高效價冷凝集素所致血型鑒定困難200例報告分析

馮冬霞+陳敬霞

【摘要】 目的 本文主要針對高效價冷凝集素所致血型鑒定困難進(jìn)行深入的分析， 為臨床提供參考。方法 對200例含高效價冷凝集素患者的臨床資料進(jìn)行分析， 同時進(jìn)行抗人球蛋白試驗(yàn)、冷凝集素效價測定以及紅細(xì)胞ABO血型鑒定等血型血清學(xué)檢測， 探討血型鑒定困難的原因。結(jié)果 當(dāng)冷凝集素的效價在<1∶2～1∶32， 不會出現(xiàn)假凝集現(xiàn)象。當(dāng)冷凝集素的效價>1∶64， 冷凝集素就會感染血型的鑒別測定。若對高效價的冷凝集素效的血液進(jìn)行血型的確定， 就容易導(dǎo)致血型判斷出錯。如果對高效價冷凝集素血液采取反向定型時， 易將A、B、AB血型錯誤鑒定為O型。結(jié)論 由于患者體內(nèi)冷凝集素的效價在增高時， 會對ABO血型鑒定的結(jié)果造成一定的影響， 所以臨床對于疑難血型的鑒定標(biāo)本， 應(yīng)盡量選擇科學(xué)的鑒別試驗(yàn)方法進(jìn)行排除， 最終正確鑒定ABO血型。

【關(guān)鍵詞】 高效價冷凝集素；血型鑒定困難；血清學(xué)檢查；抗人球蛋白試驗(yàn)；ABO血型鑒定

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.09.028

普通人的血清中都含有低滴度的冷凝集素， 一些腫瘤、EB病毒感染或者支原體等都會將滴度上高， 因此當(dāng)血清檢出高效價的冷凝集素， 會給患者的血型的鑒別的測定帶來一定的不利影響， 偏差較大的會出現(xiàn)血型鑒別錯誤的情況[1]。本次研究主要選取200例含高效價冷凝集素患者為對象展開研究， 對其進(jìn)行血型的鑒別和測定， 現(xiàn)將研究內(nèi)容和結(jié)果報道如下。

1 臨床資料

本院2012年5月～2015年5月期間共收治了235例含高效價冷凝集素患者， 從中選取200例作為研究對象， 其中， 男100例， 女100例， 年齡50～86歲， 平均年齡（76.32±5.21）歲。查體結(jié)果：全身皮膚沒有出血點(diǎn)， 肝脾沒有觸及， 胸骨沒有壓痛感， 竇性心律不齊， 心率78次/min左右， 淺表淋巴結(jié)沒有腫大跡象， 中度的貧血貌。實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果：網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)（RET）：2.0%；血小板計數(shù)（PLT）：282×109/L；紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度（MCHC）：412 g/L；紅細(xì)胞平均血紅蛋白量（MCH）：32.2 pg；紅細(xì)胞平均體積（MCV）：78.1 fl；紅細(xì)胞壓積（HCT）：18.6%；血紅蛋白（Hb）：77 g/L；白細(xì)胞（RBC）：2.38×1012/L；

紅細(xì)胞（WBC）：9.6×109/L。所有患者進(jìn)行骨髓穿刺檢查結(jié)果表現(xiàn)為增生性貧血， 且貧血程度嚴(yán)重， 需進(jìn)行輸血治療， 但是由于患者血樣在常規(guī)室溫下容易出現(xiàn)凝集的情況， 所以懷疑患者的血型是疑難血型， 需要將血樣送檢， 對血型進(jìn)行重新鑒定[2]。

2 方法及結(jié)果

2. 1 RhD、ABO血型鑒定

2. 1. 1 微柱凝膠卡法 反向定型：BC管和AC管要分別加入已知B型和A型的微升的0.5%RBC懸液；正向定型：對照管和抗D、抗B和抗A各加入50 μl患者0.5%RBC懸液。使用專門的離心機(jī)進(jìn)行5 min的離心， 后取出， 通過肉眼判定結(jié)果。

2. 1. 2 鹽水試管法 抽取每例患者5 ml的靜脈血， 經(jīng)過離心分離處理得當(dāng)血清樣品， 用生理鹽水對患者血清樣品的紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌， 并重復(fù)3次， 制成0.5%RBC懸液。反向定型：用3支試管， 標(biāo)出OC管、BC管、AC管， 每個試管中分別加入患者的血清2滴， 再依次加入血型分型試劑RBC 1滴， 以3000 rpm的速度進(jìn)行15 s的離心， 觀察結(jié)果。正向定型：用3支試管， 分別標(biāo)出抗D、抗B和抗A。分別加入患者0.5%RBC懸液1滴， 再依次加入抗D、抗B和抗血型分型試劑2滴， 3000 rpm的速度進(jìn)行15 s的離心， 觀察結(jié)果[3]。結(jié)果表明正向定型和反向定型的結(jié)果不一致， 見表1。后來經(jīng)過37℃水浴處理5 min后， 正向定型和反向定型都確定為A型， 且RhD為陽性。

