肺浸潤性腺癌中腫瘤易感基因101和上皮型黏附蛋白的表達(dá)

常 罡 肖旭陽 王小東 王冬冬

(錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院手術(shù)室，遼寧 錦州 121001)

1 胸外科

肺浸潤性腺癌中腫瘤易感基因101和上皮型黏附蛋白的表達(dá)

常 罡 肖旭陽1王小東1王冬冬

(錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院手術(shù)室，遼寧 錦州 121001)

目的 檢測肺浸潤性腺癌中腫瘤易感基因(TSG)101和上皮型黏附蛋白(E-cadherin)的表達(dá)，探討二者關(guān)系及意義。方法 確診為肺腺癌的術(shù)后標(biāo)本68例作為觀察組，選擇距腫瘤邊緣>3 cm的正常肺組織18例作為對照組，均留取術(shù)后石蠟包埋的組織，應(yīng)用免疫組化SP法檢測兩組中TSG101和E-cadherin的表達(dá)。結(jié)果 兩組中TSG101和E-cadherin表達(dá)的陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，兩組中TSG101和E-cadherin表達(dá)的陽性率與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(P<0.05)，TSG101的表達(dá)與腫瘤的分化程度相關(guān)(P<0.05)，E-cadherin的表達(dá)與腫瘤的胸膜累犯密切相關(guān)(P<0.05)。二者均與患者的性別、年齡無關(guān)(P>0.05)。線性相關(guān)分析顯示二者在觀察組中的表達(dá)無相關(guān)性(P>0.05)。結(jié)論 TSG101和E-cadherin在肺腺癌中異常表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤的形成和進(jìn)展。TSG101和E-cadherin無明顯的協(xié)同作用。

肺浸潤性腺癌；腫瘤易感基因101；上皮型黏附蛋白；免疫組化

肺腺癌的形成有不典型腺瘤樣增生-原位腺癌-浸潤性腺癌的階段性變化〔1〕，早期發(fā)現(xiàn)對患者的治療有重要價(jià)值。在病變形成過程中，相關(guān)基因和蛋白表達(dá)失調(diào)，浸潤性腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移能力強(qiáng)，患者預(yù)后差。腫瘤易感基因(TSG)101是腫瘤抑制基因，其表達(dá)丟失在腫瘤的形成和進(jìn)展中有一定作用〔2,3〕。上皮型黏附蛋白(E-cadherin)是細(xì)胞連接的重要蛋白，正常上皮中高表達(dá)，當(dāng)其表達(dá)下降或丟失后，細(xì)胞之間易于松動，腫瘤細(xì)胞易于離開原灶形成進(jìn)而形成轉(zhuǎn)移〔4,5〕。本文關(guān)注TSG101和E-cadherin在肺腺癌不同臨床病理特征中的表達(dá)，探討TSG101和E-cadherin表達(dá)的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2014年1月至2015年12月經(jīng)病理診斷為肺浸潤性腺癌，并進(jìn)行根治手術(shù)的患者68例作為觀察組，其中男30例，女38例，年齡42～78歲，平均58.9歲。其中高-中分化47例，低分化21例。選擇距腫瘤邊緣>3 cm的正常肺組織18例作為對照組，其中男9例，女9例，年齡44～73歲，平均56.5歲。兩組一般臨床資料無明顯差異。

1.2 TSG101和E-cadherin表達(dá)的檢測 兩組術(shù)后標(biāo)本均常規(guī)取材，脫水，石蠟包埋后切片，TSG101和E-cadherin的檢測應(yīng)用免疫組化SP法，二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色，操作均按說明書進(jìn)行，減少誤差。

1.3 TSG101和E-cadherin結(jié)果的判斷 結(jié)果的判讀均由病理醫(yī)師完成。TSG101的陽性部位是細(xì)胞質(zhì)，E-cadherin的陽性部位是細(xì)胞膜，以呈現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性。在100倍顯微鏡下選擇上皮細(xì)胞集中的區(qū)域，然后在400倍鏡下選擇3個(gè)視野，計(jì)算陽性率，取平均值作為最終的判斷結(jié)果。以陽性率<5%定為陰性，≥5%定為陽性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)、線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1 兩組TSG101和E-cadherin陽性率的比較 兩組TSG101和E-cadherin的陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見表1。

