細(xì)粒棘球蚴病的免疫逃逸機(jī)制探討

宋旭彤，朱 鵬，龍 爽，魏 亮，鄧紹平△

(1.川北醫(yī)學(xué)院，四川 南充 637000；2.西南醫(yī)科大學(xué)，四川 瀘州 646000；3.四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院.四川省人民醫(yī)院器官移植實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 610072)

*通訊作者

細(xì)粒棘球蚴病的免疫逃逸機(jī)制探討

宋旭彤1，朱 鵬2，龍 爽2，魏 亮3，鄧紹平3△

(1.川北醫(yī)學(xué)院，四川 南充 637000；2.西南醫(yī)科大學(xué)，四川 瀘州 646000；3.四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院.四川省人民醫(yī)院器官移植實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 610072)

細(xì)粒棘球蚴病(echinococcosis granulosa)是一種慢性、繁雜性、無(wú)臨床癥狀的地方區(qū)域性寄生蟲(chóng)傳染病。細(xì)粒棘球蚴病主要的致病是在其幼蟲(chóng)階段，通過(guò)糞口途徑傳播。目前細(xì)粒棘球蚴絳蟲(chóng)分布在全世界除南極洲以外的每個(gè)大陸，這也導(dǎo)致全世界有大量人口感染。本文主要研究細(xì)粒棘球蚴病在感染人體后，機(jī)體免疫狀態(tài)和細(xì)粒棘球蚴免疫逃逸機(jī)制的探討，提出免疫細(xì)胞能量代謝在檢測(cè)細(xì)粒棘球病新思路。

細(xì)粒棘球蚴病；免疫逃逸；細(xì)胞能量代謝；寄生蟲(chóng)病

細(xì)粒棘球蚴病(echinococcosis granulosa)是由細(xì)粒棘球蚴絳蟲(chóng)感染的一種廣泛區(qū)域性疾病，在疾病發(fā)生發(fā)展的時(shí)期沒(méi)有任何臨床癥狀和典型體征，使得該疾病很難在疾病發(fā)展的早期被診斷和治療?，F(xiàn)目前有效地診斷是通過(guò)影像學(xué)如B超、CT及MRI，世界衛(wèi)生組織在2003年根據(jù)細(xì)粒棘球蚴蟲(chóng)在B超下不同的影像將病情的發(fā)展分成四個(gè)階段(囊泡損傷階段、激活階段、變遷階段、失活階段)各個(gè)階段對(duì)應(yīng)的六個(gè)影像學(xué)分期，而通過(guò)血清學(xué)檢測(cè)缺乏特異性和靈敏度一直不作為主要的診斷方法，在治療細(xì)粒棘球蚴病方面目前外科手術(shù)治療依然是首選，阿苯達(dá)唑、甲苯咪唑作為藥物治療的一線用藥可作為輔助治療或者前期預(yù)防治療手段[1，2]。

1 囊泡結(jié)構(gòu)對(duì)機(jī)體免疫反應(yīng)的影響

細(xì)粒棘球蚴絳蟲(chóng)在宿主中生長(zhǎng)緩慢，在人體中約有80%以上的棘球蚴囊腫發(fā)生在肝臟，在這其中大部分位于肝右葉，多數(shù)延向肝靜脈，少數(shù)可穿透肝靜脈至肺、腦等全身的任意器官發(fā)病[3]。這也使得大量學(xué)者想了解清楚細(xì)粒棘球蚴病在機(jī)體中的免疫逃逸的機(jī)制和機(jī)體在感染細(xì)粒棘球蚴絳蟲(chóng)之后出現(xiàn)的免疫水平的變化情況。在細(xì)粒棘球蚴絳蟲(chóng)感染中間宿主后，初期會(huì)被機(jī)體當(dāng)做“異物”清除，并抑止蟲(chóng)體的生長(zhǎng)，但這一過(guò)程在包囊形成后和蟲(chóng)體分泌一些代謝產(chǎn)物，使得機(jī)體的免疫環(huán)境發(fā)生改變從而逃避機(jī)體的免疫反應(yīng)[4]。細(xì)粒棘球蚴蟲(chóng)感染中間宿主的基本過(guò)程是在宿主吞噬了細(xì)粒棘球蚴絳蟲(chóng)蟲(chóng)卵后，蟲(chóng)卵在腸道孵育成六鉤蚴，六鉤蚴侵襲腸道黏膜后進(jìn)入血液，遷移到宿主的內(nèi)臟器官中，比如最常見(jiàn)的肝臟。六鉤蚴在器官中逐漸發(fā)育形成囊泡[5]。囊泡是細(xì)粒棘球蚴病的一個(gè)影像學(xué)下的特征，囊泡形成過(guò)程會(huì)使得宿主機(jī)體的免疫反應(yīng)發(fā)生病理性的改變，從而抑制機(jī)體免疫反義躲避免疫細(xì)胞的攻擊[1]。使得囊泡躲過(guò)免疫逃逸的機(jī)制研究中發(fā)現(xiàn)囊泡囊壁、蟲(chóng)體、囊液在抑制宿主免疫中發(fā)揮相應(yīng)的作用。細(xì)粒棘球蚴蟲(chóng)在宿主中形成囊泡，在其囊壁的保護(hù)下細(xì)粒棘球蚴能在宿主內(nèi)生存下來(lái)。

