腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6在NF-κB炎癥通路中的研究進(jìn)展

張群燕綜述，郭郡浩，蔡 輝 審校

·綜 述·

腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6在NF-κB炎癥通路中的研究進(jìn)展

張群燕綜述，郭郡浩，蔡 輝 審校

腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor，TRAF6)既可與腫瘤壞死因子受體(TNFR)超家族結(jié)合，又可與白細(xì)胞介素-1受體/Toll樣受體(IL-1R/TLR)超家族相互作用來(lái)傳遞胞外信號(hào)的一種胞內(nèi)接頭蛋白，在炎癥反應(yīng)、免疫應(yīng)答、骨代謝中發(fā)揮著重要作用。文章就TRAF6的蛋白結(jié)構(gòu)、核因子-κB炎癥通路以及與炎癥疾病和臨床應(yīng)用等方面進(jìn)行綜述。

腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6；NF-κB；CD40；炎癥

腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor，TRAF6)是細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)通路上的關(guān)鍵接頭蛋白，能直接或間接與TNF受體超家族和(或)IL-l/Toll-1ike受體超家族成員結(jié)合，通過(guò)轉(zhuǎn)錄因子NF-κB、JNK/p38、(PI3K)/AKT、AP-1通路的激活，從而影響細(xì)胞的生成、增殖、分化和死亡，調(diào)控先天性和獲得性免疫、炎癥反應(yīng)、胚胎發(fā)育、氧化應(yīng)激、骨代謝等多個(gè)生物學(xué)過(guò)程[1]。近年來(lái)，有關(guān)TRAF6在炎癥信號(hào)傳導(dǎo)方面的研究較多?，F(xiàn)就其在NF-κB信號(hào)通路中的研究進(jìn)展作一綜述。

1 TRAF6蛋白結(jié)構(gòu)及生物學(xué)功能

1994年，Rothe等首次利用免疫沉淀反應(yīng)和酵母雙雜交技術(shù)發(fā)現(xiàn)了2種可與TNFRⅡ特異性結(jié)合的胞內(nèi)信號(hào)接頭蛋白，即TRAF1和TRAF2，隨后在哺乳動(dòng)物中發(fā)現(xiàn)6種TRAFs蛋白，按照發(fā)現(xiàn)的先后順序命名為：TRAF1-TRAF6，并統(tǒng)稱(chēng)為T(mén)RAFs。

結(jié)構(gòu)上，TRAFs蛋白非常保守，有著十分相似的結(jié)構(gòu)特征：①TRAF分子C端均含有約200個(gè)氨基酸殘基的TRAF結(jié)構(gòu)域，主要接受外來(lái)信號(hào)的刺激，其中，TRAF結(jié)構(gòu)域又將TRAF分為T(mén)RAF-N和TRAF-C兩部分。另有文獻(xiàn)將新的蛋白質(zhì)被命名為T(mén)RAF7[2]，但這種說(shuō)法是有爭(zhēng)議的，因?yàn)樵摰鞍撞痪哂卸xTRAFs的TRAF同源結(jié)構(gòu)域；②除TRAF1外，TRAF分子N端依次有3個(gè)域，分別是第45～106位含有2個(gè)鋅原子、7個(gè)半胱氨酸的環(huán)指模序(RING finger motif)，第110～264位包含5到7個(gè)鋅指(zinc finger)的結(jié)構(gòu)域和第287～342位的螺旋輪結(jié)構(gòu)。這種結(jié)構(gòu)將膜上的信號(hào)傳導(dǎo)至下游，激發(fā)一系列信號(hào)通路，從而發(fā)揮不同的生物學(xué)功能[3]。

現(xiàn)已證實(shí)，人TRAF6基因定位于11p13，編碼的蛋白質(zhì)為511個(gè)氨基酸殘基，是一種泛素連接酶，廣泛分布在中腦、肺、肝、骨骼肌、腎等組織中，而在心、脾、睪丸也有少量表達(dá)。由于N端獨(dú)特的TRAF-C結(jié)構(gòu)能結(jié)合不同的蛋白分子，使TRAF6既參與CD40的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)又參與IL-1R/TLRs的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)[4-5]，是TRAFs家族中唯一可直接和CD40、IRAK以及NF-κB受體激活蛋白(receptor activator of NF-κB，RANK)結(jié)合的銜接蛋白，然其介導(dǎo)的結(jié)果似乎相似，皆可激活NF-κB[6]，在免疫應(yīng)答、骨代謝和淋巴結(jié)的發(fā)展，乳腺，皮膚和中樞神經(jīng)系統(tǒng)的形成等過(guò)程中發(fā)揮重要生物學(xué)效應(yīng)。

