針?biāo)幉⒂脤?duì)抑郁癥睡眠障礙大鼠下丘腦、杏仁核、中縫背核5-HT與5-HIAA含量及其比值的影響

俞裕天,榮培晶,唐純志

?

針?biāo)幉⒂脤?duì)抑郁癥睡眠障礙大鼠下丘腦、杏仁核、中縫背核5-HT與5-HIAA含量及其比值的影響

俞裕天1,榮培晶1,唐純志2

(1.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院針灸研究所,北京 100700;2.廣州中醫(yī)藥大學(xué),廣州 510405)

目的 觀察針?biāo)幉⒂脤?duì)抑郁癥睡眠障礙大鼠下丘腦、杏仁核、中縫背核5-羥色胺(5-HT)和5-羥吲哚乙酸(5-HIAA)含量及其比值的影響。方法 將40只SD大鼠隨機(jī)分為正常組8只和造模組32只。正常組大鼠采用常規(guī)合籠飼養(yǎng),不接受任何刺激與處置。造模組大鼠進(jìn)行為期21 d的孤養(yǎng)＋CUMS法＋REM睡眠剝奪法造模,其中28只順利完成造模,隨機(jī)分為模型組、針刺組、藥物組和針?biāo)幗M,每組7只。模型組僅造模不干預(yù);針刺組取印堂、神庭配太沖進(jìn)行針刺干預(yù);藥物組采用鹽酸舍曲林片和阿普唑侖片的水溶液灌胃干預(yù);針?biāo)幗M采用針刺配合水溶液灌胃干預(yù)。針刺組、藥物組和針?biāo)幗M均每日治療1次,連續(xù)干預(yù)7 d。比較各組大鼠下丘腦、杏仁核、中縫背核5-HT與5-HIAA含量及其比值。結(jié)果 模型組造模后下丘腦、杏仁核和中縫背核的5-HT、5-HIAA含量較正常組出現(xiàn)明顯下降(＜0.05)。針刺組、藥物組和針?biāo)幗M治療后下丘腦、杏仁核和中縫背核的5-HT、5-HIAA含量均較模型組出現(xiàn)了明顯上調(diào)(＜0.05)。模型組下丘腦、中縫背核5-HIAA/5-HT比值與正常組比較,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.05)。針刺組杏仁核及針?biāo)幗M下丘腦5-HIAA/5-HT比值與模型組比較,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.05)。結(jié)論 針?biāo)幉⒂媚軐?duì)抑郁癥睡眠障礙大鼠5-HT能神經(jīng)系統(tǒng)的活躍程度起到一定的改善作用,能增加睡眠時(shí)間,提高睡眠質(zhì)量。針?biāo)幗Y(jié)合的療效可能以針刺為主。

針刺療法;抑郁癥;睡眠障礙;5-羥色胺;5-羥吲哚乙酸;針?biāo)幉⒂?大鼠

抑郁障礙(major depressive disorder, MDD)是一種普遍而持久的以情緒低落為主要特征的慢性疾病,伴隨著自卑心態(tài)以及對(duì)令人愉悅事物的興趣和樂(lè)趣的缺失,影響全世界約16%的人口[1]。睡眠障礙是抑郁癥狀群的重要組成部分,是抑郁癥最早和最常見的癥狀之一,以入睡困難、睡眠不深及早醒為特征。睡眠障礙可加重抑郁癥的病情,延緩抑郁癥的康復(fù)進(jìn)程;嚴(yán)重的抑郁癥睡眠障礙(sleep deprivation depression, SDD)和自殺有關(guān)[2]。SDD的研究已成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)[3]。然而,目前SDD的臨床研究較多,SDD的大鼠模型國(guó)內(nèi)則僅有少數(shù)幾位學(xué)者[3-4]探討過(guò)。筆者前期通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),針?biāo)幉⒂媚茱@著升高大鼠中縫背核5-HT1AR mRNA的表達(dá),明顯改善抗抑郁藥起效緩慢的問(wèn)題[5]。以往研究提示,失眠造模大鼠下丘腦5-羥色胺(5-HT)和5-羥吲哚乙酸(5-HIAA)含量會(huì)下降,而針刺干預(yù)后,這兩者均有所提高,這被確定為針刺增加睡眠及提高睡眠質(zhì)量的重要作用機(jī)制[6];而腦內(nèi)5-HIAA和5-HT之間的比值能間接反應(yīng)5-HT能神經(jīng)系統(tǒng)的活躍程度[7]。除此之外,杏仁核和中縫背核中5-HT的含量與情緒、睡眠密切相關(guān)。

