2個(gè)綿羊群體BMPR-IB基因多態(tài)性與綿羊產(chǎn)羔數(shù)的關(guān)系

康曉龍，劉佳龍，劉亞清，王述宇，馮登偵

(1.寧夏大學(xué) 農(nóng)學(xué)院，銀川 750021 2.寧夏宇泊科技有限公司，銀川 750021)

2個(gè)綿羊群體BMPR-IB基因多態(tài)性與綿羊產(chǎn)羔數(shù)的關(guān)系

康曉龍1，劉佳龍1，劉亞清1，王述宇2，馮登偵1

(1.寧夏大學(xué) 農(nóng)學(xué)院，銀川 750021 2.寧夏宇泊科技有限公司，銀川 750021)

旨在探討B(tài)MPR-IB基因在不同綿羊群體中的遺傳變異及其與產(chǎn)羔數(shù)的關(guān)系，利用RFLP技術(shù)分析杜泊及灘寒雜交羊群體中BMPR-IB的基因型和基因頻率，以及不同基因型對母羊產(chǎn)羔數(shù)的影響。結(jié)果顯示：杜泊羊群體均為野生型，未檢測到突變純合或雜合基因型個(gè)體。灘寒雜交群體中突變純合子(BB型)、雜合子(B+型)和野生型(++型)個(gè)體數(shù)分別為13、48和120。在灘寒雜交羊群體中，BB、B+及++基因型母羊的多羔率分別為63.64%、47.06%和32.08%；BB型經(jīng)產(chǎn)個(gè)體平均產(chǎn)羔數(shù)比雜合型(B+)及野生型(++)個(gè)體產(chǎn)羔數(shù)分別高出0.5和0.59，而雜合子母羊產(chǎn)羔數(shù)高于野生型個(gè)體，但差異不顯著。表明BMPR-IB基因FecB突變位點(diǎn)對灘寒雜交群體產(chǎn)羔數(shù)有顯著影響，因此可通過雜交手段提高后代群體FecB基因頻率來增加產(chǎn)羔數(shù)，但BMPR-IB基因是否為調(diào)控杜泊羊產(chǎn)羔數(shù)的主效基因有待進(jìn)一步探討。

BMPR-IB基因；產(chǎn)羔數(shù)；雜交羊；灘羊；小尾寒羊；杜泊羊

綿羊的繁殖性能是一個(gè)重要的經(jīng)濟(jì)性狀，在群體內(nèi)表現(xiàn)連續(xù)變異，是由一系列主基因或數(shù)量性狀基因座(Quantitative trait locus，QTL)決定的。骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體IB(Bone morphogenetic protein receptor IB，BMPR-IB)是多種骨形態(tài)發(fā)生蛋白的膜受體，廣泛存在于機(jī)體各種組織中，其在調(diào)控成骨分化、細(xì)胞擴(kuò)散以及卵巢卵泡發(fā)育等過程中起重要作用，并直接影響如綿羊等動(dòng)物的繁殖性狀。早期在對Booroola羊高繁殖力原因進(jìn)行研究時(shí)發(fā)現(xiàn)一個(gè)常染色體突變位點(diǎn)[1-2]，該突變基因于1989年被綿、山羊遺傳命名委員會正式定名為FecB基因(即Fec=fecundity，B=Booroola)。隨后的研究證實(shí)，該突變是由堿基的點(diǎn)突變引起，即A746G堿基突變導(dǎo)致編碼蛋白的第 249 位谷氨酰胺突變?yōu)榫彼?Q→R)[3]，這種變化可能導(dǎo)致卵巢對激素的敏感性[4]，或引起高繁個(gè)體體內(nèi)激素分泌的增加[5]，并進(jìn)一步引起綿羊排卵數(shù)和產(chǎn)羔數(shù)的增加。