1.1 囊壁和蟲(chóng)體對(duì)機(jī)體免疫反應(yīng)的影響 無(wú)細(xì)胞的多層紋理狀腳皮層囊壁使得內(nèi)層的和囊內(nèi)的子囊及在囊內(nèi)的原頭節(jié)能有效的躲避宿主的免疫攻擊[2]。蟲(chóng)體已有相關(guān)研究表明在抗宿主反應(yīng)中也起到了一定的作用，如在Baz等用細(xì)粒棘球蚴囊液免疫小鼠，產(chǎn)生囊液的親和力較強(qiáng)的抗體，在感染包蟲(chóng)蟲(chóng)體250天里抗囊液抗體的親和力一直很低，這證明了細(xì)粒棘球蚴蟲(chóng)可以調(diào)節(jié)宿主的抗體反應(yīng)[6]。

1.2 囊液對(duì)對(duì)機(jī)體免疫反應(yīng)的影響 囊液是一種復(fù)雜的混合物，含有獨(dú)特的宿主和寄生蟲(chóng)來(lái)源的抗原，主要是兩種抗原一種是抗原5，另一種是抗原B(AgB)，它們?cè)谀乙褐泻康谋嚷蕿?∶10[7]。在囊液中約占總蛋白含量的10%，抗原B是一種160 KDa的耐熱性的脂蛋白，在不同的物種中表達(dá)的抗原B的亞型為有所區(qū)別，而在細(xì)粒棘球蚴病中抗原B基因編碼五種亞型，分別是抗原B1、抗原B2、抗原B3、抗原B4、抗原B5[8～13]。目前對(duì)于抗原B在寄生蟲(chóng)生物學(xué)中扮演的角色不是完全清楚，但是在一些免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮了一定的作用，如在抑制中性粒細(xì)胞趨化性，抑制活性氧(ROS)的產(chǎn)生和彈性蛋白酶的活性[4，14]。在單個(gè)核細(xì)胞與抗原B混合培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)樹(shù)突狀細(xì)胞的分化成熟受到影響，檢測(cè)到了大量的細(xì)胞因子IL-10和TH2的偏移，還在誘導(dǎo)單個(gè)核細(xì)胞凋亡和參與IgG4亞型反應(yīng)都發(fā)揮了作用[15～20]?？乖?是一種400 KDa的不耐熱的糖蛋白，屬于胰蛋白酶家屬。目前對(duì)于抗原5的研究報(bào)道較少，但是有研究表明其在單個(gè)核細(xì)胞中誘導(dǎo)促炎因子產(chǎn)生有一定的作用[5]。這同時(shí)也說(shuō)明囊液中的蛋白具有抗原性，會(huì)調(diào)節(jié)機(jī)體免疫應(yīng)答。