本研究采取測(cè)定大鼠腦部下丘腦、杏仁核和中縫背核腦區(qū)的5-HT、5-HIAA含量并計(jì)算兩者的比值來(lái)探討針刺、藥物、針?biāo)幉⒂脤?duì)SDD大鼠的作用機(jī)制,以確認(rèn)各種干預(yù)對(duì)SDD大鼠睡眠和情緒的影響,現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組

采用Open-Field法[8]及蔗糖偏好實(shí)驗(yàn)[9]對(duì)雄性SPF級(jí)SD大鼠[體重為220～250 g,由廣州中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證號(hào)為SCXK(粵)2013-0034]進(jìn)行行為學(xué)評(píng)分,選擇得分相近的40只大鼠,適應(yīng)性喂養(yǎng)3 d后,采用查隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為正常組8只和造模組32只。

1.2 主要試劑與儀器

5-HT檢測(cè)試劑盒(CEA808Ge 96T,Cloud-Clone Corp.)、5-HIAA檢測(cè)試劑盒(CEB005Ge 96T,Cloud- Clone Corp.)、Bio-Rad美國(guó)伯樂(lè)imark酶標(biāo)儀(Imark)、宏朗ATM-051S/052S恒溫?fù)u床、大龍移液槍。

1.3 模型制備

造模組大鼠接受不可預(yù)見溫和應(yīng)激(chronic unpredictable mild stress, CUMS)[9-10],結(jié)合孤養(yǎng)(單獨(dú)分籠飼養(yǎng))18 d,再用小平臺(tái)睡眠剝奪技術(shù)(platform technique)[9]行快速動(dòng)眼相(REM)睡眠剝奪72 h。

1.3.1 CUMS法

本研究參照Willner P等[9]和Katz RJ等[10]的方法改進(jìn)而來(lái)。①禁水17 h;②禁食、禁水20 h;③持續(xù)光照17 h;④傾斜鼠籠(45°)17 h;⑤4℃冰水游泳5 min;⑥潮濕墊料21 h;⑦搖晃(1次/s,15 min);⑧夾尾1 min;⑨行為限制2 h。共9種刺激,每日隨機(jī)采取1種,共安排18 d。

1.3.2 小平臺(tái)睡眠剝奪技術(shù)[11]

造模組大鼠于造模的第19天開始,連續(xù)72 h進(jìn)行REM睡眠剝奪。剝奪箱為30 cm×30 cm×36 cm的玻璃水箱,正中立1個(gè)直徑為6 cm、高18 cm的圓形平臺(tái),箱中注水,水面距平臺(tái)面約1 cm。大鼠在平臺(tái)上可抬頭自由進(jìn)食進(jìn)水;如果大鼠進(jìn)入REM睡眠期,大鼠會(huì)因?yàn)榧埩λ沙诙淙胨谢蚬?jié)律性低頭、觸水,以此來(lái)達(dá)到剝奪REM睡眠的目的。造模期間持續(xù)高光通量LED燈光照射,室內(nèi)溫度控制在18.0℃～22.0℃,水溫保持在20.0℃左右。

1.4 分組處理

CUMS法造模期間,有4只大鼠出現(xiàn)較重的抑郁癥狀,分別于CUMS法造模的第15天和第17天死亡。最終完成造模共28只。采用查隨機(jī)數(shù)字表法將完成造模大鼠隨機(jī)分為模型組、針刺組、藥物組、針?biāo)幗M,每組7只。

