• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    長鏈非編碼RNA在乳腺癌的診斷和治療中的最新進展

    2017-06-05 14:15:01梁端林魏楊輝黃耀張衛(wèi)星李明
    浙江臨床醫(yī)學 2017年4期
    關(guān)鍵詞:靶點靶向特異性

    梁端林 魏楊輝 黃耀* 張衛(wèi)星 李明

    長鏈非編碼RNA在乳腺癌的診斷和治療中的最新進展

    梁端林 魏楊輝 黃耀* 張衛(wèi)星 李明

    隨著微陣列和深度測序等技術(shù)的進展,對非編碼RNA(ncRNA)有了更深入的理解。研究發(fā)現(xiàn)只有<2%的總基因組序列是蛋白質(zhì)編碼基因,>98%的基因組轉(zhuǎn)錄ncRNA。在過去,ncRNA被視作“轉(zhuǎn)錄噪聲”。但近來發(fā)現(xiàn),ncRNA在細胞分化和機體生長和代謝中發(fā)揮關(guān)鍵的調(diào)節(jié)作用[1]。NcRNA由一些眾所周知的RNA組成,如tRNA、snRNA、rRNA和snoRNA[2]。長鏈非編碼RNA(lncRNA)是ncRNA中最大的家族,具有重要的生理功能。最近在多種癌癥中檢測到lncRNA,包括乳腺癌,其參與乳腺癌的多個生物學過程,可能成為癌癥診斷,預后評估的潛在生物標志物和治療的靶點,在不遠的將來,其可能成為戰(zhàn)勝乳腺癌關(guān)鍵[3]。

    1 lncRNA的生物學特征

    LncRNA是一類不編碼蛋白質(zhì)的RNA分子,長度200 nt至100 kb[4]。以前對lncRNA的研究中,對lncRNA及其生物學作用的描述較少,無足夠的關(guān)于其功能的信息。近年來研究發(fā)現(xiàn),大多數(shù)的lncRNA由RNA聚合酶Ⅱ(RNA pol Ⅱ)轉(zhuǎn)錄,具有mRNA的部分特征,如5'端加帽,3'端多聚腺苷酸尾以及相似的剪切模式等[2,5]。lncRNA雖然序列保守性低,但多具有保守的二級結(jié)構(gòu)、剪切方式及亞細胞定位。序列特異性和結(jié)構(gòu)的保守性,表明lncRNA生物學功能的復雜多樣性。根據(jù)轉(zhuǎn)錄本來源,將lncRNA分為5類:基因間lncRNA,基因內(nèi)lncRNA,雙向lncRNA,正義lncRNA,反義lncRNA。

    2 lncRNA在乳腺癌發(fā)生、發(fā)展中的作用

    LncRNA的許多生物學功能是未知的,最近的研究表明lncRNA和乳腺癌的發(fā)生和發(fā)展有密切聯(lián)系。一些lncRNA在乳腺癌中異常表達,包括HOX轉(zhuǎn)錄反義基因間RNA(HOTAIR),肺腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)轉(zhuǎn)錄子-1(MALAT-1),,生長阻滯特異性轉(zhuǎn)錄子-5(GAS-5),長應激誘導非編碼轉(zhuǎn)錄子-5(LSINCT-5),類固醇受體RNA激活劑-1(SRA1),X非活性特異性轉(zhuǎn)錄子(XIST),H19和BC200[2,6]。一些lncRNA在某些細胞中特異性表達,可能成為其潛在的生物標志物或治療靶點[7]。在本文中,作者簡略的介紹一些lncRNA在乳腺癌中的表達及在乳腺癌進展中的作用,也討論lncRNA的臨床應用以及作為治療人類乳腺癌新方法的潛力。見表1。

    表1 一些參與乳腺癌進展的lncRNA

    除了上述lncRNA分子外,越來越多的lncRNA,包括MEG3、LOC554202、CCAT2和linRNA-ROR等,也相繼被發(fā)現(xiàn)在乳腺癌組織和癌細胞中異常表達,進而影響乳腺癌的發(fā)生和發(fā)展。

    3 lncRNA作為乳腺癌診斷的生物標志物

    可以用多種方法檢測lncRNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,包括微陣列技術(shù)[8],RNA測序,RT-PCR[9-11],northern印跡雜交,原位雜交(FISH),RNA干擾(RNAi)和RNA免疫共沉淀測序(RIP),RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀芯片(RIP-CHIP)[12-14]。