2 TRAF6與NF-κB炎癥通路

研究發(fā)現(xiàn)，在不同的信號(hào)刺激下，TRAF6可通過(guò)與多種信號(hào)分子介導(dǎo)并激活NF-κB信號(hào)通路，在包括免疫應(yīng)答在內(nèi)的眾多生命活動(dòng)中發(fā)揮了重要的功能。其激活NF-κB的共同機(jī)制可能是：TRAF-C接受外界刺激后促使TRAF-N發(fā)生結(jié)構(gòu)改變后聚合，隨后寡聚化的TRAF6依賴(lài)自身N端RING環(huán)指結(jié)構(gòu)E3泛素連接酶的功能，不僅介導(dǎo)底物蛋白還介導(dǎo)其自身K63位的泛素化；當(dāng)TRAF6 N端環(huán)指模序與E2復(fù)合體Ubc13/Uev1A以賴(lài)氨酸63位連接(Lys63-linked，K63)的多聚泛素鏈形成Ubc13/Uev1A/TRAF6復(fù)合體后，TRAF6被泛素化并通過(guò)TGF-β激活的蛋白激酶(transforming growth factor beta-activated kinase 1，TAK1)結(jié)合蛋白(TAB1)和(TAB2)復(fù)合物激活NF-κB誘導(dǎo)激酶，進(jìn)而活化NF-κB抑制物的激酶和促分裂原活化蛋白激酶激酶6，介導(dǎo)NF-κB和JNK信號(hào)通路。

由此可見(jiàn)，在激活NF-kB的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中，TRAF6是NF-κB信號(hào)通路的中心匯合點(diǎn)，TRAF6-K63催化賴(lài)氨酸聚泛素化激活TAK1是關(guān)鍵點(diǎn)[7]，這種作用機(jī)制在TRAFs成員中基本一致，而不同的是N端獨(dú)特的TRAF-C結(jié)構(gòu)能結(jié)合不同的上游分子。因此，研究在不同疾病狀態(tài)下，接受不同的外界刺激如CD40或IL-1R/TLRs的信號(hào)，對(duì)研究TRAF6在NF-kB的信號(hào)通路中的作用具有重要的意義。

2.1 Toll樣受體介導(dǎo)的NF-kB激活 TLR是一類(lèi)Ⅰ型跨膜蛋白，分為胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū)3個(gè)部分，而胞內(nèi)區(qū)與白細(xì)胞介素(interleukin，IL)受體具有相同的結(jié)構(gòu)，統(tǒng)稱(chēng)TIR結(jié)構(gòu)域，負(fù)責(zé)募集下游含TIR結(jié)構(gòu)域的銜接蛋白。現(xiàn)已證實(shí)，TLR信號(hào)通路可分為MyD88依賴(lài)途徑和不依賴(lài)于MyD88的非依賴(lài)途徑。其中，MyD88依賴(lài)途徑主要通過(guò)MyD88 C-端的TIR結(jié)構(gòu)域與TLR/IL-1R的TIR結(jié)構(gòu)域結(jié)合后，再經(jīng)其N(xiāo)-端死亡結(jié)構(gòu)域募集IL-1R相關(guān)蛋白激酶(IL-1 receptor-associated kinase，IRAK)，后者與IL-1R或TLRs與MyD88形成的受體復(fù)合物結(jié)合后自動(dòng)磷酸化，磷酸化的IRAK促進(jìn)TRAF6的C端聚合后泛素化，進(jìn)而激活NF-κB炎癥通路。

研究發(fā)現(xiàn)，MyD88-TRAF-NF-κB的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)存在于大部分的TLR信號(hào)通路中，其差異在于與MyD88偶聯(lián)的下游信號(hào)途徑由于TLR不同而有所區(qū)別。如在IL-1R/TLR超家族中，IL-1刺激下的TRAF6-/-敲除的胚胎纖維原細(xì)胞不能激活JNK和NF-κB通路[8]，表明TRAF6是TLR通路中調(diào)節(jié)NF-κB和Jun的終端激酶信號(hào)。Verstak等[9]研究發(fā)現(xiàn)，在TLR2和TLR4介導(dǎo)的信號(hào)通路中，還需類(lèi)TIR結(jié)構(gòu)域蛋白也稱(chēng)包含TIR結(jié)構(gòu)域的接頭蛋白TIRAP(MyD88-adaptor-like，Mal)的接頭分子才能介導(dǎo)下游的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。Mal的一個(gè)假定基序可促進(jìn)TRAF6直接募集至質(zhì)膜，Mal-/-小鼠中無(wú)法觸發(fā)NF-κB炎癥反應(yīng)。