表1 兩組中TSG101和E-cadherin陽性率比較〔n(%)〕

2.2 觀察組中TSG101和E-cadherin表達(dá)的陽性率在不同臨床病理特征中的比較 兩組中TSG101和E-cadherin表達(dá)的陽性率與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(P<0.05)，TSG101的表達(dá)與腫瘤的分化程度相關(guān)(P<0.05)，E-cadherin的表達(dá)與腫瘤的胸膜累犯密切相關(guān)(P<0.05)。二者均與患者的性別、年齡無關(guān)(P>0.05)。見表2。

表2 觀察組中TSG101和E-cadherin表達(dá)的陽性率在不同臨床病理特征中的比較〔n(%)〕

2.3 觀察組中TSG101和E-cadherin的相關(guān)性 TSG101和E-cadherin無明顯相關(guān)性(P>0.05)。

3 討 論

肺腺癌是具有腺樣分化或有黏液產(chǎn)生的惡性上皮源性腫瘤，表現(xiàn)為腺泡樣、乳頭樣生長，部分腫瘤可以表面為貼壁樣生長，其生物學(xué)行為均具有侵襲和轉(zhuǎn)移的潛能，在此過程中腫瘤相關(guān)基因和轉(zhuǎn)移相關(guān)基因均可以出現(xiàn)異常表達(dá)。TSG101基因于1997年克隆成功，定位于人類染色體11p15.1～p5.2，由于其含有泛素結(jié)合酶E2結(jié)構(gòu)域、脯氨酸富含區(qū)及亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)等功能區(qū)，因此其可能具有較多樣的生物學(xué)功能〔6〕。研究認(rèn)為TSG101基因cDNA全長1 494 bp，與小鼠有86%同源，開放讀碼框長1 140 bp，編碼產(chǎn)物是一個(gè)含有380個(gè)氨基酸、分子量為43 kD的蛋白質(zhì)〔7〕。TSG101參與真核生物的多種代謝過程，如細(xì)胞內(nèi)的泛素化過程、體內(nèi)蛋白的運(yùn)輸、調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄和細(xì)胞增殖等〔8〕。細(xì)胞連接的缺失是腫瘤進(jìn)展的一個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)，黏附連接是一種處于高度動態(tài)變化的結(jié)構(gòu)，黏附連接的形成及相關(guān)蛋白的重組主要通過內(nèi)吞和復(fù)合體成分循環(huán)利用來實(shí)現(xiàn)〔9〕。腫瘤在進(jìn)展中黏附連接內(nèi)吞調(diào)控常處于異常的狀態(tài)，而且復(fù)合物循環(huán)與降解一旦失衡，則引起E-cadherin的降解和細(xì)胞遷移能力增強(qiáng)〔10,11〕。因此E-cadherin的表達(dá)程度可以在一定程度上提示細(xì)胞間的連接狀態(tài)和松散程度〔12〕。也有觀點(diǎn)認(rèn)為當(dāng)E-cadherin表面下調(diào)時(shí)單個(gè)腫瘤細(xì)胞通過間充質(zhì)樣細(xì)胞運(yùn)動或阿米巴樣運(yùn)動形成非定向的遷移。間充質(zhì)樣運(yùn)動模式主要與腫瘤局部浸潤?quán)徑M織有關(guān)〔13〕。

本實(shí)驗(yàn)提示TSG101和E-cadherin二者低表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤的淋巴道播散，此時(shí)腫瘤細(xì)胞離開原發(fā)灶后通過淋巴道播散累犯腸周淋巴結(jié)或其他的區(qū)域淋巴結(jié)，形成轉(zhuǎn)移癌。本文提示TSG101參與腫瘤細(xì)胞由幼稚到成熟的調(diào)節(jié)過程，因此TSG101對腫瘤的調(diào)節(jié)過程可能更復(fù)雜。本文提示E-cadherin表達(dá)下調(diào)或丟失時(shí)腫瘤細(xì)胞易于侵襲周圍組織和鄰近臟器〔14〕。本文提示TSG101和E-cadherin間的協(xié)同作用效果不強(qiáng)。TSG101低表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤的增殖和遷移，而E-cadherin低表達(dá)主要是促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的播散，此種易于遷移的腫瘤細(xì)胞體積小、連接松散、黏附力差，腫瘤細(xì)胞的遷移能力強(qiáng)，對局部的破壞能力較強(qiáng)。但是在不同腫瘤中，不同學(xué)者也發(fā)現(xiàn)TSG101的表達(dá)不完全相同。顧汝軍等〔15〕通過觀察TSG101在肝細(xì)胞肝癌中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)TSG101的表達(dá)升高，其可能與TSG101和鼠雙微基因(MDM)2形成反饋控制環(huán)路有關(guān)，也可能與TSG101通過促進(jìn)P53基因異常表達(dá)有關(guān)。因此，TSG101的表達(dá)在不同腫瘤中可能具有特異性，有待更多的基礎(chǔ)研究證實(shí)。