杜泊羊(Dorper sheep)是南非成功雜交選育而成的著名肉用綿羊品種。杜泊母羊全年發(fā)情，不同胎次產(chǎn)羔率差異較大。其中頭胎羊的產(chǎn)羔率為 132%，二胎為167%，三胎為220%，前3胎的平均產(chǎn)羔率為177%[6]。目前，對杜泊羊產(chǎn)羔數(shù)相關(guān)的基因或位點(diǎn)研究報(bào)道較少。灘羊是寧夏本地綿羊品種，產(chǎn)羔率較低。以高繁殖力小尾寒羊與灘羊雜交形成的灘寒雜交群體(F1代)可部分提高灘羊產(chǎn)羔數(shù)，但影響產(chǎn)羔數(shù)的關(guān)鍵基因在后代群體中的基因頻率數(shù)據(jù)未見報(bào)道。自2015年開始，寧夏地區(qū)開展高產(chǎn)肉用綿羊新品種(品系)的培育工作，以BMPR-IB基因作為分子標(biāo)記，在雜交群體及核心群選育中選擇含有突變位點(diǎn)的羊留種，以便提高母羊產(chǎn)羔數(shù)。本研究以純種杜泊羊及灘寒雜交群體為材料，應(yīng)用限制性片段長度多態(tài)性(Restriction fragment length polymorphism,RFLP)對BMPR-IB基因在2個(gè)綿羊群體中的遺傳多態(tài)性及其與綿羊產(chǎn)羔數(shù)的關(guān)系進(jìn)行分析，為進(jìn)一步在高繁殖力肉用綿羊群體中進(jìn)行BMPR-IB基因的標(biāo)記輔助選擇提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及DNA提取

選擇宇泊種羊場純種杜泊 14 只，灘寒雜交群體F1代 181 只，收集整理產(chǎn)羔記錄。所有試驗(yàn)羊均采用常規(guī)飼養(yǎng)管理，體況健康。每只羊通過頸靜脈采集血液 5 mL，裝在預(yù)先加有1.5 mL ACD抗凝劑的采血管中，蓋嚴(yán)，快速振蕩混勻，低溫下帶回實(shí)驗(yàn)室，備用。采用常規(guī)的酚-氯仿抽提法提取基因組DNA，-20 ℃保存，備用。

1.2 引物合成

根據(jù)GenBank數(shù)據(jù)庫中綿羊BMPR-IB基因序列(登錄號：AF357007)，利用Primer5 .0軟件設(shè)計(jì)1 對引物，由上海生工生物工程公司合成。引物序列為:

F:5′-GTCGCTATGGGGAAGTTTGGAT- G-3′；R:5′-CAAGATGTTTTCATGCCTCATCAACACGGTC-3′。

1.3 PCR-RFLP檢測

反應(yīng)體系：PCR Mixture 12.5 μL，上、下游引物(10 pmol/μL)各1 μL，DNA模板(50 ng/μL)1 μL，補(bǔ)充ddH2O至25 μL。充分混勻，瞬時(shí)離心后進(jìn)行PCR反應(yīng)。反應(yīng)條件為：94 ℃預(yù)變性5 min；94 ℃變性30 s，62 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s， 33 個(gè)循環(huán)；最后72 ℃延伸7 min后4 ℃保存。

1.4 酶切反應(yīng)

反應(yīng)總體積為10 μL，其中PCR產(chǎn)物為4.5 μL，限制性內(nèi)切酶AvaⅡ 0.25 μL，10×Buffer 1 μL，補(bǔ)ddH2O至10 μL。反應(yīng)液混勻后，經(jīng)37 ℃水浴消化4 h，終產(chǎn)物用3 g/L的瓊脂糖凝膠電泳檢測。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

