探討高鉛血癥兒童腸道菌群變化情況

李秋燕　李樹然　彭鎮(zhèn)委

【摘要】 目的 研究分析高鉛血癥兒童腸道菌群構成變化情況。方法 30例高鉛血癥兒童為觀察組， 30例健康兒童為對照組， 均檢測兩組兒童腸道菌群中乳酸桿菌、雙歧桿菌、腸球菌和大腸桿菌的數(shù)量以及腸道內(nèi)雙歧桿菌和大腸桿菌數(shù)量對數(shù)值的比值（B/E值）。結果 兩組兒童腸道菌群數(shù)量比較結果顯示， 觀察組兒童的雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸桿菌明顯低于對照組兒童， 差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。觀察組兒童B/E值為（0.784±0.334）， 對照組兒童B/E值為（1.213±0.351）， 兩組B/E值比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結論 高鉛血癥兒童的體內(nèi)有腸道菌群紊亂的情況發(fā)生。

【關鍵詞】 高鉛血癥；兒童；腸道菌群；變化

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.07.054

鉛作為不可降解的日常生活中多見的一種污染物。由于發(fā)育的特點以及代謝特點的原因兒童與成年人存在較大的差別， 在相同環(huán)境下的正常人群相比， 兒童對鉛中毒更為敏感更為明顯， 特別是對兒童行為能力的生長發(fā)育以及嬰幼兒智力的發(fā)育有重要影響。兒童鉛中毒途徑主要由受鉛污染的食物和消化道接觸鉛， 上述兩種中毒途徑占總中毒病例的85%以上[1]。小腸的主要功能是吸收， 同時對鉛也同樣吸收， 然而大腸對鉛也有部分吸收的功效。為此腸道菌群接觸就不可避免地存在一起， 但這二者之間的相互性至今尚不明白同時也未見相關的報道。本次研究作者經(jīng)過對高鉛血癥患兒糞便中的菌落數(shù)變化情況和B/E情況進行系統(tǒng)分析， 探討高鉛血癥患兒和腸道菌群的構成之間的關系?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 將本社區(qū)健康服務中心在2015年4月～2016年4月收治的30例高鉛血癥兒童為觀察組， 30例患兒均符合相關文獻資料中的兒童高鉛血癥的診斷標準， 即兒童的血鉛值≥100 μg/L（0.483 μmol/L）。觀察組患兒中男18例， 女12例；年齡2～6歲。為了有效排除混雜等因素對本次研究的影響， 特采用1：1配對法選取同期參加體檢的健康兒童30例為對照組， 其中男18例， 女12例；年齡2～6歲， 兒童的血鉛值<100 μg/L。兩組兒童的年齡、性別等一般資料， 比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 腸道菌群檢測方法 ① 采集受檢兒童1 h內(nèi)新鮮糞便， 使用無菌方法進行收集同時在-80℃的條件下進行保存。②稱取標本（采集的新鮮糞便）0氣袋進行10倍系類的稀釋到10-1～10-9， 與原液一起共計10個稀釋度。③ 采用微量移液器分別抽取受試標本10 μl， 分別接種于PZ、 MRSA、 EMB、 TPY選擇性培養(yǎng)基礎上， 采用L棒均勻的涂抹標本， 給予培養(yǎng)受試新鮮糞便的各種有益菌， 最后收集數(shù)據(jù)。④將 TPY培養(yǎng)基和MRSA培養(yǎng)基放入?yún)捬豕拗校?同時置于厭氧后封閉氣袋， 在孵育箱中（溫度設置在37℃）培養(yǎng)2 d；與此同時將EMB、PZ培養(yǎng)基直接放入孵育箱中（溫度設置在37℃）培養(yǎng)1 d。⑤細菌培養(yǎng)結束后， 再選取具有特征性的菌落進行菌落圖片染色及鏡檢， 采用細菌的形態(tài)學特征和革蘭染色學特征進行判斷目的菌。在準確確定目的菌之后， 按照計算平板上的稀釋度計數(shù)以及活菌計數(shù)， 采用活菌計數(shù)公式計算出結果后進行計數(shù)， 其結果采用每克糞便濕質(zhì)量中的菌落， 形成單位的對數(shù)值進行表示（即log CFU/g）。