    在多種癌癥中均發(fā)現(xiàn)lncRNA的表達水平失調(diào)[15]。例如,DD3或PCA3,一種前列腺特異性lncRNA,被確定為早期檢測前列腺癌的可靠腫瘤標志物[16]。此外,在前列腺癌早期篩查中,尿沉渣測DD3比血液更敏感[17]。BC200在浸潤性乳腺癌[18]和其他腫瘤如卵巢癌、宮頸癌和肺癌中的表達高度上調(diào)。其在侵襲性乳腺癌中的高表達使其有望成為診斷標志物。HOTAIR的表達水平在原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性乳腺癌中均升高[19]。在乳腺癌組織中,同樣觀察到MALAT1 的中等或高水平表達[20]。有越來越多的證據(jù)表明乳腺癌細胞存在X染色體失活的改變[21]。在最近的一項研究中,研究了六種lncRNA:HOTAIR,H19,KCNQ1OT1,MEG3,MALAT1和ZFAS1,在45例乳腺癌患者正常乳腺上皮、導管原位癌(DCIS)和浸潤性癌(IC)中的表達,結(jié)果表明H19和HOTAIR,尤其是KCNQ1OT1是潛在的乳腺癌診斷的生物標志物[22]。

    lncRNA存在于體液中,是惡性腫瘤診斷和預后潛在的非侵入性生物標志物。例如,在最近的研究中,在乳腺癌患者和健康個體的血清中測量循環(huán)HOTAIR衍生的片段,結(jié)果顯示HOTAIR循環(huán)DNA是乳腺腫瘤的潛在生物標志物[23]。研究人員研究了乳腺癌患者的循環(huán)血清中l(wèi)ncRNA RP11-445H22.4,數(shù)據(jù)表示lncRNA RP11-445H22.4可作為潛在的乳腺癌腫瘤標志物[24]。

    4 lncRNA作為乳腺癌預后的生物標志物

    在最近的研究中,BC040587在乳腺癌組織和乳腺癌細胞系中顯著下調(diào),因此,BC040587可能成為評估乳腺癌預后新的生物標志物[25]。HOTAIR和BC200在乳腺癌中上調(diào),可用于預測乳腺癌患者的結(jié)果和腫瘤侵襲性[18]。最近,一項研究發(fā)現(xiàn),與正常組織比較,在48個乳腺癌組織中SPRY4-IT1(PRY4內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄物1)的表達顯著增加。此外,SPRY4-IT1的高表達水平與腫瘤大小和病理分期有關(guān)。因此,其可成為乳腺癌預后評估的生物標志物和乳腺癌治療的靶點[26]。在另一項研究中,研究人員發(fā)現(xiàn)嗜酸性粒細胞個體發(fā)育轉(zhuǎn)錄物(EGOT)在乳腺癌組織中下調(diào),并與腫瘤分期及乳腺癌患者的不良預后密切相關(guān)[27]。LINC 00472是一種新的lncRNA,研究結(jié)果表明,LINC 00472的表達上調(diào)預示乳腺腫瘤侵襲性小和更好的預后[28]。U79277是一種新的lncRNA,研究表明,U79277上調(diào)預示乳腺癌預后不良。

    5 lncRNA在乳腺癌治療中的臨床應用

    與蛋白質(zhì)編碼RNA比較,lncRNA更具有組織特異性,這種lncRNA的組織特異性使個體化用藥和對局部腫瘤的早期檢測成為可能,臨床也可又來預測治療效果和作為基因治療的靶點[29]。隨著時間流逝,發(fā)現(xiàn)更多的lncRNA參與乳腺腫瘤發(fā)生和發(fā)展。例如,Gupta等[19]的一項研究顯示HOTAIR在轉(zhuǎn)移性乳腺癌表達量是正常乳腺組織的上千倍,并且還顯示高水平的HOTAIR表達是轉(zhuǎn)移和死亡的重要預測物,獨立于其他風險因素如腫瘤體積,激素受體狀態(tài)和腫瘤分期。結(jié)腸癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄物-2(CCAT-2),一種乳腺癌中的新型lncRNA,在三個原發(fā)性乳腺癌患者組中,兩個組中顯示過表達,可用于無轉(zhuǎn)移患者生存預測,也可用于預測局部有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移且接受輔助化療的患者的總生存[30]。

    Meng等[31]發(fā)現(xiàn)一組4-lncRNA標簽可預測總體生存。4-lncRNA標簽(AK024118,U79277,AK000974,BC040204)可以作為分子診斷標志物和治療靶點,包括篩選出高風險患者進行輔助治療。在最近的研究中發(fā)現(xiàn)GAS-5水平降低減少了乳腺癌細胞對誘導凋亡常規(guī)化療藥的應答,恢復GAS-5的表達可能對乳腺癌化療有意義[32]。

    IncRNA臨床應用之一是應用RNAi介導的基因沉默來選擇性沉默致癌性lncRNA?;蛑委熓橇硪环N治療方法,通過向乳腺癌細胞遞送抑癌lncRNA。然而,應當注意,在實施治療性RNAi和基因治療中仍存在許多技術(shù)挑戰(zhàn)[14]。另一種策略是通過反義寡核苷酸(ASO)靶向作用于lncRNA,單鏈DNA或RNA分子可以高序列特異性結(jié)合其靶l(wèi)ncRNA,并通過RNAseH1激發(fā)其螯合[33]。該研究發(fā)現(xiàn)ASO阻斷MALAT-1后,可預防肺癌細胞的轉(zhuǎn)移。ASO可靶向作用于其它致癌性lncRNA,以限制其表達[34]。

