伯樂(lè)D—10TM糖化血紅蛋白分析系統(tǒng)測(cè)試人份擴(kuò)展及性能驗(yàn)證研究

蘇錦霞+黃澤偉

【摘要】 目的 探討伯樂(lè)D-10TM糖化血紅蛋白（HbA1c）分析系統(tǒng)測(cè)試人份擴(kuò)展及性能驗(yàn)證效果。方法 檢測(cè)糖化血紅蛋白患者的全血1000份為研究對(duì)象， 于清晨抽取靜脈空腹血2 ml置入乙二胺四乙酸（EDTA）管中， 分為2份， 第一份采用伯樂(lè)D-10TM 糖化血紅蛋白分析系統(tǒng)直接上機(jī)檢測(cè)， 將檢測(cè)結(jié)果記錄為規(guī)格內(nèi)。第二份標(biāo)本采用WASH液進(jìn)行稀釋后上機(jī)檢測(cè)， 將檢測(cè)結(jié)果作為擴(kuò)展人份。對(duì)規(guī)格內(nèi)分析柱和擴(kuò)展人份分析柱分別用離子交換高效液相色譜法測(cè)定。按照檢測(cè)糖化血紅蛋白水平將標(biāo)本分為A組（糖化血紅蛋白<6.0%）、B組（糖化血紅蛋白為6.0%～8.0%）、C組（糖化血紅蛋白>8.0%）， 對(duì)三組標(biāo)本規(guī)格內(nèi)和擴(kuò)展人份水平進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果 經(jīng)檢驗(yàn)后按照糖化血紅蛋白分組， 得出A組有300例， B組有420例， C組有280例。各組規(guī)格內(nèi)和擴(kuò)展人份糖化血紅蛋白水平比較， 差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=1.5418、1.8517、0.8514， P>0.05）。結(jié)論 伯樂(lè)D-10TM糖化血紅蛋白分析系統(tǒng)檢測(cè)糖化血紅蛋白水平， 試劑檢測(cè)人份分析柱擴(kuò)展前后對(duì)糖化血紅蛋白水平檢測(cè)無(wú)明顯影響。

【關(guān)鍵詞】 糖尿病；伯樂(lè)D-10TM分析系統(tǒng)；糖化血紅蛋白

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.05.036

隨著生活水平提高、生活方式改變， 糖尿病發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)， 為臨床中常見(jiàn)慢性疾病之一。糖尿病屬代謝紊亂性疾病， 以血糖水平升高為主要臨床表現(xiàn)[1]。研究指出， 血糖水平紊亂可引起機(jī)體各個(gè)系統(tǒng)受損， 其中最常累及全身血管、神經(jīng)系統(tǒng)， 引起相關(guān)并發(fā)癥發(fā)生， 嚴(yán)重影響糖尿病患者生活質(zhì)量和生命健康， 為導(dǎo)致糖尿病患者死亡主要原因[2， 3]。糖化血紅蛋白為臨床中常用反映糖尿病患者近3個(gè)月內(nèi)血糖水平控制情況[4]， 研究指出， 紅細(xì)胞在體內(nèi)壽命約120 d， 葡萄糖與血紅蛋白在體內(nèi)形成特殊紅細(xì)蛋白， 因此檢測(cè)糖化血紅蛋白水平可反映患者過(guò)去3個(gè)月內(nèi)平均血糖水平[5]。臨床中檢測(cè)糖化血紅蛋白水平方法較多， 本研究采用高效相色譜法檢測(cè)糖化血紅蛋白水平， 研究如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2014年4月～2016年3月潮州市中心醫(yī)院門(mén)診和住院檢測(cè)糖化血紅蛋白患者的全血1000份為研究對(duì)象， 所有標(biāo)本均為本院采集， 標(biāo)本均有效， 符合檢測(cè)質(zhì)量。其中男性標(biāo)本544份， 女性標(biāo)本456份；住院采集570份，