正常組采用常規(guī)合籠飼養(yǎng),不造模、不干預(yù)。模型組僅造模不干預(yù)(第21天后繼續(xù)行CUMS法)。針刺組造模后進(jìn)行針刺干預(yù),根據(jù)《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》大鼠穴位定位方法取印堂、神庭配雙側(cè)太沖穴,采用0.25 mm×13 mm毫針進(jìn)行針刺,各穴均行導(dǎo)氣通經(jīng)的手法15 s,留針20 min,其間每隔10 min行針1次。藥物組采用鹽酸舍曲林片(0.83 mg/kg)＋阿普唑侖片(0.067 mg/kg)的水溶液灌胃(劑量按成人劑量折算)。針?biāo)幗M采用針刺配合藥物灌胃治療,針刺方法同針刺組,藥物灌胃方法同藥物組。針刺組、藥物組、針?biāo)幗M均每日治療1次,連續(xù)治療7 d。

1.5 觀察指標(biāo)

第28天處死各組大鼠。冰浴上、解剖顯微鏡下取各組大鼠的下丘腦、杏仁核、中縫背核置于-80℃冰箱待測(cè)。測(cè)時(shí)在分析天平中精密稱重后,加入9倍量的生理鹽水在冰浴中勻漿,將勻漿液在離心機(jī)上離心,以3000 r/min離心10 min,分離上層血清,置于低溫冰箱中保存。將低溫保存的酶聯(lián)免疫試劑盒從冰箱中取出,在室溫條件下平衡20 min,使其中部分結(jié)晶的試劑全部溶解,取出預(yù)先包被5-HT、5-HIAA抗體的微孔點(diǎn)樣板,設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品區(qū)域和樣品區(qū)域,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中每孔加入濃度為0、30、60、120、240、480 pg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品溶液各50mL,樣品孔區(qū)域中每孔加入待測(cè)樣品10mL,然后再加入樣本稀釋液每孔40mL,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔每孔加入辣根過(guò)氧化物(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100mL,用封板膜將反應(yīng)孔封住,在37℃恒溫箱中溫育60 min,棄去上表面的液體,在吸水紙上振蕩拍干后,每孔加滿預(yù)先配置好的樣本洗滌液,在室溫的條件下靜置1 min后,甩去洗滌液,倒扣在吸水紙上振蕩,如此反復(fù)5次操作后,每孔加入反應(yīng)底物A和B各50mL,37℃下避光溫育15 min后,每孔加入Stop Solution 50mL,用酶標(biāo)儀測(cè)定其OD值,檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)置為450 nm。在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)OD值為縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)線性回歸曲線,然后將酶標(biāo)儀測(cè)定的樣品的OD值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線,并乘以稀釋倍數(shù),進(jìn)而推算出血清樣品中5-HT、5-HIAA的實(shí)際濃度,并計(jì)算出5-HIAA/ 5-HT的比值。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,經(jīng)過(guò)方差齊性檢驗(yàn)和正態(tài)性檢驗(yàn)后,多組間差異的比較采用單因素方差分析,組間兩兩比較采用法;計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)()。以＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠下丘腦、杏仁核、中縫背核5-HT含量比較

由表1可見,模型組大鼠下丘腦、杏仁核、中縫背核5-HT含量較正常組均出現(xiàn)明顯下調(diào),兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.05)。經(jīng)過(guò)為期7 d的各種干預(yù)后,針刺組、藥物組和針?biāo)幗M大鼠下丘腦、杏仁核、中縫背核5-HT含量均較模型組出現(xiàn)明顯上調(diào)(＜0.05)。其中藥物組下丘腦5-HT含量與針刺組比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.05);針?biāo)幗M中縫背核5-HT含量與藥物組比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.05)。