    6 結(jié)論

    IncRNA作為基因表達的重要調(diào)節(jié)劑已經(jīng)表現(xiàn)出多種功能,它們能夠通過多種途徑改變?nèi)橄侔┻M展。大多數(shù)乳腺惡性腫瘤具有侵襲性,迫切需要找到具有高靈敏度和特異性的非侵入性生物標志物,以在早期檢測出乳腺癌并監(jiān)測其對治療的應答。

    雖然一些lncRNA已經(jīng)顯示出作為診斷標志物的潛力,可預測乳腺癌患者的分期、轉(zhuǎn)移和評估患者預后,但是將lncRNA應用到臨床中仍然存在著許多障礙。理想的lncRNA生物標志物需要在生物流體,如血漿和尿液中穩(wěn)定的檢出,但是循環(huán)lncRNA的穩(wěn)定性仍是未知,此外,循環(huán)lncRNA的來源不易檢出。lncRNA轉(zhuǎn)錄物及其轉(zhuǎn)錄后水平在疾病不同時期是波動的或難以確定的。最后,lncRNA作為生物標志物的可行性仍然需要進一步的臨床實踐和驗證[35]。

    基于RNA治療學的新進展,引入lncRNA作為治療的新靶點,可能為乳腺癌的安全和有效的治療提供新的希望。檢測循環(huán)腫瘤細胞的新技術(shù)可研究腫瘤的轉(zhuǎn)移階段。新的基因組編輯工具,如CRISPR / Cas9系統(tǒng)的應用可能為lncRNA研究鋪平了道路。使用對某些lncRNA具有高親和力和特異性的合成寡核苷酸,例如鎖定核酸修飾的寡核苷(LNA),可以用于靶向修飾lncRNA的表達。高通量篩選lncRNA-蛋白質(zhì)相互作用的小分子調(diào)節(jié)劑可以引入潛在的候選物以中斷l(xiāng)ncRNA-蛋白質(zhì)相互作用或加載區(qū)域靶基因組改變lncRNA,靶向調(diào)節(jié)lncRNA-蛋白的相互作用,增加化合物特異性并減少脫靶效應,實現(xiàn)更有選擇性的治療效果。然而,在RNA治療的發(fā)展中仍然存在許多共同的挑戰(zhàn),包括缺乏安全、特異、有效的遞送方法,無確定的最佳劑量方案及防止脫靶效應。此外,使用RNAi技術(shù)難以靶向作用于lncRNA轉(zhuǎn)錄物,這可能是由于它們的分子量過大和粗放的二級結(jié)構(gòu)。

    目前,對lncRNA的了解越來越多,他們?yōu)榘┌Y治療和生物標志物提供了一個新的研究領(lǐng)域。仍需要更深入的研究,以了解lncRNA作為乳腺癌早期診斷生物標志物、評估患者預后標志物和治療新靶點的潛力。本篇綜述介紹了一些研究熱門的lncRNA,在不久的將來,它們可能用于乳腺癌的臨床篩查、診斷、治療,在此之前仍需要做許多進一步的研究和臨床實踐。

    [1] Hansji H,Leung EY,Baguley BC,et al.Keeping abreast with long non-coding RNAs in mammary gland development and breast cancer.Front Genet,2014,5:379.

    [2] Vikram R,Ramachandran R,Abdul KS.Functional significance of long non-coding RNAs in breast cancer.Breast Cancer,2014,21(5):515-521.

    [3] Su X,Malouf GG,Chen Y,et al.Comprehensive analysis of long non-coding RNAs in human breast cancer clinical subtypes. Oncotarget, 2014,5(20):9864-9876.

    [4] Ye N,Wang B,Quan ZF,et al.Functional roles of long noncoding RNA in human breast cancer.Asian Pac J Cancer Prev, 2014,15(15):5993-5997.

    [5] Merry CR,Niland C,Khalil AM.Diverse functions and mechanisms of mammalian long noncoding RNAs.MethodsMol Biol,2015, 1206:1-14.

    [6] Serviss JT,Johnsson P,Grander D.An emerging role for long noncoding RNAs in cancer metastasis.Front Genet,2014,5:234.

    [7] Qiu MT, Hu JW, Yin R,et al. Long noncoding RNA: an emerging paradigm of cancer research.Tumour Biol,2013,34(2):613-620.

    [8] Xu N,Wang F,Lv M,et al.Microarray expression profile analysis of long non-coding RNAs in human breast cancer: a study of Chinese women.Biomed Pharmacother,2015,69:221-227.

    [9] Reza Y,Massoud S.Using RT-PCR and qRT-PCR to assay RNA markers in detection of peripheral colorectal circulating cells:A systemic review.Clinical Biochemistry,2011,44(13):S196.

