維藥小檗果乙醇提取物對(duì)四氯化碳致慢性肝損傷大鼠的保護(hù)作用研究△

木克熱木·克派吐拉 買(mǎi)買(mǎi)提·司馬義 沙拉木·賽杜拉 努爾買(mǎi)買(mǎi)提·艾買(mǎi)提

(1.新疆吐魯番市維吾爾醫(yī)醫(yī)院，新疆 吐魯番 838000； 2.新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院，新疆 烏魯木齊 830000；3.新疆醫(yī)科大學(xué)維吾爾醫(yī)學(xué)院，新疆 烏魯木齊 830000)

維藥小檗果(Berberis heteropoda)為小檗科(Berberidaceae)小檗屬(BerberisL)多年生灌木。也稱(chēng)黑果小檗。小檗果是維吾爾醫(yī)藥用植物。小檗在民間具有悠久的歷史，傳統(tǒng)維吾爾醫(yī)者以其成熟及未成熟的果實(shí)用藥，維吾爾醫(yī)典籍里其作用有大量的文獻(xiàn)報(bào)道[1]。收載于《維吾爾醫(yī)藥學(xué)古籍》(第二冊(cè))，具保肝，健胃和中，澀腸止瀉等功能，維醫(yī)臨床用于治療消化不良、痢疾瀉下、 肝病、口瘡、咽炎等癥。小檗實(shí)性為二級(jí)干寒，主要含有葡萄糖、果糖、蘋(píng)果酸、胡羅卜素類(lèi)物質(zhì)；能增強(qiáng)食欲，并有清熱解毒、抗菌消炎、利膽汁的作用[3]。小檗果功效為調(diào)節(jié)異常膽液質(zhì)和異常血液質(zhì)。在臨床上常用于治療腹瀉、消化不良、口渴等疾病[3]。

1 試驗(yàn)材料

1.1 供試品、劑量設(shè)置及配制方法：乙醇提取物加0.5%羧甲基纖維素鈉(CNC-Na)配制成所需濃度；D—半乳糖氨鹽酸鹽，美國(guó)Sigma 公司產(chǎn)品；丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶試劑盒(GPT)中生北控生物科技股份有限公司，批號(hào)：150491、150311。

天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶試劑盒(GOT)中生北控生物科技股份有限公司，批號(hào)：150812、150912。GSH-Px、SOD和MDA檢測(cè)試劑盒，南京建成生物制品有限公司。

1.2 儀器：全自動(dòng)生化分析儀，意大利AUTOLAB；MP6001型電子天平，上海恒平科學(xué)儀器有限公司，TGL—16G型離心機(jī)，金壇市華峰儀器有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：Wistar大鼠，180～220g，雌雄各半，新疆醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.4 劑量設(shè)計(jì)：根據(jù)急性毒性試驗(yàn)結(jié)果選擇乙醇提取物，以 0.375g/kg、 0.75g/kg、1.5g/kg。

2 方法與結(jié)果[4-5]

取Wistar大鼠90只，依體重均衡隨機(jī)分成6組，正常組腹腔注射生理鹽水10mL/kg，余組大鼠腹腔注射7% 的CCL4橄欖油溶液10mL/kg，2d注射1次，注射2周后次日開(kāi)始給藥，正常組、模型組灌胃生理鹽水10mL/kg，灌胃乙醇提取物3個(gè)不同劑量。連續(xù)給藥8周，同時(shí)實(shí)驗(yàn)組大鼠仍隔2d腹腔注射7%的CCL4橄欖油溶液。末次給藥或生理鹽水后，大鼠禁食不禁水，16h后采取摘眼球取血，離心3000r/pm，15min，取血清作GOT、GPT檢測(cè)；剖取大鼠肝臟，取出完整肝臟，稱(chēng)重，計(jì)算肝指數(shù)，肝指數(shù)=肝臟質(zhì)量(mg)/體質(zhì)量(g)；取肝組織作HE染色，進(jìn)行組織病理學(xué)檢查及勻漿測(cè)定GSH-Px、SOD的活性及MDA的含量。

