急性腦梗死患者血清扣針蛋白-5和基質(zhì)金屬蛋白酶-3的表達及意義

仲盛年

(青海大學附屬醫(yī)院急診內(nèi)科，青海 西寧 810001)

急性腦梗死患者血清扣針蛋白-5和基質(zhì)金屬蛋白酶-3的表達及意義

仲盛年

(青海大學附屬醫(yī)院急診內(nèi)科，青海 西寧 810001)

目的 檢測急性腦梗死患者血清扣針蛋白(Fibulin)-5和基質(zhì)金屬蛋白酶 (MMP)-3的表達，分析其臨床意義。方法 神經(jīng)內(nèi)科診治的86例急性腦梗死患者作為觀察組，同時選取20例健康體檢者的血清作為對照組，檢測兩組血清中Fibulin-5和MMP-3的表達。結(jié)果 觀察組血清中Fibulin-5和MMP-3的表達量明顯高于對照組(P<0.001)，觀察組血清中MMP-3的表達量與梗死灶體積密切相關(P<0.05)，而Fibulin-5的表達量與梗死灶體積無明顯相關性(P>0.05)。相關分析顯示Fibulin-5和MMP-3無相關性(P>0.05)。結(jié)論 Fibulin-5和MMP-3在急性腦梗死患者血清中的表達升高，對病變的形成和進展有一定的調(diào)節(jié)作用。

急性腦梗死；扣針蛋白-5；基質(zhì)金屬蛋白酶-3

急性腦梗死形成中多種細胞因子參與其中，并涉及多種病理過程〔1〕?？坩樀鞍?Fibulin)-5是一種具有廣泛細胞功能的細胞外基質(zhì)糖蛋白，對血管的穩(wěn)定具有調(diào)節(jié)作用，近年研究認為其與腦梗死形成中的血管形態(tài)和功能變化相關〔2，3〕?；|(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)參與急性腦梗死形成后的炎癥反應和繼發(fā)性腦損傷的病理過程，MMP-3是家族中的重要成員，在炎性介質(zhì)誘導的病理因素下，可以有效降解細胞外基質(zhì)，降解斑塊內(nèi)的膠原含量，引起斑塊的不穩(wěn)定性和破裂，對腦梗死病變進展可能有促進作用〔4，5〕。本研究觀察急性腦梗死患者急性期血清中Fibulin-5和MMP-3的表達，分析其相關性及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2012年1月至2015年12月青海大學附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科診治的86例急性腦梗死患者為觀察組，均經(jīng)癥狀、體征、CT、磁共振成像(MRI)等診斷明確，并均符合2010年中華醫(yī)學會神經(jīng)病學分會腦血管病學組制定并頒布的標準。排除標準：①血管性頭痛及非局部神經(jīng)系統(tǒng)癥狀；②腦出血；③頭部手術(shù)史；④伴有免疫性疾??；⑤伴有嚴重內(nèi)臟器官疾病和惡性腫瘤。男46例，女40例，年齡45～87歲，平均(64.5±11.2)歲。選取20例健康體檢者的血清作為對照組，男10例，女10例，年齡45～62歲，平均(51.4±6.5)歲。兩組年齡及性別構(gòu)成無明顯差異(P>0.05)。

1.2 Fibulin-5和MMP-3的檢測 觀察組確診后抽取空腹靜脈血3 ml，對照組抽取清晨空腹靜脈血3 ml，2 000 r/min 離心15 min后分離血清，置于-20℃冰箱凍存。應用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測Fibulin-5和MMP-3表達，按說明書操作。

1.3 梗死灶體積的計算方法 應用Pullicino公式評定腦梗死灶的體積，分級標準：小梗死灶(<5 cm3)、中梗死灶(5～10 cm3)和大梗死灶(>10 cm3)。

1.4 統(tǒng)計學方法 應用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行t檢驗、方差分析、線性相關分析。

2 結(jié) 果

2.1 兩組血清Fibulin-5和MMP-3表達比較 兩組血清中Fibulin-5和MMP-3表達差異顯著(P<0.001)，見表1。

表1 兩組血清Fibulin-5和MMP-3表達比較

2.2 觀察組不同梗死灶體積患者血清中Fibulin-5和MMP-3表達比較 觀察組血清中MMP-3表達量與梗死灶體積密切相關(P<0.05)，而Fibulin-5表達量與梗死灶體積無明顯相關性(P>0.05)。見表2。

