EDTA依賴性假性血小板減少病歷分析

姚翔媚+高小麗

【摘 要】 目的：探討乙二胺四乙酸鹽（EDTA）抗凝血導致的患者血小板計數(shù)假性減少的情況，分析產(chǎn)生的原因，并提出避免這種情況的對策。方法：對我院上年度出現(xiàn)的1例血小板計數(shù)值異常偏低的病歷進行回顧性分析，并對該異常病歷再次進行了血涂片處理，對血小板分布的情況再次進行觀察，發(fā)現(xiàn)涂片和計數(shù)存在明顯不符的情況，從而再次進行復檢。在操作的過程中，血細胞計數(shù)方法采用的是手工細胞計數(shù)，血小板計數(shù)分布的情況在血涂片末梢觀察。結(jié)果：復檢時觀察患者血小板計數(shù)都在正常的范圍之內(nèi)，與初次EDTA-K2抗凝血血細胞分析儀觀察到的血小板計數(shù)明顯不符。結(jié)論：使用EDTA抗凝劑有可能導致患者出現(xiàn)血小板凝聚的情況，從而引起EDTA依賴性假性血小板減少癥（PTCP），對患者臨床檢查和治療都會產(chǎn)生嚴重不利的影響。因此，臨床檢驗工作當中，一定要提高對PTCP的重視程度，提高檢驗結(jié)果的準確性。

【關(guān)鍵詞】 EDTA依賴性假性血小板減少癥 乙二酸四乙酸鹽 血小板

抗凝血治療是臨床上常用的一種治療方法，常用的抗凝劑為乙二胺四乙酸鹽，主要是因為這種抗凝劑對患者血細胞的影響相對較小，但是仍然會導致機體偶然出現(xiàn)血小板凝聚的現(xiàn)象，進而導致出現(xiàn)EDTA依賴性假性血小板減少癥，對臨床治療產(chǎn)生不利的影響[1-4]。血小板在機體凝血當中發(fā)揮著重要的作用，血小板降低會對患者產(chǎn)生十分不利的影響，甚至有可能會導致患者喪失生命，因此臨床上醫(yī)生十分關(guān)注血小板減少的情況。如果患者出現(xiàn)EDTA依賴性假性血小板減少癥，容易導致過度治療以及不必要檢查，甚至還會出現(xiàn)漏診或誤診的情況。為了研究EDTA依賴性假性血小板減少癥，明確患者是否真正出現(xiàn)血小板減少，本文選取我院上年度出現(xiàn)類似情況的1例患者進行分析和研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料

資料來源于我院上年度治療過程中出現(xiàn)的1例血小板計數(shù)異常偏低情況的患者，患者為女性，年齡55歲，來院治療的原因是發(fā)現(xiàn)顱內(nèi)占位擬行手術(shù)治療。

1.2 使用的儀器和試劑

1.2.1 儀器 我院采用的分析儀為全自動血球計數(shù)儀，日本生產(chǎn)（MEK-8222K

），分析儀經(jīng)過校正之后，各項指標都處于正常的水平。

1.2.2 試劑 本次研究采用的試劑主要包括溶血劑、稀釋液、清洗液、草酸銨血小板稀釋液、白細胞稀釋液、EDTA-K2真空抗凝管、枸櫞酸鈉真空管、瑞氏染液。溶血劑、稀釋以及清洗液都是與分析儀相配套的進口試劑，草酸銨血小板稀釋液濃度為1%，醫(yī)院科室自配，白細胞稀釋液也是科室自配。

1.3 方法

1.3.1 儀器使用方法 分別使用EDTA-K2真空抗凝管和枸櫞酸鈉真空管抽取患者的靜脈血，并混合均勻，然后使用全自動血細胞分析儀在全血模式之下進行檢測，準確記錄WBC值以及PLT值；稀釋血液模式下測定，具體操作如下：取患者無名指末梢的血液10μL，加入標準的稀釋液當中，混合均勻，靜置5分鐘，然后將分析儀調(diào)整到稀釋血液模式，將標本在稀釋模式下進行測定，準確記錄WBC值以及PLT值。

1.3.2 手工法 準確抽取患者手指末梢血20μL，與0.38ml濃度為1%的草酸銨血小板稀釋液進行混合，搖晃均勻，直到完全溶血之后再次搖晃均勻，并在計數(shù)池當中滴入一滴血小板懸液，靜置10-15分鐘，然后使用高倍計數(shù)血小板數(shù)。對于白細胞數(shù)的手工計數(shù)采用同樣的方法進行處理。