表1 乙醇提取物對(duì)四氯化碳致慢性肝損傷大鼠肝功能的影響

注：與模型組比較， **P<0.01

表2 乙醇提取物對(duì)四氯化碳致慢性肝損傷大鼠肝功能的影響

注：與模型組比較, **P<0.01，*P<0.05

表3 乙醇提取物對(duì)四氯化碳致慢性肝損傷大鼠肝組織SOD，GSH-Px活性的影響

注：與模型組比較，**P<0.01

表4 乙醇提取物對(duì)四氯化碳致慢性肝損傷大鼠肝組織MDA含量性的影響

注：與模型組相比，*P<0.05，**P<0.01

3 討論

本實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M大鼠腹腔注射7% 的CCL4橄欖油溶液10mL/kg，2d注射1次，結(jié)果表明，模型組血清的GPT(U/L)和GOT(U/L)明顯高于空白組(P<0.01)；肝組織SOD，GSH-Px活性明顯低于空白組(P<0.01)；肝臟病理切片結(jié)果顯示模型組大部分干細(xì)胞胞漿內(nèi)見(jiàn)有多量微脂滴，融合性大脂滴(脂肪變性)，匯管區(qū)有較多量的炎細(xì)胞浸潤(rùn)。肝小葉均可見(jiàn)點(diǎn)狀或壞死，提醒模型組有肝炎的表現(xiàn)，也有脂肪肝的表現(xiàn)。說(shuō)明肝損傷動(dòng)物模型建立成功。

轉(zhuǎn)氨酶是肝細(xì)胞損傷最敏感指標(biāo)之一。谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)在肝臟的含量最高，血清中的含量最低，所以肝細(xì)胞損傷時(shí)，谷丙轉(zhuǎn)氨酶大量的釋放入血，造成血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶增高；所以血清的轉(zhuǎn)氨酶增高可以反映肝細(xì)胞損傷程度[63]。MDA是脂質(zhì)過(guò)氧化物分解的終末產(chǎn)物，可損傷組織細(xì)胞的模型結(jié)構(gòu)，影響膜的功能。從而導(dǎo)致組織細(xì)胞功能的損傷[7]。MDA在脂質(zhì)中的含量可直接反應(yīng)機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化的速率和強(qiáng)度。本研究結(jié)果表明，小檗果乙醇取物灌胃給予四氯化碳致慢性肝損傷大鼠后，明顯降低GPT 和GOT的含量及肝臟指數(shù)(P<0.01)同時(shí)可以提高GSH-Px、SOD的活性，降低MDA的含量。維藥小檗果乙醇提取物不同劑量對(duì)CCL4致大鼠慢性化學(xué)性肝損傷有保肝作用。維吾爾醫(yī)藥小檗果其他不同提取物對(duì)不同原因所致肝損傷的影響有待進(jìn)一步研究。

[1]伊莎克江·買(mǎi)合木提.維吾爾醫(yī)百科全書(shū)(第6集)[M].烏魯木齊：新疆人民衛(wèi)生出版社，1995:242.

[2]阿不力克木·努爾買(mǎi)買(mǎi)提阿吉.維吾爾醫(yī)生藥學(xué)(下冊(cè)、下冊(cè))[M].烏魯木齊：新疆人民衛(wèi)生出版社，2006:225.

[3] 巴亞洪·艾孜孜.維吾爾醫(yī)學(xué)知識(shí)[M].烏魯木齊：新疆人民衛(wèi)生出版社，2006:662.

[4] 陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1993.

[5]李舒丹，厲有名，等.大鼠慢性酒精性肝損傷模型的建立[J].浙江醫(yī)學(xué) 2002，24(9)：524-525.

[6]杜建華，田翠時(shí)，邊永玲.大鼠酒精性肝損傷模型制作研究[J].張家口醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2003，20(5)：8-10.

[7]田時(shí)，宋廣杰，侯麗娟，等.護(hù)肝飲對(duì)大鼠酒精性肝損傷的保護(hù)作用研究[J].中醫(yī)藥學(xué)刊，2004，22(1)：180-182.