中老年翼狀胬肉患者癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞黏附分子6和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)與微血管密度的關(guān)系

李 娟 樸天華 王 睿 王云楓

(牡丹江醫(yī)學(xué)院附屬紅旗醫(yī)院眼科，黑龍江 牡丹江 157000)

中老年翼狀胬肉患者癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞黏附分子6和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)與微血管密度的關(guān)系

李 娟 樸天華 王 睿 王云楓1

(牡丹江醫(yī)學(xué)院附屬紅旗醫(yī)院眼科，黑龍江 牡丹江 157000)

目的 檢測(cè)翼狀胬肉中癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞黏附分子(CEACAM)6、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)和CD105標(biāo)記的微血管密度(MVD)的關(guān)系，探討其臨床價(jià)值。方法 64例翼狀胬肉患者臨床資料及術(shù)后標(biāo)本作為觀察組，15例正常結(jié)膜組織標(biāo)本作為對(duì)照組。應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)兩組CEACAM6、VEGF和CD105的表達(dá)。結(jié)果 兩組CEACAM6、VEGF表達(dá)的陽(yáng)性率及MVD值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。觀察組CEACAM6、VEGF和MVD在不同病變的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。相關(guān)分析顯示觀察組CEACAM6與MVD值、VEGF與MVD值均呈正相關(guān)性。結(jié)論 翼狀胬肉中CEACAM6、VEGF高表達(dá)預(yù)示病變處于進(jìn)展?fàn)顟B(tài)，間質(zhì)中有較高的血管密度。

翼狀胬肉；癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞黏附分子(CEACAM)6；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)；微血管密度(MVD)

翼狀胬肉是一種纖維血管組織從結(jié)膜向角膜增生的常見(jiàn)外眼疾病，中醫(yī)稱“胬肉攀睛”，俗稱“魚(yú)肉”，不僅影響局部結(jié)構(gòu)，還可以損害視功能〔1,2〕，目前其發(fā)病因素不清楚。近來(lái)研究認(rèn)為翼狀胬肉的發(fā)生需要新生的血管化〔3〕。癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞黏附分子(CEACAM)6是在細(xì)胞表面和細(xì)胞膜中形成的跨膜糖蛋白，是癌胚抗原亞型，近來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)其與血管生成有一定關(guān)系〔4,5〕。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)是經(jīng)典的血管生成促進(jìn)因子，可以引起血管內(nèi)皮的繁殖和新生，并促進(jìn)間質(zhì)的血管化〔6,7〕。本實(shí)驗(yàn)觀察翼狀胬肉中CEACAM6、VEGF的表達(dá)特征，關(guān)注二者與CD105標(biāo)記的微血管密度(MVD)的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2013～2015年行翼狀胬肉切除的患者64例作為觀察組，其中靜止期31例，進(jìn)行期33例，男34例，女30例，年齡40～69例，平均59歲，病程11個(gè)月～10年。均無(wú)其他角膜及結(jié)膜的病變。15例正常結(jié)膜組織標(biāo)本作為對(duì)照組，來(lái)源于無(wú)眼病的供體眼或活體手術(shù)眼，男10例，女5例，年齡35～65例，平均53歲?；颊吲c家屬簽署知情同意書(shū)，并經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。兩組一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 CEACAM6、VEGF和CD105的檢測(cè) 均應(yīng)用免疫組化SP法、二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色。操作嚴(yán)格按實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行，做好質(zhì)控工作。

1.3 CEACAM6、VEGF和MVD結(jié)果的判定方法 CEACAM6、VEGF：定位于細(xì)胞質(zhì)，以細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒物質(zhì)為陽(yáng)性。隨機(jī)計(jì)數(shù)5個(gè)高倍視野區(qū)域(400倍)，取其平均值，以陽(yáng)性細(xì)胞≥10%為陽(yáng)性表達(dá)，<10%為陰性表達(dá)。CD105結(jié)果的判定方法：以微血管內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)呈棕黃色為陽(yáng)性細(xì)胞，MVD計(jì)數(shù)參照Weindner等〔8〕方法，先確定棕色染色的內(nèi)皮細(xì)胞或細(xì)胞叢作為一個(gè)計(jì)數(shù)的血管，首先在低倍鏡下確定腫瘤內(nèi)血管密度的熱點(diǎn)區(qū)，再在高倍鏡下觀察腫瘤細(xì)胞與結(jié)締組織成分明顯區(qū)別的任何一個(gè)染色的內(nèi)皮細(xì)胞或細(xì)胞叢計(jì)為一個(gè)血管，如果不連續(xù)，其分支結(jié)構(gòu)也作為一個(gè)血管計(jì)數(shù)。記錄5 個(gè)視野內(nèi)的微血管數(shù)，取其平均值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SAS6.12統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)、Pearson相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1 兩組CEACAM6、VEGF和MVD比較 兩組CEACAM6、VEGF陽(yáng)性率、MVD值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