1.3.3 血涂片瑞氏染色觀察：分別選取手指末梢血以及EDTA-K2抗凝血制作血涂片，然后進行瑞氏染色，通過油鏡觀察血小板的形態(tài)。

2 結(jié)果

該例患者入院之后，初次采用EDTA-K2抗凝血進行血常規(guī)檢查，檢查結(jié)果發(fā)現(xiàn)血小板低于正常值，然而患者并沒有出現(xiàn)明顯的血小板減少相關(guān)癥狀，并且肝脾淋巴結(jié)正常。進而對患者又使用不同的抗凝劑重新采集全血和稀釋血進行復查，同時對患者的凝血功能、肝腎功能以及紅細胞沉降等情況進行檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)再次采用EDTA抗凝血劑時患者血小板的檢測值仍然偏低，但是使用其它抗凝血的方法進行復查的結(jié)果正常，其他的各項檢查結(jié)果均未發(fā)現(xiàn)異常，并且對手指末梢血采用血涂片法進行血小板數(shù)量和分布情況的檢測，結(jié)果顯示均未出現(xiàn)異常，但血涂片直接對EDTA抗凝血進行檢測，發(fā)現(xiàn)血小板存在聚集成簇的情況，甚至成片，很少見血小板單純的存在，表明患者出現(xiàn)血小板計數(shù)假性減少的原因為血小板聚集在一起，與患者機體功能沒有直接的關(guān)系。

對此患者采用的三種方法進行檢測結(jié)果如下：EDTA抗凝血標本采用血細胞分析儀進行檢測，血小板計數(shù)為45×109/L，WBC總數(shù)為25.1×109/L；通過顯微鏡對枸櫞酸鈉抗凝血標本進行檢測，結(jié)果血小板計數(shù)為220×109/L，WBC總數(shù)為19.3×109/L，然后采用血細胞分析儀對其進行檢測，血小板計數(shù)為186×109/L，WBC總數(shù)為18.5×109/L。

3 討論

相對于其他的抗凝劑，EDTA對血液的影響較小，因此國際血液學標準委員會將其作為使用血細胞分析儀進行血細胞檢測的常用抗凝劑。通常情況下，EDTA對血液當中血細胞的形態(tài)以及血小板的數(shù)量是沒有影響的，但是由于患者個體差異性，偶爾會出現(xiàn)血小板聚集成塊或者成片的情況，進而導致患者的檢測結(jié)果出現(xiàn)血小板計數(shù)明顯降低的情況，這種情況也被成為EDTA依賴性假性血小板減少癥[5-8]。由于血小板是機體參與凝血的重要組成部分，如果出現(xiàn)EDTA依賴性假性血小板減少癥，有可能會導致誤診的出現(xiàn)，進而影響患者治療的情況。因此，EDTA依賴性假性血小板減少癥這種情況一定要引起臨床醫(yī)生的高度重視，正確判斷患者是否真的出現(xiàn)血小板計數(shù)減少的情況[9-13]。

3.1 EDTA依賴性假性血小板減少癥出現(xiàn)的原因分析 （1）EDTA-K2的特性：EDTA-K2具有使血液產(chǎn)生免疫介導的作用，導致出現(xiàn)冷抗血小板抗體，進而導致血小板發(fā)生抗體抗原反應，產(chǎn)生凝聚現(xiàn)象。（2）個體差異性：EDTA依賴性假性血小板減少癥一般情況下不會出現(xiàn)，只有少數(shù)的患者會出現(xiàn)。有研究表明，這類患者血小板的表面存在一種隱蔽性的抗原，在EDTA促使血小板活化的同時，會導致血小板表面的抗原與血漿當中自身抗體相結(jié)合，進而產(chǎn)生一種活性物質(zhì)，這些活性物質(zhì)會導致血小板纖維蛋白原受體活性增強，致使血小板凝聚成一團，進而導致血小板計數(shù)出現(xiàn)假性減少的情況。（3）儀器自身的特點：全自動血細胞分析儀工作的原理是電阻法或化學發(fā)光原理，對于體積大小不同的細胞，通過計數(shù)小孔時電阻會增加，進而產(chǎn)生脈沖數(shù)目，然后通過脈沖數(shù)目來計數(shù)細胞的數(shù)量。因此，儀器只是對細胞的大小進行判斷，但是對于細胞的類型還不能明確判斷，這樣以來，聚集在一起的血小板就會被當中一個單細胞或者是其他的類型的細胞計算，由此導致血小板計數(shù)明顯減少[14-15]。

3.2 糾正方法 通過本文的分析發(fā)現(xiàn)，采用另外方法對機體血小板計數(shù)進行復檢是切實可行的，可以有效的糾正EDTA依賴性假性血小板減少的現(xiàn)象，并且操作相對比較簡單，雖然有報道指出，個別患者采用枸櫞酸鈉抗凝劑之后仍然會出現(xiàn)血小板計數(shù)減少的情況，但是總體上來說，使用枸櫞酸鈉抗凝劑是糾正EDTA依賴性假性血小板減少癥的可用方法之一。此外，檢測操作時需要嚴格按照規(guī)定進行，儀器和器材的使用都需要規(guī)范。在將懸液滴入計數(shù)池之后，要靜置10-15分鐘的時間，避免時間過短，導致血小板沒有完全沉下；同時所有的檢測需在1h之內(nèi)完成，避免時間過長，導致血小板被破壞，從而影響計數(shù)的準確性。另外，在檢驗結(jié)果表明患者的血小板數(shù)量減少時，一定要綜合分析患者的病情、凝血功能情況、病史等情況，及時與患者主治醫(yī)生溝通，全面了解患者的實際情況，以便及時跟蹤檢測，保證檢測結(jié)果的準確性，為患者治療提供可靠的判斷標準，防止出現(xiàn)誤診、漏診等情況。

