視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中基質(zhì)金屬蛋白酶-9、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)水平及其臨床意義

梁 軍，楊依依

(尉氏縣人民醫(yī)院眼科，河南 開封 452170)

視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中基質(zhì)金屬蛋白酶-9、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)水平及其臨床意義

梁 軍，楊依依

(尉氏縣人民醫(yī)院眼科，河南 開封 452170)

目的 探討視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)表達(dá)水平及其臨床意義。方法 采用免疫組化S-P法檢測(cè)100例視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤和30例正常視網(wǎng)膜組織中MMP-9、VEGF的表達(dá)水平，并分析兩者與視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中MMP-9的陽(yáng)性率為65.0%(65/100)，高于正常視網(wǎng)膜組織的6.7%(2/30)(P<0.05)；視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中VEGF的陽(yáng)性率為72.0%(72/100)，高于正常視網(wǎng)膜組織的10.0%(3/30)(P<0.05)。視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中MMP-9、VEGF的表達(dá)與腫瘤分化程度、臨床分期有關(guān)(P<0.05)。視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中MMP-9、VEGF的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.570，P<0.05)。結(jié)論 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中存在高表達(dá)的MMP-9、VEGF，兩者可能協(xié)同參與視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移。

視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤；基質(zhì)金屬蛋白酶-9；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子

視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的主要致病原因是Rb1基因的缺失，該病的主要危害是導(dǎo)致患兒的視力下降，為進(jìn)一步探討視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的發(fā)病機(jī)制，本研究采用免疫組化S-P法檢測(cè)視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9，MMP-9)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表達(dá)，并分析兩者之間的相關(guān)性，以期對(duì)視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的發(fā)病機(jī)制進(jìn)一步闡明。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 入組河南省眼科研究所和尉氏縣人民醫(yī)院2011年6月至2016年1月收治的經(jīng)病理學(xué)確診的100例視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤患者，男66例，女34例；年齡4個(gè)月～11歲，中位年齡4.2歲；組織分化程度：分化型55例，未分化型45例；臨床分期：眼內(nèi)期39例，青光眼期36例，眼外擴(kuò)展期25例。并選取同期收治的因外傷摘除眼球的正常視網(wǎng)膜患者30例作為對(duì)照，其中男21例，女9例，年齡6個(gè)月～10歲，中位年齡3.9歲。2組患者的性別、年齡等基線資料具有可比性(P>0.05)。

1.2 試劑 MMP-9、VEGF鼠抗人單克隆抗體等均購(gòu)自北京中山金橋生物技術(shù)有限公司。

1.3 MMP-9、VEGF表達(dá)的檢測(cè) 對(duì)于收集到的100例視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤和30例正常視網(wǎng)膜組織標(biāo)本，均采用免疫組化S-P法檢測(cè)其MMP-9、VEGF的表達(dá)，以PBS代替一抗作為陰性對(duì)照，以已知MMP-9、VEGF陽(yáng)性切片作為陽(yáng)性對(duì)照。

1.4 結(jié)果判定 MMP-9陽(yáng)性信號(hào)主要定位于細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞膜，VEGF陽(yáng)性信號(hào)主要定位于細(xì)胞質(zhì)，陽(yáng)性信號(hào)均為棕黃色顆粒以選取至少5個(gè)高倍鏡(×400)視野，計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù),并觀察染色強(qiáng)度，進(jìn)行綜合評(píng)估，判斷陽(yáng)性率[1]。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，MMP-9、VEGF的陽(yáng)性率比較采用χ2檢驗(yàn)，MMP-9與VEGF的相關(guān)性分析采用Spearmen相關(guān)性分析法，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中MMP-9、VEGF的表達(dá) 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中MMP-9的陽(yáng)性率為65.0%(65/100)，高于正常視網(wǎng)膜組織的6.7%(2/30)(P<0.05)；視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中VEGF的陽(yáng)性率為72.0%(72/100)，高于正常視網(wǎng)膜組織的10.0%(3/30)(P<0.05)。

2.2 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中MMP-9、VEGF的表達(dá)與其臨床病理特征的關(guān)系 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中MMP-9、VEGF的表達(dá)與腫瘤分化程度、臨床分期有關(guān)(P<0.05)。見表1。

2.3 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中MMP-9與VEGF的關(guān)系 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中MMP-9、VEGF的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.570，P<0.05)。見表2。

表1 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中MMP-9、VEGF的表達(dá)與其臨床病理特征的關(guān)系