利用Excel整理和統(tǒng)計(jì)生產(chǎn)數(shù)據(jù)，并進(jìn)行基因頻率和基因型頻率分析。使用SPSS 22.0 軟件進(jìn)行BMPR-IB不同基因型與杜泊羊及灘寒雜交群體產(chǎn)羔數(shù)關(guān)聯(lián)分析，數(shù)據(jù)采用“最小二乘均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 BMPR-IB 基因多態(tài)位點(diǎn)的 PCR 擴(kuò)增

利用特異引物對 2 個(gè)綿羊群體基因組 DNA 進(jìn)行擴(kuò)增，產(chǎn)物經(jīng) 3 g/L 的瓊脂糖凝膠電泳檢測，得到長度為 140 bp 的特異性條帶(圖 1)，目的條帶清晰，特異性好，可直接進(jìn)行酶切分析。

M.50 bp Marker; 1～6.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物 PCR products ofBMPR-IB

圖1BMPR-IB基因的PCR擴(kuò)增
Fig.1 Amplification ofBMPR-IBgene

AvaⅡ 限制性內(nèi)切酶消化 PCR 產(chǎn)物后，出現(xiàn) 3 種帶型(圖 2)：野生型為 1 條140 bp的條帶(++型)，純合突變型為 110 和 30 bp 2 條帶(BB基因型)，有以上3 種條帶的為雜合型，記作“B+”，其中30 bp的條帶均遷移到末端，不易辨認(rèn)。

M. 50 bp Marker；1、2、4、5. ++基因型 ++ genotype; 3. B+基因型 B+ genotype; 6、7. BB基因型 BB genotype

圖2BMPR-IB基因AvaⅡ酶切
Fig.2 The enzyme-digested products ofBMPR-IBbyAvaⅡ

2.2 BMPR-IB基因多態(tài)位點(diǎn)的等位基因頻率和基因型頻率

對杜泊羊及灘寒雜交羊共 195 只個(gè)體進(jìn)行BMPR-IB基因FecB突變的多態(tài)性檢測。杜泊羊群體均為野生型，未檢測到突變純合或雜合基因型個(gè)體。灘寒雜交羊中突變純合子(BB型)13 只、突變雜合子(B+型)48 只、未發(fā)生突變(++型)個(gè)體120 只(表 1)，表明小尾寒羊與灘羊的雜交后代個(gè)體中B等位基因頻率有所增加。

2.3 BMPR-IB 基因型與不同群體綿羊產(chǎn)羔數(shù)的關(guān)系

經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析不同基因型個(gè)體與產(chǎn)羔數(shù)的相關(guān)性，結(jié)果表明，在所分析的杜泊羊群體中，++型母羊雙羔率為 35.71%，平均產(chǎn)羔數(shù)為1.36(表 2)，未檢測到FecB位點(diǎn)突變型的純合或雜合個(gè)體。一方面可能是樣本量較少的緣故，另一方面也表明杜泊羊可能不存在BMPR-IB的FecB突變位點(diǎn)。

在灘寒雜交群體中經(jīng)產(chǎn)母羊 151 只，其中BB基因型母羊雙羔率為 63.64%，B+基因型母羊雙羔率為 47.06%，++型個(gè)體雙羔率為 32.08%；灘寒雜交群體母羊BMPR-IB基因的突變純合子(BB型)平均產(chǎn)羔數(shù)比雜合型(B+)及野生型(++)個(gè)體分別高出 0.5 和 0.59 (P<0.01)，而B+與++型差異不顯著，說明BMPR-IB基因?qū)┖s交群體產(chǎn)羔數(shù)有顯著影響。

表1 不同綿羊群體BMPR-IB基因型及基因頻率Table 1 Distribution of BMPR-IB genotype and allele frequency in different sheep

表2 基因型與不同群體母羊的關(guān)系產(chǎn)羔數(shù)Table 2 The relationship of BMPR-IB genotypes and the litter size in different sheep

注：同列數(shù)據(jù)后不同大寫字母表示平均值間差異極顯著(P<0.01) 。

Note:Data in same column with different uppercase letters is significant difference atP<0.01.

