新疆地區(qū)羊藍(lán)舌病流行病學(xué)調(diào)查與分析

舒 展，劉 帥，加帕爾·哈斯木，宋迎春，薛新梅，葉 鋒，馬曉菁，鐘 旗，馬俊杰，谷文喜*

（1.新疆阿勒泰地區(qū)動(dòng)物疾病控制與診斷中心，新疆 阿勒泰 835600；2.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院，新疆 烏魯木齊 830052；3.新疆尉犁縣畜牧獸醫(yī)工作站，新疆 尉犁 841500；4.新疆巴音郭楞蒙古自治州動(dòng)物疾病控制與診斷中心，新疆 庫爾勒 841000；5.新疆畜牧科學(xué)院獸醫(yī)研究所，新疆 烏魯木齊 830000）

新疆地區(qū)羊藍(lán)舌病流行病學(xué)調(diào)查與分析

舒 展1，劉 帥2，加帕爾·哈斯木3，宋迎春4，薛新梅4，葉 鋒5，馬曉菁5，鐘 旗5，馬俊杰5，谷文喜5*

（1.新疆阿勒泰地區(qū)動(dòng)物疾病控制與診斷中心，新疆 阿勒泰 835600；2.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院，新疆 烏魯木齊 830052；3.新疆尉犁縣畜牧獸醫(yī)工作站，新疆 尉犁 841500；4.新疆巴音郭楞蒙古自治州動(dòng)物疾病控制與診斷中心，新疆 庫爾勒 841000；5.新疆畜牧科學(xué)院獸醫(yī)研究所，新疆 烏魯木齊 830000）

本研究采用競(jìng)爭(zhēng)性ELISA方法，對(duì)采集自新疆哈密地區(qū)、昌吉州、烏魯木齊市、吐魯番地區(qū)、伊犁地區(qū)、巴州、和田地區(qū)和喀什地區(qū)等8地州的2 135份羊血清樣本進(jìn)行藍(lán)舌病抗體檢測(cè)。結(jié)果顯示，除了新疆吐魯番地區(qū)沒有檢出藍(lán)舌病陽性樣本外，其它地區(qū)都檢出了陽性樣本，且以巴州陽性率最高，達(dá)12.44%。全疆共檢出陽性樣本145份，平均陽性率6.79%，說明新疆的藍(lán)舌病流行態(tài)勢(shì)依然嚴(yán)峻。本次調(diào)查數(shù)據(jù)對(duì)了解新疆的藍(lán)舌病流行現(xiàn)狀及其防控策略的制定提供了科學(xué)依據(jù)。

藍(lán)舌?。涣餍胁W(xué)；羊；新疆

10.16863/j.cnki.1003-6377.2017.01.008

藍(lán)舌?。˙luetongue，BT）是由藍(lán)舌病病毒（Bluetongue virus，BTV）引起的可在反芻動(dòng)物間經(jīng)蟲媒傳播的一種急性病毒性傳染病。該病于1905年由Spreull通過大量臨床研究首次命名為“藍(lán)舌病”[1-2]。藍(lán)舌病病毒屬于呼腸孤病毒科（Reoviridae）環(huán)狀病毒屬（Orbivirus）藍(lán)舌病病毒亞群（Bluetingue virus subgroup），已確認(rèn)有24個(gè)血清型，2008、2011和2015年又分離出與其它血清型不同的毒株被分別定為BTV-25、26和27型[3-5]。

綿羊、山羊、牛、鹿、駱駝等反芻動(dòng)物為其易感動(dòng)物，病畜會(huì)出現(xiàn)發(fā)熱、口腔黏膜及舌頭充血、糜爛等臨床癥狀，并能引起妊娠母畜流產(chǎn)、死胎等，對(duì)養(yǎng)殖業(yè)造成重大損失。

藍(lán)舌病被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）列為A類法定報(bào)告疾病，在我國(guó)被列為一類動(dòng)物傳染病[6]，是國(guó)際間動(dòng)物貿(mào)易重點(diǎn)檢測(cè)疾病。我國(guó)自1979年在云南省的師宗縣首次分離出BTV后[7]，至今在全國(guó)范圍內(nèi)已分離到11個(gè)血清型的BTV毒株[8-9]。

