中藥復(fù)方多糖對不同MHCB-LβII基因型雞血清細胞因子質(zhì)量濃度的影響

楊紅洋，朱曉慶，商云霞，谷新利，郭 曉

(石河子大學(xué) 動物科技學(xué)院，新疆石河子 832003)

中藥復(fù)方多糖對不同MHCB-LβII基因型雞血清細胞因子質(zhì)量濃度的影響

楊紅洋，朱曉慶，商云霞，谷新利，郭 曉

(石河子大學(xué) 動物科技學(xué)院，新疆石河子 832003)

為探究MHCB-LβII基因多態(tài)性對中藥復(fù)方多糖免疫調(diào)節(jié)劑量的影響，采用PCR-SSCP方法將500羽黃麻肉雞按不同MHCB-LβII基因型分組，再將各組分成高、中、低劑量中藥復(fù)方多糖組和空白對照組。分別于8日齡皮下注射50、25、 12.5 mg/mL中藥復(fù)方多糖和生理鹽水，每只0.2 mL，連續(xù)注射7 d，于21、42、56、70日齡各組隨機取5只試驗雞，翅靜脈采血并分離血清，測定血清中IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ和TNF-α的質(zhì)量濃度。結(jié)果顯示，中藥復(fù)方多糖能提高不同MHCB-LβII基因型雞血清中IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ和TNF-α的質(zhì)量濃度，且高劑量中藥復(fù)方多糖組中AA基因型個體血清中IL-2、IL-4、IL-6和IFN-γ質(zhì)量濃度高于AB、BB、AC、AD基因型個體的，中劑量中藥復(fù)方多糖組中AB基因型個體血清中IL-2、IL-4和IFN-γ水平高于AA、BB、AC、AD基因型個體的，低劑量中藥復(fù)方多糖組中AB基因型個體血清中IL-2、IL-4、IL-6和IFN-γ高于AA、BB、AC、AD基因型個體的。表明中藥復(fù)方多糖對不同MHCB-LβII基因型雞的最適免疫調(diào)節(jié)劑量不同。

中藥復(fù)方多糖；MHCB-LβII基因；細胞因子；雞

雞主要組織相容性復(fù)合體(Major Histocompatibility Complex，MHC)又稱B復(fù)合體，是16號染色體上一組緊密連鎖的高度多態(tài)性基因座組成的一個遺傳區(qū)域，它含有B-F、B-L和B-G 3個亞區(qū)[1]。其中，B-L區(qū)基因編碼MHC II類分子，主要負責(zé)遞呈外源性抗原，供CD4+T細胞識別，誘導(dǎo)細胞因子的分泌，調(diào)節(jié)機體抗體產(chǎn)生，影響細胞毒性T細胞活性，參與機體細胞免疫和體液免疫反應(yīng)[2]。

中草藥是中國特有的中醫(yī)理論與實踐相結(jié)合的產(chǎn)物，其資源豐富、歷史悠久，作用和安全性已被人們認可[3]，作為提高動物免疫力的免疫增強劑被廣泛研究并運用到畜禽生產(chǎn)中，以增強畜禽機體抵抗病原的能力。中藥有效成分中的多糖是起免疫增強作用的主要成分之一，現(xiàn)已證明很多中藥多糖能通過影響白介素(如IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12)、干擾素(如IFN-α、IFN-γ)、腫瘤壞死因子(TNF)等細胞因子的生成和表達來調(diào)節(jié)機體免疫力[4]。也有研究表明多糖不僅能被MHC II分子呈遞而被αβ-T細胞的TCR直接或間接識別，激活適應(yīng)性細胞免疫應(yīng)答，亦能有效激活B淋巴細胞，誘導(dǎo)特異性抗體的產(chǎn)生[5]。而雞MHC基因多態(tài)性使得不同個體對相同抗原有不同的免疫反應(yīng)，從而導(dǎo)致機體免疫功能存在個體差異，進而可能影響中藥多糖的最適免疫增強劑量。

本研究采用PCR-SSCP方法對試驗雞進行MHCB-LβII基因分型后給予不同劑量中藥復(fù)方多糖，通過測定各組試驗雞細胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ和TNF-α的質(zhì)量濃度，探討MHCB-LβII基因多態(tài)性對中藥復(fù)方多糖提高雞細胞因子含量的最佳使用劑量是否有影響。