3 討 論

綿羊的多胎(羔)性狀是重要的經(jīng)濟(jì)性狀，備受關(guān)注。BMPR-IB基因是TGF2β受體超家族的成員之一。綿羊BMPR-IB基因已被定位到 6q23～31，全長 20 kb，包含 10 個(gè)外顯子，編碼區(qū)長1 509 bp，編碼 502 個(gè)氨基酸。已經(jīng)報(bào)道BMPR-IB基因編碼區(qū)A746G突變導(dǎo)致其受體激酶結(jié)構(gòu)域的第 249 位氨基酸由谷氨酰胺突變?yōu)榫彼?，造成受體部分失活，影響與之識別的配體GDF-5和BMP-4對類固醇生成作用的反應(yīng)，結(jié)果使攜帶BMPR-IB突變基因的母羊顆粒細(xì)胞分化加快，進(jìn)而加速卵泡成熟，使排卵數(shù)增多[3,7-8]。BMPR-IB基因的FecB突變位點(diǎn)對排卵數(shù)具有加性效應(yīng)，對產(chǎn)羔數(shù)則部分顯性。攜帶1個(gè)FecB拷貝(B+型) 的母羊產(chǎn)羔數(shù)增加 0.9～1.2，攜帶 2 個(gè)FecB拷貝(BB型) 的母羊產(chǎn)羔數(shù)增加1.1～1.7[9-10]。針對BMPR-IB基因在動(dòng)物排卵及產(chǎn)仔數(shù)方面發(fā)揮的重要作用，國內(nèi)外許多研究者分別在綿羊[11-13]、山羊[14-15]、豬[16]及雞[17]中開展此項(xiàng)研究。如對脂尾羊產(chǎn)羔數(shù)的研究表明，BMPR-IB基因的不同基因型間綿羊個(gè)體平均產(chǎn)羔數(shù)差異顯著(P<0.01)，BB 基因型個(gè)體平均產(chǎn)羔數(shù)最高，達(dá)到1.685[18]。利用BMPR-IB基因的 A287G SNP 位點(diǎn)與雞排卵數(shù)進(jìn)行相關(guān)性分析顯示，不同基因型間個(gè)體排卵數(shù)無顯著差異[17]。除對候選基因的特定位點(diǎn)進(jìn)行分析外，也有學(xué)者在綿羊繁殖性能方面開展全基因組關(guān)聯(lián)分析[19-21]，如對挪威白羊開展的全基因組關(guān)聯(lián)分析結(jié)果顯示，生長分化因子基因 GDF9(Growth differentiation factor 9)的一個(gè)錯(cuò)義突變(c.1111G>A)與該綿羊群體的產(chǎn)羔數(shù)呈顯著相關(guān)[19]， BMP15基因的FecXGr和FecXO2個(gè)突變位點(diǎn)與Grivette和Olkuska綿羊的高繁殖性能有關(guān)[20]。但全基因組關(guān)聯(lián)分析的相關(guān)結(jié)果均未發(fā)現(xiàn)BMPR-IB基因在產(chǎn)仔數(shù)與排卵率方面所發(fā)揮的作用，可能與綿羊品種及群體數(shù)量有關(guān)。

本試驗(yàn)采用PCR-RFLP技術(shù)分別對灘寒雜交羊及杜泊羊群體進(jìn)行檢測，在灘寒雜交群體中BB型個(gè)體平均產(chǎn)羔數(shù)比雜合型(B+)及野生型(++)個(gè)體分別高0.5和0.59，而雜合型個(gè)體平均產(chǎn)羔數(shù)高于野生型個(gè)體，但差異不顯著，因此通過導(dǎo)入具有FecB突變的外血可有效提高雜交后代群體中B 等位基因頻率，利用該基因在新品種培育中作為分子標(biāo)記提高產(chǎn)羔數(shù)是可行的。

