某疫情不穩(wěn)定豬場(chǎng)主要病毒性疾病抗體檢測(cè)與分析

陳同煜 范貴瑞 彭 濤 王玉超 古金元 胡東方 劉思當(dāng)

（1山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東泰安 271000；2山東費(fèi)縣梁邱獸醫(yī)站，山東費(fèi)縣 273416）

某疫情不穩(wěn)定豬場(chǎng)主要病毒性疾病抗體檢測(cè)與分析

陳同煜1范貴瑞2彭 濤1王玉超1古金元1胡東方1劉思當(dāng)*

（1山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東泰安 271000；2山東費(fèi)縣梁邱獸醫(yī)站，山東費(fèi)縣 273416）

2016年夏秋季節(jié)某規(guī)?；i場(chǎng)生產(chǎn)狀況較差，不同豬群均出現(xiàn)疫情不穩(wěn)定現(xiàn)象，主要表現(xiàn)為妊娠母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎及弱胎，哺乳及保育豬腹瀉并多發(fā)神經(jīng)癥狀，育肥豬咳嗽、氣喘，其中以哺乳仔豬和保育仔豬群的發(fā)病最為嚴(yán)重，豬場(chǎng)經(jīng)投服多種抗生素治療，效果均不理想。懷疑病毒性疾病流行，遂對(duì)各日齡階段豬群隨機(jī)采集85份血清，采用ELⅠSA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）方法檢測(cè)豬瘟病毒、豬藍(lán)耳病病毒、豬偽狂犬病病毒gE、豬圓環(huán)病毒2型血清抗體，結(jié)果顯示：各日齡豬群抗體水平均不理想，符合發(fā)病豬群的基本特征。通過分析抗體檢測(cè)數(shù)據(jù)，查找免疫漏洞及疫病流行狀態(tài)，及時(shí)調(diào)整免疫程序，疫情得到迅速控制，從而顯著改善了該場(chǎng)生產(chǎn)成績(jī)，使該場(chǎng)生產(chǎn)步入健康軌道。

規(guī)?；i場(chǎng)；病毒性疾??；抗體檢測(cè)

近年來，部分規(guī)?；i場(chǎng)由于疫苗免疫不到位或免疫程序不合理，頻繁遭受多種病毒性疾病的侵襲，豬群健康狀況差，抗生素藥物用量大，但治療效果不佳，使豬場(chǎng)蒙受巨大經(jīng)濟(jì)損失，并帶來嚴(yán)重的食品安全隱患。如何制定科學(xué)合理的免疫程序保證豬群健康成為當(dāng)下養(yǎng)殖場(chǎng)最迫切的需求。自2006年高致病性豬繁殖與呼吸綜合征（藍(lán)耳病）暴發(fā)以來，其一直是影響豬群健康的重要疾病；2011年豬偽狂犬病病毒變異毒株流行后，豬群的野毒感染率越來越高且臨床病例的發(fā)生愈演愈烈；豬瘟作為傳統(tǒng)病毒性疾病則一直在豬場(chǎng)疾病中扮演重要角色，常以非典型性豬瘟或豬瘟病毒的亞臨床感染形式危害豬群健康；感染率極高的豬2型圓環(huán)病毒病在豬群中的發(fā)病越發(fā)普遍，各類豬群均難以幸免。上述疫病作為免疫抑制性疾病常與其他病毒病或細(xì)菌病混合感染，使豬場(chǎng)疾病復(fù)雜化，使原發(fā)性疾病的臨床診斷更加困難，難以把握最佳防治時(shí)機(jī)，加重了豬病帶來的危害。所以加強(qiáng)對(duì)上述四種常見病毒性疾病的監(jiān)測(cè)與防控，對(duì)穩(wěn)定豬群健康生產(chǎn)和提高豬場(chǎng)生產(chǎn)成績(jī)有著十分重要的現(xiàn)實(shí)意義。本文就某疫情不穩(wěn)定的規(guī)?；i場(chǎng)各日齡階段豬群四種病毒病的免疫狀態(tài)進(jìn)行檢測(cè)分析，并結(jié)合臨床發(fā)病情況和免疫背景對(duì)免疫程序進(jìn)行調(diào)整優(yōu)化，改善了豬場(chǎng)主要病毒性疾病的免疫狀態(tài)，顯著降低了該場(chǎng)病毒性疾病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，保證了豬場(chǎng)的健康生產(chǎn)。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

