CD4+、CD8+T細胞及IL-2、IL-6與急性分泌性中耳炎的關聯(lián)性及臨床意義研究

趙興泉 鐘渠

·實驗研究·

CD4+、CD8+T細胞及IL-2、IL-6與急性分泌性中耳炎的關聯(lián)性及臨床意義研究

趙興泉1鐘渠1

目的 探究急性分泌性中耳炎患者外周血和中耳積液中CD4+、CD8+T細胞及細胞因子IL-2、IL-6活性特征。方法以我院收治的47例急性分泌性中耳炎患者為觀察組，48例健康體檢人群為對照組，對比分析兩組外周血CD4+、CD8+T細胞百分比及IL-2、IL-4及IL-6水平及CD4+/CD8+與中耳積液IL-2、IL-6活性的相關性。結果觀察組患者外周血CD4+、CD8+T細胞數(shù)值及CD4+/CD8+比值均顯著高于對照組（P＜0.001）。血清IL-2、IL-4及IL-6水平組間比較比較無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），但觀察組患者中耳積液IL-2、IL-6水平顯著高于兩組研究對象外周血中的相應指標水平，且中耳積液IL-2、IL-6與患者外周血CD4+/CD8+比值呈正相關趨勢，r分別為=0.431（P＜0.001）與0.462（P＜0.001）。結論急性分泌性中耳炎患者外周血CD4+、CD8+T細胞及中耳積液IL-2、IL-6水平顯著升高，為本病發(fā)病機制研究提供了相關線索。

急性分泌性中耳炎；T細胞亞群；細胞因子；相關性；發(fā)病機制

分泌性中耳炎（secretory otitismedia，SOM）是耳鼻咽喉科常見的中耳非化膿性炎性疾病，多由于上呼吸道感染引起[1]，臨床表現(xiàn)有聽力下降、鼓室積液及耳鳴等癥狀，可分為急、慢性兩種類型，易發(fā)于成年人和兒童[2]。急性分泌性中耳炎如不得到及時診治，比較難治愈且易反復，后期癥狀加重可能會引起中耳粘連、鼓室硬化等并發(fā)癥，甚至造成耳聾的風險[3]，嚴重影響患者的生活質量和健康。因此，急性分泌性中耳炎患者的早期篩查診斷及檢測指標的選擇就成為如今醫(yī)學研究的方向。有研究發(fā)現(xiàn)，T淋巴細胞亞群在急性分泌性中耳炎患者體內(nèi)發(fā)生異常[4]，IL-2具有免疫激活功能，IL-6可以參與機體感染的免疫調(diào)節(jié)[5]。所以本文旨在研究T淋巴細胞群中CD4＋、CD8＋細胞和細胞因子IL-2、IL-6在急性分泌性中耳炎患者外周血或中耳積液中的變化及臨床意義。

材料與方法

1 研究對象

分析2014年11月～2016年2月在我院接治的47例急性分泌性中耳炎患者的臨床資料，并列為觀察組，其中男性25例，女性22例，年齡均值（41.32± 11.27）歲。同時選取48例在我院進行健康檢查的人群作為對照組，其中20例男性，28例女性，年齡均值（40.51±11.05）歲。入選標準要求觀察組患者均經(jīng)耳鼻咽喉科醫(yī)生按照癥狀標準，如耳鳴、耳痛、耳內(nèi)閉塞感、聽力下降等癥狀，經(jīng)過鼓氣耳鏡或耳內(nèi)鏡檢查，結合聲導抗結果或鼓膜穿刺抽出液體診斷為急性分泌性中耳炎，且在2月內(nèi)發(fā)??；對照組人群均經(jīng)體檢健康，同時兩組均排除研究對象伴有肝腎功能不全、心律失常、糖尿病、惡性腫瘤及鼻咽新生異物等疾病；在具有可比性的常規(guī)資料比較上，兩組研究對象差異比較均無意義（P＞0.05）。