灘羊是中國著名的裘皮用綿羊品種，但產(chǎn)羔率較低。為提高灘羊產(chǎn)羔率，許多研究者開展灘羊多羔品系研究。杜立新[22]在較早研究報(bào)道中稱，在灘羊群體中發(fā)現(xiàn)多羔家系，經(jīng)性激素測定及初步雜交分析，發(fā)現(xiàn)灘羊多羔性狀表現(xiàn)與布魯拉美利奴羊的BMPR-IB突變(FecB)接近，平均每只產(chǎn)羔1.9，而同一地區(qū)其他灘羊的產(chǎn)羔數(shù)僅為0.8左右。表明盡管灘羊產(chǎn)羔率較低，但其具有FecB突變位點(diǎn)(c.746A>G)。最新研究結(jié)果表明[23]，灘羊FecB突變中的BB基因型個(gè)體平均產(chǎn)羔數(shù)較B+和++基因型分別多 0.076和 0.159，差異均不顯著(P>0.05)。灘羊群體中B基因?qū)Ξa(chǎn)羔數(shù)的提高未能較好發(fā)揮，也可能與灘羊的飼養(yǎng)管理有關(guān)。小尾寒羊?qū)儆诟弋a(chǎn)綿羊品種，攜帶FecB突變。Chu等[24]研究發(fā)現(xiàn)，BB基因型小尾寒羊平均產(chǎn)羔數(shù)比++基因型多1.40(P<0.01)，B+基因型小尾寒羊平均產(chǎn)羔數(shù)比++基因型多1.11(P<0.01)，小尾寒羊FecB基因B等位基因與其產(chǎn)羔數(shù)呈顯著正相關(guān)。灘羊產(chǎn)羔率較低，一般只有103%，小尾寒羊?qū)儆诟弋a(chǎn)綿羊品種。本研究結(jié)果表明，灘寒雜交群體，BB個(gè)體產(chǎn)羔數(shù)達(dá)1.91，顯著高于其他2種基因型；B+基因型個(gè)體產(chǎn)羔數(shù)高于++基因型，但差異不顯著。因此，通過小尾寒羊與灘羊雜交，可定向增加特定基因型頻率。通過不同性狀個(gè)體雜交，對所生后代進(jìn)行基因型鑒定，選擇FecB突變中含有B基因的BB和B+基因型羊留種，以期提高后代產(chǎn)羔數(shù)。

杜泊羊平均產(chǎn)羔率達(dá)177%，在本試驗(yàn)群體中，杜泊羊只檢測到++基因型，未檢測到FecB突變型，與王公金等[25]研究結(jié)果吻合。對于杜泊羊產(chǎn)羔性能的其他研究[26]顯示，促卵泡素受體(FSHR)基因CC基因型的杜泊羊個(gè)體產(chǎn)羔數(shù)顯著高于TT型(P<0.01)；同時(shí)對綿羊排卵數(shù)或產(chǎn)羔數(shù)有顯著影響的生長分化因子基因( GDF9)的G1(c.260G>A)突變位點(diǎn)，在杜泊羊群體中也具有2種基因型，AA型和AB型[27]，而在該基因的G7(c.1111G>A)突變位點(diǎn)和FecGV突變位點(diǎn)(c.943C>T)則對杜泊多羔性狀無顯著影響[28]。因此，對于杜泊羊，后續(xù)研究可在擴(kuò)大樣本量的基礎(chǔ)上對 GDF9基因等或BMPR-IB基因的其他突變位點(diǎn)開展研究。

4 結(jié) 論

杜泊羊雙羔個(gè)體中未檢測到BMPR-IB基因FecB突變位點(diǎn)，需要進(jìn)一步開展其他基因或BMPR-IB基因其他位點(diǎn)與杜泊羊雙羔性能的相關(guān)性。同時(shí)，BMPR-IB基因的FecB位點(diǎn)與灘寒雜交群體產(chǎn)羔數(shù)呈顯著相關(guān)，因此，可通過雜交導(dǎo)入FecB突變位點(diǎn)的措施提高后代群體FecB基因頻率來增加產(chǎn)羔數(shù)。本研究為BMPR-IB基因在寧夏地區(qū)高產(chǎn)肉用綿羊新品種(品系)選育中的應(yīng)用提供依據(jù)。

