復(fù)方通光散對實(shí)熱型胃潰瘍大鼠潰瘍指數(shù)面積抑制百分率的影響

邢德倫，張 林，崔海明

（1.重慶市墊江縣中醫(yī)院肝病科，重慶 墊江 408300；2.河北省中醫(yī)院，河北 石家莊 050011；3.重慶市石柱縣中醫(yī)院，重慶 石柱 409100）

復(fù)方通光散對實(shí)熱型胃潰瘍大鼠潰瘍指數(shù)面積抑制百分率的影響

邢德倫1，張 林2，崔海明3

（1.重慶市墊江縣中醫(yī)院肝病科，重慶 墊江 408300；2.河北省中醫(yī)院，河北 石家莊 050011；3.重慶市石柱縣中醫(yī)院，重慶 石柱 409100）

目的：研究復(fù)方通光散對實(shí)熱型胃潰瘍大鼠潰瘍指數(shù)面積抑制百分率的影響。方法：取wistar大鼠60只，隨機(jī)分為6組，即空白組，模型組，麗珠得樂組，復(fù)方通光散低、中、高劑量組各10只。除空白組外，其余各組均建立大鼠實(shí)熱型胃潰瘍模型。在造模成功的次日，給予各組大鼠灌服相應(yīng)藥物，早晚各1次，給藥時間共計(jì)16天，于實(shí)驗(yàn)的第26天將大鼠脫頸處死，進(jìn)行胃黏膜取材，利用游標(biāo)卡尺測量潰瘍指數(shù)及潰瘍面積。結(jié)果：潰瘍指數(shù)、潰瘍面積麗珠得樂、復(fù)方通光散中、高劑量組較模型組小（P＜0．05）。潰瘍指數(shù)、潰瘍面積低劑量組與麗珠得樂組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）。潰瘍抑制百分率麗珠得樂、復(fù)方通光散中、高劑量組較低劑量組高（P＜0．05）。結(jié)論：復(fù)方通光散高、中劑量對實(shí)驗(yàn)性大鼠胃潰瘍實(shí)熱型有治療效果，且高、中劑量效果優(yōu)于低劑量，具有一定的量效關(guān)系。

復(fù)方通光散；胃潰瘍；實(shí)熱型；潰瘍指數(shù)；潰瘍面積；潰瘍抑制百分率

胃潰瘍是以饑餓不適、飽脹噯氣、泛酸、或餐后定時慢性中上腹疼痛，嚴(yán)重時可伴有黑便或嘔血為典型癥狀的慢性胃腸道疾病。近年來臨床報(bào)道用中藥、治療胃潰瘍?nèi)〉么_切的療效。本課題通過動物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證復(fù)方通光散治療實(shí)熱型胃潰瘍的療效，報(bào)道如下。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動物

wistar大鼠，雌雄各50%，體質(zhì)量（200±20）g，清潔級2級，由貴陽醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供。大鼠置于室溫為20℃～24℃，濕度為50%左右［1］的普通級環(huán)境中飼養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)期間各組大鼠自由飼食，飲用自來水。

1.2 主要藥品及試劑

復(fù)方通光散。以通光散為主藥，輔以朱砂蓮和蒲公英，按6∶5∶2比例組成。三味藥材均由貴陽中醫(yī)學(xué)院方藥教研室汪毅教授自黔東南雷山采集提供，經(jīng)鑒定為正品后入藥。按照人和大鼠每kg體質(zhì)量劑量折算系數(shù)折算［2］，將其水煎液濃縮為1g/mL，置于4℃冰箱內(nèi)保存。

麗珠得樂枸櫞酸鉍鉀膠囊。麗珠集團(tuán)麗珠制藥廠生產(chǎn)，國藥準(zhǔn)字H10920098，臨用前用生理鹽水稀釋。

干辣椒粉。重慶市沙坪壩區(qū)雯棋食品廠生產(chǎn)，執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)QCWQ3-2007號，臨用時打開即可。

無水乙醇。分析純，重慶川東化工集團(tuán)有限公司化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字H20070110號，臨用前可按照所需濃度進(jìn)行配比。

冰醋酸。重慶川江化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，國藥準(zhǔn)字H20070429號，臨用前將其配成20%的冰醋酸。

1.3 主要儀器及設(shè)備

主要實(shí)驗(yàn)器材及手術(shù)器械。托盤天平、量筒、燒杯、12號灌胃針、一次性注射器、手術(shù)鑷、眼科鑷、手術(shù)剪、眼科剪、手術(shù)刀、止血鉗、持針器、縫合針、縫合線。以上均由貴陽中醫(yī)學(xué)院中醫(yī)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室提供。

主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備。JJ200型精密電子天平（常熟雙杰測試儀器廠生產(chǎn)），Motic SMZ-168-TL體式顯微鏡 （蘇州新磊三維儀器有限公司），Olympus AH-2型雙目光學(xué)顯微鏡（日本Olympus公司生產(chǎn)），手術(shù)顯微鏡（常州三能光學(xué)設(shè)備有限公司），游標(biāo)卡尺（廣州紅星儀器有限公司）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 實(shí)熱型胃潰瘍大鼠模型的建立