2.2 各組大鼠下丘腦、杏仁核、中縫背核5-HIAA含量比較

由表2可見,模型組大鼠下丘腦、杏仁核、中縫背核5-HIAA含量較正常組均出現(xiàn)明顯下調(diào),兩組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.05)。經(jīng)過(guò)為期7 d的各種干預(yù)后,針刺組、藥物組和針?biāo)幗M大鼠下丘腦、杏仁核、中縫背核5-HIAA含量均較模型組出現(xiàn)明顯上調(diào) (＜0.05)。其中藥物組下丘腦、杏仁核、中縫背核5-HIAA含量與針刺組比較,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (＜0.05);針?biāo)幗M中縫背核5-HIAA含量與藥物組比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.05)。

表1 各組SDD大鼠下丘腦、杏仁核、中縫背核5-HT含量的變化 (±s,ng/g)

表1 各組SDD大鼠下丘腦、杏仁核、中縫背核5-HT含量的變化 (±s,ng/g)

組別n下丘腦杏仁核中縫背核 正常組8140.31±2.14202.50±17.18113.66±6.60 模型組7 66.77±8.671) 122.66±15.731) 87.75±5.921) 針刺組7 93.64±9.122) 173.13±19.212) 128.62±8.922) 藥物組7 121.25±4.982)3) 148.82±19.742) 103.57±20.642) 針?biāo)幗M7 97.66±6.252) 145.01±20.682) 130.66±14.812)4)

注:與正常組比較1)＜0.05;與模型組比較2)＜0.05;與針刺組比較3)＜0.05;與藥物組比較4)＜0.05

表2 各組SDD大鼠下丘腦、杏仁核、中縫背核5-HIAA含量的變化 (±s,ng/g)

表2 各組SDD大鼠下丘腦、杏仁核、中縫背核5-HIAA含量的變化 (±s,ng/g)

組別n下丘腦杏仁核中縫背核 正常組8113.66±6.60117.58±3.5575.95±7.54 模型組7 87.75±5.921) 67.06±2.461) 45.43±2.941) 針刺組7 128.62±8.922) 119.25±12.652) 77.09±7.672) 藥物組7 103.57±20.642)3) 89.73±4.812)3) 60.14±5.562)3) 針?biāo)幗M7 130.66±14.812) 80.56±5.322) 74.72±5.082)4)

注:與正常組比較1)＜0.05;與模型組比較2)＜0.05;與針刺組比較3)＜0.05;與藥物組比較4)＜0.05

2.3 各組大鼠下丘腦、杏仁核、中縫背核5-HIAA/ 5-HT比值比較

由表3可見,模型組大鼠下丘腦、中縫背核5-HIAA/5-HT比值較正常組均出現(xiàn)明顯下調(diào),兩組比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.05)。針?biāo)幗M下丘腦5-HIAA/5-HT比值與模型組比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.05)。針刺組杏仁核5-HIAA/5-HT比值與模型組比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.05)。其他各組下丘腦、杏仁核、中縫背核5-HIAA/5-HT比值比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＞0.05)。

表3 各組大鼠下丘腦、杏仁核、中縫背核5-HIAA/5-HT比值比較 (±s)

表3 各組大鼠下丘腦、杏仁核、中縫背核5-HIAA/5-HT比值比較 (±s)

組別n下丘腦杏仁核中縫背核 正常組80.67±0.060.58±0.050.67±0.09 模型組7 0.53±0.111)0.55±0.07 0.52±0.051) 針刺組70.49±0.06 0.69±0.122)0.60±0.05 藥物組70.49±0.030.61±0.070.59±0.07 針?biāo)幗M7 0.67±0.092)0.57±0.100.58±0.05