    [10] Karimi S,Mohamadnia A,Nadji SA,et al.Expression of two basic mRNA biomarkers in peripheral blood of patients with non-small cell lung cancer detected by real-time rt-PCR,individually and simultaneously.Iran Biomed J,2015,19(1):17-22.

    [11] Yadegarazari R,Hassanzadeh T,Majlesi A,et al.Improved realtime rt-PCR assays of two colorectal cancer peripheral blood mRNA biomarkers: a pilot study.Iran Biomed J,2013,17(1):15-21.

    [12] Yan B,Wang ZH,Guo JT.The research strategies for probing the function of long noncoding RNAs.Genomics,2012,99(2):76-80.

    [13] Feng Y,Hu X,Zhang Y,et al.Methodsfor the study of long noncoding RNA in cancer cell signaling.MethodsMol Biol,2014,1165:115-143.

    [14] Juracek J, Iliev R, Svoboda M, et al. Long Noncoding RNAs in Breast Cancer: Implications for Pathogenesis,Diagnosis,and Therapy. Springer India,2014.

    [15] Gutschner T,Diederichs S.The hallmarks of cancer: a long noncoding RNA point of view.RNA Biol,2012,9(6):703-719.

    [16] Klecka J,Holubec L,Pesta M,et al.Differential display code 3(DD3/PCA3)in prostate cancer diagnosis.Anticancer Res,2010, 30(2):665-670.

    [17] Moradi SH,Goodarzi MT,Yadegar-Azari R,et al.Prostate cancer antigen 3 gene expression in peripheral blood and urine sediments from prostate cancer and benign prostatic hyperplasia patients versus healthy individuals.Urol J,2014,11(6):1952-1958.

    [18] Iacoangeli A,Lin Y,Morley EJ,et al.BC200 RNA in invasive and preinvasive breast cancer.Carcinogenesis,2004,25(11):2125-2133.

    [19] Gupta RA,Shah N,Wang KC,et al.Long non-coding RNA HOTAIR reprograms chromatin state to promote cancer metastasis. Nature,2010,464(7291):1071-1076.

    [20] Lin R,Maeda S,Liu C,et al.A large noncoding RNA is a marker for murine hepatocellular carcinomas and a spectrum of human carcinomas.Oncogene,2007,26(6):851-858.

    [21] Froberg JE,Yang L,Lee JT.Guided by RNAs: X-inactivation as a model for lncRNA function.J Mol Biol,2013,425(19):3698-3706.

    [22] Zhang Z,Peng Z,Olsen D,et al.Abstract 1498: Long non-coding RNA in situ hybridization signal patterns correlate with breast tumor pathology.Cancer Research,2014,74(19 Supplement):1498.

    [23] Zhang L,Song X,Wang X,et al.Circulating DNA of HOTAIR in serum is a novel biomarker for breast cancer.Breast Cancer Res Treat,2015,152(1):199-208.

    [24] Xu N, Chen F, Wang F, et al. Clinical significance of high expression of circulating serum lncRNA RP11-445H22.4 in breast cancer patients: a Chinese population-based study.Tumour Biol, 2015,36(10):7659-7665.

    [25] Chi Y,Huang S,Yuan L,et al.Role of BC040587 as a predictor of poor outcome in breast cancer.Cancer Cell Int,2014,14(1):123.

    [26] Shi Y,Li J,Liu Y,et al.The long noncoding RNA SPRY4-IT1 increases the proliferation of human breast cancer cells by upregulating ZNF703 expression.Mol Cancer,2015,14:51.

    [27] Xu SP, Zhang JF, Sui SY, et al. Downregulation of the long noncoding RNA EGOT correlates with malignant status and poor prognosis in breast cancer..Tumor Biology,2015,36(12):1-6.

    [28] Shen Y,Katsaros D,Loo LW,et al.Prognostic and predictive values of long non-coding RNA LINC00472 in breast cancer.Oncotarg et,2015,6(11):8579-8592.

    [29] Nguyen Q,Carninci P.Expression Specificity of Disease-Associated lncRNAs: Toward Personalized Medicine.Curr Top Microbiol Immunol,2016,394:237-258.

    [30] Redis RS,Sieuwerts AM,Look MP,et al.CCAT2,a novel long non-coding RNA in breast cancer: expression study and clinical correlations.Oncotarget,2013,4(10):1748-1762.

    [31] Meng J,Li P,Zhang Q,et al.A four-long non-coding RNA signature in predicting breast cancer survival.J Exp Clin Cancer Res,2014,33:84.

    [32] Pickard MR,Williams GT.Regulation of apoptosis by long non-coding RNA GAS5 in breast cancer cells: implications for chemotherapy.Breast Cancer Res Treat,2014,145(2):359-370.

    [33] Zong X,Huang L,Tripathi V,et al.Knockdown of nuclearretained long noncoding RNAs using modified DNA antisense oligonucleotides.MethodsMol Biol,2015,1262:321-331.