1 Lam DC,Cooper WA,O′Toole SA,etal.Molecular biology of lung cancer〔J〕.Lung Cancer,2001;34(2):745-50.

2 Chen YY,Zeng ZH,Zheng PE,etal.Expression of the tumor susceptibility gene(TSG101)in carcinoma of esophagus,stomach and colorectum〔J〕.Cancer Res Prev Treat,2006;33(6):433-5.

3 Chen YJ,Chen PH,Lin SY,etal.Analysis of aberrant transcription of TSG101,in hepatocellular carcinomas〔J〕.Eur J Cancer,1999;35(2):302-8.

4 Erdemir F,Ozcan F,Kilicaslan I,etal.The relationship between the expression of E-cadherin and tumor recurrence and progression in high-grade stage T1 bladder urothelial carcinoma〔J〕.Int Urol Nephrol,2007;39(4):1031-7.

5 Cheng CW,Wu PE,Yu JC,etal.Mechanisms of inactivation of E-cadherin in breast carcinoma:modification of the two-hit hypothesis of tumor suppressor gene〔J〕.Oncogene,2001;20(29):3814-23.

6 Liu Z,Yang Z,Liu D,etal.TSG101 and PEG10 are prognostic markers in squamous cell/adenosquamous carcinomas and adenocarcinoma of the gallbladder〔J〕.Oncol Lett,2014;7(4):1128-38.

7 Xu BS,Makiyama T,Sakane H,etal.TSG101,a tumor susceptibility gene,bidirectionally modulates cell invasion through regulating MMP-9 mRNA expression〔J〕.BMC Cancer,2015;15(1):1-14.

8 張忠民,于招炎,王紹勇,等.結(jié)腸癌組織TSG101表達(dá)及意義〔J〕.中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用,2013;7(2):32-4.

9 Liu X,Yao N,Qian J,etal.High expression and prognostic role of CAP1 and CtBP2 in breast carcinoma:associated with E-cadherin and cell proliferation〔J〕.Med Oncol,2014;31(3):1-11.

10 Nakamura M,Onoda N,Noda S,etal.E-cadherin expression and cell proliferation in the primary tumor and metastatic lymph nodes of papillary thyroid microcarcinoma.〔J〕.Mol Clin Oncol,2014;2(2):226-32.

11 Ucvet A,Kul C,Gursoy S,etal.Prognostic value of epithelial growth factor receptor,vascular endothelial growth factor,E-cadherin,and p120 catenin in resected non-small cell lung carcinoma〔J〕.Arch De Bronconeumol,2011;47(8):397-402.

12 楊心治,鐘 警,文格波.E-cadherin在黏附連接的調(diào)控機(jī)制及腫瘤EMT中的作用研究進(jìn)展〔J〕.現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生,2015;31(11):1658-60.

13 Dukes JD,Fish L,Richardson JD,etal.Functional ESCRT machinery is required for constitutive recycling of claudin-1 and maintenance of polarity in vertebrate epithelial cells〔J〕.Mole Biol Cell,2011;22(17):3192-200.

14 Zhou J,Feng ZY,Zhang ZG,etal.Correlation of nm23 and E-cadherin protein expression with recurrence and metastasis after liver transplantation for hepatocellular carcinoma〔J〕.Organ Transpl,2013;4(5):258-62.

15 顧汝軍,王蘇春,孫 剛,等.腫瘤易感基因101在肝細(xì)胞肝癌組織中的表達(dá)及意義〔J〕.細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志,2012;28(7):738-40.

〔2016-12-17修回〕

(編輯 苑云杰)

常 罡(1971-)，女，主治醫(yī)師，主要從事胸外科疾病研究。

R734.2

A

1005-9202(2017)09-2201-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.09.055