注:與正常組比較1)＜0.05;與模型組比較2)＜0.05

3 討論

下丘腦被認(rèn)為與睡眠發(fā)生直接相關(guān),大量研究表明,這個(gè)腦區(qū)直接對(duì)睡眠進(jìn)行調(diào)控,而且下丘腦還參與了形成抑郁癥的腦內(nèi)神經(jīng)回路[12];杏仁核是腦內(nèi)對(duì)外界負(fù)面信息轉(zhuǎn)化為神經(jīng)信號(hào)的場(chǎng)所,它在解剖上屬于古紋狀體,功能上屬于邊緣系統(tǒng)的一個(gè)核團(tuán)[13],參與對(duì)情緒、行為活動(dòng)的調(diào)節(jié),含有大量調(diào)節(jié)睡眠的相關(guān)物質(zhì),如內(nèi)啡肽、生長(zhǎng)抑素、腎上腺素皮質(zhì)激素釋放因子等[14-16];腦干的中縫背核對(duì)人體睡眠、覺(jué)醒周期、情緒、行為都有重要的調(diào)節(jié)作用,腦內(nèi)5-HT能神經(jīng)遞質(zhì)均起源于中縫核團(tuán),經(jīng)過(guò)神經(jīng)纖維投射到整個(gè)中樞[17]。

5-HT是腦內(nèi)極為重要的神經(jīng)遞質(zhì),它不僅參與大腦焦慮、抑郁情緒的調(diào)節(jié),還直接或間接參與對(duì)睡眠的生理調(diào)節(jié)過(guò)程[18]。腦內(nèi)的5-HT主要代謝途徑是在單胺氧化酶的作用下生成5-HIAA。而腦內(nèi)5-HIAA和5-HT之間的比值能間接反應(yīng)5-HT能神經(jīng)系統(tǒng)的活躍程度[7,19]。

選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑(selective sero- tonin reuptake inhibitor, SSRIs)是20世紀(jì)80年代開發(fā)并應(yīng)用于臨床的一類新型抗抑郁藥物。這類藥物選擇性抑制突觸前膜對(duì)5-HT的回收,對(duì)去甲腎上腺素(NE)影響很小,幾乎不影響多巴胺(DA)的回收。目前臨床上30%～40%的抑郁癥患者聯(lián)合使用SSRIs+苯二氮卓類(BDZ)藥物。傳統(tǒng)的鎮(zhèn)靜催眠藥BDZ可以治療抑郁相關(guān)失眠[20]。此類藥物可縮短入睡時(shí)間,減少覺(jué)醒時(shí)間和次數(shù),增加總睡眠時(shí)間,具有安全、起效快、耐受性良好等特點(diǎn)[21]。聯(lián)用BDZ,主要在于加強(qiáng)SSRIs對(duì)中樞神經(jīng)的作用,以盡快改善睡眠以及全身癥狀,穩(wěn)定患者的情緒,特別是對(duì)焦慮、抑郁和失眠的改善尤為明顯[22-23]。本研究藥物組和針?biāo)幗M聯(lián)合使用鹽酸舍曲林片和阿普唑侖片是SSRIs+BDZ治療SDD的典型代表。

本研究中針刺組和針?biāo)幗M所選用的靳三針“刺神穴組”,由靳三針中的“智三針”與“定神針”精煉而來(lái)[24]。印堂穴是“定神針”的要穴,在兩眉之間、鼻根部,雖說(shuō)是經(jīng)外奇穴,但處于督脈之上,可振奮陽(yáng)氣;神庭穴是“智三針”的要穴,是頭部?jī)H有的以“神”命名的兩個(gè)穴位之一,專用于調(diào)神的要穴;配穴方面,太沖穴是足厥陰肝經(jīng)的輸穴和原穴,位于足背第一、二跖骨之間,具有鎮(zhèn)肝熄風(fēng)、醒腦開竅、鎮(zhèn)心安神、解郁止痛的功效,善于治療失眠癥。

