雄激素受體和NF-κB在乳腺癌組織中的表達及其與臨床病理特征的關(guān)系

陳雙龍 付 莉 杜好信

(廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院乳腺外科，福建 廈門 361000)

雄激素受體和NF-κB在乳腺癌組織中的表達及其與臨床病理特征的關(guān)系

陳雙龍 付 莉1杜好信

(廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院乳腺外科，福建 廈門 361000)

目的 探討雄激素受體(AR)和核因子(NF)-κB在乳腺癌組織中的表達及其與臨床病理特征的關(guān)系。方法 200例乳腺癌患者中三陰型乳腺癌98例及非三陰型乳腺癌102例。免疫組化法檢測兩組AR、NF-κB的表達情況并收集患者臨床病理資料，分析兩指標(biāo)與臨床特征的關(guān)系。結(jié)果 三陰乳腺癌組AR表達陽性率低于非三陰乳腺癌組，NF-κB表達陽性率高于例非三陰乳腺癌組(P<0.05)；三陰乳腺癌患者AR表達陽性與乳腺癌腫瘤壞死和組織浸潤呈負相關(guān)(P<0.05)，非三陰乳腺癌患者AR表達陽性與乳腺癌瘤體大小、腫瘤壞死和組織浸潤呈負相關(guān)(P<0.05)；三陰乳腺癌組織NF-κB表達陽性與乳腺癌腫瘤大小、腫瘤壞死和組織浸潤呈負相關(guān)但與組織分級呈正相關(guān)(P<0.05)，而在非三陰乳腺癌中，NF-κB表達陽性僅與乳腺癌腫瘤大小、腫瘤壞死和組織浸潤呈負相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論 乳腺癌組織中AR、NF-κB異常表達，可能參與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移，可能成為理想的乳腺癌預(yù)測標(biāo)志物。

雄激素受體；核因子κB；乳腺癌

參與機體防御反應(yīng)、組織損傷和應(yīng)激、細胞分化和凋亡的轉(zhuǎn)錄核因子(NF)-κB在乳腺癌的抗凋亡機制中發(fā)揮重要作用〔1，2〕。NF-κB被激活后進入細胞核啟動靶基因轉(zhuǎn)錄，通過上調(diào)與細胞增殖相關(guān)的基因表達或抑制凋亡通路而發(fā)揮抗凋亡作用〔3〕。文獻報道，雄激素受體(AR)在乳腺腫瘤中通常過表達，與相應(yīng)配體雄激素結(jié)合后而發(fā)揮腫瘤抑制作用。本研究旨在探討AR和NF-κB在乳腺癌中的作用機制。

1 對象和方法

1.1 對象 選取2010年1月至2012年2月廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院就診的200例術(shù)前未經(jīng)過放、化療治療的乳腺癌患者手術(shù)標(biāo)本，通過B超、鉬靶X線檢查及細胞學(xué)穿刺檢查以排除類似乳腺癌的囊腫、纖維腺瘤等病變。乳腺癌患者均為女性，年齡35～75歲，平均(50.53±1.64)歲。通過對腫瘤組織免疫組化檢查為雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)和原癌基因Her-2均為陰性而將患者分為三陰型乳腺癌組(98例)及非三陰型乳腺癌(102例)。試劑：AR單克隆抗體(兔抗人)、NF-κB單克隆抗體(兔抗人)、β-actin單克隆抗體(兔抗人)、SP Human HRP Kit(DAB)試劑盒等均購于Santa Cruz公司。

1.2 方法

1.2.1 免疫組化 收集乳腺癌患者的手術(shù)切除標(biāo)本，一部分經(jīng)多聚甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，5 μm切片，石蠟切片經(jīng)二甲苯脫蠟、乙醇梯度水化，再去除切片組織內(nèi)的內(nèi)源性過氧化酶，最后在微波爐內(nèi)加熱檸檬酸緩沖液進行熱抗原修復(fù)。用已知陽性切片作陽性對照，用正常小鼠非免疫血清和磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗作陰性對照，DAB顯色，蘇木精對比染色，100倍光鏡下觀察〔4〕。AR、NF-κB在乳腺癌組織的表達判斷按下述方法：AR、NF-κB存在于細胞核和細胞質(zhì)中，陽性表達時呈淺棕色或深棕色。根據(jù)組織的染色強度對陽性表達進行分類：組織染色強度弱(+)，僅個別細胞經(jīng)染色呈淡黃色至棕黃色；染色強度強()，細胞經(jīng)染色呈棕黃至棕褐色；中等染色強度()，組織染色強度介于弱陽性與強陽性之間。染色強度×陽性細胞的比例(%)為每例乳腺癌組織表達的綜合計分，合計分≥1為表達陽性，計分<1則為表達陰性。