經(jīng)現(xiàn)場(chǎng)考察發(fā)現(xiàn)該豬場(chǎng)生產(chǎn)狀況極不穩(wěn)定，母豬群生產(chǎn)性能整體欠佳，因夏季高熱引發(fā)2%的母豬死亡，有流產(chǎn)、產(chǎn)死胎、弱胎問題的母豬高達(dá)10%，且部分母豬同窩產(chǎn)床仔豬個(gè)體差異較大，弱仔比例較高，被毛粗亂，有的成為僵豬；發(fā)病最嚴(yán)重的則集中于產(chǎn)房哺乳仔豬和保育豬群，主要表現(xiàn)為發(fā)熱、腹瀉、關(guān)節(jié)腫大、跛行、咳嗽、氣喘及神經(jīng)癥狀等，其中腹瀉發(fā)病率高達(dá)60%、死亡率達(dá)10%；神經(jīng)癥狀發(fā)生率為5%、死亡率為2%；呼吸道癥狀發(fā)生率為20%、死亡率為2%；另外，育肥豬群呼吸系統(tǒng)疾病防控壓力大，咳嗽、氣喘比例較高。

該豬場(chǎng)后備母豬自165日齡開始間隔一周依次進(jìn)行豬瘟、偽狂犬病、藍(lán)耳病、圓環(huán)病毒病疫苗的免疫，一月后各自加強(qiáng)免疫一次；懷孕母豬僅在懷孕80天時(shí)免疫豬瘟疫苗；哺乳及保育仔豬2日齡時(shí)偽狂犬病疫苗滴鼻免疫，間隔一周免疫藍(lán)耳病疫苗，27日齡時(shí)進(jìn)行豬瘟首免，間隔一周藍(lán)耳病疫苗二免，60日齡豬瘟疫苗二免，70日齡偽狂犬病弱毒苗注射，98日齡再次免疫偽狂犬病疫苗。

通過前腔靜脈采血方法，對(duì)該豬場(chǎng)各日齡階段的豬群隨機(jī)采集血清85份，依次編號(hào)，及時(shí)分離血清，-20℃冷凍備檢。見表1。

表1 樣品采集類別及數(shù)目

1.2 試劑及設(shè)備

四種病毒抗體檢測(cè)所用試劑盒均由韓國(guó)金諾公司生產(chǎn)。高速離心機(jī)、震蕩儀，購(gòu)自Eppendorf公司的各種規(guī)格移液器，96孔酶標(biāo)儀等。

1.3 檢測(cè)方法

四種病毒檢測(cè)均按照說明書步驟嚴(yán)格規(guī)范操作。

1.4 判定標(biāo)準(zhǔn)

豬瘟病毒（CSFV）：阻斷率≥40%為陽(yáng)性；阻斷率＜40%為陰性。

豬藍(lán)耳病病毒（PRRSV）：S/P值≥0.40為陽(yáng)性；S/P值＜0.40為陰性。

豬偽狂犬病病毒gE（PRV gE）：S/N值≤0.6為陽(yáng)性；S/N值＞0.6為陰性。

豬2型圓環(huán)病毒（PCV 2）：S/P值≥0.4為陽(yáng)性；S/P值＜0.3為陰性，之間為可疑。

2 結(jié)果與分析

不同日齡階段豬群四種病毒抗體檢測(cè)結(jié)果見表2。由表2可知，后備母豬（待配）四種病毒抗體陽(yáng)性率均達(dá)到100%，其中豬瘟抗體平均值達(dá)到88.07%，離散度達(dá)18.38%，說明豬瘟免疫效果較理想，僅兩頭豬抗體水平較低，需要加強(qiáng)免疫。藍(lán)耳病病毒抗體平均值為2.24，雖然離散度尚可，為20.92%，但據(jù)臨床母豬發(fā)病情況，可推測(cè)后備母豬群可能有藍(lán)耳病野毒感染，100%的抗體陽(yáng)性率并非完全疫苗免疫產(chǎn)生。偽狂犬病gE抗體100%陽(yáng)性率值得高度關(guān)注，表明后備母豬幾乎全群感染偽狂犬病野毒，這可能是造成母豬返情、流產(chǎn)、產(chǎn)死胎等問題的主要原因。在疫苗免疫的情況下，2型圓環(huán)病毒抗體水平較好。

妊娠母豬豬瘟、2型圓環(huán)病毒病抗體陽(yáng)性率均達(dá)100%，且離散度較低，除個(gè)別豬只豬瘟抗體水平低外，免疫效果較為理想。藍(lán)耳病抗體水平平均值較低，離散度過高，提示藍(lán)耳病病毒在妊娠母豬群中較為活躍，導(dǎo)致妊娠母豬群藍(lán)耳病感染壓力較大，出現(xiàn)妊娠母豬尤其是妊娠后期母豬流產(chǎn)及產(chǎn)木乃伊胎、死胎、弱胎比例增高，需注意妊娠母豬藍(lán)耳病的免疫與防控。盡管偽狂犬病疫苗免疫強(qiáng)度較大，但妊娠母豬群只有少部分豬只gE抗體呈陰性，80%呈gE抗體陽(yáng)性，這是造成妊娠母豬群健康問題的重要因素，加強(qiáng)偽狂犬病疫苗的產(chǎn)前免疫甚為重要。2型圓環(huán)病毒病的抗體水平沿襲了后備母豬100%的陽(yáng)性率，說明疫苗免疫效果較好。