表2 觀察組不同梗死灶體積患者血清Fibulin-5和MMP-3比較

2.3 觀察組中Fibulin-5和MMP-3表達相關性 Fibulin-5和MMP-3表達無相關性(P>0.05)。

3 討 論

腦梗死是缺血性改變，血管的病變是重要因素，動脈的斑塊形成有重要的作用〔6〕，急性期多種細胞因子參與病變的形成。Fibulin-5含有448個氨基酸，緊鄰V末端的Fibulin-5組件由6個能與鈣離子結(jié)合的表皮生長因子樣的區(qū)域組成，其中第1個區(qū)域含有能與整合素結(jié)合的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)基序，其能對血管內(nèi)皮細胞的黏附功能進行有效調(diào)節(jié)，并可與整合素結(jié)合發(fā)揮生物學功能〔7，8〕。文燦等〔9〕通過觀察Fibulin-5在腫瘤中的表達，認為Fibulin-5高表達參與了血管生成的作用，因此Fibulin-5在腦梗死中也可能對缺血后神經(jīng)細胞間質(zhì)中的血管生成有一定的作用，即促進血管的生成和損傷血管的修復，促進病變良性轉(zhuǎn)化〔10〕。在腦組織缺血性改變后細胞外基質(zhì)也可以出現(xiàn)變化，與此種作用關系最明顯的是MMPs的分泌增加，缺血性病變通過引起細胞外基質(zhì)的降解和再灌注后使血腦屏障開放，引起腦組織水腫的形成和白細胞浸潤〔11〕。MMP-3又名基質(zhì)分解素，可以降解Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ型膠原、降解軟骨蛋白多糖、纖維連接蛋白等〔12〕，此時引起血管通透性增加，血腦屏障開放，血管源性腦水腫形成〔13〕。

本研究提示Fibulin-5和MMP-3異常高表達在病變形成和進展中有一定作用，尤其MMP-3高表達在病變進展時的作用可能更明顯。腦血管早期梗阻發(fā)生時可以引起內(nèi)皮細胞壞死和凋亡，細胞間的結(jié)構(gòu)和信息傳遞出現(xiàn)破壞，進而引起血腦屏障的破壞，導致細胞因子級聯(lián)反應發(fā)生。Fibulin-5作為一種細胞外基質(zhì)蛋白，在組織的形成、重建和修復中具有重要作用〔14〕。在正常機體血管中Fibulin-5的表達較低，在缺氧條件下Fibulin-5的表達升高，可以引起內(nèi)皮細胞的黏附，降低血管的內(nèi)皮細胞的遷移功能，這種作用可以在一定程度上穩(wěn)定血管的結(jié)構(gòu)，因此Fibulin-5的上調(diào)可以引起腦缺血后血管的穩(wěn)定，對病變的恢復有一定作用。而腦缺血后可以產(chǎn)生大量的活性氧簇(ROS)，ROS激活Rho酶介導的內(nèi)皮細胞的損傷，使血腦屏障通透性增加。Fibulin-5可以通過與纖連蛋白競爭性結(jié)合整合素受體從而抑制整合素通路，因此Fibulin-5的升高可能通過此種途徑減少血腦屏障的損害。也有研究認為Fibulin-5過表達后能減輕缺血再灌注損傷，這與Fibulin-5促進緊密連接蛋白occludin的表達有關，同時對神經(jīng)系統(tǒng)功能的恢復有一定作用〔15〕。本文提示Fibulin-5和MMP-3無明顯的協(xié)同作用。Fibulin-5是腦缺血后維持血管穩(wěn)定的因子，具有保護作用，而MMP-3在一定程度上可以加速神經(jīng)組織的損傷，抑制修復，是病變進展的因子，因此二者的作用方式及對缺血后的調(diào)節(jié)機制均不相同。而MMP-3通過攻擊和破壞血腦屏障引起神經(jīng)細胞的水腫，對神經(jīng)元形成不同程度的破壞和毒性作用，MMP-3對毛細血管基底膜的破壞，是神經(jīng)炎癥反應引起血腦屏障受損的最后通路〔16〕。也有觀點認為MMP-3在動脈粥樣硬化形成及斑塊不穩(wěn)定過程中發(fā)揮作用〔17〕。因此Fibulin-5和MMP-3二者可能是血管穩(wěn)定性和破壞性、血腦屏障穩(wěn)定性和破壞性動態(tài)平衡調(diào)節(jié)的兩個相反作用的因子，此種作用也可能與膠原降解和彈性纖維生成量有關〔18〕，但是其機制尚需要更多實驗明確。

1 解學軍，李東芳，李光來，等.基質(zhì)金屬蛋白酶-3、高敏C-反應蛋白與頸動脈粥樣硬化和急性腦梗死的關系〔J〕.國際腦血管病雜志，2008；16(3)：177-80.

