熒光分析法在藥物分析中的應(yīng)用分析

成永婧

通標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)服務(wù)（上海）有限公司 上海 200233

藥物分析是涉及許多方面的，比如化學(xué)與藥物化學(xué)技術(shù)，其中進(jìn)行藥物分析最普遍的手段是光化學(xué)分析法，對(duì)藥物進(jìn)行色譜分析、電化學(xué)分析。在進(jìn)行光化學(xué)分析過(guò)程中，又包含熒光分析法，原子吸收光譜分析法發(fā)等不同方法。在實(shí)際的分析過(guò)程中，使用光化學(xué)分析具有很多優(yōu)勢(shì)，能夠提高分析的靈敏度，使檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確。本文將通過(guò)調(diào)查研究，總結(jié)熒光分析法在藥物分析中的使用方法以及發(fā)展前景，促進(jìn)熒光分析法的不斷進(jìn)步和發(fā)展[1]。

1 熒光分析法在藥物分析中的應(yīng)用

1.1 膠束增敏熒光分析法

膠束增敏熒光法指在溶液當(dāng)中，更好的融合表面活性物質(zhì)和熒光分子，是熒光分析法中最常見(jiàn)的方法之一，具有增加靈敏度和穩(wěn)定性的優(yōu)勢(shì)。主要操作方法為：首先要對(duì)藥物進(jìn)行表面溫度與電荷的檢測(cè)，根據(jù)藥物的主觀和客觀分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析，同時(shí)結(jié)合微觀環(huán)境總結(jié)能夠促進(jìn)膠束形成造成熒光分子非輻射速率降低的特點(diǎn)，在速率降低的過(guò)程中，速度量保持不變，而量子效率逐漸增加。通過(guò)分析藥物的客觀成分，在膠束外的各種行動(dòng)受到限制，比如吸附、穿入。在對(duì)藥物進(jìn)行分析的過(guò)程中，使用熒光分析法，操作簡(jiǎn)單，靈敏度較高，進(jìn)行研究過(guò)程中，對(duì)氟羅沙星藥物進(jìn)行含量檢測(cè)分析，能夠進(jìn)一步體現(xiàn)該藥物的價(jià)值和作用[2]。

1.2 反相膠束增敏熒光分析法

該方法需要配合表面活性劑進(jìn)行分析，將兩種不相容的溶液更好地進(jìn)行混合，其中溶劑量較小的會(huì)被溶劑量較大的包圍起來(lái)，稱(chēng)之為“微泡”。在微泡中能夠提供更好的生長(zhǎng)環(huán)境，促進(jìn)溶劑的凝結(jié)，最終形成納米級(jí)別的凝聚體。在進(jìn)行熒光分析的過(guò)程中，通過(guò)使用反相膠束的方法，方便快捷，準(zhǔn)確度高，檢測(cè)范圍廣，具有很多優(yōu)勢(shì)，能夠有效提高物質(zhì)的濃度，保障熒光的強(qiáng)度。由于操作簡(jiǎn)單，在一定程度上降低了分析成本。有學(xué)者通過(guò)試驗(yàn)得出結(jié)論，反相膠束內(nèi)所含物質(zhì)丁二酸雙酯磺酸鈉/正辛烷熒光體系對(duì) 2,3-二氨基吩嗪（DAP）熒光具有一定的增敏能力，進(jìn)一步提高了敏感程度，更好地對(duì)藥物進(jìn)行檢測(cè)工作，發(fā)揮了熒光分析法的價(jià)值。

1.3 同步熒光光譜法

熒光光譜儀分析法屬于熒光分析技術(shù)中的一部分，它能夠有效清除背景的干擾，簡(jiǎn)化處理流程，不需要將樣品分離就可以進(jìn)行測(cè)定和分析，具有較高的靈敏度和選擇性。主要包含的內(nèi)容有可變角法、恒波長(zhǎng)法、恒能量法等不同分析技術(shù)。本文通過(guò)對(duì)恒波長(zhǎng)法進(jìn)行具體研究，該方法通過(guò)使用掃描儀檢測(cè)藥物內(nèi)部的發(fā)射波長(zhǎng)與激發(fā)波長(zhǎng)，從而確定波長(zhǎng)距離，更好地掌握藥物內(nèi)的成分信息。為了更好地保障藥物分析時(shí)的準(zhǔn)確性和合理性，必須制定科學(xué)的波長(zhǎng)間距，符合藥物的要求，防止在檢測(cè)過(guò)程中受到信號(hào)的影響，導(dǎo)致測(cè)量結(jié)果不準(zhǔn)確[3]。