依照文獻(xiàn)［3-4］將各組wistar大鼠用2%的戊巴比妥納2mL/kg腹腔麻醉后，以仰臥位固定于手術(shù)臺上，剪掉腹壁被毛，按無菌操作，在劍突下做2.0～2.5cm的腹部正中切口，用彎鑷在肝臟下方將十二指腸輕輕勾出，并將腺胃部輕輕提起，在胃的腹側(cè)面，胃體部與幽門竇交界處，用1mL注射器從漿膜面進(jìn)針0.4～0.5mm，將20%醋酸0.05mL注入黏膜下，形成丘疹，而空白對照組則按同樣的方法，將生理鹽水0.05mL注入黏膜下，將胃輕輕送回，關(guān)腹，可用80萬U青霉素鈉涂于傷口以防感染。將手術(shù)造模后的wistar大鼠置于干燥的鼠籠中，并給予MTC微波手術(shù)治療儀照射，予以抗炎、保暖。潰瘍造模后，次日施加熱因刺激，空白對照組給予2mL/100g灌飼生理鹽水，其他各組均給予等量的辣椒汁混合液（干辣椒粉：50%乙醇＝1∶10）每日1次，共計(jì)6天。

2.2 動物分組及處理方法

選用wistar大鼠60只，雌雄各50%，常規(guī)飼養(yǎng)1周后，隨機(jī)抽取10只作為空白組；其余50只大鼠進(jìn)行造模，造模結(jié)束時大鼠死亡9只，隨機(jī)抽取5只（4只模型組大鼠和1只空白組大鼠），3天后取胃竇部組織做病理切片，結(jié)果顯示已形成胃潰瘍。隨后將剩余37只大鼠隨機(jī)分為5組，即模型組7只、麗珠得樂組8只、復(fù)方通光散低劑量組7只、復(fù)方通光散中劑量組8只、復(fù)方通光散高劑量組7只。在造模成功的次日給予各組大鼠灌服相應(yīng)藥物，早晚各1次?？瞻捉M和模型組每次灌服生理鹽水各2mL，麗珠得樂組給藥劑量0.07g/kg，復(fù)方通光散低劑量組給藥劑量1.93g/kg，復(fù)方通光散中劑量組給藥劑量3.85g/kg，復(fù)方通光散高劑量組給藥劑量7.70g/kg。各給藥組均用生理鹽水稀釋至2mL。給藥時間共計(jì)16天，于實(shí)驗(yàn)的第26天將大鼠脫頸處死。

2.3 觀測指標(biāo)及檢測方法

大鼠潰瘍指數(shù)、潰瘍面積、潰瘍抑制百分率的測定。將大鼠脫頸處死后，剖腹取胃，結(jié)扎幽門、賁門后，胃內(nèi)注入10%的甲醛溶液8mL，取出游離胃，放入10%的甲醛溶液中固定10min，沿胃大彎剪開胃，用生理鹽水沖洗胃內(nèi)容物，然后將其平鋪于玻璃板上，在解剖顯微鏡下用游標(biāo)卡尺測量出通過潰瘍中心的最大縱徑和最大橫徑［5］。依文獻(xiàn)［5］確定潰瘍指數(shù)、潰瘍面積和潰瘍抑制百分率。

潰瘍指數(shù)：通過潰瘍中心的最大縱徑和通過潰瘍中心的最大橫徑之和。

潰瘍面積：S=π×（d1/2）×（d2/2）公式中S為潰瘍面積，π為圓周率（取3.14），d1為通過潰瘍中心的最大縱徑，d2為通過潰瘍中心的最大縱橫徑。

應(yīng)用SPSS12.0分析軟件將所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，各項(xiàng)指標(biāo)結(jié)果均采用（±s）表示，組間比較采用one way-ANOVA進(jìn)行單因素方差分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

復(fù)方通光散對各組大鼠潰瘍指數(shù)、潰瘍抑制百分率的影響見表1。

表1 各組大鼠潰瘍指數(shù)及潰瘍抑制百分率比較 （±s）

注：與模型組比較，**P＜0.01；與麗珠得樂組比較，△△P＜0.01。

（mm） 潰瘍抑制百分率（%）空白組 92mL生理鹽水 - -模型組 7 2mL生理鹽水 17.41±3.67 -麗珠得樂組 8 0.07 8.45±1.63**51.5通光散低劑量組7 1.93 16.54±2.75△△5.0通光散中劑量組8 3.85 11.05±1.51**36.5通光散高劑量組7 7.70 9.14±3.14**47.5組別 n給藥劑量（g/kg） 潰瘍指數(shù)