新疆1988-1989年間在全疆范圍內(nèi)組織了首次藍(lán)舌病血清學(xué)調(diào)查，結(jié)果顯示藍(lán)舌病在新疆廣泛存在，羊總體藍(lán)舌病感染率高于牛[10]。2012年王玉用瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散法（AGID）對(duì)新疆8地州的牛羊進(jìn)行藍(lán)舌病血清學(xué)調(diào)查，結(jié)果再次證實(shí)藍(lán)舌病在新疆廣泛存在，且陽性率南疆高于北疆[11]。

近年來，隨著國(guó)家“一帶一路”戰(zhàn)略的提出和實(shí)施，新疆作為絲綢之路中的重要環(huán)節(jié)，經(jīng)濟(jì)交流得到快速發(fā)展，特別是動(dòng)物貿(mào)易的擴(kuò)大，加速了疆內(nèi)與疆外家畜的頻繁流動(dòng)，這些都對(duì)新疆地區(qū)藍(lán)舌病的爆發(fā)和流行創(chuàng)造了條件。本研究利用競(jìng)爭(zhēng)性ELISA(C-ELISA)方法，對(duì)新疆8地州的15個(gè)縣（市）共計(jì)2 135只羊的血清樣本進(jìn)行藍(lán)舌病抗體檢測(cè)，了解了新疆目前藍(lán)舌病流行狀況，為該病防控政策的制定提供了科學(xué)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 血清來源

2014—2015年間采自新疆哈密地區(qū)、昌吉州、烏魯木齊市、吐魯番地區(qū)、伊犁地區(qū)、巴州、和田地區(qū)和喀什地區(qū)，8個(gè)地州的15個(gè)縣（市）共計(jì)2 135只羊的血清。

1.2 藍(lán)舌病血清抗體檢測(cè)

1.2.1 檢測(cè)試劑盒

藍(lán)舌病血清檢測(cè)試劑盒（C-ELISA）由云南省熱帶亞熱帶動(dòng)物病毒病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供。

1.2.2 C-ELISA檢測(cè)方法

取出4℃保存的BTV抗原包被ELISA板，按樣品數(shù)量編好號(hào)。把樣品、陰陽對(duì)照加到相應(yīng)的孔中。配制檢測(cè)競(jìng)爭(zhēng)液:用競(jìng)爭(zhēng)抗體按1:100用稀釋液配制檢測(cè)競(jìng)爭(zhēng)液，并加到ELISA板中，在37℃溫箱里溫育1h。取出板，倒掉里面的液體，甩干，加酶標(biāo)二抗，混勻，在37℃溫箱里溫育30 min。取出，洗板，加TMB顯色液，放入37℃10（±2）min，顯色充分后加顯色終止液終止反應(yīng)。酶標(biāo)儀檢測(cè)OD450 nm值，每孔計(jì)算抑制率（PI），PI＞40%為陽性，PI＜30%為陰性，30%＜PI＜40%為弱陽性，統(tǒng)計(jì)最后結(jié)果。

2 結(jié)果與分析

新疆8地（州）的2 135份羊血清樣本藍(lán)舌病抗體C-ELISA檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)見表1。除了吐魯番地區(qū)外，其它地區(qū)均檢出藍(lán)舌病陽性樣本，共檢出陽性樣本145份，平均陽性率6.79%，其中和靜縣陽性檢出率最高，為15.33%（21/137），其次為尉犁縣14.04%（33/235）。新疆8地（州）采樣地點(diǎn)分布如圖1所示，紅色點(diǎn)為藍(lán)舌病抗體檢出陽性地區(qū)，藍(lán)色點(diǎn)為藍(lán)舌病抗體檢出陰性地區(qū)。