1.4 聯(lián)用技術(shù)及流動(dòng)注射分析法

在進(jìn)行熒光分析的過(guò)程中，還需要結(jié)合許多先進(jìn)的儀器進(jìn)行藥物的分析。隨著聯(lián)合應(yīng)用技術(shù)的不斷增多，逐漸出現(xiàn)了流動(dòng)性的注射熒光分析法。通過(guò)結(jié)合先進(jìn)的熒光分析技術(shù)，以及液相、薄層色譜等技術(shù)手段共同對(duì)藥物的成分信息進(jìn)行研究和分析，相對(duì)于傳統(tǒng)的熒光分析方法，技術(shù)性更強(qiáng)，研究結(jié)果更加可靠，能夠方便快捷的檢測(cè)出結(jié)果，從而促進(jìn)了藥物分析技術(shù)的不斷發(fā)展[4]。

1.5 色譜聯(lián)用

進(jìn)行藥物分析過(guò)程中，常常會(huì)采用色譜連用的方法，能夠更好地對(duì)臨床藥物進(jìn)行檢驗(yàn)與鑒定。色譜聯(lián)用的主要使用方法是：直接檢測(cè)和間接檢測(cè)。在進(jìn)行藥物檢測(cè)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，大部分樣品中所含的藥物比例少于實(shí)際藥品，因此，無(wú)法更好地滿(mǎn)足藥物檢測(cè)的需求。同時(shí)在藥物中幾乎不含有生色基因，因此降低了藥物檢測(cè)的靈敏性。為了更好地解決該問(wèn)題，可以利用衍生藥物，吸收紫外線(xiàn)的方法，最后再通過(guò)色譜分離的方法，得到所需要的物質(zhì)信息。通過(guò)間接的檢測(cè)能夠改變傳統(tǒng)直接檢測(cè)方案的缺點(diǎn)，提高檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確性[5]。

2 新型熒光技術(shù)及其在藥物分析中的應(yīng)用

2.1 熒光猝滅分析法

熒光猝滅能夠在原子核外電子產(chǎn)生非輻射現(xiàn)象時(shí)，釋放能量，有效減少熒光程度，通過(guò)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，該方法在藥物檢測(cè)過(guò)程中得到了大量的應(yīng)用，具有一定的優(yōu)勢(shì)。對(duì)藥物進(jìn)行檢測(cè)的過(guò)程中，可以通過(guò)熒光猝滅分析法分析藥物的濃度于熒光強(qiáng)度大線(xiàn)性關(guān)系，提高藥物檢測(cè)的準(zhǔn)確性和可靠性。有學(xué)者通過(guò)調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)二氫槲皮素和二氫楊梅素與牛血清白蛋白能夠更好地融合，并產(chǎn)生強(qiáng)烈的反應(yīng)，通過(guò)使用熒光猝滅分析法，提出疏水作用力的概念，進(jìn)一步促進(jìn)了兩種物質(zhì)的融合與反應(yīng)。劉佑成等學(xué)者通過(guò)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)在氨水-氯化銨緩沖條件下，牛血紅蛋白的熒光強(qiáng)度不斷增強(qiáng)，因此可以認(rèn)為丙二醛能夠更好地進(jìn)行猝滅，并達(dá)到了良好的效果。

2.2 化學(xué)計(jì)量學(xué)方法

化學(xué)計(jì)量方法需要結(jié)合多種學(xué)科進(jìn)行研究，包括數(shù)學(xué)、統(tǒng)計(jì)學(xué)、計(jì)算機(jī)技術(shù)，是當(dāng)今時(shí)代比較先進(jìn)的學(xué)科。作為學(xué)科的基礎(chǔ)學(xué)習(xí)內(nèi)容，要求能夠進(jìn)行相關(guān)檢測(cè)試驗(yàn)，在實(shí)踐中總結(jié)理論知識(shí)和經(jīng)驗(yàn)，要求同學(xué)能夠更好地對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和分析，保障所學(xué)知識(shí)能夠更好地應(yīng)用在藥物檢測(cè)工作當(dāng)中。在進(jìn)行熒光分析的過(guò)程中，容易受到很多因素的影響，從而影響檢測(cè)結(jié)果，比較常見(jiàn)的影響因素是散射光，因此只能進(jìn)行單一樣品的分析。而通過(guò)引入化學(xué)計(jì)量學(xué)方法，能夠更好地將所需物質(zhì)通過(guò)先進(jìn)的系統(tǒng)和技術(shù)進(jìn)行分離，進(jìn)一步提高了熒光分析的效果，解決了散射光的影響問(wèn)題。在對(duì)藥物進(jìn)行檢測(cè)的過(guò)程中，采用了熒光分析法，并結(jié)合了化學(xué)計(jì)量學(xué)中的相關(guān)知識(shí)，對(duì)人體血清和尿液中的兩種非甾體抗炎藥即萘普生和二氟尼柳進(jìn)行檢測(cè)，具有較好的檢測(cè)效果。