2 細(xì)粒棘球蚴病的免疫逃逸機(jī)制探討

2.1 Th1和Th2偏移理論 前面所探討的細(xì)粒棘球蚴在宿主中形成的囊泡結(jié)構(gòu)及其成分在其體內(nèi)的免疫反應(yīng)中所發(fā)揮的作用，而在研究細(xì)粒棘球蚴在宿主中免疫逃逸機(jī)制的理論中，Th1和Th2偏移與細(xì)粒棘球蚴病的免疫逃逸有著直接的關(guān)系。Th2反應(yīng)是助于寄生蟲(chóng)在宿主中寄生，而Th1反應(yīng)對(duì)寄生蟲(chóng)的殺滅起著主要的作用，所以寄生蟲(chóng)想在機(jī)體中存活就會(huì)使得Th2反應(yīng)增強(qiáng)而減弱Th1反應(yīng)。Newport等在研究62例臨床病例，通過(guò)檢測(cè)病人血清中的細(xì)胞因子證明在感染細(xì)粒棘球蚴的病人中Th2細(xì)胞的細(xì)胞因子占主導(dǎo)地位[21]。Mourglia-Ettlin等研究表明在體外試驗(yàn)中將脾臟細(xì)胞和原頭蚴混培后檢測(cè)出了大量的IL-10細(xì)胞因子[22]。將IFN-γ和IL-12基因轉(zhuǎn)染到小鼠體內(nèi)，用原頭蚴感染轉(zhuǎn)染后的小鼠，小鼠體內(nèi)的囊泡明顯減少。而用IL-4基因轉(zhuǎn)染小鼠后，在感染原頭蚴基因轉(zhuǎn)染后的小鼠體內(nèi)囊泡與對(duì)照組相比顯著增加[23]。Mourglia-Ettlin 等在其研究細(xì)粒棘球蚴絳蟲(chóng)感染的早期腹膜的免疫反應(yīng)中，在用PCR技術(shù)檢測(cè)Th1和Th2相關(guān)的細(xì)胞因子基因表達(dá)情況時(shí)發(fā)現(xiàn)在原頭蚴感染Th1細(xì)胞因子表達(dá)明顯高于Th2細(xì)胞因子的表達(dá)，直到第七天后Th2細(xì)胞因子的表達(dá)遠(yuǎn)高于Th1細(xì)胞因子[22]。也有研究表明在感染細(xì)粒棘球幼的患者中檢測(cè)到囊性包蟲(chóng)特異性抗原B時(shí)，這種患者中的T細(xì)胞會(huì)在細(xì)胞因子的趨化作用下表達(dá)出大量的Th2細(xì)胞，因此這個(gè)研究也說(shuō)明了抗原B是一個(gè)在固有免疫中的信號(hào)，它會(huì)使得適應(yīng)性免疫應(yīng)答向Th2反應(yīng)偏移[24～26]。研究報(bào)道體外抗體B會(huì)影響樹(shù)突狀細(xì)胞的成熟，包括通過(guò)誘導(dǎo)其表型使其能夠分泌IL-10和使T細(xì)胞分化成為能夠分泌IL-4的細(xì)胞[27]。然而上述對(duì)于抗原B誘導(dǎo)Th2產(chǎn)生的研究只能作為解釋細(xì)粒棘球蚴免疫逃避機(jī)制的可能存在理論之一，其中還有許多復(fù)雜的因素的影響存在，比如不同的基因或者多態(tài)性的形成激活了不同的免疫反應(yīng)，也有可能是免疫調(diào)節(jié)是通過(guò)脂質(zhì)傳遞給免疫細(xì)胞，并且一些強(qiáng)烈的免疫調(diào)節(jié)反應(yīng)的級(jí)聯(lián)效應(yīng)，促使了受感染的機(jī)體免疫應(yīng)答反應(yīng)的消失，如在局部或者是在受感染的機(jī)體的全身系統(tǒng)中檢測(cè)到抑制免疫應(yīng)答的相關(guān)細(xì)胞因子如TGF-β、IL-10等，也在機(jī)體的局部或者全身系統(tǒng)中檢測(cè)到了FoxP3+調(diào)節(jié)細(xì)胞的聚集[28]。