Reference：

[1] DAVIS G H,MONTGOMERY G W,ALLISON A J,etal.Segregation of a major gene influencing fecundity in progeny of Booroola sheep[J].NewZealandJournalofAgriculturalResearch,1982,25(4):525-529.

[2] PIPER L R,BINDON B M.The Booroola Merino and the performance of medium non-Peppin crosses at Armidale [J].WoolTechnologyandSheepBreeding,1983,31(1):9-19.

[3] MULSANT P,LECERF F,FABRE S,etal.Mutation in bone morphogenetic protein receptor-IB is associated with increased ovulation rate in Booroola Merino ewes [J].ProceedingsoftheNationalAcademyofSciencesUSA,2001,98(9):5104-5109.

[4] MONTGOMERY G,MCNATTY K,DAVIS G.Physiology and molecular genetics of mutations that increase ovulation rate in sheep [J].EndocrineReviews,1992,13(2):309-328.

[5] MONTGOMERY G W,GALLOWAY S M,DAVIS G H,etal.Genes controlling ovulation rate in sheep [J].Reproduction,2001,121(6):843-852.

[6] 王建剛.杜泊羊種質(zhì)特性初步研究[D].陜西楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué),2006.

WANG J G.A primary study on trait of Dorper sheep[D].Yangling Shaanxi:Northwest A&F University,2006(in Chinese with English abstract).

[7] WILSON T,WU X Y,JUENGEL J L,etal.Highly prolific Booroola sheep have a mu tat ion in the intracellular kinase domain of bone morphogenetic protein IB receptor(ALK-6) that is expressed in both oocytes and granulosa cells [J].BiologyReproduction,2001,64(4):1225-1235.

[8] SOUZA C J,MACDOUGALL C,CAMPBELL B K,etal.The Booroola(FecB) phenotype is as sociated with a mutation in the bone morphogenetic receptor type IB(BMPR-IB) gene[J].Endocrinol,2001,169(2):1-6.

[9] 儲明星,張寶云,王憑青,等．綿羊微衛(wèi)星 OarJL36和FecB基因的多態(tài)及連鎖分析[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2009,42(6):2133-2141.

CHU M X,ZHANG B Y,WANG P Q,etal.Polymorphic and linkage analysis of microsatellite OarJL36 andFecBgene in sheep[J].ScientiaAgriculturaSinica,2009,42(6):2133-2141(in Chinese with English abstract).

[10] DAVIS G H,BALAKRISHNAN L,ROSS I K,etal.Investigation of the Booroola(FecB) and Inverdale(FecXI) mutations in 21 prolific breeds and strains of sheep sampled in 13 countries [J].AnimalReproductionScience,2006,92(1/2):87-96．

[11] WANG W,LIU S,LI F,etal.Polymorphisms of the ovineBMPR-IB,BMP-15 andFSHRand their associations with litter size in two Chinese indigenous sheep breeds[J].InternationalJournalofMolecularSciences,2015,16(5):11385-11397.

[12] MAHDAVI M,NANEKARANI S,HOSSEINI S D.Mutation inBMPR-IBgene is associated with litter size in Iranian Kalehkoohi sheep[J].AnimalReproductionScience,2014,147(3):93-98.

[13] ABDOLI R,ZAMANI P,DELJOU A,etal.Association of BMPR-1B and GDF9 genes polymorphisms and secondary protein structure changes with reproduction traits in Mehraban ewes[J].Gene,2013,524(2):296-303.