門(mén)診采集430份；采集到檢驗(yàn)時(shí)間10 min～2 h， 平均時(shí)間（40.5±26.6）min。

1. 2 方法 于清晨抽取患者靜脈空腹血2 ml置入EDTA管中， 送檢驗(yàn)科進(jìn)行檢測(cè)。將標(biāo)本分為2份， 第一份采用伯樂(lè)D-10TM 糖化血紅蛋白分析系統(tǒng)直接上機(jī)檢測(cè)， 將檢測(cè)結(jié)果記錄為規(guī)格內(nèi)。對(duì)第二份標(biāo)本用WASH液進(jìn)行稀釋后上機(jī)檢測(cè)， 將檢測(cè)結(jié)果作為擴(kuò)展人份。對(duì)規(guī)格內(nèi)分析柱和擴(kuò)展人份分析柱分別用離子交換高效液相色譜法測(cè)定。按照檢測(cè)糖化血紅蛋白水平將標(biāo)本分為A組（糖化血紅蛋白<6.0%）、B組（糖化血紅蛋白為6.0%～8.0%）、C組（糖化血紅蛋白>8.0%）， 用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)三組規(guī)格內(nèi)、擴(kuò)展人份水平進(jìn)行比較。

1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

經(jīng)檢驗(yàn)后按照糖化血紅蛋白分組， 得出A組有300例， B組有420例， C組有280例。各組規(guī)格內(nèi)和擴(kuò)展人份糖化血紅蛋白水平比較， 差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=1.5418、1.8517、0.8514， P>0.05）。見(jiàn)表1。

3 討論

糖化血紅蛋白為臨床中反映機(jī)體近3個(gè)月內(nèi)平均血糖水平， 為協(xié)助診斷糖尿病、判定糖尿病患者長(zhǎng)期血糖控制水平關(guān)鍵指標(biāo)， 具有重要臨床檢測(cè)價(jià)值[6， 7]。臨床中準(zhǔn)確、快速、經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)便檢測(cè)出糖化血紅蛋白水平為提高檢測(cè)效率和檢測(cè)質(zhì)量關(guān)鍵， 目前常用檢測(cè)方法包括比色法、電泳法、等電聚柱法、手工微柱法、高效液相層析法、離子交換層析法、免疫化學(xué)法、離子交換高效液相色譜法等[8， 9]。隨著臨床研究和實(shí)踐， 離子交換高效液相色譜法具有較高穩(wěn)定性和準(zhǔn)確度， 為目前臨床中公認(rèn)檢測(cè)糖化血紅蛋白金標(biāo)準(zhǔn)[10]。

伯樂(lè)D-10TM糖化血紅蛋白分析儀器為美國(guó)伯樂(lè)公司生產(chǎn)檢測(cè)糖化血紅蛋白儀器系統(tǒng)， 其公司試劑包含種類(lèi)較多， 包括活化劑、分析柱、緩沖液、標(biāo)準(zhǔn)品、清洗液等， 其說(shuō)明書(shū)規(guī)定每包試劑檢測(cè)份數(shù)為400份， 由于臨床中400份檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)， 在不同組上檢測(cè)試劑消耗程度不同， 往往在達(dá)到400份檢測(cè)數(shù)量后還有部分試劑殘留， 造成嚴(yán)重浪費(fèi)[11-13]。本次研究將殘留試劑中分析柱進(jìn)行再活化、校準(zhǔn)， 與標(biāo)準(zhǔn)試劑分別對(duì)1000份糖化血紅蛋白水平進(jìn)行檢測(cè)， 得出使用規(guī)格內(nèi)和擴(kuò)展人份兩組檢測(cè)水平比較， 差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=1.5418、1.8517、0.8514， P>0.05）。表明殘留試劑經(jīng)活化、校準(zhǔn)后在臨床中再次使用對(duì)檢測(cè)結(jié)果無(wú)明顯影響。本次研究在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)， 在日常應(yīng)用中， 以無(wú)菌水、頂格檢測(cè)替代清洗液， 可對(duì)殘留試劑進(jìn)行消耗， 在保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確前提下可有效降低耗材浪費(fèi)， 降低實(shí)驗(yàn)成本[14-17]。

綜上所述， 伯樂(lè)D-10TM糖化血紅蛋白分析系統(tǒng)檢測(cè)糖化血紅蛋白水平， 試劑檢測(cè)人份分析柱擴(kuò)展前后對(duì)糖化血紅蛋白水平檢測(cè)無(wú)明顯影響， 臨床中在保障檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確前提下， 可應(yīng)用擴(kuò)張方式對(duì)試劑進(jìn)行充分利用。

參考文獻(xiàn)

[1] Liotta L， Di FA， Pazzagli M， et al. Glycated hemoglobin （HbA1c） measurement in frozen whole blood depends on baseline values of fresh samples. Analytical and Bioanalytical Chemistry， 2013， 405（1）：429-434.