保育豬群免疫狀況整體欠佳，豬瘟抗體陽(yáng)性率僅為48%，且豬只抗體水平不整齊。分析其原因，一方面與母源抗體影響有關(guān)；另一方面，該階段豬群藍(lán)耳病及偽狂犬病gE抗體水平均不理想，可能與其他病毒感染或豬只體況差導(dǎo)致免疫失敗有關(guān)。另外，與疫苗有效抗原含量、疫苗保存及回溫是否得當(dāng)、免疫部位是否準(zhǔn)確等也不無關(guān)系。藍(lán)耳病抗體陽(yáng)性率為84%，離散度較大，說明保育豬群藍(lán)耳病不穩(wěn)定。偽狂犬病gE抗體陽(yáng)性率為72%，結(jié)合母豬及保育豬群發(fā)病情況，在排除母源抗體因素干擾下，說明保育豬群偽狂犬病野毒感染仍較普遍，是引發(fā)本階段豬只腹瀉和神經(jīng)癥狀的重要原因，由于母豬普遍存在偽狂犬病野毒感染，因而所產(chǎn)仔豬也難以幸免，對(duì)出生仔豬盡快完成滴鼻免疫并保障后續(xù)疫苗免疫的次數(shù)和質(zhì)量至關(guān)重要。2型圓環(huán)病毒病陽(yáng)性率92%，免疫效果尚可，但仍有部分豬只在疫苗免疫后未產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，可能與該階段豬群感染其他病毒病導(dǎo)致豬只抵抗力下降，繼而造成小部分豬只健康狀況不穩(wěn)定。

從育肥豬病毒抗體檢測(cè)結(jié)果看，豬瘟經(jīng)過二次免疫，抗體水平較保育階段有大幅提升，但豬瘟抗體水平整齊度欠佳，需及時(shí)檢測(cè)和補(bǔ)免。藍(lán)耳病的陽(yáng)性率與保育豬群幾乎持平，且離散度大為下降，說明疫苗免疫對(duì)生長(zhǎng)豬群的防控起到了一定作用，但2.08的抗體平均值和34.73%的離散度也顯示出育肥豬群該病的不穩(wěn)定性。由于免疫強(qiáng)度的加大，育肥豬群偽狂犬病野毒的感染率下降到50%，雖然因野毒感染導(dǎo)致的死亡率有所下降，但半數(shù)育肥豬群的偽狂犬病野毒感染成為導(dǎo)致呼吸道問題的主要因素，偽狂犬病的免疫不能松懈。2型圓環(huán)病毒病的陽(yáng)性率及抗體水平與保育豬群類似，說明圓環(huán)病毒的感染在育肥豬群已趨于穩(wěn)定，較其他病毒性疾病對(duì)豬群產(chǎn)生的危害處于次要地位，疫苗免疫功不可沒。

表2 不同日齡階段豬群血清抗體檢測(cè)結(jié)果

3 討論

抗體檢測(cè)結(jié)果證實(shí)該豬場(chǎng)各豬群均存在不同程度的偽狂犬病野毒和藍(lán)耳病病毒的感染現(xiàn)象，兩病是造成該豬場(chǎng)疫情不穩(wěn)定的主要原因，需重視對(duì)兩種病毒性疾病的免疫與防控。據(jù)檢測(cè)和疫病發(fā)生情況對(duì)免疫程序進(jìn)行了如下優(yōu)化調(diào)整。

⑴出生仔豬進(jìn)行偽狂犬病疫苗滴鼻，盡量出生當(dāng)天完成，需保證使用水性稀釋液和專用霧化噴頭。懷孕母豬產(chǎn)前一月加強(qiáng)免疫一次偽狂犬病滅活疫苗。

⑵根據(jù)抗體檢測(cè)結(jié)果，將豬瘟和偽狂犬病疫苗二免時(shí)間在原有基礎(chǔ)上向前推移5天；豬瘟首免日齡不變，弱仔較多的圈舍進(jìn)行豬瘟超免。

⑶后備母豬配種前45天，間隔一月完成兩次藍(lán)耳病疫苗免疫，出生仔豬藍(lán)耳病首免時(shí)間提至豬瘟首免前一周。

⑷仔豬階段免疫一次副豬嗜血桿菌病疫苗。

此外還加強(qiáng)了該場(chǎng)生物安全體系建設(shè)，逐步淘汰無生產(chǎn)價(jià)值的陽(yáng)性種豬，通過實(shí)施以上防治措施，該場(chǎng)豬群逐步恢復(fù)穩(wěn)定生產(chǎn)。

S858.28

：A

：1673-4645(2017)02-0072-03

2016-12-09

陳同煜（1990-），男，碩士研究生，研究方向?yàn)閯?dòng)物臨床病理學(xué)，E-mail：chentongyu123@126.com

*通訊作者：劉思當(dāng)（1961-），教授，博士生導(dǎo)師，主要研究方向?yàn)閯?dòng)物臨床病理學(xué)及獸藥毒理學(xué)，E-mail：liusid@sdau.edu.cn