圖1 新疆羊藍(lán)舌病樣品采集及檢測(cè)結(jié)果分布示意圖

表1 新疆8地（州）羊藍(lán)舌病C-ELISA檢測(cè)結(jié)果

3 討 論

本研究通過對(duì)新疆8地州的2135份羊血清樣本進(jìn)行藍(lán)舌病檢測(cè)，結(jié)果顯示，有7個(gè)地州檢出陽性個(gè)體，平均陽性率6.79%，說明在新疆羊群中普遍存在藍(lán)舌病的感染。其中巴州的和靜縣和尉犁縣最為嚴(yán)重，陽性率分別達(dá)到15.33%和14.04%，吐魯番地區(qū)沒有檢測(cè)到陽性樣本，這與1988-1989年間全疆藍(lán)舌病普查的情況相符。

在新疆歷史上，有兩次大規(guī)模的藍(lán)舌病血清學(xué)調(diào)查，一次是1988-1989年的全疆反芻動(dòng)物藍(lán)舌病調(diào)查，共對(duì)包括綿羊、山羊、黃牛、牦牛和鹿等在內(nèi)的總計(jì)160 671份的動(dòng)物血清進(jìn)行了藍(lán)舌病抗體檢測(cè)，首次證實(shí)了藍(lán)舌病在新疆廣泛存在，并且羊特別是山羊的陽性率最高。第二次是2012年王玉對(duì)新疆8地（州）的8個(gè)縣（市）共計(jì)2 142頭（只）牛羊進(jìn)行的藍(lán)舌病血清學(xué)調(diào)查，結(jié)果顯示，牛的血清樣本全部為陰性，羊的陽性率為1.32%，且南疆高于北疆。本研究針對(duì)陽性感染率最高的動(dòng)物（羊）進(jìn)行了第三次大規(guī)模藍(lán)舌病血清學(xué)調(diào)查，覆蓋全疆8個(gè)地州15個(gè)縣市，共采集2 135只羊的血清，與2012年的調(diào)查相比，剔除了緯度較高的阿勒泰地區(qū)，加入了吐魯番地區(qū)，同時(shí)增加了采樣點(diǎn)的數(shù)量。在檢測(cè)方法上，與前兩次調(diào)查也不同。本次調(diào)查采用了C-ELISA方法，而不是之前一直沿用的AGID，其優(yōu)點(diǎn)是更加敏感，特異性更強(qiáng)，目前也是OIE指定首選的BTV血清學(xué)診斷方法。三次大規(guī)模藍(lán)舌病調(diào)查，時(shí)間跨度達(dá)28年，抽樣點(diǎn)覆蓋全疆，使用檢測(cè)方法不同，但是結(jié)果都證實(shí)了藍(lán)舌病在新疆普遍存在的實(shí)際狀況。做為我國(guó)一類動(dòng)物傳染病，國(guó)際動(dòng)物貿(mào)易重點(diǎn)檢測(cè)疾病，這種情況必須引起我們畜牧獸醫(yī)工作者及相關(guān)主管部門的高度重視。目前，在我國(guó)藍(lán)舌病疫苗短缺，就有必要加強(qiáng)藍(lán)舌病的監(jiān)測(cè)工作，對(duì)病畜或分離出病毒的陽性畜應(yīng)予以撲殺，血清學(xué)陽性畜要定期復(fù)檢，限制活動(dòng)，不能留作種用，同時(shí)定期進(jìn)行藥浴和驅(qū)蟲，改善環(huán)境衛(wèi)生，做好環(huán)境消毒工作，減少或消滅庫蠓等媒介昆蟲對(duì)家畜的侵?jǐn)_，以達(dá)到切斷傳播途徑的目的。

吐魯番地區(qū)沒有檢出陽性血清樣，這與其地理環(huán)境及氣候密切相關(guān)。藍(lán)舌病是一種非接觸性傳染病，主要的傳播媒介是庫蠓，通過吸血將病毒在動(dòng)物間傳播。庫蠓種類繁多，常孳生于水塘、沼澤、湖泊附近的草叢、樹林、洞穴等避風(fēng)、避光、潮濕處。當(dāng)溫度、光照適合且無風(fēng)時(shí)，成蟲即成群飛出交配。受精雌蠓將卵產(chǎn)在濕潤(rùn)場(chǎng)所，蟲卵孵化對(duì)環(huán)境要求較為嚴(yán)格，除了溫度要適中外，干燥環(huán)境極易導(dǎo)致蟲卵干癟而不能孵化。吐魯番位于天山東部山間盆地，四周高山環(huán)抱，日照長(zhǎng)，氣溫高，晝夜溫差大，降水少，風(fēng)力強(qiáng)是它的5大特點(diǎn)。素有“火州”“風(fēng)庫”之稱。每年高于攝氏35℃的炎熱日年均在100 d以上，高于攝氏40℃的酷熱日年均35～40 d，地表溫度通常在攝氏70℃以上，這些都導(dǎo)致庫蠓等昆蟲難以存活。冬季11、12、1、2月，溫度在攝氏0℃以下，3、4月份氣溫有所回升但風(fēng)力較大，降水稀少，5月份以后氣溫日最高溫度已竄至攝氏

