不同時期類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血清炎性因子的變化及臨床意義

蘇 江 朱 靜 程 佳 陳棲棲 龍 麗

(四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，四川 成都 610072)

不同時期類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血清炎性因子的變化及臨床意義

蘇 江 朱 靜 程 佳 陳棲棲 龍 麗

(四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，四川 成都 610072)

目的 探討不同時期類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)患者血清炎癥因子的變化及臨床意義。方法 90例RA患者根據(jù)RA患者病情評價(DAS28)分為活動組(46例)和緩解組(44例)，同時抽取體檢正?；颊?0例為對照組，所有受試者抽取空腹外周靜脈血5 ml分離血清，采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測腫瘤壞死因子(TNF)-α、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、白細(xì)胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8、IL-10表達(dá)，同時觀察常規(guī)檢測指標(biāo)，分析血清炎癥因子表達(dá)變化及臨床意義。結(jié)果 3組血清TNF-α、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10水平組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，其中活動組均高于對照組(P<0.05)，緩解組 TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10水平高于對照組(P<0.05)。TNF-α、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10血清炎癥因子分別與晨僵時間、關(guān)節(jié)腫脹指數(shù)、壓痛指數(shù)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、紅細(xì)胞沉降率(ESR)、DAS28存在正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)。結(jié)論 RA病情可能與血清炎癥因子介導(dǎo)的免疫反應(yīng)密切相關(guān)，監(jiān)測血清炎癥因子在評估RA病情嚴(yán)重程度和預(yù)后及治療效果評價中具有重要臨床價值。

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎；血清炎癥因子

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)是以慢性對稱性滑膜炎為主要特征的自身免疫性疾病〔1〕，其確切的病因及發(fā)病機(jī)制尚不明確，主要病理特點包括滑膜襯里細(xì)胞增生、大量炎性細(xì)胞浸潤及微血管的新生等，表現(xiàn)為手、足等多關(guān)節(jié)、對稱性、侵襲性炎癥等，同時伴有關(guān)節(jié)外器官受累及血清炎癥因子的過度表達(dá)〔2〕，可能導(dǎo)致畸形或關(guān)節(jié)功能喪失〔3〕。目前臨床對于RA沒有統(tǒng)一根治的方法，早預(yù)防、早診斷、早治療至關(guān)重要。RA是免疫介導(dǎo)的慢性炎癥反應(yīng)，血清炎癥因子在免疫性疾病中起著重要作用〔4〕。目前主要關(guān)注腫瘤壞死因子(TNF)-α、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、白細(xì)胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8、IL-10等。本文旨在探討不同時期RA患者血清炎癥因子的變化及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 四川省人民醫(yī)院2013年1月至2016年1月收治的RA患者90例，均符合美國風(fēng)濕病學(xué)會1987年修訂的RA分類(診斷)標(biāo)準(zhǔn)〔5〕：以下≥4條并排除其他原因引起的關(guān)節(jié)炎可確診。①晨僵至少1 h，持續(xù)≥6 w。②3個或以上的關(guān)節(jié)受累持續(xù)≥6 w。③手關(guān)節(jié)(腕、MCP或PIP關(guān)節(jié))受累，持續(xù)≥6 w。④對稱性關(guān)節(jié)炎，持續(xù)≥6 w。⑤有類風(fēng)濕皮下結(jié)節(jié)。⑥血清類風(fēng)濕因子陽性。⑦X線片顯示骨侵蝕或骨質(zhì)疏松。本研究符合倫理道德，患者簽署了知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)患有嚴(yán)重感染、腫瘤、血液系統(tǒng)疾病等，或合并其他自身免疫性疾病者。(2)不依從、不配合以及拒絕參加試驗者。(3)未按照規(guī)定進(jìn)行檢查者或研究期間病情加重者。根據(jù)RA患者病情評分(DAS28)分為活動組(DAS28≥3.2)和緩解組(DAS28<3.2)，其中活動組46例，男25例，女21例，年齡28～60〔平均(44.6±2.7)〕歲，病程0.5～7〔平均(3.7±1.2)年，緩解組44例，男23例，女21例，年齡30～60〔平均(45.7±3.7)〕歲，病程0.5～8〔平均(4.3±1.2)年。同時抽取體檢正?；颊?0例為對照組，其中男27例，女23例，年齡30～60〔平均(45.8±3.5)〕歲。3組間年齡、性別等基礎(chǔ)資料差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 研究方法 所有受試者經(jīng)過基本檢查后抽取空腹外周靜脈血5 ml，室溫靜置2 h待析出血清，3 000 r/min，離心5 min分離血清，-80℃保存?zhèn)溆?。TNF-α、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10均采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測，嚴(yán)格按照各血清炎癥因子試劑盒要求步驟進(jìn)行。 TNF-α、VEGF ELISA試劑盒均購自上?；鈱崢I(yè)有限公司，IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10 ELISA試劑盒均購自南京建成工程研究所，詳細(xì)記錄患者檢測結(jié)果，每個患者每個指標(biāo)檢測3次，取平均值。常規(guī)觀察、檢測和記錄晨僵時間、關(guān)節(jié)腫脹指數(shù)、壓痛指數(shù)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、紅細(xì)胞沉降率(ESR)、DAS28 評分。