[2] Suzuki S， Koga M， Niizeki N， et al. Evaluation of glycated hemoglobin and fetal hemoglobin-adjusted HbA1c measurements in infants. Pediatric Diabetes， 2013， 14（4）：267-272.

[3] Hempe JM， Mcgehee AM， Chalew SA. Two-dimensional analysis of glycated hemoglobin heterogeneity in pediatric type 1 diabetes patients. Analytical Biochemistry， 2013， 442（2）：205-212.

[4] 陳璐， 孫伯欣.糖化血紅蛋白與血脂檢測(cè)在2型糖尿病檢測(cè)中的臨床評(píng)價(jià).中國(guó)老年學(xué)雜志， 2013， 33（19）：4856-4857.

[5] Chakraborty S， Ghosh SS， Das A， et al. Can EDTA， EDTA-fluoride， and buffered citrate tubes be used for measurement of HbA1c on the Bio-Rad D10？Clinical Chemistry & Laboratory Medicine Cclm， 2015， 53（1）：e5-e8.

[6] Chakraborty S， Gupta D. A patient with undetectable hemoglobin A（1c）. Clin Chem， 2013 ， 59（5）：856-857.

[7] Chakraborty S， Chanda D， Gain M， et al. Interference of the Hope Hemoglobin With Hemoglobin A1c Results. Laboratory Medicine， 2015， 46（3）：221-225.

[8] 徐安平， 紀(jì)玲， 陳衛(wèi)東， 等.毛細(xì)管電泳法糖化血紅蛋白檢測(cè)系統(tǒng)在缺鐵性貧血患者中的應(yīng)用.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)， 2016， 31（4）：299-303.

[9] Chopra A， Tuteja S， Sachdeva N， et al. CdTe nanobioprobe based optoelectrochemical immunodetection of diabetic marker HbA1c. Biosensors & Bioelectronics， 2013， 44（1）：132.

[10] Hsieh WP， Chieh JJ， Yang CC， et al. Stability study for magnetic reagent assaying Hb and HbA1c. Journal of Magnetism & Magnetic Materials， 2013， 326（1）：147-150.

[11] Hsieh KM， Lan KC， Hu WL， et al. Glycated hemoglobin （HbA 1c）

affinity biosensors with ring-shaped interdigital electrodes on impedance measurement. Biosensors & Bioelectronics， 2013， 49（10）：450-456.

[12] 許愛(ài)萍， 張羽， 曹季軍. 不同處理方式在伯樂(lè)D-10TM糖化分析儀上檢測(cè)HbA1c結(jié)果的影響. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床， 2013， 10（10）： 1317-1318.

[13] 楊興萍. 美國(guó)伯樂(lè)D-10糖化血紅蛋白分析儀的性能評(píng)價(jià). 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床， 2011， 8（21）：2683-2684.

[14] 張茜. D-10糖化血紅蛋白分析儀的檢測(cè)性能. 實(shí)用醫(yī)技雜志， 2013， 20（11）：1231-1232.

[15] 韓紅梅， 侯明良. Bio-Rad D-10糖化血紅蛋白分析儀臨床應(yīng)用常見(jiàn)問(wèn)題分析. 糖尿病新世界， 2015（24）：127-129.

[16] 王開(kāi)軍， 郭長(zhǎng)青. 糖化血紅蛋白質(zhì)控物的研制及應(yīng)用. 國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志， 2013， 34（19）：2595-2596.

[17] 閆穎， 張傳寶， 張江濤， 等. 三種相同原理的糖化血紅蛋白分析儀檢測(cè)結(jié)果的初步比對(duì). 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)， 2012， 27（7）：575-578.