| 国产欧美日韩精品一区二区| 亚洲无线在线观看| 欧美+日韩+精品| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 美女黄网站色视频| 免费人成在线观看视频色| or卡值多少钱| 色5月婷婷丁香| 亚洲av一区综合| 国产精品乱码一区二三区的特点| 免费人成视频x8x8入口观看| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 国产精品乱码一区二三区的特点| 免费搜索国产男女视频| 插逼视频在线观看| 简卡轻食公司| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| kizo精华| 亚洲最大成人手机在线| 黄片wwwwww| 国产在线男女| 在线观看午夜福利视频| 日韩欧美精品v在线| 亚洲三级黄色毛片| 国产成人a∨麻豆精品| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 亚洲国产精品国产精品| 超碰av人人做人人爽久久| 三级国产精品欧美在线观看| 精品久久久久久成人av| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 黄色欧美视频在线观看| 日日摸夜夜添夜夜爱| 亚洲精品亚洲一区二区| 真实男女啪啪啪动态图| 日本爱情动作片www.在线观看| 久久久久久九九精品二区国产| 久久久久久久久久久丰满| 国产精品女同一区二区软件| 三级国产精品欧美在线观看| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| av在线天堂中文字幕| 亚洲欧美精品自产自拍| 免费黄网站久久成人精品| 中国国产av一级| 三级国产精品欧美在线观看| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 我要看日韩黄色一级片| 身体一侧抽搐| 国产精品永久免费网站| 日本免费a在线| 久久热精品热| 久久人妻av系列| 丝袜美腿在线中文| 日本五十路高清| 亚洲在线自拍视频| 天天躁日日操中文字幕| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 联通29元200g的流量卡| av卡一久久| 亚洲自拍偷在线| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 亚洲精品国产av成人精品| 久久国产乱子免费精品| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 午夜福利视频1000在线观看| 一区福利在线观看| 麻豆成人av视频|