2.2 CD40介導(dǎo)的NF-kB激活 從TRAF6發(fā)現(xiàn)來(lái)看，其最早是作為綁定CD40細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域的一個(gè)分子被發(fā)現(xiàn)的?，F(xiàn)已證實(shí)，CD40的胞質(zhì)內(nèi)部有與TRAF6結(jié)合的位點(diǎn)。Chatzigeorgiou等[10]發(fā)現(xiàn)，CD40分子胞漿段信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子的結(jié)合部位(CD40cyt)較短且組成中無(wú)酪氨酸殘基(Tyr)，缺乏激酶活性，在與CD40L結(jié)合后，其信號(hào)傳遞主要是通過(guò)TRAF與CD40胞質(zhì)尾端結(jié)構(gòu)域結(jié)合來(lái)調(diào)節(jié)CD40信號(hào)通路。Zarzycka等[11]發(fā)現(xiàn)TRAF6可與CD40cyt-N結(jié)構(gòu)域直接結(jié)合，結(jié)合的最小基序?yàn)?31QEPQEINF，當(dāng)基序的缺失或關(guān)鍵氨基酸殘基的突變時(shí)，TRAF6與CD40cyt-N結(jié)構(gòu)域的結(jié)合能力減弱或喪失。

Kobayashi等[12]通過(guò)TRAF6-/-小鼠與骨髓重建TRAF6-/-胎肝細(xì)胞發(fā)現(xiàn)，TRAF6-/-DCs不能上調(diào)MHCⅠ和CD86的表達(dá)及炎性細(xì)胞因子的產(chǎn)生。因此，當(dāng)受到外界微生物或CD40L刺激時(shí)，TRAF6-/-DCs未能上調(diào)細(xì)胞表面MHCII和共刺激分B7-2的表達(dá)或產(chǎn)生炎癥細(xì)胞因子。此外，脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)處理TRAF6-/-DCs無(wú)刺激初始型T細(xì)胞增強(qiáng)的能力。表明TRAF6在DC的成熟、活化、調(diào)控方面起著重要作用，是先天和適應(yīng)性免疫發(fā)展所需的關(guān)鍵過(guò)程。

在B細(xì)胞中，TRAF6可能是CD40信號(hào)下傳的主要介導(dǎo)蛋白，但TRAF6具體作用于CD40信號(hào)途徑中的何種激酶和轉(zhuǎn)錄因子目前尚不清楚。Iwata等[13]發(fā)現(xiàn)，絡(luò)氨酸激酶Syk介導(dǎo)的CD40信號(hào)為T(mén)LR9和TRAF6的優(yōu)化誘導(dǎo)提供了先決條件，在TRAF6的介導(dǎo)下，TLR9激活的信號(hào)在記憶性B細(xì)胞中增殖和傳導(dǎo)。表明，TRAF6可能通過(guò)Syk介導(dǎo)TLR9與CD40的活化以及下游信號(hào)傳導(dǎo)，而Syk的磷酸化增加可導(dǎo)致系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus，SLE)患者外周血B淋巴中TRAF6的表達(dá)上升。

Rowland等[14]發(fā)現(xiàn)TRAF6-/-脾細(xì)胞中，CD40介導(dǎo)的NF-κB信號(hào)通路不能被活化，而不能與CD40結(jié)合的TRAF6突變體能夠恢復(fù)TRAF6-/-脾細(xì)胞的CD40依賴(lài)的JNK活化和CD80的上調(diào)，這就揭示了TRAF6可能通過(guò)與CD40直接和間接結(jié)合調(diào)控NF-κB信號(hào)通路。TRAF6-/-CD40 T細(xì)胞通過(guò)增加TGF-β誘導(dǎo)的Smad2/3活化和下調(diào)IL-12來(lái)調(diào)節(jié)Th17的分化[15]。活化的TRAF6-/-CD8 T細(xì)胞在應(yīng)對(duì)生長(zhǎng)因子缺失時(shí)，表現(xiàn)出AMP激酶活化的缺陷，導(dǎo)致感染后記憶性CD8 T細(xì)胞形成嚴(yán)重缺陷[16]。