1. 3 觀察指標 觀察兩組兒童腸道內(nèi)的雙歧桿菌和大腸桿菌以及乳酸桿菌、腸球菌的數(shù)量；B/E情況。當B/E值<1時說明腸道的抵抗力降低， 說明菌群結構發(fā)生紊亂；當菌群結構正常則B/E值≥1。

1. 4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計學軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料以均數(shù)±標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗；計數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2. 1 兩組兒童腸道菌群數(shù)量比較 觀察組患兒的雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸桿菌數(shù)量明顯低于對照組兒童， 差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表1。

2. 2 兩組兒童B/E值比較 觀察組兒童B/E值<1， 對照組兒童B/E值>1， 兩組B/E值比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

人體的腸道中棲息著一千多個細菌， 其中絕大多數(shù)為厭氧菌， 其中主要有大腸埃希菌屬、擬桿菌屬、雙歧桿菌屬和梭菌以及乳酸桿菌等， 在遠端小腸和結腸中分布著眾多細菌中的有益菌， 其中十二指腸和胃等消化系統(tǒng)中均存在有菌群， 人體胃腸道中的生物學屏障是由眾多的腸道菌群所構成， 在維持腸道結構和維持腸道正常生理功能中腸道菌群發(fā)揮了具有重要作用。由于年齡關系兒童腸道菌群處在生理性演變過程中， 年齡越小的患兒腸道的微生態(tài)平衡便越差， 進而造成腸道微生態(tài)紊亂癥狀[2-4]。鉛作為不可降解的日常生活中多見的一種污染物， 由于發(fā)育的特點以及代謝特點的原因兒童與成年人存在較大的差別， 與在相同環(huán)境下的正常人群相比， 兒童對鉛中毒更為敏感更為明顯， 特別是對兒童行為能力的發(fā)育和智力的發(fā)育有重要影響。低濃度的鉛中毒能引起患兒智能損傷， 患兒出現(xiàn)學習行為等異常出現(xiàn)。相關研究顯示[5-7]， 小腸和大腸均能對鉛給予有效吸收， 然而大腸內(nèi)主要寄居為腸道菌群， 為宿主提供豐富發(fā)熱能量底物， 進而腸道菌群的紊亂導致代謝系統(tǒng)混亂， 進而影響對鉛物質(zhì)的吸收。其次， 腸道菌群的相對穩(wěn)定對維持人體正常排便功能具有十分重要意義， 然而腸道菌群的紊亂與否， 對便秘的產(chǎn)生和加重有重要接影響， 從而加重了對鉛的吸收[8-10]。最后由于微量元素（如銅、鈣、鋅、鐵、鎂）在腸道吸收過程中和鉛一起在同一部位轉運蛋白， 為此鉛與鋅、鐵、鈣之間均有拮抗功效， 進而充分的補充鋅劑和鈣劑以及鐵劑等均能降低血鉛在體內(nèi)的含量。由于腸道正常菌群中雙歧桿菌可有效利用對碳水化合物的發(fā)酵， 促進短鏈脂肪酸等產(chǎn)物不斷增多， 進而有效的降低了pH值， 促進腸道對鈣、鐵、鎂等離子的吸收[11-13]。同時部分益生菌對鉛有驅逐的功效。相關研究發(fā)現(xiàn)雙歧桿菌菌株和乳酸桿菌菌株能快速清除重金屬鉛和鎘。

本次研究顯示， 觀察組兒童的雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸桿菌數(shù)量明顯低于對照組兒童， 差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。觀察組兒童B/E值<1， 對照組兒童B/E值>1， 兩組B/E值比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。這充分的有力的證實了雙歧桿菌菌株和乳酸桿菌菌株能快速清除重金屬鉛和鎘。同時， 相關研究證實[14]雙歧桿菌L46和乳酸桿菌ME3能在人體外經(jīng)過可逆性的表面結合的形式， 充分清除水溶液中的鉛和鎘。由于充分考慮體內(nèi)腸道益生菌具有對鉛有效結合的能力， 同時益生菌數(shù)量的不斷增加能有效的降低鉛吸收。

總之， 高鉛血癥兒童的體內(nèi)有腸道菌群紊亂的情況發(fā)生。

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[收稿日期：2017-01-12]