    [34] Gutschner T,Hammerle M,Eissmann M,et al.The noncoding RNA MALAT1 is a critical regulator of the metastasis phenotype of lung cancer cells.Cancer Res,2013,73(3):1180-1189.

    [35] Engstrom PF,Bloom MG,Demetri GD,et al.NCCN molecular testing white paper: effectiveness,efficiency,and reimbursement.J Natl Compr Canc Netw,2011,9(Suppl 6):S1-S16.

    518033 廣東醫(yī)學院附屬福田醫(yī)院(梁端林)

    518033 中山大學附屬第八醫(yī)院(魏楊輝 黃耀 張衛(wèi)星 李明)

    *通信作者

    猜你喜歡
    靶點靶向特異性
    如何判斷靶向治療耐藥
    維生素D受體或是糖尿病治療的新靶點
    中老年保健(2021年3期)2021-12-03 02:32:25
    中國臨床醫(yī)學影像雜志(2021年6期)2021-08-14 02:21:56
    毛必靜:靶向治療,你了解多少?
    肝博士(2020年5期)2021-01-18 02:50:18
    腫瘤免疫治療發(fā)現(xiàn)新潛在靶點
    精確制導 特異性溶栓
    BOPIM-dma作為BSA Site Ⅰ特異性探針的研究及其應用
    重復周圍磁刺激治療慢性非特異性下腰痛的臨床效果
    兒童非特異性ST-T改變
    心力衰竭的分子重構(gòu)機制及其潛在的治療靶點
    成人黄色视频免费在线看| 国产免费视频播放在线视频| 黄片wwwwww| 成人美女网站在线观看视频| 国产一区二区在线观看日韩| 色视频www国产| 精品国产三级普通话版| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 嘟嘟电影网在线观看| a 毛片基地| 国产精品欧美亚洲77777| 九九在线视频观看精品| 久久久久久久久久久丰满| 六月丁香七月| 日韩大片免费观看网站| 3wmmmm亚洲av在线观看| 国产有黄有色有爽视频| 久久亚洲国产成人精品v| 国产淫语在线视频| 国产在线一区二区三区精| 妹子高潮喷水视频| 亚洲欧美一区二区三区国产| 国产中年淑女户外野战色| 91在线精品国自产拍蜜月| 国产精品人妻久久久影院| 五月伊人婷婷丁香| 欧美精品一区二区大全| 免费观看av网站的网址| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 麻豆国产97在线/欧美| 国产精品不卡视频一区二区| videossex国产| 成人国产麻豆网| 成人毛片60女人毛片免费| 成人免费观看视频高清| 久久毛片免费看一区二区三区| 观看免费一级毛片| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 国产日韩欧美在线精品| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 国产乱人偷精品视频| 欧美日韩亚洲高清精品| a 毛片基地| 中文字幕精品免费在线观看视频 | a级一级毛片免费在线观看| 男人狂女人下面高潮的视频| 国产淫片久久久久久久久| 最近中文字幕高清免费大全6| 大码成人一级视频| 一区二区av电影网| 国产高潮美女av| 成人亚洲欧美一区二区av| 亚洲人成网站在线观看播放| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产精品一区www在线观看| 久久国产亚洲av麻豆专区| 色哟哟·www| 中国三级夫妇交换| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 在线精品无人区一区二区三 | 午夜福利高清视频| 精品少妇黑人巨大在线播放| 人妻系列 视频| 亚洲成人手机| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 国产真实伦视频高清在线观看| 三级国产精品欧美在线观看| 色5月婷婷丁香| 在线观看人妻少妇| 国产乱来视频区| 插阴视频在线观看视频| 免费av中文字幕在线| 又大又黄又爽视频免费| 国产永久视频网站| 色综合色国产| 伊人久久精品亚洲午夜| 日韩视频在线欧美| 亚洲图色成人| 免费看av在线观看网站| a级毛色黄片| 97精品久久久久久久久久精品| 简卡轻食公司| 国产成人aa在线观看| 国产精品99久久99久久久不卡 | 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 久久久国产一区二区| 男女边吃奶边做爰视频| 人妻夜夜爽99麻豆av| 欧美日韩综合久久久久久| 在线天堂最新版资源| 国产午夜精品一二区理论片| 美女高潮的动态| 亚洲精品国产av成人精品| 成人特级av手机在线观看| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 午夜福利在线在线| 免费观看av网站的网址| 国产成人freesex在线| 国产成人精品一,二区| 中文字幕亚洲精品专区| 少妇熟女欧美另类| 国产片特级美女逼逼视频| 国模一区二区三区四区视频| 国产在视频线精品| 99久久精品国产国产毛片| 99久国产av精品国产电影| 国产精品嫩草影院av在线观看| 99久国产av精品国产电影| 精品久久久精品久久久| 一二三四中文在线观看免费高清| 天堂8中文在线网| 大码成人一级视频| 国产一区亚洲一区在线观看| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 99精国产麻豆久久婷婷| 成年美女黄网站色视频大全免费 | 18+在线观看网站| 乱码一卡2卡4卡精品| 婷婷色av中文字幕| 水蜜桃什么品种好| 