針刺治療SDD的優(yōu)勢(shì)在于多靶點(diǎn)、整體調(diào)整、無(wú)毒副反應(yīng)、安全性高等。針刺作用的基礎(chǔ)在于刺激患者自身內(nèi)源性調(diào)節(jié)機(jī)制的發(fā)揮,無(wú)須借助于藥物而起作用,這種綠色安全的特色是藥物不可比擬的。針?biāo)幉⒂檬轻樉陌l(fā)展的重要途徑,它結(jié)合了針灸與藥物的雙重優(yōu)勢(shì)[22-23],是抗抑郁治療的新趨勢(shì),具有以下優(yōu)點(diǎn)。①針?biāo)幉⒂每梢愿酶纳埔钟舭Y的軀體化癥狀;②針?biāo)幉⒂每梢詮浹a(bǔ)抗抑郁藥起效較慢問(wèn)題,臨床觀察也發(fā)現(xiàn),針灸治療抑郁癥起效迅速,一般多在2星期內(nèi)就起效,部分患者還存在即時(shí)效應(yīng)。因此,針?biāo)幉⒂弥委熞钟舭Y可以快速起效,盡量減輕患者及其家屬的痛苦,減少功能損害和降低自殺的危險(xiǎn)性,對(duì)抑郁癥社會(huì)經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)的減輕具有重要意義;③針?biāo)幉⒂每梢詼p輕西藥的副反應(yīng)。

筆者同期研究結(jié)果表明,①為期7 d的針?biāo)幉⒂酶深A(yù)對(duì)抑郁癥睡眠障礙大鼠起效較快,能明顯改善抗抑郁藥物起效慢的問(wèn)題(中縫背核5-羥色胺受體mRNA表達(dá))[5];②為期7 d的針刺干預(yù)對(duì)抑郁癥睡眠障礙大鼠有效,且與藥物干預(yù)效果相當(dāng),為期7 d的針?biāo)幗Y(jié)合干預(yù)則有明顯的增效作用(外側(cè)韁核bCaMKⅡ蛋白表達(dá))[25]。

本研究采取測(cè)定大鼠腦部下丘腦、杏仁核和中縫背核腦區(qū)的5-HT、5-HIAA,并計(jì)算兩者之間的比值來(lái)探討針刺、藥物、針?biāo)幉⒂脤?duì)SDD造模大鼠的作用機(jī)制。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,①SDD造模后大鼠下丘腦、杏仁核和中縫背核的5-HT、5-HIAA含量均出現(xiàn)明顯下降 (＜0.05),經(jīng)過(guò)為期7 d的各種干預(yù)后,各干預(yù)組下丘腦、杏仁核、中縫背核5-HT含量均較模型組出現(xiàn)了明顯的上調(diào)(＜0.05);僅有個(gè)別組的組間比較出現(xiàn)了明顯的變化(＜0.05)。②SDD造模后大鼠的下丘腦、杏仁核、中縫背核5-HIAA/5-HT比值均出現(xiàn)了明顯的下調(diào)(＜0.05);針?biāo)幗M下丘腦5-HIAA/5-HT比值被明顯上調(diào)(＜0.05),針刺組杏仁核5-HIAA/5-HT比值被明顯上調(diào)(＜0.05),其他干預(yù)組的各腦區(qū)5-HIAA/5-HT比值均較模型組未出現(xiàn)明顯的變化(＞0.05)。從以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出,各種干預(yù)手段均能有效提高下丘腦、杏仁核、中縫背核這些影響情緒與睡眠的相關(guān)腦區(qū)的5-HT含量;而只有針刺和針?biāo)幉⒂媚軌蛱岣吒髂X區(qū)5-HIAA/5-HT比值。由此,筆者認(rèn)為,針刺和針?biāo)幉⒂镁芨纳?-HT能神經(jīng)系統(tǒng),增加睡眠,提高睡眠質(zhì)量,而其中針?biāo)幉⒂玫男Ч芸赡苁且葬槾虨橹鞯?值得我們進(jìn)一步研究。

[1] Kessler RC, Berglund P, Demler O,. The epidemio- logy of major depressive disorder: results from the National Comorbidity Survey Replication (NCS-R)[J]., 2003,289(23):3095-3105.

