約氏乳桿菌對大鼠生長性能、血液指標(biāo)及臟器指數(shù)的影響

汪 攀，胡 婷，褚衍偉王丹玉，張 樂，閆軼潔，王安如*

（1．北京大北農(nóng)科技集團(tuán)股份有限公司，飼用微生物工程國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100080；2．淮安市淮陰大北農(nóng)飼料有限公司，江蘇淮安 223300）

約氏乳桿菌對大鼠生長性能、血液指標(biāo)及臟器指數(shù)的影響

汪 攀1，胡 婷1，褚衍偉2王丹玉1，張 樂1，閆軼潔1，王安如1*

（1．北京大北農(nóng)科技集團(tuán)股份有限公司，飼用微生物工程國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100080；2．淮安市淮陰大北農(nóng)飼料有限公司，江蘇淮安 223300）

本試驗(yàn)旨在研究約氏乳桿菌對大鼠生長性能、血液指標(biāo)及臟器指數(shù)的影響。試驗(yàn)選取SD大鼠80只，雌雄各半。大鼠按照體重相近的原則隨機(jī)分為4個劑量組，即陰性對照組、試驗(yàn)Ⅰ（5 000 mg/kg體重）、試驗(yàn)Ⅱ（1 000 mg/kg體重）和試驗(yàn)Ⅲ組（200 mg/kg體重）。試驗(yàn)期為30 d。結(jié)果表明：試驗(yàn)劑量為200～1 000 mg/kg體重時，約氏乳桿菌對大鼠體增重、總采食量、飼料轉(zhuǎn)化率、血液學(xué)指標(biāo)和病理學(xué)指標(biāo)的影響無顯著性差異（P＞ 0．05）；試驗(yàn)劑量為5 000 mg/kg體重時，谷草轉(zhuǎn)氨酶、血糖、總膽固醇差異不顯著（P＞0．05）；與其他劑量組相比，大鼠的體增重和總采食量顯著降低（P＜ 0．05），但飼料轉(zhuǎn)化率無顯著差異（P＞ 0．05）；谷丙轉(zhuǎn)氨酶水平顯著降低（P＜ 0．05），白蛋白和總蛋白顯著增高（P＜ 0．05）；雌性大鼠尿素氮和雄性大鼠肌酐顯著增高（P＜ 0．05）。綜合分析，約氏乳桿菌劑量低于1 000 mg/kg體重時，對大鼠平均日增重、血液指標(biāo)及臟器指數(shù)無影響；約氏乳桿菌劑量高于5 000 mg/kg體重時，對大鼠臟器指數(shù)有影響。

約氏乳桿菌；大鼠；生長性能；血液指標(biāo)；臟器指數(shù)

約氏乳桿菌是人和動物體內(nèi)的一種固有菌群[1]，其益生作用主要體現(xiàn)在提高動物生產(chǎn)性能、抑制腸道病原菌繁殖、降低腸道pH、增強(qiáng)皮膚健康和免疫性能等方面。飼喂約氏乳桿菌可以使Cobb500肉雞飼料轉(zhuǎn)化率顯著提高[2]，可有效抑制小鼠胃腸道中幽門螺旋桿菌的繁殖[3]。約氏乳桿菌能夠預(yù)防年老小鼠因蛋白營養(yǎng)不良而導(dǎo)致的免疫機(jī)能障礙，通過排泄物檢測發(fā)現(xiàn)飼喂約氏乳桿菌組小鼠糞便浸提物中IgA含量增加，IgA、IgG、脾細(xì)胞數(shù)量和CD8+T細(xì)胞含量均增加[4]。苗玉和等[5]研究發(fā)現(xiàn)，飼喂約氏乳桿菌對仔豬腹瀉具有一定的預(yù)防作用。目前，對約氏乳桿菌的研究主要集中在其應(yīng)用效果及作用機(jī)理方面，關(guān)于約氏乳桿菌的應(yīng)用劑量和動物耐受能力方面的研究較少。因此，本試驗(yàn)選用SD大鼠為試驗(yàn)動物，旨在研究約氏乳桿菌對大鼠生長性能、血液指標(biāo)及臟器指數(shù)的影響，為約氏乳桿菌在養(yǎng)殖生產(chǎn)中的實(shí)際應(yīng)用提供試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1．1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)選取21日齡SD大鼠80只，雌雄各半，隨機(jī)分成4組，每組20只。試驗(yàn)設(shè)5 000 mg/kg體重（Ⅰ）、1 000 mg/kg體重（Ⅱ）、200 mg/kg體重（Ⅲ）3個劑量組，另設(shè)一個陰性對照組。將約氏乳桿菌凍干粉按各劑量添加到飲水中，經(jīng)自由飲水給予試驗(yàn)大鼠，飲水量按體重20%計(jì)。飼養(yǎng)過程中大鼠自由采食、飲水。預(yù)試7 d，試驗(yàn)期30 d，每天觀察大鼠的一般行為表現(xiàn)?；A(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)成分見表1。