大香蕉97超碰在线| 国产av国产精品国产| 久久久精品94久久精品| av免费在线看不卡| 精品人妻视频免费看| 最黄视频免费看| 亚洲真实伦在线观看| 亚洲精品视频女| 午夜福利在线在线| 99热国产这里只有精品6| 日日撸夜夜添| 国产亚洲欧美精品永久| 亚洲精品国产成人久久av| 一级毛片久久久久久久久女| 日韩av免费高清视频| 中国三级夫妇交换| 亚洲av成人精品一二三区| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 国产亚洲欧美精品永久| 成人漫画全彩无遮挡| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 亚洲高清免费不卡视频| 成人影院久久| 成人国产av品久久久| 观看免费一级毛片| 亚洲成人一二三区av| 最近的中文字幕免费完整| 高清欧美精品videossex| 好男人视频免费观看在线| videossex国产| 久久 成人 亚洲| 嫩草影院新地址| 观看美女的网站| 99九九线精品视频在线观看视频| 91久久精品国产一区二区三区| 天美传媒精品一区二区| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 国产在视频线精品| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 热re99久久精品国产66热6| 国产爽快片一区二区三区| 新久久久久国产一级毛片| a级一级毛片免费在线观看| 欧美变态另类bdsm刘玥| 国产精品不卡视频一区二区| 99国产精品免费福利视频| 国产在线视频一区二区| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 亚洲经典国产精华液单| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 成人毛片60女人毛片免费| 国产精品国产三级专区第一集| 亚洲欧洲国产日韩| 久久久久久伊人网av| 国产精品av视频在线免费观看| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 最新中文字幕久久久久| 亚洲精品日韩av片在线观看| 久久久亚洲精品成人影院| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 青青草视频在线视频观看| 一级二级三级毛片免费看| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 啦啦啦在线观看免费高清www| 国产一区亚洲一区在线观看| 国产亚洲91精品色在线| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91 | 精品久久久久久电影网| 亚洲美女黄色视频免费看| 亚洲怡红院男人天堂| 精品午夜福利在线看| 亚洲国产精品一区三区| av国产久精品久网站免费入址| 国产美女午夜福利| 纯流量卡能插随身wifi吗| 亚洲图色成人| 国产色婷婷99| 午夜免费男女啪啪视频观看| 国产伦理片在线播放av一区| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 欧美3d第一页| 高清在线视频一区二区三区| 国产av一区二区精品久久 | 2022亚洲国产成人精品| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 1000部很黄的大片| 狂野欧美激情性bbbbbb| 国产69精品久久久久777片| 免费黄网站久久成人精品| 黄色欧美视频在线观看| 亚洲,欧美,日韩| 免费大片黄手机在线观看| 在线精品无人区一区二区三 | 97超视频在线观看视频| 五月玫瑰六月丁香| a级毛片免费高清观看在线播放| 视频中文字幕在线观看| 国精品久久久久久国模美| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 亚洲av免费高清在线观看| 最近2019中文字幕mv第一页| 99热这里只有是精品50| 欧美97在线视频| 亚洲成色77777| 在线观看免费日韩欧美大片 | 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 美女中出高潮动态图| 老司机影院毛片| 搡女人真爽免费视频火全软件| 一级毛片 在线播放| 久久久久久久精品精品| 插阴视频在线观看视频| 极品教师在线视频| 国产欧美日韩精品一区二区| 内射极品少妇av片p| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 亚洲精品自拍成人| 最黄视频免费看| 国产精品人妻久久久影院| 一级二级三级毛片免费看| 欧美成人a在线观看| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 极品教师在线视频| 联通29元200g的流量卡| 精品酒店卫生间| 91aial.com中文字幕在线观看| www.色视频.com| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 又黄又爽又刺激的免费视频.