Leo等[17]用CD40L處理過(guò)的293T細(xì)胞研究證實(shí)，TRAF2、TRAF3或TRAF6介導(dǎo)了293T細(xì)胞野生型CD40誘導(dǎo)的NF-κB的活化且TRAF6主要通過(guò)CD40cyt-N結(jié)構(gòu)域近膜區(qū)E235A介導(dǎo)活化NF-κB。為進(jìn)一步探索TRAF2和TRAF6在CD40誘導(dǎo)的NF-κB信號(hào)激活途徑中的作用以及CD40信號(hào)是否需要TRAF2的作用。Zhang等[18]利用野生型TRAF2或顯性負(fù)TRAF2，TRAF2-shRNA或TRAF6-shRNA的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染人B細(xì)胞系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，TRAF2可誘導(dǎo)IκB激酶(IKKα)活化，IκBα磷酸化以及p65/RelA的核易位和磷酸化。與此相反，TRAF6能強(qiáng)烈誘導(dǎo)NF-κB的活化和p65、p50、c-Rel的核轉(zhuǎn)位，且TRAF2可與TRAF6競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合CD40，從而限制了CD40的參與誘導(dǎo)NF-κB活化的能力。

3 TRAF6與炎性疾病

Namjou等[19]對(duì)7490例SLE患者和來(lái)自不同血統(tǒng)的6780例對(duì)照受試者的15種TRAF6單核苷酸多態(tài)性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)TRAF6單核苷酸多態(tài)性的位點(diǎn)與類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)和SLE明確相關(guān)，如與RA相關(guān)聯(lián)的單核苷酸多態(tài)性rs540386位點(diǎn)與SLE亦有明顯相關(guān)性，表明TRAF6基因多態(tài)性參與了SLE與RA等自身免疫疾病的發(fā)病。劉曦等[20]發(fā)現(xiàn)TRAF6、IL-6R單核苷酸多態(tài)性與RA易感性相關(guān)，TRAF6 rs5030445位點(diǎn)G等位基因可能為RA的保護(hù)性基因，IL-6R rs11265618位點(diǎn)T等位基因可能為RA易感基因。

Zhu等[21]研究發(fā)現(xiàn)，RA患者滑膜組織中TRAF6的表達(dá)升高與滑膜炎積分、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)積分以及浸潤(rùn)的多種炎癥細(xì)胞數(shù)呈顯著正相關(guān)，提示TRAF6可能通過(guò)介導(dǎo)炎癥反應(yīng)參與了RA滑膜炎癥和關(guān)節(jié)破壞。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，RA滑膜襯里層和襯里下層均見(jiàn)TRAF6表達(dá)，且RA患者滑膜組織TRAF6表達(dá)與血清骨代謝標(biāo)志物I型前膠原氨基端前肽、骨鈣素降解產(chǎn)物呈正相關(guān)(r=0.381，0.345，P<0.05)，提示滑膜TRAF6表達(dá)增加可能與RA代償性骨形成增加有關(guān)，TRAF6可能通過(guò)介導(dǎo)滑膜炎癥參與了RA的骨代謝失衡[22]。

Chen等[23]研究發(fā)現(xiàn)，腦缺血后腦組織中TRAF6表達(dá)明顯升高，TRAF6參與了缺血性卒中的炎癥反應(yīng)。Donners等[24]的研究表明，TRAF6炎癥信號(hào)傳導(dǎo)通路對(duì)動(dòng)脈內(nèi)膜損傷的形成起了明顯作用，TRAF6信號(hào)傳導(dǎo)途徑可能是治療血管性疾病的一種靶點(diǎn)。

為探索TRAF6和促炎因子在人牙周膜成纖維細(xì)胞(human periodontal ligament fibroblasts，HPLFs)中的表達(dá)。Zhang等[25]用Toll樣受體和NOD誘導(dǎo)活化的HPLFs，TRAF6和促炎因子(IL-1β，IL-6和IL-8)的表達(dá)水平顯著上升。徐利東等[26]發(fā)現(xiàn)TRAF6在正常HPLFs中呈陰性表達(dá)，以L(fǎng)PS 0.1、l、10μg/mL刺激HPLFs后，TRAF6蛋白的表達(dá)均顯著上調(diào)，以100μg/mL刺激后，其表達(dá)顯著下降。說(shuō)明TRAF6在LPS引發(fā)的HPLFs炎癥損傷中可能發(fā)揮重要的作用。