35℃以上，這些都嚴(yán)重影響了春季庫蠓從產(chǎn)卵、孵化到幼蟲再到成蟲的正常發(fā)育和成長(zhǎng)過程，6、7、8、9月份是當(dāng)?shù)刈钛谉岬募竟?jié)，溫度通常都在攝氏40℃左右，地表溫度在攝氏70℃以上，常常會(huì)出現(xiàn)攝氏80℃甚至攝氏90℃的情況，庫蠓等吸血昆蟲存活困難，10月份氣溫降低，但即使不考慮大風(fēng)的影響，此時(shí)孵化的蟲卵也難以成為成蟲。由于庫蠓等媒介昆蟲稀少，依賴于昆蟲傳播的蟲媒病毒病—藍(lán)舌病就少有發(fā)生。這也就解釋了為什么與吐魯番地區(qū)四周毗連的哈密、和靜、尉犁、和碩、若羌、烏魯木齊及昌吉地區(qū)藍(lán)舌病檢查陽性率較高，而吐魯番地區(qū)檢出率為零了。

本研究是新疆地區(qū)對(duì)藍(lán)舌病最新的規(guī)模調(diào)查，結(jié)果再次證明新疆羊群中藍(lán)舌病依然嚴(yán)重。這為今后新疆地區(qū)開展藍(lán)舌病的研究及防控工作提供了科學(xué)依據(jù)。

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Epidemiological Investigation and Analysis of Sheep Bluetongue in Xinjiang

SHU Zhan1,LIU Shuai2,JIAPAER·Hasimu3,SONG Ying-chun4,XUE Xin-mei4, YE Feng5,MA Xiao-qing5,ZHONG Qi5,MA Jun-jie5，GU Wen-xi5*
（1.Animal Disease Control and Disagnosis Center of Altay Region,Altay 835600,China; 2.College of Veterinary Medicine,Xinjiang Agricultural University,Urumqi 830052,China; 3.Yuli Station of Animal Husbandry and Veterinary,Yuli Xinjiang 841500,China; 4.Animal Disease Cotrol and Disagnosis Center of Bayinguoteng Mongolia Autonomous Prefecture, Korla 841000,China; 5.Veterinary Research Institute,Xinjiang Academy of Animal Science,Urumqi 830000,China）

Present this study,2135 sheep serum samples were collected from 8（prefectures）and the samples were detected by indirect ELISA.The results showed that the samples in the collecting location were all positive except Turpan,Xinjiang,the most serious area were Bazhou，and the average positive rate was 12.44%.There were 145 positive samples detected in the 8（prefectures）,the average positive rate was 6.79%, which indicated that the epidemic situation of bluetongue in Xinjiang was still severe.The survey data provided scientific basis for understanding the epidemic situation and developing preventive strategies of bluetongue in Xinjiang.

bluetongue,epidemiology,sheep,Xinjiang,region

S855.3

A

1003－6377（2017）01－0047-05

公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專項(xiàng)“重要牛羊蟲媒病毒病防控關(guān)鍵技術(shù)研究與應(yīng)用”項(xiàng)目（201303035）

舒展（1964-），男，高級(jí)畜牧師，研究方向：現(xiàn)代畜牧業(yè)發(fā)展及動(dòng)物防疫。E-mail：972582360@qq.com

谷文喜（1974-），男，副研究員，研究方向：動(dòng)物預(yù)防醫(yī)學(xué)。

2016-09-10，

2016-11-18