1.3 觀察指標(biāo) RA患者與對照組TNF-α、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10表達(dá)水平比較；RA患者TNF-α、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10表達(dá)水平與晨僵時間、關(guān)節(jié)腫脹指數(shù)、壓痛指數(shù)、CRP、ESR、DAS28 評分相關(guān)性分析。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(F檢驗)、LSD-t檢驗、秩和檢驗、Pearson相關(guān)或Spearman秩相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1 3組血清炎癥因子表達(dá)水平比較 3組血清TNF-α、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10水平比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，其中活動組均高于對照組(P<0.05)，緩解組 TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10水平高于對照組(P<0.05)。見表1。

2.2 血清炎癥因子與RA患者常規(guī)觀察指標(biāo)相關(guān)性分析 TNF-α、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10分別與晨僵時間、關(guān)節(jié)腫脹指數(shù)、壓痛指數(shù)、CRP、ESR、DAS28存在正相關(guān)關(guān)系(均P<0.05)。見表2。

表1 3組血清炎癥因子表達(dá)水平比較±s)

與對照組比較：1)P<0.05；與緩解組比較:2)P<0.05

表2 血清炎癥因子與RA患者常規(guī)觀察指標(biāo)相關(guān)性分析(r值)

1)Spearman秩相關(guān)；2)P<0.05

3 討 論

RA是一種自身免疫性疾病，過度增生的滑膜細(xì)胞可以引起骨、軟骨以及關(guān)節(jié)破壞〔1〕，多種血清炎癥因子參與疾病病變過程，主要包括TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、VEGF等〔6〕。VEGF是血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性的肝素結(jié)合生長因子〔7〕，可在體內(nèi)誘導(dǎo)血管新生，VEGF通過與受體結(jié)合促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞變形、遷移、分裂、增殖等誘導(dǎo)血管增生；此外，促進(jìn)微血管、小靜脈通透性增加從而促進(jìn)炎癥滑膜組織新生血管形成，血管內(nèi)物質(zhì)外滲等，進(jìn)一步促進(jìn)炎癥形成，加重RA臨床癥狀，導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸形〔8〕。TNF-α主要由活化的單核/巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，除了能殺傷和抑制腫瘤細(xì)胞，還能促進(jìn)細(xì)胞增殖和分化，是重要的炎癥因子，并參與一些自身免疫病的病理損傷，研究發(fā)現(xiàn)TNF-α是介導(dǎo)RA炎癥和骨質(zhì)破壞的關(guān)鍵細(xì)胞因子，是RA的重要治療靶點〔9〕，目前已有多種TNF-α拮抗劑應(yīng)用于臨床。IL-1β由活化的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，是參與炎癥反應(yīng)重要的介質(zhì)之一，與細(xì)胞的增殖、分化和凋亡有關(guān)。目前認(rèn)為，IL-1β在RA軟骨破壞機(jī)制中起的作用甚至超過了TNF-α〔10〕。既往的研究也發(fā)現(xiàn)，IL-1β在RA外周血高表達(dá)，且與RA的持續(xù)炎癥反應(yīng)有關(guān)〔11〕。IL-6在急性炎癥反應(yīng)中加速急性期反應(yīng)蛋白的生成，尤其是CRP和淀粉狀蛋白〔12〕；另外，IL-6對于TNF-α和IL-1β誘導(dǎo)的疾病具有促進(jìn)作用；IL-8參與機(jī)體局部炎癥反應(yīng)，從而發(fā)揮殺菌和損傷細(xì)胞的作用〔6〕。本研究結(jié)果說明發(fā)生RA疾病同時伴隨著炎癥反應(yīng)，并且活動期更為明顯，臨床上可以通過檢測這些炎癥指標(biāo)變化判斷患者疾病變化的嚴(yán)重程度。通過這些指標(biāo)可以用來判斷患者疾病治療和預(yù)防的效果，出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因主要是由于RA患者疾病發(fā)展過程中始終伴隨著關(guān)節(jié)及全身性炎癥反應(yīng)的進(jìn)行；同時RA發(fā)展的不同時期機(jī)體內(nèi)的炎癥反應(yīng)程度不同，因此體內(nèi)的炎癥因子水平會出現(xiàn)差異〔13〕。本研究結(jié)果提示RA病情可能與血清炎癥因子介導(dǎo)的免疫反應(yīng)密切相關(guān)，檢測血清炎癥因子在評估RA病情嚴(yán)重程度和預(yù)后及治療效果具有重要臨床價值。