1 材料與方法

1.1 材 料

1.1.1 試驗藥物 中藥復(fù)方由當(dāng)歸、黨參、熟地、川芎、山楂、何首烏、淫羊藿、麥冬、茯苓、補骨脂和黃芪11味中藥組成，各單味藥均購自石河子市醫(yī)藥公司。中藥多糖(w=77.10%)由石河子大學(xué)化工學(xué)院提供。用滅菌蒸餾水將中藥復(fù)方多糖配制成高劑量(50 mg/mL)、中劑量(25 mg/mL)、低劑量(12.5 mg/mL)3個質(zhì)量濃度。雞IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ和TNF-α ELISA檢測試劑盒購自上海藍基生物科技有限公司；血液基因組DNA提取試劑盒購自天根生化科技(北京)有限公司；PCR Mixture購自寶生物工程(大連)有限公司；新城疫活疫苗購自新疆石河子市八師獸醫(yī)站；其他試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.1.2 試驗動物及分組 500羽1日齡黃麻肉雞購自石河子市孵化場，臨床檢查健康。根據(jù)MHCB-LβII基因第2外顯子PCR-SSCP的檢測結(jié)果分組，再將各組分成高、中、低劑量中藥多糖組和空白對照組。分別于8日齡皮下注射50、25、12.5 mg/mL中藥復(fù)方多糖及生理鹽水，每只0.2 mL，連續(xù)注射7 d。

所有試驗雞于7日齡進行新城疫疫苗的點眼和滴鼻免疫，27日齡進行二免，并且均采用相同的飼養(yǎng)方法、飼養(yǎng)條件、飼料品質(zhì)和飼養(yǎng)管理進行常規(guī)飼養(yǎng)。

1.1.3 試驗儀器 酶標儀(美國熱電FC型號)，微量移液器，恒溫培養(yǎng)箱，等。

1.2 方 法

1.2.1 DNA提取 分別采集 500羽試驗雞的外周血，按照 DNA 提取試劑盒說明書提取雞全血DNA，4 ℃冰箱保存，備用。

1.2.2 引物設(shè)計 參照GenBank收錄的雞MHCB-LβII基因序列(NC_006103.2)第2外顯子信息，由生工生物工程(上海)股份有限公司完成引物設(shè)計和合成，擴增目的條帶大小308 bp，上游引物Forward：5′-CTGAATACTGGAACAGCAACG-3′，下游引物Reverse：5′-ACCACTTCACCTCGATCTCC-3′。

1.2.3 PCR擴增 擴增反應(yīng)總體積為 20 μL：Mix 12 μL，上下游引物各 1 μL，基因組DNA 1 μL，滅菌ddH2O 5 μL。反應(yīng)條件：94 ℃預(yù)變性3 min；94 ℃變性30 s，60 ℃復(fù)性 30 s ，72 ℃延伸1 min，30 個循環(huán)；最后 72 ℃延伸 5 min；4 ℃保存。

1.2.4 PCR-SSCP檢測 3 μL PCR產(chǎn)物和8 μL上樣緩沖液(V=98%甲酰胺，V=0.025%溴酚藍，V=0.025%二甲苯青，10 mmol EDTA)混勻后98 ℃水浴變性10 min，立即冰浴10 min。樣品在8%非變性聚丙烯酰氨凝膠中電泳。電泳結(jié)束后銀染，用聚焦成像系統(tǒng)觀察結(jié)果并照相。

1.2.5 雞血清IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ和TNF-α水平檢測 每組隨機取5只試驗雞，于21、42、56、70日齡翅靜脈采血，常規(guī)分離血清。按照雞IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ和TNF-α ELISA檢測試劑盒說明書步驟操作，用酶聯(lián)免疫檢測儀測定450 nm波長下的吸光度值(OD值)，并根據(jù)ELISA檢測試劑盒中標準品濃度及其對應(yīng)的OD值獲得標準曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣品的OD值計算出相應(yīng)樣品IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ和TNF-α的質(zhì)量濃度。

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 19.0對試驗數(shù)據(jù)進行方差分析和多重比較。數(shù)據(jù)均以“平均數(shù)±標準差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 PCR-SSCP基因型檢測