2 檢測方法

留取兩組受試者5ml靜脈血液，取其中2ml靜脈血置于EDTA抗凝管混勻后待測，余下3m l進行離心取血清待測。觀察組患者在同一醫(yī)生的操作下，經(jīng)鼓膜穿刺提取中耳積液0.3ml，要求在耳內(nèi)鏡下進行且避免穿刺血污染耳積液。采用美國貝克爾曼庫爾特公司的FC500液式細胞儀、相應的抗體試劑及FACS溶血素，檢測EDTA抗凝管血樣的輔助細胞（CD4＋）和殺傷抑制細胞（CD8＋），并用貝克曼庫爾特自帶高效C×P電腦軟件獲取百分比數(shù)據(jù)；運用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）及相應試劑盒（上海酶聯(lián)生物科技有限公司的mlb:0系列試劑的ml028590、ml028585、ml028583）檢測余下血清及耳積液樣本中白介素2（IL-2）、白介素4（IL-4）及白介素6（IL-6）水平。以上操作均按照試劑盒要求及樣品檢測說明下進行的。

3 觀察指標

對比兩組研究對象CD4＋、CD8＋T細胞百分比值及細胞因子（IL-2、IL-4及IL-6）水平；分析觀察組患者外周血CD4＋/CD8＋與耳積液IL-2、IL-6的相關性。

4 統(tǒng)計學方法

結果

1 一般資料

95例研究對象中，觀察組47例，對照組48例。兩組研究對象在部分具有可比性資料上差異無意義，P＞0.05，見表1。

表1 兩組一般資料

2 兩組研究對象CD4＋、CD8＋T細胞檢測結果比較

經(jīng)分析得，觀察組研究對象血清中T細胞CD4＋(t＝7.43，P＜0.001)、CD8＋(t＝6.11，P＜0.001)、及CD4＋/ CD8＋(t＝13.07，P＜0.001)百分比值均顯著高于對照組，（P＜0.05），見表2。

表2 兩組研究對象CD4＋、CD8＋T細胞檢測結果比較（，%）

3兩組研究對象細胞因子檢測結果比較

經(jīng)分析得，兩組研究對象外周血中IL-2、IL-4及IL-6水平比較差異無統(tǒng)計學意義，（P＞0.05）；觀察組患者中耳積液中IL-2、IL-6水平顯著高于兩組研究對象外周血水平，（P＜0.05），見表3。

表3 兩組研究對象細胞因子檢測結果比較（，pg/m l）

4 觀察組患者外周血CD4＋/CD8＋與中耳積液IL-2及IL-6的相關分析比較

用Pearson檢驗相關性分析觀察組IL-2、IL-6與CD4＋/CD8＋的相關性。結果可得，IL-2（r＝0.431, P＜0.001）及IL-6（r＝0.462，P＜0.001）與CD4＋/CD8＋呈正相關。詳情如圖1，2所示。

圖1

圖2

討論

急性分泌性中耳炎是多因呼吸道感染、免疫反應等因素引起的耳鼻咽喉科常見病[6]，患者多表現(xiàn)出耳鳴、耳痛、聽力下降等癥狀[7]，臨床上常通過抗感染、改善鼓室通氣引流、清理耳積液等方法給予患者治療，但患者治療過程中如不得到及時診治，病情易反復或加重，逐漸發(fā)展有耳聾的可能[8]，對患者的身心健康帶來損害。目前，急性分泌性中耳炎發(fā)病的原因和機制尚未有統(tǒng)一的理論說明，所以早期的預防和篩查就顯得格外重要。因此，醫(yī)學研究方向傾向于如何選擇早期急性分泌性中耳炎的診斷指標。

有文獻指出，急性分泌性中耳炎與機體免疫反應有關，過程中有T淋巴細胞亞群參與。CD4＋、CD8＋是T細胞免疫調(diào)節(jié)重要組成部分，CD4＋可以幫助T細胞生成抗體，CD8＋可以抑制T細胞增殖及抗體的合成[9]。細胞因子IL-2多由CD4＋細胞分泌生成[10]，IL-6具有急性期反應調(diào)節(jié)免疫作用[11]，兩者都直接或間接地參與了機體免疫應答反應。因此，本文通過分析CD4＋、CD8＋和IL-2、IL-6在急性分泌性中耳炎患者外周血或中耳積液中的水平變化，來探究其臨床意義。