Riba等[27]利用基因技術(shù)來(lái)分析不同的小鼠品系和急性過(guò)敏性哮喘模型的基因芯片數(shù)據(jù)集，結(jié)果發(fā)現(xiàn)TRAF6作為重要鏈接蛋白參與哮喘發(fā)病的炎癥機(jī)制。Kondo等[28]發(fā)現(xiàn)肺纖維化時(shí)NF-κB活性增強(qiáng)，可引起持續(xù)的炎癥反應(yīng)。IL-33/ST2L-TRAF6信號(hào)通路的激活可誘導(dǎo)產(chǎn)生IL-4、IL-5、IL-13等炎癥因子啟動(dòng)Th2型免疫應(yīng)答，從而引起氣道高反應(yīng)性及杯狀細(xì)胞增生。當(dāng)小鼠發(fā)生急性胰腺炎時(shí)，TRAF6在肺組織和胰腺組織上的表達(dá)增高，且認(rèn)為T(mén)LR4-TRAF6通路參與了小鼠急性胰腺炎和與胰腺炎相關(guān)的肺組織損害。

Wu等[29]發(fā)現(xiàn)正常人群外周血單個(gè)核細(xì)胞和血漿中通常不表達(dá)或低表達(dá)TRAF6，而在炎癥性腸病患者外周血中單個(gè)核細(xì)胞和血漿TRAF6水平增高，提示TRAF6參與了炎癥性腸病的發(fā)病過(guò)程，但血漿中TRAF6的水平和內(nèi)鏡下疾病活動(dòng)程度無(wú)關(guān)，不能反映內(nèi)鏡下疾病的活動(dòng)程度。Shen等[30]認(rèn)為T(mén)RAF4和TRAF6在IBD中均有過(guò)度表達(dá)，但所起不同的作用，TRAF4可以是UC內(nèi)窺鏡疾病活性的指標(biāo)，而TRAF6預(yù)活化在非炎癥結(jié)腸段被檢測(cè)。

有研究發(fā)現(xiàn)高糖環(huán)境可上調(diào)TLR4、TRAF6的表達(dá)，TRAF6 rs16928973等位基因與糖尿病腎病之間有明顯相關(guān)，TRAF6的TA單體型與DN呈負(fù)相關(guān)，提示TLR-4/TRAF6信號(hào)通路可能參與糖尿病大鼠腎臟病變的發(fā)病過(guò)程[31]。Habibi等[32]的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明糖尿病大鼠海馬組織中IRAK1、NF-κB、TRAF6基因的表達(dá)明顯增加，miR-146a的表達(dá)顯著減少，揭示TRAF6在促進(jìn)糖尿病大鼠海馬組織NF-κB活性及細(xì)胞凋中起了重要作用。

4 TRAF6的調(diào)控與臨床應(yīng)用

TRAF6通過(guò)多種信號(hào)參與調(diào)節(jié)機(jī)體多項(xiàng)固有及適應(yīng)性免疫炎癥反應(yīng)激活NF-κB通路，與多種系統(tǒng)性炎癥或自身免疫性疾病相關(guān)，因此臨床或?qū)嵺`中可通過(guò)沉默或拮抗抑制TRAF6的表達(dá)來(lái)調(diào)控達(dá)到治療相關(guān)疾病的目的。

miRNA是一類(lèi)由21-23個(gè)堿基組成的內(nèi)源性非編碼RNA，TRAF6是miR-146a的靶點(diǎn)之一。有研究發(fā)現(xiàn)，自身免疫性心肌炎大鼠心臟組織中miR-146a表達(dá)上升、NF-κB活性顯著增強(qiáng)，當(dāng)給予miR-146a agomirs(人工合成類(lèi)似物)干預(yù)后，自身免疫性心肌炎大鼠心臟炎癥減輕，心功能得以改善，其作用機(jī)制可能是通過(guò)抑制其靶點(diǎn)TRAF6，進(jìn)而阻斷NF-κB經(jīng)典信號(hào)傳導(dǎo)通路，降低NF-κB活性來(lái)實(shí)現(xiàn)的[33]。最新研究亦發(fā)現(xiàn)miR-146a可能通過(guò)TRAF6介導(dǎo)的NF-κB信號(hào)通路在骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞增殖和凋亡中起間接但至關(guān)重要的作用[38]。