1．2 試驗(yàn)材料 約氏乳桿菌凍干粉（1．0×1010CFU/g）由北京大北農(nóng)科技集團(tuán)股份有限公司飼用微生物工程國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供。該菌（保藏號：CGMCC No．4926）分離自仔豬腸道，為兼性厭氧菌，其發(fā)酵產(chǎn)物主要為乳酸、丁酸等有機(jī)酸，具有良好的耐酸和耐膽鹽能力。

SD大鼠由北京維通利華動物科技有限公司提供，實(shí)驗(yàn)動物合格證號SCXK（京）2007-0001。1．3 檢測指標(biāo)

1．3．1 生長指標(biāo) 在試驗(yàn)第0天和第30天大鼠禁食12 h，稱量體重，每日記錄大鼠采食量，計(jì)算體增重、總采食量和飼料轉(zhuǎn)化率（增重/采食量）。

1．3．2 血液學(xué)指標(biāo) 試驗(yàn)結(jié)束時摘眼球采血，測定血紅蛋白（Hg）、紅細(xì)胞數(shù)（RBC）、白細(xì)胞數(shù)（WBC）、血小板數(shù)（PLT）等指標(biāo)。

1．3．3 血液生化指標(biāo) 試驗(yàn)結(jié)束時摘眼球采血，測定谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、血糖（Glu）、血清白蛋白（Alb）、總蛋白（TP）、總膽固醇（TC）等指標(biāo)。

1．3．4 臟器指數(shù) 采血后，脫頸處死，剖離肝臟、腎臟、脾臟、肺臟、心臟、睪丸、卵巢，稱重并計(jì)算臟器指數(shù)。臟器系數(shù)＝器官重量/體重×100%。1．4 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS 8．0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析，用Duncan′s法進(jìn)行多重比較，以P＜0．05為顯著水平，試驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)成分(飼喂基礎(chǔ))

2 結(jié) 果

2．1 約氏乳桿菌對大鼠生長的影響 由表2可見，各組間飼料轉(zhuǎn)化率差異不顯著（P＞0．05）。Ⅱ、Ⅲ組和對照組末體重、體增重和總采食量差異不顯著（P＞0．05），但與I組差異顯著（P＜0．05）。

2．2 約氏乳桿菌對大鼠血常規(guī)指標(biāo)的影響 由表3可見，3個劑量組的大鼠各項(xiàng)血常規(guī)指標(biāo)（Hg、RBC、WBC、PLT）均無顯著差異（P＞0．05）。

2．3 約氏乳桿菌對大鼠血清生化指標(biāo)的影響 由表4可以看出，Ⅰ組所有大鼠的ALT顯著低于其他各組（P＜0．05），Ⅱ、Ⅲ組和對照組的ALT差異不顯著（P＞0．05）。Ⅰ組所有大鼠的Alb和TP顯著高于其他各組（P＜0．05），Ⅱ、Ⅲ組和對照組之間Alb和TP差異不顯著（P＞0．05）。Ⅰ組雌性大鼠的BUN顯著高于其他組（P＜0．05），Ⅱ、Ⅲ組和對照組雌性大鼠的BUN差異不顯著（P＞0．05）；各組雄性大鼠的BUN差異不顯著（P＞0．05）。Ⅰ組雄性大鼠的Cr顯著高于其他組（P＜0．05），Ⅱ、Ⅲ組和對照組之間大鼠的Cr差異不顯著（P＞0．05），各組雌性大鼠的Cr差異不顯著（P＞0．05）。AST、Glu、TC各組間差異不顯著（P＞0．05）。