本研究發(fā)現(xiàn)，觀察組研究對象血清中CD4＋、CD8＋及CD4＋/CD8＋比值均顯著高于對照組（P＜0.05），說明急性分泌性中耳炎患者機體發(fā)生了炎癥感染反應，刺激了機體免疫功能應激反應，T細胞增殖及抗體合成分泌加快，因此CD4＋、CD8＋比值含量要高于正常人群。兩組研究對象外周血中IL-2、IL-6水平比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），但觀察組患者中耳積液中IL-2、IL-6水平顯著高于兩組研究對象外周血水平（P＜0.05），說明IL-2、IL-6在外周血沒有變化，但在中耳積液中產(chǎn)生應答，可能由于中耳黏膜與炎癥因子發(fā)生了免疫反應，釋放出前列腺素、白細胞因子等炎性介質，通過提高血管透性導致鼓室黏膜水腫，進而發(fā)展成中耳炎[12]。同時細胞因子IL-2、IL-6在患者中耳積液中高表達，導致炎癥細胞不斷遷移激活，可能是造成患者病情反復的因素[13]。用Pearson檢驗分析觀察組患者耳積液IL-2、IL-6與外周血CD4+/CD8+的相關性得出，IL-2、IL-6與CD4+/CD8+呈正相關，說明患者中耳炎癥感染侵襲引起免疫反應的CD4+、CD8+T細胞表達與細胞因子IL-2、IL-6作用同步，且存在平行上升趨勢。

綜上所述，急性分泌性中耳炎患者CD4+、CD8+細胞及IL-2、IL-6水平均存在高表達，且之間存在正相關，可以為臨床的早期診斷提供參考指標，但由于本文研究的樣本量有限，所得結論還有待進一步的研究。

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（收稿：2016-06-27）

Correlation of the numbers of CD4+and CD8+T cells,the levels of IL-2 and IL-6 with acute secretary otitismedia and their clinical im plications

ZHAO Xingquan,ZHONG Qu
Department of Otolaryngology,the Second Affiliated Hospital of North Sichuan Medical College，the 404thHospital ofMianyang,Sichuan,621000,China

ObjectiveTo explore the characteristics of the numbers of CD4+and CD8+T cells,the levels of IL-2 and IL-6 in peripheral blood and in the effusion of middle ear among patients with acute secretary otitismedia.MethodsIncluded in this study were 47 cases with acute secretary otitismedia treated in our Hospital as the observation group(OG)and 40 healthy persons as control group(CG).Their blood sampleswere collected from peripheral venous vessels and effusion samples collected from middle ear to determine the numbers of CD4+and CD8+T,the levels of IL-2,IL-4 and IL-6 for a comparing analysis between the two groups to explore their correlations with the lesion ofmiddle ear among these patients.ResultsThe numbers of CD4+and CD8+T cells in peripheral blood were significantly higher in cases of OG than that of CG,with an obviously elevated ratio of CD4+/CD8+T cell values in OG,while no significantly statistical significance seen in the differences of IL-2,IL-4 and IL-6 levels between these 2 groups.However,the levels of IL-2 and IL-6 in effusion ofmiddle ear were significantly higher than that of peripheral blood among cases in either group.Furthermore,the levels of IL-2 and IL-6 in the effusion ofmiddle ear showed positive correlations with the ratio of CD4+/CD8+T cells in peripheral blood in OG,with r=0.431(P＜0.001)for IL-2 and r=0.462 for IL-6(P＜0.001)respectively.ConclusionsThe numbers of CD4+and CD8+T cells in peripheral blood and the levels of IL-2 and IL-6 in effusion ofmiddle ear are significantly elevated among caseswith acute secretary otitismedia.These factsmay provide significant clues for further study on the pathogenesis of such a lesion.

Acute secretary otitismedia;T cell subpopulations;Cytokines;Correlation;Pathogenesis

10.16542/j.cnki.issn.1007-4856.2017.01.001

1 川北醫(yī)學院附屬第二醫(yī)院（四川綿陽四0四醫(yī)院）耳鼻咽喉科（四川綿陽，621000）

鐘渠，主任醫(yī)師.Email:zhongqudu080@163.com