表2 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中MMP-9與VEGF的關(guān)系

注：r=0.570，P<0.05

3 討論

視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤是嬰幼兒高發(fā)的眼部原發(fā)性惡性腫瘤，可導(dǎo)致患兒的視力下降，嚴(yán)唐者可危及患兒生命[2-3]。視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的發(fā)生發(fā)展與大多數(shù)實(shí)體瘤一樣，離不開體內(nèi)癌基因與抑癌基因平衡的打破，而腫瘤發(fā)生后如果繼續(xù)進(jìn)展則需要腫瘤細(xì)胞穿透基底膜而向外浸潤(rùn)或通過(guò)血管、淋巴管向遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移；腫瘤的生長(zhǎng)也需要新生血管形成來(lái)為其提供一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[2-4]。MMPs是一類能夠降解細(xì)胞外基質(zhì)，從而破壞基底膜的酶類，這對(duì)腫瘤的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移十分重要。研究證實(shí)，MMP-9在大多數(shù)實(shí)體瘤中存在高表達(dá)[5]。VEGF則是目前已知功能最強(qiáng)的促血管生成因子，是腫瘤血管新生的主要促進(jìn)因子，在腫瘤血管新生過(guò)程中發(fā)揮了十分重要的作用，是很多實(shí)體瘤發(fā)生、發(fā)展的關(guān)鍵因子[6]。本研究結(jié)果顯示，視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中MMP-9的陽(yáng)性率為65.0%(65/100)，高于正常視網(wǎng)膜組織的6.7%(2/30)(P<0.05)；視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中VEGF的陽(yáng)性率為72.0%(72/100)，高于正常視網(wǎng)膜組織的10.0%(3/30)(P<0.05)。視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中MMP-9、VEGF的表達(dá)與腫瘤分化程度、臨床分期有關(guān)(P<0.05)。視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織

中MMP-9、VEGF的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.570，P<0.05)。這與有關(guān)文獻(xiàn)[1]報(bào)道結(jié)果相近。總之，視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織存在MMP-9、VEGF的異常表達(dá)，這與視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移等有關(guān)。

[1]劉月君.基質(zhì)金屬蛋白酶-9、基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑-1 和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中的表達(dá)[J].新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2014,31(12):1015-1016.

[2]秦靜，段大鵬，車選義,等.視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中SHH與PTCH的表達(dá)及其意義[J].中華實(shí)用診斷與治療雜志,2015,29(6):559-561.

[3]程育宏,申家泉,唐俠.基質(zhì)金屬蛋白酶-14 和細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的表達(dá)及意義[J].山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2008,46(4):411-414,419.

[4]楊依依.視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中Survivin、P53的表達(dá)及其意義[J].腫瘤基礎(chǔ)與臨床,2016,29(6):473-475.

[5]吳子旭,王炳彥,姚宏.基質(zhì)金屬蛋白酶-9和Ki-67在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的表達(dá)和意義[J].山西醫(yī)藥雜志,2011,40(12):1195-1196.

[6]袁思奇,宋華.基質(zhì)金屬蛋白酶-1、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的表達(dá)及意義[J].眼科學(xué)報(bào),2010,25(1):48-51.

Expressions of Matrix Metalloproteinase-9 and Vascular Endothelial Growth Factor in the Retinoblastoma

LIANG Jun，YANG Yiyi

(DepartmentofOphthalmology,thePeople’sHospitalofWeishiCounty,Kaifeng452170,China)

Objective To investigate the expressions and clinical significance of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) and vascular endothelial growth factor (VEGF) in the retinoblastoma.Methods Immunohistochemical S-P method was used to detect the expressions of MMP-9 and VEGF in the 100 patients with retinoblastoma and the 30 patients with normal retina tissues,their relationship with clinicopathological parameters were analyzed.Results The positive rate of MMP-9 [65.0%(65/100)] in the retinoblastoma was higher than that [6.7%(2/30)] in the normal retina tissues (P<0.05).The positive rate of VEGF [72.0%(72/100)] in the retinoblastoma was higher than that [10.0%(3/30)] in the normal retina tissues (P<0.05).The expressions of MMP-9 and VEGF in the retinoblastoma were related with cell differentiation degree and clinical stage (P<0.05).In the retinoblastoma,the expression of MMP-9 was positively related with VEGF (r=0.570,P<0.05).Conclusion High expressions of MMP-9 and VEGF may be related to the infiltration and metastasis of retinoblastoma.

retinoblastoma; matrix metalloproteinase-9; vascular endothelial growth factor

梁軍(1972-),女,主治醫(yī)師,主要從事眼科疾病相關(guān)臨床工作。

10.3969/j.issn.1673-5412.2017.01.007

R739.7；R730.23

A

1673-5412(2017)01-0027-03

2016-08-13)