2.2 觀察組CEACAM6、VEGF和MVD在不同病變中的表達(dá) 觀察組CEACAM6、VEGF和MVD在不同病變中的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

2.3 觀察組CEACAM6、VEGF和MVD的相關(guān)性 CEACAM6與MVD值(r=0.48，P=0.045 1)、VEGF與MVD值(r=0.54，P=0.012 2)均呈正相關(guān)性。

表1 兩組CEACAM6、VEGF陽(yáng)性表達(dá)和MVD比較〔n(%)〕

表2 觀察組CEACAM6、VEGF陽(yáng)性表達(dá)和MVD在不同病變中的表達(dá)〔n(%)〕

3 討 論

翼狀胬肉一般認(rèn)為是由外界刺激而形成的局部球結(jié)膜纖維血管組織的炎性病變，瞼裂部球結(jié)膜及結(jié)膜下組織變性、肥厚、增生，向角膜內(nèi)發(fā)展，形成三角形贅生組織，單眼或雙眼受犯，侵犯角膜后逐漸增大，甚至可覆蓋至瞳孔區(qū)而嚴(yán)重影響視力〔9〕。近來(lái)認(rèn)為外界刺激、慢性炎癥引起的局部組織的細(xì)胞增殖和血管形成可能對(duì)病變有明顯的促進(jìn)作用〔10〕。而新生的血管是翼狀胬肉的主要病理表現(xiàn)〔11〕。VEGF定位在染色體的6p21.3，全長(zhǎng)14 kb，由8個(gè)外顯子，7個(gè)內(nèi)含子組成，這是被研究最多的與血管生成相關(guān)的因子〔12,13〕，其高表達(dá)時(shí)可以通過(guò)受體參與間質(zhì)的血管生成〔14〕。CD105被認(rèn)為是與細(xì)胞增生有關(guān)的內(nèi)皮細(xì)胞膜抗原〔15〕，也有學(xué)者認(rèn)為CD105是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β受體的復(fù)合物之一，正常情況下CD105表達(dá)的間質(zhì)血管內(nèi)皮中，因此CD105陽(yáng)性的部位提示為血管〔16,17〕。CEACAM6作為免疫球蛋白超家族的成員，也是細(xì)胞表面的糖蛋白，主要在炎性反應(yīng)和免疫反應(yīng)部位活化淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞及各種上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞表面表達(dá)；研究顯示其在腫瘤中的表達(dá)異常，并對(duì)腫瘤進(jìn)展有一定作用〔18〕；其與細(xì)胞的血管生成相關(guān)，尤其是在高增殖狀態(tài)的腫瘤中〔19〕。張哲等〔20〕通過(guò)研究CEACAM6在骨肉瘤中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)CEACAM6參與細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)變的增殖過(guò)程，同時(shí)對(duì)間質(zhì)的血管生成有重要的促進(jìn)作用。本實(shí)驗(yàn)提示翼狀胬肉中CEACAM6、VEGF的表達(dá)升高可以促進(jìn)病變的形成；CEACAM6、VEGF可以在一定程度上促進(jìn)間質(zhì)中CD105陽(yáng)性的血管新生，此時(shí)實(shí)質(zhì)細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)活躍，血液供應(yīng)充足。此結(jié)果也提示翼狀胬肉是以血管生成為中心環(huán)節(jié)的病變，積極研究病變的血管生成，對(duì)闡明其生長(zhǎng)機(jī)制有重要價(jià)值，而阻斷血管生成可能對(duì)治療提供一種可行的手段〔21,22〕。

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〔2015-03-17修回〕

(編輯 苑云杰)

牡丹江市科學(xué)技術(shù)計(jì)劃項(xiàng)目(No.Z2015s0030)

王云楓(1981-)，男，主治醫(yī)師，碩士，主要從事內(nèi)分泌學(xué)研究。

李 娟(1980-)，女，主治醫(yī)師，碩士，主要從事眼科學(xué)研究。

R777.33

A

1005-9202(2017)06-1497-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.06.087

1 內(nèi)分泌科