紫外—可見分光光度法測定水產(chǎn)品中二氧化硫殘留量

趙飛++高廣慧

摘 要：建立了紫外-可見分光光度法檢測水產(chǎn)品中二氧化硫殘留量的分析方法。方法采用紫外-可見分光光度計進行檢測，檢測波長為550 nm，以甲醛溶液作為吸收液，鹽酸副玫瑰苯胺溶液作為顯色劑，環(huán)境溫度控制在23 ℃時，顯色時間為20 min。亞硫酸鹽在0.4-2.0 μg范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)大于0.999，回收率在80.3-87.2%，精密度均小于3.0%。采用新建立的方法對水產(chǎn)品中的亞硫酸鹽含量進行檢測，該方法重現(xiàn)性好、準確度高、毒性小，適用于水產(chǎn)品中二氧化硫殘留量的檢測。

關(guān)鍵詞：紫外-可見分光光度法；二氧化硫；水產(chǎn)品

中圖分類號：O657.3 文獻標識碼：A 文章編號：1671-2064（2017）02-0227-02

Abstract：An ultraviolet-visible spectrophotometry method for the determination of sulfur dioxide in aquatic products was developed. Methods Ultraviolet-visible spectrophotometry， the detection wavelength was 550 nm， formaldehyde solution as absorption liquid， pararosaniline hydrochloric acid solution as chromogenic agent. The temperature was held constantly at 23 ℃， and the Chromogenic time was contoled at 20 min. sulfur dioxide has good linear relationship in the range of 0.4-2 μg with the correlation coefficient larger than 0.999. The recovery is between 80.3-87.2%， and the precision is below 3.0%. The method was used in the detecting of aquatic products， and the established method has been successfully applied to the determination of sulfur dioxide in aquatic products.

Key words：Ultraviolet-visible spectrophotometry； Sulfur dioxide； Aquatic products

亞硫酸鹽是一種較早就被廣泛使用的食品添加劑，可作為抗氧化劑、漂白劑和防腐劑，可抑制食物褐變，防止鮮蝦生成黑斑等，在酸性介質(zhì)中，也可作為抗菌劑使用[1]。GB 2760-2014《食品安全國家標準 食品添加劑使用標準》中規(guī)定了各類食品中亞硫酸鹽的最大使用量（以二氧化硫殘留量計），若攝入過量的亞硫酸鹽，會造成胃腸障礙，引起頭疼，腎臟障礙等癥狀。

亞硫酸鹽的檢測方法通常采用顯色法、蒸餾法、離子色譜法[2，3]等，各種方法適用的食品類別不同。蒸餾法適用于色酒、葡萄糖糖漿、果脯；顯色法適用范圍更為廣泛，但該法中使用四氯汞鈉溶液作為吸收液，常溫下具有微小的揮發(fā)性，且配制時使用的氯化高汞為劇毒品，本研究中采用甲醛溶液作為吸收液，避免使用劇毒品，且具有較好的準確度和精密度，適用于水產(chǎn)品中亞硫酸鹽的檢測。

1 實驗部分

1.1 儀器、材料與溶液配制

儀器：紫外-可見分光光度計（日本島津公司）；渦旋混合器（德國IKA）；分析天平（德國賽多利斯）。

材料：二氧化硫標準溶液（質(zhì)量濃度為100mg/L，上海滬宇生物科技有限公司），氫氧化鈉（分析純，國藥集團化學試劑有限公司），氨基磺酸銨（分析純，國藥集團化學試劑有限公司），鄰苯二甲酸氫鉀（分析純，國藥集團化學試劑有限公司），甲醛（分析純，國藥集團化學試劑有限公司），0.2%鹽酸副玫瑰苯胺溶液（上海滬宇生物科技有限公司），乙二胺四乙酸二鈉鹽（分析純，國藥集團化學試劑有限公司），亞鐵氰化鉀（分析純，國藥集團化學試劑有限公司），乙酸鋅（分析純，國藥集團化學試劑有限公司）。

溶液配制：甲醛吸收儲備液：稱取2.04g鄰苯二甲酸氫鉀，少量水溶解，加入20mL0.05mol/L乙二胺四乙酸二鈉鹽溶液、5.5mL甲醛，用水定容至100mL，搖勻；甲醛吸收使用液：用水將甲醛吸收儲備液稀釋100倍即得，臨用現(xiàn)配；0.05mol/L乙二胺四乙酸二鈉鹽溶液：稱取1.8612g乙二胺四乙酸二鈉鹽，用新沸后冷卻水溶解并定容至100mL，搖勻；氨基磺酸銨溶液：稱取0.30g氨基磺酸銨，少量水溶解，加入3mL1mol/L氫氧化鈉溶液，用水定容至100mL，搖勻；1mol/L氫氧化鈉溶液：稱取4.00g氫氧化鈉，少量水溶解，并用水定容至100mL，搖勻；鹽酸副玫瑰苯胺使用液：移取13mL0.2%鹽酸副玫瑰苯胺，加入30mL濃磷酸、12mL濃鹽酸，用水定容至100mL，搖勻；亞鐵氰化鉀溶液：稱取10.6g亞鐵氰化鉀，用水溶解并定容至100mL，搖勻；乙酸鋅溶液：稱取22g乙酸鋅，用水溶解，加入3mL冰醋酸，并用水定容至100mL，搖勻；2μg/mL二氧化硫標準使用液：精密吸取二氧化硫標準溶液0.2mL，用甲醛吸收使用液稀釋定容至20mL，搖勻待用。