對所有DNA樣品采用PCR-SSCP方法進行MHCB-LβII基因型檢測，發(fā)現(xiàn)有5種基因型，即AA基因型(共186羽)、AB基因型(共180羽)、BB基因型(共68羽)、AC基因型(共35羽)、AD基因型(共31羽)(圖1)。

2.2 中藥復(fù)方多糖對不同MHC B-LβII基因型雞血清中IL-2水平的影響

與空白對照組相比，各劑量中藥復(fù)方多糖均能提高不同基因型雞血清中IL-2的質(zhì)量濃度，但在同一劑量的中藥復(fù)方多糖組和空白對照組中，不同基因型雞血清中IL-2的質(zhì)量濃度不同(表1)。其中，42日齡時，高劑量組AA基因型雞血清中IL-2的質(zhì)量濃度顯著高于AB、BB、AC、AD基因型(P<0.05)，AB、BB、AC基因型顯著高于AD基因型(P<0.05)，56和72日齡時，AA基因型顯著高于AB、BB、AC、AD基因型(P<0.05)；中劑量組各日齡雞AB基因型均顯著高于AA、BB、AC、AD基因型(P<0.05)；21日齡時，低劑量組AB基因型顯著高于AC、AD基因型(P<0.05)，42和70日齡時，AB基因型顯著高于AA、BB、AC、AD基因型(P<0.05)，56日齡時，AB基因型顯著高于AA、BB、AC、AD基因型(P<0.05)，AA、BB基因型顯著高于AC、AD基因型(P<0.05)；21、42、和56日齡時，空白對照組的AB基因型顯著高于AA、BB、AC、AD基因型(P<0.05)，42日齡時，AA基因型顯著高于AD基因型(P<0.05)，70日齡時，AB基因型顯著高于AD基因型(P<0.05)。

1～3.AC型 Type AC；4～6.BB型 Type BB；7～9.AA型 Type AA；10～12.AB型 Type AB；13～15.AD型 Type AD

圖1 部分試驗雞MHCB-LβII基因型的PCR-SSCP檢測
Fig.1 PCR-SSCP detection ofMHCB-LβIIgenotype in partial chicken

表1 不同MHC B-LβII基因型黃麻肉雞血清IL-2的質(zhì)量濃度Table 1 Mass fraction of serum IL-2 in different MHC B-LβII genotype Huangma chickens pg/mL

注：同一劑量組中，同列數(shù)據(jù)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。下表同。

Notes：In the same dose group,different lowercase letters with the same column data was significant difference(P<0.05).The same as follows.

2.3 中藥復(fù)方多糖對不同MHC B-LβII基因型雞血清中IL-4水平的影響

與空白對照組相比，各劑量中藥復(fù)方多糖均能提高不同基因型雞血清中IL-4的質(zhì)量濃度，但在同一劑量的中藥復(fù)方多糖組和空白對照組中，不同基因型雞血清中IL-4的質(zhì)量濃度不同(表2)。其中，21日齡時，高劑量組AA基因型雞血清中IL-4的質(zhì)量濃度顯著高于AB、BB、AC、AD基因型(P<0.05)，其余各日齡AA基因型高于AB、BB、AC、AD基因型，但無顯著性差異(P>0.05)；42日齡時，中劑量組的AB基因型顯著高于AA、BB、AC、AD基因型(P<0.05)，其余各日齡AB基因型高于AA、BB、AC、AD基因型，但無顯著性差異(P>0.05)；21日齡和70日齡時，低劑量組的AB基因型顯著高于BB、AC、AD基因型(P<0.05)，42日齡和56日齡時，AB基因型高于AA、BB、AC、AD基因型，但無顯著性差異(P>0.05)；空白對照組的各基因型雞血清中IL-4 質(zhì)量濃度無明顯差異。

表2 不同MHC B-LβII基因型黃麻肉雞血清IL-4的質(zhì)量濃度Table 2 Mass fraction of serum IL-4 in different MHC B-LβII genotype Huangma chickens pg/mL