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〔2017-01-05修回〕

(編輯 袁左鳴/滕欣航)

Changes and clinical significance of serum inflammatory factors in patients with rheumatoid arthritis at different stages

SU Jiang,ZHU Jing,CHENG Jia,etal.

Department of Rheumatology and Immunology,Sichuan Academy of Medical Sciences, Sichuan Provincial People's Hospital,Chengdu 610072,Sichuan, China

Objective To investigate the changes and clinical significance of serum inflammatory factors in patients with rheumatoid arthritis (RA) at different stages. Methods 90 patients with RA were divided into active group (n=46) and remission group (n=44) according to the disease evaluation (DAS28) of RA patients with;at the same time,50 normal patients were selected as control group. The expressions of tumor necrosis factor (TNF)-α,vascular endothelial growth factor (VEGF),interleukin (IL)-1β and IL-6,IL-8,IL-10 were detected by double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).Results There were significant differences in serum TNF-α,VEGF,IL-1β,IL-6,IL-8 and IL-10 levels among the 3 groups (P<0.05),the levels of TNF-α,VEGF,IL-1β,IL-6,IL-8,IL-10 in active group were higher than those in control group(P<0.05),the levels of TNF-α,IL-6,IL-8 and IL-10 in remission group were higher than those in control group(P<0.05). The levels of TNF-α,VEGF,IL-1β,IL-6,IL-8,and IL-10 were positively correlated with the time of morning stiffness, swelling index, joint tenderness index, CRP, ESR, DAS28(P<0.05).Conclusions RA patient's conditions might be closely related to the immune reaction by serum inflammatory factors mediation, and it has great clinical value to monitor the serum inflammatory factors in evaluating the severity and prognosis and treatment effect of RA.

Rheumatoid arthritis;Serum inflammatory factors

國家自然科學(xué)基金(81102272)

龍 麗(1978-)，女，博士，副教授，副主任醫(yī)師，主要從事風(fēng)濕免疫方面的研究。

蘇 江(1979-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事自身免疫性疾病研究。

R593.22

A

1005-9202(2017)09-2252-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.09.080