[14] HELAL M A Y,MAHBOUB H D H,HEMEDA S A,etal.Polymorphism of bone morphogenetic protein receptor-IB(BMPR-IB) gene with litter size and kids growth of some goat breeds in Egypt[J].AlexandriaJournalofVeterinarySciences,2014,41(1):28-34.

[15] MEHDIZADEH GAZOOEI Y,NIAZI A,ZAMIRI M J.Single nucleotide polymorphism analysis of the bone morphogenetic protein receptor IB and growth and differentiation factor 9 genes in Rayini goats(Caprahircus)[J].JournalofLivestockScienceandTechnologies,2013,1(2):45-50.

[16] ZHAO X Y,YANG Q,ZHAO K W,etal.Production of transgenic pigs with an introduced missense mutation of the bone morphogenetic protein receptor type IB gene related to prolificacy[J].AsianAustralasJournalAnimalScience,2016,29(7):925-937.

[17] NIKNAFS S,JAVAREMI A N,SADEGHI M.Single nucleotide polymorphisms inBMPR-IBand STAT5B genes and their association with growth and reproductive traits in chicken[J].SongklanakarinJournalScienceTechnology,2014,36(2):137-142.

[18] MASKUR M,TAPAUL R,KASIP L.Genetic polymorphism of bone morphogenetic protein receptor 1B( BMPR-1B ) gene and its association with litter size in Indonesian fat-tailed sheep[J].AfricanJournalofBiotechnology,2016,15(25):1315-1319.

[19] V?GE D I,HUSDAL M,KENT M P,etal.A missense mutation in growth differentiation factor 9( GDF9) is strongly associated with litter size in sheep[J].BMCGenetics,2013,14:1.

[20] DEMARS J,FABRE S,SARRY J,etal.Genome-wide association studies identify two novel BMP15 mutations responsible for an atypical hyper prolificacy phenotype in sheep[J].PLoSGenetics,2013,9(4):e1003482.

[21] GHOLIZADEH M,RAHIMI-MIANJI G,NEJATI-JAVAREMI A,etal.Genome wide association study to detect QTL for twinning rate in Baluchi sheep[J].JournalofGenetics,2014,93(2):489-493.

[22] 杜立新.灘羊多胎基因突變生化遺傳標(biāo)記的研究[C].北京:第九次全國動(dòng)物遺傳育種學(xué)術(shù)討論論文集,1997:126-129.

DU L X.Study of biochemical genetic markers on genes related to litter size in Tan Sheep [C].Beijing:The 9th National Animal Breeding and Genetic Bulletin,1997:126-129(in Chinese).

[23] 田秀娥,孫紅霞,王永軍.3個(gè)綿羊群體BMPR-IB基因的遺傳多態(tài)性及其對產(chǎn)羔數(shù)的影響[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2007,37(11):31-36.

TIAN X E,SUN H X,WANG Y J.Genetic polymorphism ofBMPR-IBgene and effect on litter size in three sheep breeds[J].JournalofNorthwestA&FUniversity(NaturalScienceEdition),2007,37(11):31-36(in Chinese with English abstract).

[24] CHU M X,LIU Z H,JIAO C L,etal.Mutations inBMPR-IBand BMP-15 genes are associated with litter size in Small Tailed Han sheep(Ovisaries) [J].JournalofAnimalScience,2007,85(3):598-603.

[25] 王公金,竇德宇,花衛(wèi)華,等.5個(gè)綿羊群體的BMPR-IB基因多態(tài)性分析[J].江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2007,23(5):447-450.

WANG G J,DOU D Y,HUA W H,etal.Analysis of polymorphism ofBMPR-IBgene in five sheep populations[J].JiangsuJournalofAgriculturalScience,2007,23(5):447-450(in Chinese with English abstract).

[26] PAN X,LIU S,LI F,etal.Molecular characterization,expression profiles of the ovineFSHRgene and its association with litter size [J].MolecularBiologyReports,2014,41(12):7749-7754.