各組大鼠潰瘍面積比較見表2。

表2 各組大鼠潰瘍面積比較 （±s）

表2 各組大鼠潰瘍面積比較 （±s）

注：與模型組比較，**P＜0.01；與麗珠得樂組比較，△△P＜0.01。

組別 n 給藥劑量（g/kg） 潰瘍面積（mm2）空白組 9 2mL生理鹽水模型組 7 2mL生理鹽水 60.67±25.76麗珠得樂組 8 0.07 14.37±5.82**通光散低劑量組 7 1.93 54.55±17.83△△通光散中劑量組 8 3.85 23.92±6.77**通光散高劑量組 7 7.70 17.91±12.79**

4 討 論

通光散是黔東南雷山等地的苗族驗(yàn)方，由通光散、朱砂蓮、蒲公英組成，針對實(shí)熱型胃潰瘍病機(jī)，適證加減，臨床有較好的療效。復(fù)方通光散中的通光散具有清熱解毒，軟堅(jiān)散結(jié)止痛之功效，為主藥；朱砂蓮既能清熱解毒，理氣散瘀，又能助通光散鎮(zhèn)痛；蒲公英具有清熱解毒，消癰散結(jié)之功效，與通光散和朱砂蓮配伍可加強(qiáng)涼血散瘀止痛之作用。諸藥合用，共奏清熱解毒、理氣散結(jié)、鎮(zhèn)痛止血之功效。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，復(fù)合因素誘發(fā)大鼠實(shí)熱型胃潰瘍后，PGE2的含量顯著降低，與空白組比較有極顯著差異（P＜0.01），說明模型組大鼠潰瘍處于形成過程中，其胃黏膜分泌細(xì)胞保護(hù)性激素功能受損。復(fù)方通光散灌胃治療后，其含量明顯升高，以麗珠得樂及復(fù)方通光散中、高劑量組最為明顯，與模型組比較有極顯著差異（P ＜0.01），表明復(fù)方通光散中、高劑量可顯著促進(jìn)實(shí)熱型胃潰瘍大鼠胃黏膜上皮細(xì)胞合成和分泌PGE2，從而增強(qiáng)胃黏膜的防御功能。因此，復(fù)方通光散對實(shí)驗(yàn)性大鼠實(shí)熱型胃潰瘍具有較好的治療效果。

綜上所述，復(fù)方通光散高、中劑量組對實(shí)驗(yàn)性大鼠實(shí)熱型胃潰瘍有確切的療效，且高、中劑量組均優(yōu)于低劑量組，具有一定的量效關(guān)系。且中、高劑量組可顯著提高大鼠血漿及胃竇部組織中PGE2的含量，表明該藥可促進(jìn)胃黏膜組織的表面黏液細(xì)胞合成、分泌、釋放PGE2，這可能是該藥抗實(shí)驗(yàn)性實(shí)熱型胃潰瘍的主要機(jī)制之一。

［1］ 鄒移海．實(shí)驗(yàn)動物學(xué)［M］．北京：科學(xué)出版社，2004：46-48．

［2］ 苗明三．實(shí)驗(yàn)動物和動物實(shí)驗(yàn)技術(shù)［M］．北京：中國中醫(yī)藥出版社，1997：144-145．

［3］ 陳奇．中藥藥理研究方法學(xué)［M］．北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：79-96，430-445．

［4］ 黎敬波．胃潰瘍胃實(shí)寒、實(shí)熱癥模型大鼠經(jīng)穴輻射熱、pH值、氧分壓的檢測研究［J］．湖南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1998，18（3）：56．

［5］ 陳奇．中藥藥理研究方法學(xué)［M］．北京：人民衛(wèi)生出版社，1993：462-463．

Objective：To study the effect of compound Tongguang Powder in the treatment of gastric ulcer rats of excessive heat type. Method：60 Wistar rats were randomly divided into six groups：control group，model group，lizhudele group，low dose group，medium group and high dose group，10 rats in each group. Except the blank group，the other groups were all established rat models of gastric ulcer of excessive heat type. In the modeling，the rats were given orally with corresponding drugs，sooner or later each 1 times，delivery time of a total of 16 days. On the twenty-sixth day of the experiment，the rats were sacrificed and the gastric mucosa were harvested, the vernier caliper used to measure the ulcer index and ulcer area. Result：Compared with the ulcer index and ulcer area of the model group，that of lizhudele group and compound Tongguang Powder in middle dose group and high dose group were significantly reduced. There was a significant difference （P＜0.05）. There was significant difference in the ulcer index and ulcer area between the low dose group and lizhudele group（P＜0.05）.Compared with the percentage of ulcer inhibition of the low dose group，that of lizhudele group, middle dose group and high dose group significantly increased（P＜0.05）. Conclusion：The high dose group and middle dose group have definite therapeutic effect on experimental gastric ulcer in rats and the effect of the high dose group and middle dose group is superior to that of the low dose group，which has a certain dose effect relationship.

Compound Tong San Powder；Gastric ulcer；Excessive heat type；Ulcer index；Ulcer area；Percentage of ulcer inhibition

R256.337.31

B

1004-2814（2017）02-0114-02

2016-09-18