2. 2 血清冷凝集素效價測定方法 取患者的靜脈血5 ml， 在常規(guī)條件下進(jìn)行離心分離， 然后從中移取血清0.5 ml， 采用生理鹽水對其進(jìn)行稀釋一倍。每管加等體積經(jīng)洗滌的正常人O型2%RBC懸液， 搖勻之后， 樣品放在4℃的冰箱中保存， 12 h后觀察現(xiàn)象， 以出現(xiàn)“+”凝集者為冷凝集素效價的終點(diǎn)。4℃時， 患者的血清凝集效價是1∶16395， 放入37℃的水浴30 min， 樣品凝集現(xiàn)象減退。

2. 3 抗人球蛋白試驗(yàn) 取5 ml患者靜脈血樣品， 離心分離得到血清， 用生理鹽水對患者的紅細(xì)胞進(jìn)行三次洗滌之后， 制成0.5%RBC懸液。在微柱凝膠卡待測孔中加入50 μl 0.5%RBC懸液， 確定為陰性對照組。立即采用離心機(jī)離心5 min后視覺觀察效果， 結(jié)果表明對照組和測定組樣品均呈陰性。

2. 4 冷凝集素對ABO血型鑒定的影響 當(dāng)冷凝集素的效價在<1∶2～1∶32， 不會出現(xiàn)假凝集現(xiàn)象。當(dāng)冷凝集素的效價>1∶64， 冷凝集素就會感染血型的鑒別測定。若對高效價的冷凝集素效的血液進(jìn)行血型的確定， 就容易導(dǎo)致血型判斷出錯。如果對高效價冷凝集素血液采取反向定型時， 易將A、B、AB血型錯誤鑒定為O型。

3 討論

冷凝集素廣泛存在于人體血清中， 其正常值為1∶8～1∶16范圍之間， 但是當(dāng)人體的冷凝集素效價偏高， 易發(fā)生血型鑒定誤判的情況， 給血型的鑒定帶來一定的困難[4-6]。研究表明在冬季遇到血型鑒定結(jié)果出現(xiàn)錯誤時， 其最主要原因是有高效價的冷凝集素的存在而干擾測定[7， 8]。因此在進(jìn)行血型鑒定的研究實(shí)， 臨床上需要注意以下方面：①測定時要有適宜的環(huán)境和溫度， 溫度盡可能保持在37℃， 消除冷凝集素對血型鑒定試驗(yàn)的干擾[9-11]；②目前在進(jìn)行血型鑒定時， 少數(shù)條件較差的醫(yī)院只能進(jìn)行正向定型， 來對ABO血型進(jìn)行鑒定， 建議在進(jìn)行正向定型的同時， 還要進(jìn)行反向定型， 進(jìn)行正反向的相互印證， 才能做出最終的判斷；③對于紅細(xì)胞經(jīng)生理鹽水洗滌后的正、反向定型過程中出現(xiàn)結(jié)果偏差的現(xiàn)象時， 應(yīng)將樣品置于37℃水浴鍋中加熱5 min后再次觀察樣品現(xiàn)象。據(jù)相關(guān)報道表明， 冷凝集素的凝集能力和效價會隨著溫度的變化而發(fā)生變化， 37℃條件下冷凝集素在低效價時， 其凝集活性會降低甚至消失， 不會感染血型的測定和定型[12， 13]。

此外， 由于臨床實(shí)際操作過程中， 會遇到很多突發(fā)情況， 患者由于受到一些外傷導(dǎo)致失血過多， 急需要輸血， 但是輸血科又無法在第一時間內(nèi)進(jìn)行吸收冷凝集素實(shí)驗(yàn)， 所以在平時實(shí)踐過程中知識經(jīng)驗(yàn)的積累非常重要[14]。如果遇到試管法或者玻片法正向定型和反向定型結(jié)果不符時， 實(shí)驗(yàn)者要進(jìn)行全面的考慮， 排除不規(guī)則天然抗體影響和自己操作失誤以后， 要和臨床進(jìn)行溝通， 詢問患者的病史和臨床用藥情況， 并及時重新進(jìn)行抽血復(fù)查， 確定是否存在冷凝集素的影響[15， 16]。確定有冷凝集素影響之后， 輸血科要和臨床做好溝通， 確?；颊咴谳斞^程中有專人陪護(hù)， 同時注意患者的保暖， 不要讓患者受涼， 并將輸注的懸液進(jìn)行37℃的預(yù)溫處理， 進(jìn)行緩慢滴注， 確保臨床輸血安全。經(jīng)過上述一系列措施之后， 患者的病情得到了有效的控制， 不僅挽救了患者的生命， 也有效避免了醫(yī)患糾紛的發(fā)生。

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[收稿日期：2016-12-27]