2.2 免疫細(xì)胞能量代謝理論 隨著全世界學(xué)者對(duì)于細(xì)粒棘球蚴病免疫的深入研究，對(duì)于它的一些免疫逃逸的機(jī)制也有了一定的認(rèn)識(shí)，但還尚未能完全清楚。我們經(jīng)過(guò)一些研究也提出了一些新的思路和想法，免疫細(xì)胞在受到外來(lái)異物刺激時(shí)會(huì)產(chǎn)生一系列的應(yīng)對(duì)措施來(lái)消滅異物，這一過(guò)程中細(xì)胞需要能量的補(bǔ)給，而免疫逃避中這種免疫細(xì)胞能量補(bǔ)給的變化情況尚未知。這個(gè)思路提示在細(xì)粒棘球蚴長(zhǎng)期感染的機(jī)體中存在這種免疫逃避反應(yīng)，能否通過(guò)檢測(cè)免疫細(xì)胞的能量代謝的變化水平，從免疫細(xì)胞的能量代謝方面入手來(lái)探索免疫逃逸的機(jī)制。T細(xì)胞的激活與細(xì)胞線粒體的氧化磷酸化和糖酵解變化密切相關(guān)，而在T細(xì)胞不同的分化水平有著不同的能量代謝的利用水平，Michalek 等第一次證明了當(dāng)T細(xì)胞分化成為CD4+輔助T細(xì)胞(Th1，Th2，Th17)時(shí)，糖酵解反應(yīng)明顯強(qiáng)于線粒體氧化磷酸化反應(yīng)，而在誘導(dǎo)分化成CD4+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞時(shí)，除了有氧化磷酸化反義和糖酵解反應(yīng)還有脂質(zhì)氧化反應(yīng)的參加[29]，特別是在Th17細(xì)胞中，通過(guò)增加糖酵解反應(yīng)來(lái)保持和維護(hù)Th17細(xì)胞的持續(xù)分化。缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1a)是一種氧化敏感的轉(zhuǎn)錄因子，它調(diào)控糖酵解在Th17細(xì)胞中的表達(dá)，通過(guò)缺氧誘導(dǎo)因子-1α來(lái)阻斷糖酵解反應(yīng)，使Th17細(xì)胞的分化降低而調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的分化增加[30]。證明在活化的T細(xì)胞進(jìn)行不同類(lèi)型的增殖分化，相應(yīng)的能量代謝的水平也不同。Hung等在研究肝細(xì)胞移植后供體T細(xì)胞代謝的重組，得出在治療移植術(shù)后供體抗受體的免疫排斥反應(yīng)的疾病中，將T細(xì)胞的能量代謝變化作為一個(gè)潛在的治療指標(biāo)[31]。在研究Notch細(xì)胞通路對(duì)維持記憶CD4 T細(xì)胞存活的實(shí)驗(yàn)中，在敲基因小鼠模型中，證明Notch細(xì)胞通路通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞對(duì)葡糖糖的攝取從而維持了記憶CD4 T細(xì)胞存活[32]。細(xì)胞能量代謝的改變能反應(yīng)細(xì)胞某些生理活動(dòng)，為我們辨別這些細(xì)胞生理活動(dòng)提供了訊息。Keppel等發(fā)現(xiàn)如當(dāng)NK細(xì)胞在被激活產(chǎn)生IFN-γ時(shí)，如果是被細(xì)胞因子IL12和IL18激活是不依賴(lài)線粒體氧化磷酸化或者糖酵解的，而被NK受體激活卻恰恰相反[33]。在研究能量免疫代謝中，有學(xué)者認(rèn)為T(mén)細(xì)胞接受刺激初始，T細(xì)胞增殖分化成效應(yīng)T細(xì)胞的過(guò)程中，糖酵解反應(yīng)大于氧化磷酸化反應(yīng)，而效應(yīng)T細(xì)胞部分轉(zhuǎn)變成記憶T細(xì)胞的過(guò)程中氧化磷酸化反應(yīng)大于糖酵解反應(yīng)[34]。這也說(shuō)明在T細(xì)胞處于不同的時(shí)期對(duì)于能量的攝取的途徑是有差異的。我們從前面的Th1和Th2偏移理論中得到啟發(fā)，免疫細(xì)胞受到抑制是否與細(xì)胞能量代謝的重新編碼有直接的關(guān)系，但尚有待進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)證明。

3 展望

在研究細(xì)粒棘球蚴病的免疫逃逸機(jī)制是為了更好地認(rèn)識(shí)疾病，能使我們更早更有效的診斷疾病的發(fā)生發(fā)展水平，使患者得到更及時(shí)的治療。在研究該疾病的免疫機(jī)制中，不少專(zhuān)家學(xué)者已經(jīng)進(jìn)行了大量血清學(xué)的研究，想通過(guò)檢測(cè)特異性的抗體或者抗原來(lái)診斷疾病，而在研究免疫細(xì)胞能量代謝的變化確實(shí)對(duì)于細(xì)胞的生物學(xué)活性產(chǎn)生了相應(yīng)的改變，這也為研究細(xì)粒棘球蚴病的免疫逃逸和血清學(xué)診斷該疾病提供了一個(gè)全新的思路。研究細(xì)粒棘球蚴病的免疫逃逸的機(jī)制時(shí)，需要更加深入全方位多角度地分析其逃避免疫應(yīng)答的原因，對(duì)于日后希望用免疫學(xué)技術(shù)來(lái)診斷治療細(xì)粒棘球蚴病有著深遠(yuǎn)的意義。

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The immune escape of echinococcosis granulosa mechanism discussion

SONG Xu-tong，ZHU Peng，LONG Shuang，WEI Liang，DENG Shao-ping

R532.32

B

1672-6170(2017)03-0138-04

2016-11-25；

2016-12-20)