2.4 中藥復(fù)方多糖對不同MHC B-LβII基因型雞血清中IL-6水平的影響

與對照組相比，各劑量中藥復(fù)方多糖均能提高不同基因型雞血清中IL-6的質(zhì)量濃度，且中劑量組作用最好，但在同一劑量的中藥復(fù)方多糖組和空白對照組中，不同基因型雞血清中IL-6的質(zhì)量濃度不同(表3)。其中，高劑量組的AA基因型雞血清中IL-6質(zhì)量濃度略高于AB、BB、AC、AD基因型，中劑量組的AC基因型略高于AA、AB、BB、AD基因型，低劑量組和對照組的AB基因型略高于AA、BB、AC、AD基因型，3個劑量組和對照組各基因型間雞血清中IL-6的質(zhì)量濃度均無顯著性差異(P>0.05)。

2.5 中藥復(fù)方多糖對不同MHC B-LβII基因型雞血清中IFN-γ水平的影響

與對照組相比，3種不同劑量中藥復(fù)方多糖均能提高不同基因型雞血清中IFN-γ的質(zhì)量濃度，但在同一劑量的中藥復(fù)方多糖組和空白對照組中，不同基因型雞血清中IFN-γ的質(zhì)量濃度不同(表4)。其中，高劑量組的AA基因型雞血清中IFN-γ的質(zhì)量濃度略高于AB、BB、AC、AD基因型，中劑量組和低劑量組的AB基因型略高于AA、BB、AC、AD基因型，空白對照組的AA基因型略高于AB、BB、AC、AD基因型，3個劑量組和空白對照組各基因型間雞血清中IFN-γ的質(zhì)量濃度均無顯著性差異(P>0.05)。

表3 不同MHC B-LβII基因型黃麻肉雞血清IL-6的質(zhì)量濃度Table 3 Mass fraction of serum IL-6 in different MHC B-LβII genotype Huangma chickens pg/mL

表4 不同MHC B-LβII基因型黃麻肉雞血清IFN-γ的質(zhì)量濃度Table 4 Mass fraction of serum IFN-γ in different MHC B-LβII genotype Huangma chickens pg/mL

2.6 中藥復(fù)方多糖對不同MHC B-LβII基因型雞血清中TNF-α水平的影響

3種不同劑量的中藥復(fù)方多糖均能提高不同基因型雞血清中TNF-α的質(zhì)量濃度，但在同一劑量的中藥復(fù)方多糖組和空白對照組中，不同基因型雞血清中TNF-α的質(zhì)量濃度不同(表5)。其中，高劑量組的AD基因型雞血清中TNF-α的質(zhì)量濃度高于AA、AB、BB、AC基因型，中劑量組的AA基因型高于AB、BB、AC、AD基因型，低劑量組的AC基因型高于AA、AB、BB、AD基因型，空白對照組的AB基因型略高于AA、BB、AC、AD基因型，3個劑量組和空白對照組各基因型雞間血清中TNF-α的質(zhì)量濃度均無顯著性差異(P>0.05)。

表5 不同MHC B-LβII基因型黃麻肉雞血清TNF-α的質(zhì)量濃度Table 5 Mass fraction of serum TNF-α in different MHC B-LβII genotype Huangma chickens pg/mL

3 討論與結(jié)論

細胞因子是由免疫活性細胞和其他細胞分泌，介導(dǎo)和調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)以及炎癥反應(yīng)等的一類小分子糖蛋白[6]，它們在促進免疫細胞增殖分化、增強對感染的抵抗力、調(diào)節(jié)機體的免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)等方面發(fā)揮著重要作用[7]。其中，IL-2主要由Th1細胞亞群分泌，主要介導(dǎo)機體的細胞免疫[8]；IL-4主要由Th2細胞亞群分泌，主要促進體液免疫[9]；IL-6由淋巴樣細胞和非淋巴樣細胞產(chǎn)生，它能夠促進B淋巴細胞的增殖并促使其合成為分泌型免疫球蛋白的mRNA，增加免疫球蛋白IgM、IgA、IgG的分泌，同時也能促進造血干細胞的生成，在造血和免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)方面起著至關(guān)重要的作用[10-11]；IFN-γ屬于Th1型細胞因子，它由Th0和Th1細胞及幾乎所有的CD8+T細胞產(chǎn)生[12]，在初級免疫應(yīng)答中可提高MHCII類分子的表達和細胞的抗原遞呈能力，引起記憶性T細胞水平增高[13]，主要促進細胞免疫；TNF-α是一種生物學(xué)活性比較廣泛的細胞因子，它能夠抑制或直接殺死腫瘤細胞，并具有促進細胞分化和增殖的作用[14]。本研究中，高、中、低劑量中藥復(fù)方多糖均能提高各基因型雞血清中IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ和TNF-α的水平，并且中劑量中藥復(fù)方多糖的作用最好，說明中藥多糖的免疫調(diào)節(jié)活性不是劑量越大越好，它與西藥一樣也有其“治療窗”，一旦達到飽和，無論再增大多少劑量，其效應(yīng)都不會再增加，有的可能還會產(chǎn)生嚴重的毒副作用。