表2 約氏乳桿菌對大鼠生長性能的影響

2．4 約氏乳桿菌對大鼠臟器指數(shù)的影響 由表5可知，Ⅱ、Ⅲ組和對照組的各項(xiàng)臟器指數(shù)差異不顯著（P＞0．05）。Ⅰ組大鼠的肝臟指數(shù)、腎臟指數(shù)、脾臟指數(shù)、肺臟指數(shù)、心臟指數(shù)和睪丸指數(shù)均顯著高于其他各組（P＜0．05）。雄性大鼠的睪丸指數(shù)Ⅱ、Ⅲ組和對照組之間差異不顯著（P＞0．05），但與Ⅰ組大鼠差異顯著（P＜0．05）。雌性大鼠的卵巢指數(shù)各試驗(yàn)組間差異不顯著（P＞0．05）。

表3 約氏乳桿菌對大鼠血常規(guī)指標(biāo)的影響

表4 約氏乳桿菌對大鼠血液生化指標(biāo)的影響

表5 約氏乳桿菌對大鼠臟器指數(shù)的影響

3 討 論

3．1 約氏乳桿菌對大鼠生長性能的影響 約氏乳桿菌是一種常見的益生菌。目前，有關(guān)約氏乳桿菌對大鼠生長方面的研究較少。馬志勇[6]研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加0．1%的約氏乳桿菌可以顯著提高斷奶仔豬的生長性能，提高幅度可達(dá)16．4%；曹希亮[7]的研究也證實(shí)，約氏乳桿菌可以提高斷奶仔豬的生長性能；Taheri等[8]在飼糧中添加1．0×106CFU/g約氏乳桿菌發(fā)現(xiàn)，其對肉雞采食量、日增重及耗料增重比影響不顯著。本試驗(yàn)研究結(jié)果與上述研究不完全一致，可能是所選菌株和劑量與上述研究不同所致。不同菌株具有不同的功能特性，不同益生菌添加量可能會影響動物采食和增重，具體機(jī)理待進(jìn)一步分析。

3．2 約氏乳桿菌對血液學(xué)指標(biāo)的影響 血常規(guī)指標(biāo)作為血液學(xué)最基本的檢查指標(biāo)，與機(jī)體新陳代謝和健康狀態(tài)有著密切的關(guān)系，在評估機(jī)體的健康狀況方面起到了重要的作用。約氏乳桿菌屬于乳酸桿菌，溫燦全[9]用乳酸桿菌對大鼠進(jìn)行30 d喂養(yǎng)試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)束后發(fā)現(xiàn)大鼠的血常規(guī)指標(biāo)未見異常。在本研究中，飼喂約氏乳桿菌后未對大鼠的血常規(guī)指標(biāo)產(chǎn)生顯著影響，說明在本次試驗(yàn)的添加水平下，約氏乳桿菌對大鼠血常規(guī)無不良影響。

有關(guān)乳桿菌對血液生化指標(biāo)影響的報(bào)道結(jié)果不一。陳焱等[10]試驗(yàn)表明，蛋雞日糧中添加約氏乳桿菌不會對各項(xiàng)血清生化指標(biāo)產(chǎn)生明顯影響。溫燦全[9]對大鼠進(jìn)行30 d喂養(yǎng)試驗(yàn)表明，飼喂植物乳桿菌的大鼠血常規(guī)指標(biāo)未見異常。此外，李瑞等[11]在哺乳仔豬上的研究發(fā)現(xiàn)，灌服德氏乳桿菌后ALT極顯著高于對照組，Alb和TP水平差異不顯著。賈卿等[12]在日糧中添加嗜酸乳桿菌顯著降低了蛋雞血液中TC、尿酸（UA）、AST和ALT的水平。這表明乳桿菌對血液生化指標(biāo)的影響或與試驗(yàn)菌株特性以及添加劑量有關(guān)。