[2] Woznica AA, Carney CE, Kuo JR,. The insomnia and suicide link: toward an enhanced understanding of this relationship[J]., 2015,22(8):37-46.

[3] 甄君,范建中,姚曉黎,等.針刺對(duì)抑郁癥睡眠障礙大鼠行為學(xué)和海馬5-羥色胺受體表達(dá)水平的影響[J].中國(guó)康復(fù)理論與實(shí)踐,2011,17(7):625-627.

[4] 孔梅,舒曉春,邢長(zhǎng)永.抑郁癥睡眠障礙模型大鼠甲狀腺激素變化及逍遙散干預(yù)的研究[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2010,16(16):147-149.

[5] 俞裕天,袁青,陳津巖,等.針?biāo)幗Y(jié)合對(duì)抑郁癥睡眠障礙大鼠行為學(xué)與中縫背核5-羥色胺受體mRNA表達(dá)的影響[J].廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2015,32(3):448-453.

[6] 張殿全,孫忠人,徐先偉.針刺四神聰對(duì)失眠大鼠下丘腦內(nèi)5-HT、5-HIAA含量的影響[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊, 2009,27(9):1975-1977.

[7] 方劍喬,梁宜,汪存信,等.經(jīng)皮穴位電刺激對(duì)力竭運(yùn)動(dòng)大鼠海馬,中腦5-HT及代謝產(chǎn)物含量影響的機(jī)制[J].中國(guó)康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志,2009,24(3):193-196.

[8] de Oliveira RA, Cunha GM, Borges KD,. The effect of venlafaxine on behaviour, body weight and striatal monoamine levels on sleep-deprived female rats[J]., 2004,79(3):499-506.

[9] Willner P, Towell A, Sampson D,. Reduction of sucrose preference by chronic unpredictable mild stress, and its restoration by a tricyclic antidepressant[J]., 1987,93(3):358-364.

[10] Katz RJ, Roth KA, Carroll BJ. Acute and chronic stress effects on open field activity in the rat: implications for a model of depression[J]., 1981,5 (2):247-251.

[11] Lopez-Rodriguez F, Kim J, Poland RE. Total sleep deprivation decreases immobility in the forced-swim test[J]., 2004,29(6):1105 -1111.

[12] 孟德欣,牟麗,黃民,等.下丘腦Hypocretin神經(jīng)肽在大鼠韁核對(duì)睡眠-覺(jué)醒調(diào)節(jié)中的作用[J].吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2009,35(2):214-217.

[13] McCarley RW, Greene RW, Rainnie D,. Brainstem neuromodulation and REM sleep[J]., 1995,7(5):341-354.

[14] Seifritz E, Moore P, Trachsel L,. The 5-HT1A agonist ipsapirone enhances EEG slow wave activity in human sleep and produces a power spectrum similar to 5-HT2 blockade[J]., 1996,209(1):41-44.

[15] Gillin JC, Sohn JW, Stahl SM,. Ipsapirone, a 5-HT1A agonist, suppresses REM sleep equally in unmedicated depressed patients and normal controls[J]., 1996,15(2):109-115.

[16] Driver HS, Flanigan MJ, Bentley AJ,. The influence of ipsapirone, a 5-HT1A agonist, on sleep patterns of healthy subjects[J].(), 1995,117(2):186-192.

[17] 高振平,潘澤,孟祥輝,等.5-羥色胺細(xì)胞在成人腦干中縫核群的分布[J].白求恩醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),1998,24(1): 35-36.

[18] Leonard BE. Serotonin receptors and their function in sleep, anxiety disorders and depression[J]., 1996,65(2):66-75.

[19] Zhang J, Yu B, Zhang XQ,. Tetrandrine, an antihypertensive alkaloid, improves the sleep state of spontaneously hypertensive rats (SHRs)[J]., 2014,151(1):729-732.

[20] Benca RM, Ancoli-Israel S, Moldofsky H. Special considerations in insomnia diagnosis and management: depressed, elderly, and chronic pain populations[J]., 2004,65(Suppl 8):26-35.