何孝亮等[34]發(fā)現(xiàn)，強(qiáng)直性脊柱炎(ankylosing spondylitis，AS)患者外周血中TRAF6表達(dá)降低，而miR-146a、IRAK1表達(dá)上調(diào)且miR-146a與NF-κB下游信號(hào)分子TNF-α、IL-1β、IL-6等細(xì)胞因子以及病情活動(dòng)度相關(guān)，提示miR-146a可能通過(guò)抑制TRAF6減少促炎因子的產(chǎn)生參與AS的疾病調(diào)控。Hajivalili等[39]的數(shù)據(jù)顯示，G2013可通過(guò)減少下游信號(hào)分子IRAK1和TRAF6來(lái)調(diào)節(jié)炎癥過(guò)程中的TLR4信號(hào)通路，而不改變miR-146a的表達(dá)。Chen等[35]研究發(fā)現(xiàn)，siRNA可與TRAF6的結(jié)構(gòu)域結(jié)合抑制TRAF6的表達(dá)，從而能夠阻斷TRAF6的泛素化，最終抑制由TRAF6介導(dǎo)的炎癥通路所致的NF-κB的活化。

TRAF6泛素化是TRAF6-NF-κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中的關(guān)鍵步驟，因此抑制TRAF6泛素化或去泛素化對(duì)NF-κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)控也至關(guān)重要。鋅指蛋白A20主要通過(guò)阻斷K63多聚泛素鏈來(lái)抑制TRAF6信號(hào)傳導(dǎo)[36]。另外，A20也能通過(guò)阻斷TRAF6與E2酶Ubc13及UbcH5的結(jié)合來(lái)減弱TRAF6活性或催化TRAF6的K48泛素化，使其降解，導(dǎo)致信號(hào)鏈完全終止。

缺失環(huán)指/鋅指結(jié)構(gòu)的TRAF6突變體常被用作研究TRAF6分子功能的一類(lèi)負(fù)性抑制劑。Walsh等[40]為獨(dú)立評(píng)估TRAF6的E3連接酶和泛素底物的功能，分別運(yùn)用RING結(jié)構(gòu)域和完整的賴(lài)氨酸缺陷型TRAF6，發(fā)現(xiàn)盡管TRAF6 RING結(jié)構(gòu)域是激活TAK1所必需的，但TRAF6和TAK1-TAB1-TAB2復(fù)合物之間的相互作用是不必要的；而賴(lài)氨酸缺陷型TRAF6與TAK1-TAB1-TAB2復(fù)合物相互作用可激活TAK1，NF-kappaB以及和AP-1。Lamothe等[37]通過(guò)鋅指結(jié)構(gòu)域模序的點(diǎn)突變或缺失TRAF6缺陷小鼠模型重建發(fā)現(xiàn)，雖然TRAF6分子鋅指結(jié)構(gòu)域2-4模序在IL-1和LPS介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)中激活I(lǐng)KK，p38和JNK信號(hào)并非必需，但這些數(shù)據(jù)建立了信號(hào)級(jí)聯(lián)，其中受調(diào)節(jié)的位點(diǎn)特異性L(fǎng)ys-63連鎖的TRAF6自身泛素化是IKK的關(guān)鍵上游介體。

基因敲除和基因嵌入技術(shù)也是研究TRAF6基因生物學(xué)功能常用的方法。Chatzigeorgiou等[10]的研究發(fā)現(xiàn)，MHCII(+)細(xì)胞中的CD40-TRAF2/3/5信號(hào)通路保護(hù)免于與肥胖相關(guān)的AT炎癥和代謝并發(fā)癥，而MHCII(+)細(xì)胞中的CD40-TRAF6相互作用加重這些并發(fā)癥。

5 結(jié) 語(yǔ)

TRAF6是細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)通路上的一種重要接頭蛋白，其獨(dú)特的結(jié)構(gòu)使其可直接和CD40、IRAK、RANK結(jié)合激活NF-κB炎癥通路，在炎癥、腫瘤、自身免疫性疾病等領(lǐng)域具有廣泛的臨床研究?jī)r(jià)值，相關(guān)的新藥研發(fā)也在迅猛發(fā)展。然NF-κB信號(hào)通路極其復(fù)雜，參與的蛋白分子和調(diào)控因素較多，TRAF6在其中發(fā)揮的具體作用及與其他信號(hào)分子或成員間的相互作用的具體方式尚未完全清楚，需進(jìn)一步深入研究。

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(本文編輯：劉玉巧)

南京軍區(qū)南京總醫(yī)院科研基金(2016040)

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蔡 輝，E-mail：zqynihao@163.com

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10.3969/j.issn.1672-271X.2017.04.014

2017-02-28；

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