1.2 標準系列的配制

分別精密移取2μg/mL二氧化硫標準使用液0、0.2、0.4、 0.6、0.8、1.0mL于試管中，以甲醛吸收液定容至10mL，搖勻，加入0.5mL氨基磺酸銨溶液，搖勻，加入1.0mL1mol/L氫氧化鈉溶液，搖勻待用；取另一套試管，分別加入0.5mL鹽酸副玫瑰苯胺使用液，將第一套管中溶液快速倒入第二套管中，立即蓋塞并搖勻，23℃條件下20min測定。

1.3 樣品前處理

（1）提取準確稱取混合均勻的水產(chǎn)品樣品5-10g（精確至0.01g），置于100mL容量瓶中，加入相當于20mL的甲醛吸收液，浸泡4h以上，加入亞鐵氰化鉀和乙酸鋅溶液各3mL，搖勻，用水稀釋定容至刻度，搖勻并用定量濾紙過濾待用。

（2）顯色：精密移取上述濾液0.5-5mL于試管中，其余操作同標準系列配制中“以甲醛吸收液定容至10mL”至“23℃條件下20min測定”。

1.4 紫外-可見分光光度計條件

檢測波長550nm。

2 結(jié)果與討論

2.1 吸收液的選擇

本文中采用甲醛吸收液代替國家標準GB/T5009.34《食品中亞硫酸鹽的測定》方法中采用四氯汞鈉吸收液提取樣品中的二氧化硫，其目的在于避免使用劇毒試藥氯化高汞，以及避免各單位采購、領(lǐng)取、使用和廢液處理中帶來的諸多不便；采用甲醛吸收液進行亞硫酸鹽檢測的原理是樣品在酸性條件下釋放出二氧化硫，被甲醛吸收液中甲醛結(jié)合形成羥甲基磺酸加成物，并與顯色劑鹽酸副玫瑰苯胺形成紫紅色絡合物，通過紫外分光光度計進行檢測。

2.2 顯色條件的優(yōu)化與控制

鹽酸副玫瑰苯胺顯色法檢測亞硫酸鹽含量中，顯色反應受溫度影響較大，溫度較低時，顯色反應較慢，相同顯色時間較溫度稍高時的靈敏度低；溫度過高時，顯色反應快，有效測定待測液吸光度值的時間較短，重復性較差，因此在均衡考慮顯色速度與顯色時間兩者，通過實驗測試表明，在23℃下，顯色20min較優(yōu)，且標準系列溶液同樣品溶液應在相同條件下顯色，并控制顯色時間一致才能保證檢測的準確度和精密度。

2.3 方法的線性

在相同的檢測條件下，依次測試標準系列溶液，得到相應的響應值，以響應值為縱坐標、含量為橫坐標作圖，得到標準曲線的線性為y=0.0342x-0.0006，相關(guān)系數(shù)為0.9993，線性關(guān)系較好。如圖1所示。

2.4 方法的精密度和準確度試驗

稱取空白樣品六份，分別加入一定濃度的標準溶液，按樣品前處理方法進行處理并檢測，分別計算回收率和精密度，得出回收率在80.3%-87.2%之間，RSD小于3.0%，測定結(jié)果見表1。

3 結(jié)語

本文采用紫外可見分光光度計檢測水產(chǎn)品中亞硫酸鹽的含量，采用甲醛吸收液代替四氯汞鈉作為吸收液，避免使用劇毒試藥，同時也避免了劇毒試藥采購、使用等方面的一系列問題；同時方法中需要注重的細節(jié)也一一進行詳細的闡述；且本文建立的方法具有較好的回收率、精密度，線性關(guān)系良好，適用于水產(chǎn)品中亞硫酸鹽的檢測。

參考文獻：

[1]李雪蓮，楊麗等.食品中亞硫酸鹽研究進展[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2015，11：34-37.

[2]黃慧玲，王玉健等.食品中亞硫酸鹽的離子色譜法測定[J].分析試驗室，2009，08：15-18.

[3]宋蓮芳.食品中亞硫酸鹽的離子色譜法測定分析[J].生物技術(shù)世界，2016，2：57.