[27] 古麗格娜,艾買提·買買提,於建國,等.7 種綿羊和4種山羊 GDF9基因G1突變檢測[J].中國草食動(dòng)物科學(xué),2015,35(4):1-4.

GULIGENA,AIMAITI M·AIMAITI,YU J G,etal.Detection of G1 mutation of the GDF9 gene in seven sheep and four goat breeds[J].ChinaHerbivoreScience,2015,35(4):1-4(in Chinese with English abstract).

[28] 金慧慧,儲明星,潘章源,等.16種山羊和6種綿羊 GDF9基因G7和FecGV突變檢測[J].安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2015,42(1):104-109.

JIN H H,CHU M X,PAN ZH Y,etal.Detection of the G7 andFecGVmutations of the GDF9 gene in sixteen goat and six sheep breeds[J].JournalofAnhuiAgriculturalUniversity,2015,42(1):104-109(in Chinese with English abstract).

(責(zé)任編輯：顧玉蘭 Responsible editor:GU Yulan)

Association betweenBMPR-IBPolymorphism and Litter Size in Two Sheep Groups

KANG Xiaolong1,LIU Jialong1,LIU Yaqing1,WANG Shuyu2and FENG Dengzhen1

(1.School of Agriculture,Ningxia University,Yinchuan 750021,China；2.Ningxia Yubo Technology Co.LTD,Yinchuan 750021,China)

In order to make certain the genetic variation ofBMPR-IBand its relationship with sheep litter size,we analyzed the genotypic and genic frequency ofBMPR-IBgene,and the effects of genotypes on litter size of Dorper and hybrid sheep (Tan crossed with Small Tail Han sheep) by RFLP technology. The results showed that there were no individuals of BB and B+ genotypes appeared in Dorper sheep. In the hybrid sheep group,there were 13,48 and 120 individuals of BB,B+ and ++ genotypes. And the percentage of prolificacy of BB,B+ and ++ genotype in hybrid group was 63.64%，47.06% and 32.08%,respectively. The average litter size of individual with BB genotype was significant higher than individual of B+ (0.5) and ++ (0.59) genotype,and there was no significance between B+ ewe and ++ ewe. The above results demonstrated that the mutation ofFecBofBMPR-IBgene has significant effects on litter size of hybrid sheep. The litter size of sheep could be increased with the risingFecBgenic frequency in a group by hybridization. Further studies are needed to determine ifBMPR-IBcould be the major gene in fecundity of Dorper sheep.

BMPR-IBgene; Litter size; Hybrid sheep of Tan and Han sheep; Dorper sheep

KANG Xiaolong,male,associate professor. Research area:animal genetics and breeding.E-mail:kangxl@nxu.edu.cn

FENG Dengzhen,male,professor. Research area:animal genetics and breeding.E-mail:fdzh126@sohu.com

日期：2017-03-30

2016-11-21

2016-12-25

寧夏回族自治區(qū)肉羊育種專項(xiàng)(NXNYYZ20150101)；寧夏自然科學(xué)基金(NZ15030)；寧夏大學(xué)自然科學(xué)基金(ZR1433)。

康曉龍，男，副教授，從事動(dòng)物分子遺傳育種研究。E-mail：kangxl@nxu.edu.cn

馮登偵，男，教授，主要從事動(dòng)物遺傳繁育研究。E-mail:fdzh126@sohu.com

S813.3

A

1004-1389(2017)04-0497-06

網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://kns.cnki.net/kcms/detail/61.1220.S.20170330.1508.004.html

Received 2016-11-21 Returned 2016-12-25

Foundation item Specific Project for Mutton Sheep Breeding of Ningxia Hui Autonomous Region(No. NXNYYZ20150101); Natural Science Foundation of Ningxia Hui Autonomous Region(No.NZ15030)；Natural Science Foundation of Ningxia University(No. ZR1433).