| 久久久久久久亚洲中文字幕| 午夜免费男女啪啪视频观看| 全区人妻精品视频| 亚洲精品,欧美精品| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 搡女人真爽免费视频火全软件| 久久精品久久精品一区二区三区| 久久久久精品性色| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国产伦在线观看视频一区| 亚洲av日韩在线播放| 亚洲综合色惰| 亚洲,一卡二卡三卡| 亚洲精品日本国产第一区| 韩国高清视频一区二区三区| 国产爽快片一区二区三区| 国产在线男女| 男女免费视频国产| 精品国产三级普通话版| 一级a做视频免费观看| 久久6这里有精品| 国产淫片久久久久久久久| 亚洲av不卡在线观看| 99久久精品一区二区三区| 在线看a的网站| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 国产精品免费大片| 色婷婷久久久亚洲欧美| av黄色大香蕉| 久久精品国产亚洲av涩爱| 成人毛片60女人毛片免费| 色吧在线观看| 超碰av人人做人人爽久久| 久久久久精品性色| 日韩视频在线欧美| 成人亚洲欧美一区二区av| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 九色成人免费人妻av| 国产精品熟女久久久久浪| 韩国高清视频一区二区三区| 亚洲人成网站在线观看播放| 男的添女的下面高潮视频| 大码成人一级视频| 国内精品宾馆在线| 日韩电影二区| 精品国产露脸久久av麻豆| 少妇丰满av| 精品少妇久久久久久888优播| 亚洲欧美一区二区三区国产| 精品亚洲成a人片在线观看 | 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 99久久综合免费| 如何舔出高潮| 伊人久久精品亚洲午夜| 少妇人妻一区二区三区视频| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 亚洲国产色片| 亚洲av成人精品一区久久| 波野结衣二区三区在线| 看非洲黑人一级黄片| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 在线免费十八禁| 极品少妇高潮喷水抽搐| 免费大片黄手机在线观看| 成人黄色视频免费在线看| 免费观看性生交大片5| 一级av片app| 久久久久久久精品精品| 国产精品熟女久久久久浪| 精品亚洲成国产av| av福利片在线观看| 观看av在线不卡| 国精品久久久久久国模美| 在线免费观看不下载黄p国产| 精品一品国产午夜福利视频| 亚洲av日韩在线播放| 99久久精品热视频| 毛片一级片免费看久久久久| 久久99热6这里只有精品| 国产在线男女| 日韩av不卡免费在线播放| 大片电影免费在线观看免费| videossex国产| 少妇精品久久久久久久| 全区人妻精品视频| 26uuu在线亚洲综合色| 日韩成人av中文字幕在线观看| 国产一级毛片在线| 女性生殖器流出的白浆| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 毛片一级片免费看久久久久| 亚洲国产成人一精品久久久| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 免费黄频网站在线观看国产| 免费看不卡的av| 国产 一区精品| 国产精品久久久久久av不卡| 国产乱人偷精品视频| 寂寞人妻少妇视频99o| 国产视频首页在线观看| 2021少妇久久久久久久久久久| 免费黄频网站在线观看国产| 国产高清不卡午夜福利| 日韩中文字幕视频在线看片 | 国产成人午夜福利电影在线观看| 日韩人妻高清精品专区| 一本色道久久久久久精品综合| 久久久色成人| 人妻 亚洲 视频| 国产高潮美女av| 亚洲欧洲日产国产| 亚洲综合精品二区| 亚洲人与动物交配视频| 精品一品国产午夜福利视频| 午夜免费男女啪啪视频观看| 国产极品天堂在线| 欧美少妇被猛烈插入视频| 三级国产精品片| 亚洲无线观看免费| 少妇人妻一区二区三区视频| 免费观看性生交大片5| 99久久人妻综合| av.在线天堂| 丰满人妻一区二区三区视频av| 日本一二三区视频观看| 中文字幕久久专区| 免费人妻精品一区二区三区视频| 在线观看国产h片| 免费看av在线观看网站| 国产在线视频一区二区| 国产真实伦视频高清在线观看| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 少妇精品久久久久久久| 婷婷色麻豆天堂久久| 精品久久久久久久末码| videos熟女内射| 国产精品久久久久久久电影| 亚洲精品色激情综合| 久久久久国产精品人妻一区二区| 色5月婷婷丁香| 精品国产乱码久久久久久小说| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 成年av动漫网址| 女性生殖器流出的白浆| 国产精品av视频在线免费观看| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 国产91av在线免费观看| 99精国产麻豆久久婷婷| 一级爰片在线观看| 成人毛片a级毛片在线播放| 国产精品欧美亚洲77777| 午夜精品国产一区二区电影| 高清午夜精品一区二区三区| 一级毛片电影观看| 99热这里只有是精品在线观看| 久久久久久久久久成人| 少妇丰满av| 精品久久久精品久久久| 男人添女人高潮全过程视频| 日韩人妻高清精品专区| 91久久精品国产一区二区成人| 国产久久久一区二区三区| 免费观看av网站的网址| 一级片'在线观看视频| 国产 精品1| 亚洲精品一二三| 一区在线观看完整版| 男男h啪啪无遮挡| 少妇精品久久久久久久| 国产亚洲5aaaaa淫片| 久久韩国三级中文字幕| 国产日韩欧美亚洲二区| 国产高潮美女av| 久久影院123| 久久久a久久爽久久v久久| 午夜福利网站1000一区二区三区| 男女国产视频网站| 欧美日韩亚洲高清精品| 人体艺术视频欧美日本| 精品久久国产蜜桃| 久久精品久久久久久久性| 国产欧美亚洲国产| 高清日韩中文字幕在线| 51国产日韩欧美| 国产在线视频一区二区| 亚洲欧洲国产日韩| 国产精品熟女久久久久浪| 国产精品人妻久久久久久| av国产免费在线观看| 亚洲av免费高清在线观看| 日韩成人伦理影院| 亚洲综合色惰| 亚洲人与动物交配视频| .