[21] Becker PM. Trazodone as a hypnotic in major depress- ion[J]., 2004,5(1):7-8.

[22] 鄺慧芳.針灸結(jié)合藥物治療抑郁癥伴睡眠障礙的臨床研究[D].南京中醫(yī)藥大學(xué),2009.

[23] 王欣君.針?biāo)幗Y(jié)合抗抑郁快速起效的中樞5-HT受體機(jī)制及臨床研究[D].南京中醫(yī)藥大學(xué),2009.

[24] 袁青.靳三針問(wèn)答圖解[M].廣州:廣東經(jīng)濟(jì)出版社, 2003:45.

[25] 俞裕天,袁青,陳津巖,等.針?biāo)幗Y(jié)合對(duì)抑郁癥睡眠障礙大鼠行為學(xué)及外側(cè)韁核bCaMKⅡ蛋白表達(dá)的影響[J].中華中醫(yī)藥雜志,2015,30(5):1546-1550.

Effect of Combined Acupuncture and Medicine on the 5-HT and 5-HIAA Contents of Hypothalami, Amygdalae and Dorsal Raphe Nuclei and Their Ratio in Rats with Sleep Deprivation Depression

-1,-1,-2.

1.,,100700,; 2.,510405,

Objective To investigate the effect of combined acupuncture and medicine on the 5-hydroxytryptamine (5-HT) and 5-hydroxyindoleacetic acid (5-HIAA) contents of hypothalami, amygdalae and dorsal raphe nuclei and their ratio in rats with sleep deprivation depression. Method Forty SD rats were randomized to a normal group of eight rats and a model making group of 32 rats. The normal group of rats was routinely fed together in one cage without any stimulation and treatment. The model making group of rats underwent 21 days’ solitary feeding ＋ CUMS ＋ REM sleep deprivation. Twenty-eight rats with successful model making were randomized to model, acupuncture, medicine and combined acupuncture and medicine groups, seven each. The model group received model making and no intervention; the acupuncture group, intervention with acupuncture at Yintang, Shenting and Taichong; the medicine group, intervention by an oral gavage of sertraline hydrochloride tablets and alprazolam tablets in aqueous solution; the combined acupuncture and medicine group, intervention with acupuncture plus the aqueous solution. The three groups received seven consecutive days of intervention. The 5-HT and 5-HIAA contents of hypothalami, amygdalae and dorsal raphe nuclei and their ratios were compared between the groups. Result The 5-HT and 5-HIAA contents of hypothalami, amygdalae and dorsal raphe nuclei decreased significantly in the model group after model making compared with the normal group (＜0.05) and increased significantly in the acupuncture, medicine and combined acupuncture and medicine groups after treatment compared with the model group (＜0.05). There were statistically significant differences in the ratios between the 5-HIAA and 5-HT contents of hypothalami and dorsal raphe nuclei between the model and normal groups (＜0.05). There was a statistically significant difference in the ratio of amygdalae 5-HIAA to 5-HT content between the acupuncture and model groups and in the ratio of hypothalamic 5-HIAA to 5-HT content between the combined acupuncture and medicine and model groups (＜0.05). Conclusion Combined use of acupuncture and medicine can produce a certain improving effect on 5-hydroxytryptaminergic neuronal activity and therefore increase sleep time and improve sleep quality in rats with sleep deprivation depression. Perhaps acupuncture produces the main effect of combined acupuncture and medicine.

Acupuncture therapy; Depression; Dyssomnia; 5-hydroxytryptamine; 5-hydroxyindoleacetic acid; Combined use of acupuncture and medicine; Rats

1005-0957(2017)03-0337-06

R2-03

A

10.13460/j.issn.1005-0957.2017.03.0337

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81303041,81473780);中國(guó)博士后科學(xué)基金項(xiàng)目(2016M590185)

俞裕天(1987—),男,博士后,Email:195824064@qq.com

2016-11-04