2 閆 安，楊 靜，張 博，等.葛根素治療急性腦梗死老年患者的療效及對血清中Fibulin-5、IL-18和S100B的影響〔J〕.重慶醫(yī)學，2015；31(32)：4566-8.

3 葉 琦，王 華.鼠神經(jīng)生長因子對急性腦梗死患者血清中腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子、Fibulin-5和顱內(nèi)血流的影響〔J〕.中國生化藥物雜志，2017；37(3)：110-3.

4 楊 虹，魏桂榮，李紅戈.腦梗死血清MMP-3與MMP-9 的動態(tài)變化及臨床意義〔J〕.中國康復，2005；20(5)：278-80.

5 郭正清，肖小華.腦梗死血清MMP-3的測定及臨床意義〔J〕.江蘇大學學報(醫(yī)學版)，2004；14(3)：208-9.

6 Candelario-Jalil E，Yang Y，Rosenberg GA.Diverse roles of matrix metalloproteinases and tissue inhibitors of metalloproteinases in neuroinflammation and cerebral ischemia〔J〕.Neuroscience，2009；158(3)：983-94.

7 Spencer JA，Hacker SL，Davis EC，etal.Altered vascular remodeling in fibulin-5-deficient mice reveals a role of fibulin-5 in smooth muscle cell proliferation and migration〔J〕.Proc Nat Acad Sci U S A，2005；102(8)：2946-51.

8 Merklinger SL，Wagner RA，Spiekerkoetter E，etal.Increased fibulin-5 and elastin in S100A4/Mts1 mice with pulmonary hypertension〔J〕.Circ Res，2005；97(97)：596-604.

9 文 燦，董世武，余匯洋.Fibulin-5表達與胃癌血管生成的關系研究〔J〕.腹部外科，2007；20(3)：182-3.

10 Nguyen AD，Itoh S，Jeney V，etal.Fibulin-5 is a novel binding protein for extracellular superoxide dismutase〔J〕.Circ Res，2004；95(11)：1067-74.

11 李 強，李 貝.腦梗死患者血清IL-17、hs-CRP及MMP-3水平的變化及大劑量阿托伐他汀的干預作用〔J〕.中國老年學雜志，2012；32(3)：459-61.

12 陳紹輝，劉 鵬.中西醫(yī)結(jié)合對腦梗死血清CRP、MMP-3及MMP-9水平影響研究〔J〕.中醫(yī)臨床研究，2011；3(2)：36-7.

13 劉筱潔，黃金忠，陳應柱，等.動脈粥樣硬化性腦梗死患者MMP-2、3、9動態(tài)變化及與頸部斑塊關系研究〔J〕.中國血液流變學雜志，2010；20(4)：567-70.

14 徐廣會，秦新月，陶 濤，等.Fibulin-5在缺血再灌注大鼠腦組織中的表達〔J〕.中國老年學雜志，2013；33(6)：1294-5.

15 程 創(chuàng)，秦新月，郭 佳，等.過表達Fibulin-5對大鼠腦缺血再灌注損傷后血腦屏障的保護作用〔J〕.第三軍醫(yī)大學學報，2014；36(13)：1386-8.

16 Zhao JK，Duan SR，Zhou JX，etal.Mild hypothermia reduces expression of Fas/FasL and MMP-3 after cerebral ischemia-reperfusion in rats〔J〕.Iranian J Basic Med Sci，2014；17(6)：454-9.

17 Peeters SA，Lian E，Buijs J，etal.Plasma levels of matrix metalloproteinase-2，-3，-10，and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 are associated with vascular complications in patients with type 1 diabetes：the eurodiab prospective complications study〔J〕.Cardiovasc Diabetol，2015；14(1)：1-10.

18 董 克.MMP-2和Fibulin-5在盆底功能障礙疾病中的表達及意義探討〔J〕.中國現(xiàn)代醫(yī)生，2011；49(25)：42-4.

〔2016-12-07修回〕

(編輯 苑云杰)

仲盛年(1980-)，男，主治醫(yī)師，主要從事急性腦梗死研究。

R743

A

1005-9202(2017)09-2163-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.09.035