3.3 各種檢查方法分析 血小板計數(shù)檢查結(jié)果是否準確直接關(guān)系到臨床診斷和治療，因此一定要保證檢查結(jié)果的準確性，對于檢查結(jié)果存在疑問的標本需要使用其他方式復查。手工法是臨床上評價血小板計數(shù)準確性的參考方法，但是這種檢查方法得到的結(jié)果精密性比較差，雖然如此，但是這種方法仍是臨床上有效的確定血小板計數(shù)的復檢方法。使用枸櫞酸鈉抗凝劑進行復檢時，如果檢查的結(jié)果與手工法檢查的結(jié)果差異明顯，則不能像臨床上發(fā)送檢驗報告書，需要進一步確定檢查結(jié)果的準確性。使用瑞氏染色方法對血涂片進行觀察，如果發(fā)現(xiàn)存在血小板大量聚集但是數(shù)量并沒有減少的情況，則需要將其作為可疑病例進一步復查。

EDTA依賴性假性血小板減少癥可見于健康人群和患病人群，患病人群多為癌癥、肝病、肺心病、全身免疫性疾病等患者，發(fā)生率非常低。盡管如此，一旦發(fā)生這種情況，臨床上會進行大量的輔助檢查，從而導致醫(yī)療資源的浪費，甚至還會發(fā)生誤診等情況，對患者造成嚴重不利的影響。因此，對于沒有明顯血小板減少臨床表現(xiàn)的人一定要使用不同的方法進行復檢，以提高檢查結(jié)果的準確性，避免對臨床醫(yī)生造成誤導，發(fā)生誤診。

綜上所述，使用EDTA抗凝劑有可能導致患者出現(xiàn)血小板凝聚的情況，從而引起EDTA依賴性假性血小板減少癥（PTCP），主要的表現(xiàn)為血小板計數(shù)減少，白細胞增多，對患者臨床檢查和治療都會產(chǎn)生嚴重不利的影響，導致輔助檢查項目增多，嚴重時導致出現(xiàn)誤診的情況。因此，臨床檢驗工作當中，一定要提高對PTCP的重視程度，提高檢驗結(jié)果的準確性。

參考文獻

[1] 陳言偉，張一民，董娟等.EDTA依賴性假性血小板減少癥1例分析[J].中國誤診學雜志，2011，11（4）：849.

[2] 李麗紅，金玲，李威等.我院56例EDTA依賴性假性血小板減少病例分析及臨床處理[J].中國實驗診斷學，2013，17（12）：2232-2234.

[3] 曹錦梅，王兵.EDTA依賴性假性血小板減少原因分析及糾正方法[J].海南醫(yī)學，2016，27（11）：1881-1882.

[4] 孫寶旗，郭欣.EDTA依賴性假性血小板減少1例[J].河北醫(yī)科大學學報，2014，35（2）：159，165，169.

[5] 李波，史敏，宋軍等.EDTA依賴性假性血小板減少的臨床和實驗室分析[J].河北醫(yī)科大學學報，2012，33（9）：1028-1031.

[6] 田維娟，侯霞，張之等.EDTA依賴性假性血小板減少檢測方法的探討[J].大家健康（下旬版），2016，10（7）：64-64.

[7] 李榮輝，高莉莉，姜蕾等.3例EDTA依賴性假性血小板減少結(jié)果分析[J].檢驗醫(yī)學與臨床，2012，9（14）：1811-1812.

[8] 邵永生，張嵩.阻抗法稀釋模式在EDTA依賴性假性血小板減少癥中的研究[J].實用醫(yī)學雜志，2016，32（2）：303-305.

[9] 郭利利，顧平，張葵等.10例EDTA依賴性假性血小板減少癥血小板檢測的動態(tài)分析[J].臨床輸血與檢驗，2012，14（3）：212-214.

[10] 羊裔明，周輝，廖建梅等.妊娠晚期乙二胺四乙酸依賴性假性血小板減少一例的識別與診治[J].臨床誤診誤治，2013，26（3）：47-49.

[11] 李得平，呂靜靜.急性心肌梗死伴EDTA依賴性假性血小板減少癥一例[J].實用心腦肺血管病雜志，2015，23（12）：116-117.

[12] 曹科，林曉文，羅小娟等.EDTA依賴性假性血小板減少癥誤診1例[J].國際檢驗醫(yī)學雜志，2012，33（12）：1536-1536.

[13] 于明，靳海龍，張寶秋等.27例乙二胺四乙酸依賴性假性血小板減少特點及臨床分析[J].國際檢驗醫(yī)學雜志，2016，37（9）：1200-1201，1204.

[14] 陳宇，王琳，沈涌海等.間接稀釋法在EDTA依賴性假性血小板減少癥中的臨床應用[J].中華全科醫(yī)學，2015，13（8）：1328-1329.

[15] 栗春香.EDTA依賴性假性血小板減少癥（EDTA-PTCP）患者的臨床實驗室特征以避免臨床的誤診研究[J].心理醫(yī)生，2015，21（18）：49-50.