1.2.2 資料收集 收集病例的臨床資料包括：腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織分級、腫瘤壞死和腫瘤浸潤等。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS19.0軟件進行χ2檢驗。

2 結(jié) 果

2.1 AR和NF-κB在乳腺癌中的表達水平 三陰乳腺癌組AR陽性率〔20.41%(20/98)〕低于非三陰乳腺癌組〔73.53%(75/102)〕(P<0.05)；NF-κB陽性率〔77.55%(76/98)〕高于非三陰乳腺癌組〔47.06%(48/102)〕(P<0.05)。見圖1。

圖1 免疫組化法檢測乳腺癌組織切片組織AR、NF-κB表達(DAB，×100)

2.2 AR和NF-κB表達水平與臨床病理特征的關(guān)系 由表1可知，乳腺癌腫瘤壞死和組織浸潤是三陰乳腺癌患者AR表達陽性的影響因素(P<0.05)；非三陰乳腺癌患者AR表達陽性與乳腺癌瘤體大小、腫瘤壞死和組織浸潤呈負相關(guān)(P<0.05)。在三陰乳腺癌組NF-κB表達陽性與乳腺癌腫瘤大小、腫瘤壞死和組織浸潤呈負相關(guān)且與乳腺癌組織分級呈正相關(guān)(P<0.05)；而非三陰乳腺癌組NF-κB表達陽性與乳腺癌腫瘤大小、腫瘤壞死和組織浸潤呈負相關(guān)(P<0.05)。

表1 AR、NF-κB陽性表達與乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系〔n(%)〕

3 討 論

乳腺癌是一類異質(zhì)性腫瘤，常根據(jù)其臨床病理特征和分子特征分為不同類型〔5〕。由于免疫組化有操作簡單的優(yōu)點，應(yīng)用檢測ER、PR、CK5/6、C-erbB-2、EGFR、Ki-67為乳腺癌分型被大家推崇〔6〕。近年來隨著基因表達譜分析應(yīng)用于臨床后，乳腺癌的分子分型逐漸被人認識，研究者根據(jù)乳腺癌的基因微陣列分析和免疫表型特征將其分為5個亞型：luminal A、luminal B、HER-2過表達型、basal-like以及normal-like乳腺癌，將其中basal-like與normal-like乳腺癌歸屬于三陰性乳腺癌，其占全部乳腺癌的10%～17%。目前關(guān)于關(guān)于其預(yù)后的判斷指標(biāo)，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了許多有臨床上有應(yīng)用價值的標(biāo)志物，例如AR、NF-κB、聚腺苷酸二磷酸核糖合成酶(PARP)1、絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)、表皮生長因子受體(EGFR)等〔7〕。AR被認為是影響三陰性乳腺癌預(yù)后的重要因素〔8〕。有研究還發(fā)現(xiàn)，NF-κB在雌激素受體陰性的乳腺癌中表達率高于雌激素受體陽性的乳腺癌〔9〕。研究表明，AR能夠直接影響乳腺癌細胞的增殖，其表達是影響乳腺癌預(yù)后的重要因素，AR在其陽性表達的原位癌臨近浸潤性癌中的表達量高于其在原位癌中的表達量，這表明AR與腫瘤浸潤密切相關(guān)〔10〕，此外，還有研究表明乳腺癌中AR表達水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)〔11，12〕。已證實NF-κB具有轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)作用，參與應(yīng)激反應(yīng)和免疫細胞的活化、增殖、分化、凋亡及腫瘤形成等相關(guān)的基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控〔13〕，因此，NF-κB的表達與人體腫瘤發(fā)生、浸潤轉(zhuǎn)移、預(yù)后有著密切關(guān)系〔14，15〕。本研究結(jié)果表明，AR、NF-κB在乳腺癌組織中異常表達，可能在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移中具有重要作用，且與某些特定的乳腺癌分子亞型可能有關(guān)系。

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〔2016-07-15修回〕

(編輯 郭 菁/滕欣航)

福建省衛(wèi)生廳青年科研課題(No.2012-2-77)

杜好信(1962-)，男，博士，主任醫(yī)師，主要從事乳腺外科研究。

陳雙龍(1979-)，男，副主任醫(yī)師，主要從事乳腺外科研究。

R73

A

1005-9202(2017)09-2185-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.09.046

1 廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院病理科