雞MHCB-LβII基因具有豐富的多態(tài)性，它使不同個體對相同抗原表現(xiàn)出不同的免疫反應(yīng)，從而導(dǎo)致機體免疫功能存在個體差異。有研究表明，不同MHCB-LβII基因型個體的淋巴細胞活性、抗體滴度及細胞因子含量不同。Shanaz等[15]比較Bantam、BWLH和WLH雞種中B2、B15、B2B15、B2B19、B19等 9 種單倍型雞ND和SRBC抗體滴度，發(fā)現(xiàn)MHCB-LβII基因的等位基因 B15和 B19單倍型雞的ND和SRBC抗體滴度均顯著高于其他單倍型，是優(yōu)勢基因型。蔡文博等[16]研究顯示，不同MHC單倍型雞體內(nèi)Th1型細胞因子和Th2型細胞因子轉(zhuǎn)錄水平有差異，雖未達到顯著水平，但可以反應(yīng)出不同MHC基因型雞的細胞因子表達水平存在一定差異。在本次試驗的空白對照組中，不同MHCB-LβII基因型雞IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ和TNF-α的質(zhì)量濃度不同。其中，AB基因型雞血清中IL-2的質(zhì)量濃度顯著高于AA、BB、AC、AD基因型 (P<0.05)，AB基因型雞血清中IL-4、IL-6和TNF-α的質(zhì)量濃度略高于其他基因型，AA基因型雞血清中IFN-γ的質(zhì)量濃度略高于其他基因型，提示MHCB-LβII基因多態(tài)性會引起機體免疫功能的個體差異。

Cobb 等[5]的研究表明，多糖能通過胞吞途徑被NO系統(tǒng)降解為小分子質(zhì)量碳水化合物，被MHC II類分子處理并呈遞給T細胞的TCR識別，進而使T細胞活化、增殖并分泌細胞因子，發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。因此，MHCB-LβII基因多態(tài)性的存在，可能會使中藥多糖與TCR受體識別和結(jié)合能力不同，進而影響T細胞的活化、增殖及細胞因子的分泌。在本次試驗中，當(dāng)對不同MHCB-LβII基因型雞給予不同劑量中藥復(fù)方多糖后，高劑量中藥復(fù)方多糖組中AA基因型個體血清中IL-2、IL-4、IL-6和IFN-γ的質(zhì)量濃度較高，AD基因型個體血清中TNF-α的質(zhì)量濃度較高；中劑量中藥復(fù)方多糖組中AB基因型個體血清中IL-2、IL-4和IFN-γ的質(zhì)量濃度較高，AC基因型個體血清中IL-6的質(zhì)量濃度較高，AA基因型個體血清中TNF-α的質(zhì)量濃度較高；低劑量中藥復(fù)方多糖組中AB基因型個體血清中IL-2、IL-4、IL-6和IFN-γ的質(zhì)量濃度較高，AC基因型個體血清中TNF-α的質(zhì)量濃度較高。出現(xiàn)不同劑量中藥復(fù)方多糖組中優(yōu)勢基因型不同的原因可能是：不同基因型雞體內(nèi)Th1型細胞因子和Th2 型細胞因子轉(zhuǎn)錄水平和表達水平的差異，使得產(chǎn)生細胞因子的量存在一定差異； TCR在識別被呈遞的抗原的同時，也要識別細胞上的MHC II類分子，而MHC基因具有豐富的多態(tài)性，這會導(dǎo)致MHC II類分子抗原肽結(jié)合槽的結(jié)構(gòu)不同，由此造成不同MHC等位基因編碼的分子與抗原肽的結(jié)合具有一定的選擇性，這種選擇性反應(yīng)不同個體對同一抗原會出現(xiàn)免疫應(yīng)答的差異，進而導(dǎo)致不同劑量中藥復(fù)方多糖組中MHCB-LβII的優(yōu)勢基因型不同；免疫系統(tǒng)對抗原的感知有數(shù)量和濃度上的敏感性差異，多糖的質(zhì)量濃度過高或者過低均不會產(chǎn)生較高的免疫應(yīng)答，從而引起細胞因子含量的差異；免疫性狀除受MHCB-LβII基因調(diào)控外，還受到其他突變位點或者基因的調(diào)控，不同突變位點引起的免疫性狀變化，對細胞因子的產(chǎn)生具有調(diào)節(jié)作用。