3 熒光分析法在藥物分析中的應(yīng)用進(jìn)展以及發(fā)展方向

3.1 熒光分析法在藥物分析中的應(yīng)用進(jìn)展

近些年，越來(lái)越多的學(xué)者關(guān)注對(duì)藥物的分析，其中大部分關(guān)注的是對(duì)發(fā)光體系的研究，此類(lèi)研究與藥物的熒光強(qiáng)弱程度和有無(wú)熒光沒(méi)有關(guān)聯(lián)，在實(shí)際的藥物檢測(cè)分析過(guò)程中，通過(guò)相應(yīng)的化學(xué)反應(yīng)將非熒光物質(zhì)轉(zhuǎn)化為熒光物質(zhì)，然后再對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行分析。比如在進(jìn)行分析過(guò)程中，會(huì)使用到熒光增強(qiáng)劑，因此，加大了對(duì)熒光增強(qiáng)劑的研究和使用。同時(shí)，在對(duì)藥物進(jìn)行熒光分析的過(guò)程中，比較關(guān)注藥物檢測(cè)的靈敏度與準(zhǔn)確度，因此對(duì)同步熒光、三維熒光、雙體系雙波長(zhǎng)熒光的特點(diǎn)進(jìn)行了總結(jié)分析，研究在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中各自的特點(diǎn)以及檢測(cè)的水平，進(jìn)一步提高熒光分析法的特異性與選擇性，促進(jìn)檢測(cè)藥物技術(shù)的不斷發(fā)展。通過(guò)調(diào)查三維熒光分析法可以發(fā)現(xiàn)，在傳統(tǒng)的熒光分析法中所獲取的信息為二維光譜，熒光強(qiáng)度會(huì)隨著光譜的變化而改變，具有一定的靈敏性，然而在檢測(cè)分析過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，必須對(duì)熒光光譜中的激發(fā)波長(zhǎng)與發(fā)射波長(zhǎng)共同進(jìn)行研究，同時(shí)考慮二者的影響，并對(duì)函數(shù)變化進(jìn)行分析。而在三維熒光，分析法當(dāng)中，熒光強(qiáng)度、激發(fā)波長(zhǎng)、發(fā)射波長(zhǎng)，同時(shí)在圖譜分析中展現(xiàn)，能夠更加清晰地發(fā)現(xiàn)三者的變量關(guān)系，具有很大的優(yōu)勢(shì)。因此，三維熒光分析法又稱(chēng)為三維熒光光譜或熒光總發(fā)光光譜。

3.2 熒光分析法的發(fā)展方向

在進(jìn)行藥物分析的過(guò)程中，采用熒光分析法具有很多的優(yōu)勢(shì)，操作簡(jiǎn)單，易于上手，同時(shí)具有較高的靈敏度和準(zhǔn)確度，在藥物分析中，具有較強(qiáng)的經(jīng)濟(jì)優(yōu)勢(shì)，因此近些年越來(lái)越多的學(xué)者加大了對(duì)熒光分析法的研究，熒光分析法也在應(yīng)用中不斷創(chuàng)新和發(fā)展，更好地滿(mǎn)足當(dāng)今藥物分析的需求。調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)，在熒光分析法不斷優(yōu)化創(chuàng)新的過(guò)程中，應(yīng)該更加關(guān)注膠束體的研究，進(jìn)一步增強(qiáng)藥物內(nèi)部的熒光強(qiáng)度，更好地對(duì)藥物進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)根據(jù)熒光探針原理以及其他先進(jìn)的檢測(cè)手段，進(jìn)一步促進(jìn)對(duì)藥物的研究和分析，提高了熒光分析法技術(shù)手段。

4 結(jié)論

綜上所述，隨著社會(huì)與科技的不斷進(jìn)步和發(fā)展，在對(duì)藥物進(jìn)行檢測(cè)過(guò)程中逐漸引入了熒光分析法，能夠更好地符合當(dāng)今藥物分析的需求。熒光分析法也在應(yīng)用中不斷創(chuàng)新和發(fā)展，提高了對(duì)藥物檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確性，進(jìn)一步保障了對(duì)藥物的檢測(cè)工作，同時(shí)，在檢測(cè)分析過(guò)程中融合計(jì)算機(jī)技術(shù)，進(jìn)一步保障熒光分析工作的自動(dòng)化與智能化發(fā)展，推動(dòng)整個(gè)生物化學(xué)領(lǐng)域的不斷發(fā)展，具有較好的發(fā)展前景。