3．3 約氏乳桿菌對大鼠臟器系數(shù)的影響 有關(guān)乳桿菌對臟器指數(shù)的研究較多，但結(jié)果不一。Zhou等[13]給小鼠注射鼠李糖乳桿菌、嗜酸乳桿菌和雙歧桿菌，其脾臟指數(shù)變化不顯著。陳焱等[10]試驗(yàn)表明，添加1．0×108CFU/g的約氏乳桿菌，蛋雞心臟、肺臟、腎臟指數(shù)顯著低于對照組；添加1．0×106CFU/g的約氏乳桿菌，蛋雞腎臟指數(shù)顯著低于對照組?？h怡涵等[14]研究發(fā)現(xiàn)，植物乳桿菌和干酪乳桿菌能顯著提高5日齡仔豬脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)，但對胃指數(shù)和大腸指數(shù)無顯著影響。在本研究中，1 000 mg/kg體重組和200 mg/kg體重組與對照組之間各項(xiàng)臟器指數(shù)差異不顯著，說明未對大鼠各臟器產(chǎn)生不良影響；而劑量較高的5 000 mg/kg體重組大鼠的肝臟指數(shù)、腎臟指數(shù)、脾臟指數(shù)、肺臟指數(shù)、心臟指數(shù)和睪丸指數(shù)顯著高于其他各組，其具體原因有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié) 論

約氏乳桿菌劑量低于1 000 mg/kg體重時，對大鼠生長性能、血液指標(biāo)及臟器指數(shù)無影響；約氏乳桿菌劑量高于5 000 mg/kg體重時，對大鼠臟器指數(shù)有影響。

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Ef f ects ofLactobacillus johnsoniion Growth, Blood Ιndices and Organ Ιndices in SD Rats

WANG Pan1, HU Ting1, CHU Yan-wei2,WANG Dan-yu1, ZHANG Le1, YAN Yi-jie1, WANG An-ru1*
(1.State Key Laboratory of Direct-Fed Microbiology Egineering, Beijing Dabeinong Technology Group Co, Ltd, Beijing 100080, China; 2.Huaian Huaiyin DaBeiNong Feed Co.Ltd, JiangsuHuaian 223300, China)

This experiment was conducted to explore the effects ofLactobacillus johnsoniion average daily gain, blood indices and organ indices in rats. Eighty Sprague-Dawley rats, half of male and female, were randomly allotted into 4 groups in accordance with the principle of similar weight: Negative control group, group Ⅰ (5 000 mg/kg body weight), group Ⅱ(1 000 mg/kg body weight) and group Ⅲ (200 mg/kg body weight). Each group had 20 rats, half of male and female. The experiment lasted for 30 days.Lactobacillus johnsoniiwas added to drinking water and the dosage was calculated as 20% of the weight of the rats. The results showed as follows: there was no signif i cant dif f erence (P＞0.05) on BWG, total feed intake, FCR, blood indices and organ indices of rats when the dosage was 200 mg/kg and 1 000 mg/kg body weight. When the dosage was 5 000 mg/kg body weight, there was no signif i cant dif f erence (P＞0.05) on aspartate transaminase, blood glucose and total cholesterol. Compared with other groups, the alanine aminotransferase were significantly decreased (P＜0.05); serum albumin and total protein were significantly increased (P＜0.05); while blood urea nitrogen level of female and creatinine level of male rat were signif i cantly increased (P＜0.05). Ⅰt is concluded that when the dosage ofLactobacillus johnsoniiwas lower than 1 000 mg/kg body weight, it had no ef f ect to rats on average daily gain, blood indices and organ indices; when the dosage ofLactobacillus johnsoniiwas up to 5 000 mg/kg body weight, it had an ef f ect on the organ index of rats.

Lactobacillus johnsonii; Rat; Growth; Blood indices; Organ indices

S865.1+29.4

A

10.19556/j.0258-7033.2017-03-112

2017-02-08；

2017-02-21

農(nóng)業(yè)部公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)（20140304 7）；江蘇省科技廳科技富民強(qiáng)縣項(xiàng)目蘇北科技發(fā)展計(jì)劃（SBN2014010228）

汪攀（1982-），男，河北保定人，工程師，碩士，主要研究方向?yàn)轱曈梦⑸镏苿╅_發(fā)，E-mail:174288682@ qq．com

* 通訊作者：王安如，研究員，飼用微生物工程國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室副主任，E-mail: anruwang@sohu．com