以上結(jié)果說明，MHCB-LβII基因多態(tài)性使雞的免疫能力產(chǎn)生個體差異，并且對促進雞免疫因子產(chǎn)生的最適多糖劑量會有一定影響。

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(責(zé)任編輯：顧玉蘭 Responsible editor:GU Yulan)

Effects of Traditional Chinese Medicine Compound Polysaccharide on Serum Cytokines Mass Fraction in DifferentMHCB-LβIIGenotype Chickens

YANG Hongyang,ZHU Xiaoqing,SHANG Yunxia,GU Xinli and GUO Xiao

(College of Animal Science and Technology,Shihezi University,Shihezi Xinjiang 832003,China)

In order to explore the effect ofMHCB-LβIIgene polymorphism on the immunomodulatory dose selection of traditional Chinese medicine compound polysaccharides(cCHMPS),PCR-SSCP technique was applied to group Huangma chickens according to differentMHCB-LβIIgenotypes,divided into high,medium and low dose Chinese medicine polysaccharide group and blank control group.Eight-day old chickens were vaccinated with 50 mg/mL,25 mg/mL,12.5 mg/mL cCHMP and physiologic saline, 0.2 mL for each one,once a day for seven successive days.On 21 days,42 days,56 days and 70 days,five chickens’ blood for each group were sampled for determination of serum IL-2,IL-4,IL-6,IFN-γ and TNF-α mass fraction.The results showed that cCHMPS at different dose could improve serum IL-2,IL-4,IL-6,IFN-γ and TNF-α mass fraction in eachMHCB-LβIIgenotypes.In high dose cCHMP,the serum IL-2,IL-4,IL-6 and IFN-γ mass fraction of AA genotype chicken were higher than those of the AB,BB,AC and AD genotype; in middle dose cCHMPS,the serum IL-2,IL-4 and IFN-γ mass fraction of AB genotype were higher than those of AA,BB,AC and AD genotype; in low dose cCHMPS,the serum IL-2,IL-4,IL-6 and IFN-γ mass fraction of AB genotype were higher than those of AA,BB,AC and AD genotype.The results demonstrated that the optimum immunodulatory dose of cCHMP were different in eachMHCB-LβIIgenotype chicken.

Traditional Chinese medicine compound polysaccharides;MHCB-LβIIgene; Cytokines; Chickens

YANG Hongyang,male,master student.Research area: clinical veterinary science.E-mail:hongyangy527@126.com

SHANG Yunxia,female,bachelor.Research area:animal disease prevention and control.E-mail:shangyunxia@shzu.edu.cn

日期：2017-03-30

2016-11-01

2016-12-12

國家自然科學(xué)基金(31460673)。

楊紅洋，男，碩士研究生，研究方向為臨床獸醫(yī)學(xué)。 E-mail:hongyangy527@126.com

商云霞，女，學(xué)士，主要從事動物疫病防治研究。E-mail:shangyunxia@shzu.edu.cn 谷新利，男，教授，博士生導(dǎo)師，主要從事中藥制劑開發(fā)與應(yīng)用研究。E-mail:xlgu@shzu.edu.cn

S853.72

A

1004-1389(2017)04-0514-09

GU Xinli,male,professor,doctoral supervisor.Research area:development and application of traditional Chinese medicine preparation.E-mail:xlgu@shzu.edu.cn

網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://kns.cnki.net/kcms/detail/61.1220.S.20170330.1508.010.html

Received 2016-11-01 Returned 2016-12-12

Foundation item The National Natural Science Foundation of China (No.31460673).