国产精品久久| 麻豆国产97在线/欧美| 亚洲美女搞黄在线观看| 99热这里只有是精品50| av女优亚洲男人天堂| 十八禁网站网址无遮挡 | 亚洲精品aⅴ在线观看| 一区二区三区四区激情视频| 在线观看一区二区三区激情| 日本色播在线视频| 在线 av 中文字幕| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 丰满乱子伦码专区| 久久久久久人妻| 久久久午夜欧美精品| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 在线 av 中文字幕| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 在线观看三级黄色| 嘟嘟电影网在线观看| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 欧美成人一区二区免费高清观看| 97超碰精品成人国产| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 亚洲精品日本国产第一区| 一个人看视频在线观看www免费| 色吧在线观看| 国产v大片淫在线免费观看| 国产精品一区二区性色av| 91精品国产国语对白视频| 在线观看免费视频网站a站| 七月丁香在线播放| 成年av动漫网址| 日日啪夜夜撸| 男人和女人高潮做爰伦理| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 男女边吃奶边做爰视频| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 亚洲熟女精品中文字幕| 黄色视频在线播放观看不卡| 99精国产麻豆久久婷婷| 一区二区三区四区激情视频| 色5月婷婷丁香| 亚洲国产欧美人成| 一级爰片在线观看| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 性色av一级| av网站免费在线观看视频| 一区二区三区乱码不卡18| 伦精品一区二区三区| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 亚洲人成网站高清观看| 最新中文字幕久久久久| 啦啦啦啦在线视频资源| 男人舔奶头视频| 老司机影院成人| 99视频精品全部免费 在线| 成人漫画全彩无遮挡| 国产淫语在线视频| 高清日韩中文字幕在线| 亚洲人成网站在线播| av免费观看日本| 三级国产精品片| 国产高潮美女av| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 黄色一级大片看看| 亚洲精品乱久久久久久| 欧美高清性xxxxhd video| 欧美日韩视频精品一区| 亚洲欧美一区二区三区国产| 夫妻性生交免费视频一级片| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 特大巨黑吊av在线直播| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 女性被躁到高潮视频| 国产成人精品久久久久久| 久久久色成人| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 久久 成人 亚洲| 91精品一卡2卡3卡4卡| 777米奇影视久久| 亚洲av在线观看美女高潮| 国产精品无大码| 熟女人妻精品中文字幕| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 国产高清有码在线观看视频| 亚洲欧美成人精品一区二区| 2018国产大陆天天弄谢| 国产大屁股一区二区在线视频| 五月伊人婷婷丁香| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 日韩欧美 国产精品| 亚洲欧美清纯卡通| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 99久久中文字幕三级久久日本| 晚上一个人看的免费电影| 永久免费av网站大全| 国产免费一区二区三区四区乱码| 日本黄色日本黄色录像| 国产精品爽爽va在线观看网站| 国产成人精品一,二区| 日本vs欧美在线观看视频 | 成年免费大片在线观看| 成人毛片a级毛片在线播放| 免费观看的影片在线观看| 国产精品.久久久| 91在线精品国自产拍蜜月| 久久av网站| 青春草亚洲视频在线观看| 人妻 亚洲 视频| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 国产伦精品一区二区三区视频9| 啦啦啦啦在线视频资源| 亚洲一区二区三区欧美精品| 简卡轻食公司| 成人毛片60女人毛片免费| 最近手机中文字幕大全| 夫妻性生交免费视频一级片| 91久久精品国产一区二区成人| 国产欧美亚洲国产| 天美传媒精品一区二区| 国产伦理片在线播放av一区| 亚洲国产精品一区三区| 91精品一卡2卡3卡4卡| 伦理电影免费视频| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 少妇的逼好多水| 成人一区二区视频在线观看| 欧美精品国产亚洲| 中文字幕久久专区| 一级片'在线观看视频| 成人美女网站在线观看视频| 亚洲av福利一区| av专区在线播放| 欧美国产精品一级二级三级 | 一级爰片在线观看| 97超视频在线观看视频| 国产 一区 欧美 日韩| 我的女老师完整版在线观看| 极品少妇高潮喷水抽搐| 99久久中文字幕三级久久日本| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| av免费在线看不卡| 一级爰片在线观看| 精品久久国产蜜桃| 国产精品国产av在线观看| 欧美性感艳星| 久久久欧美国产精品| 久久久久人妻精品一区果冻| 国产精品不卡视频一区二区| 国产成人免费无遮挡视频| 精品酒店卫生间| 久久97久久精品| .国产精品久久| 好男人视频免费观看在线| 大陆偷拍与自拍| 99久久精品国产国产毛片| 国产成人精品久久久久久| 亚洲国产色片| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 少妇熟女欧美另类| 久久99精品国语久久久| 美女高潮的动态| 亚洲熟女精品中文字幕| 纯流量卡能插随身wifi吗| 最黄视频免费看| 久久精品国产a三级三级三级| 亚洲伊人久久精品综合| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 亚洲国产av新网站|