HR—HPV DNA PCR和TCT聯(lián)合檢測在宮頸癌前病變診斷中的應(yīng)用價值

張鐵英

【摘要】 目的 研究宮頸癌前病變患者應(yīng)用高危型人乳頭瘤病毒（HR-HPV）DNA聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）與液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查（TCT）聯(lián)合檢測的診斷價值。方法 474例行宮頸癌前病變篩查的患者， 均進(jìn)行HR-HPV DNA PCR與TCT檢測， 觀察診斷價值。結(jié)果 474例患者中， 有270例患者TCT結(jié)果存在異常， 而通過活檢顯示存在72例異常者， TCT檢測符合率為26.67%（72/270）。有130例（27.43%）TCT陽性并HPV陽性者患者， 其中鱗狀細(xì)胞癌、高及低度鱗狀上皮內(nèi)病變、非典型鱗狀上皮細(xì)胞HPV、低危型HPV、HR-HPV感染率對比， 差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義 （P<0.05）。結(jié)論 宮頸癌前病變患者應(yīng)用HR-HPV DNA PCR與TCT聯(lián)合檢測的診斷價值及推廣價值較高。

【關(guān)鍵詞】 宮頸癌前病變；液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查；聚合酶鏈反應(yīng)；高危型人乳頭瘤病毒

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.02.030

宮頸癌屬于婦科一種常見腫瘤， 具有較高患病率和病死率， 對患者生命安全造成嚴(yán)重威脅， 臨床對癌前病變和宮頸癌進(jìn)行早期篩查與采取有效防治措施對生存率提高發(fā)揮著十分重要作用[1-4]。本文分析本院近1年對宮頸癌前病變進(jìn)行篩查的474例患者臨床資料， 以提高疾病診斷準(zhǔn)確率， 盡早實施有效防治舉措， 從而促進(jìn)患者生存率提高， 現(xiàn)將相關(guān)研究內(nèi)容作如下闡述。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 分析本院2015年11月～2016年11月對宮頸癌前病變進(jìn)行篩查的474例患者臨床資料， 年齡21～66歲， 平均年齡（42.30±7.92）歲， 孕次1～3次， 平均孕次（1.86±0.39）次，

受教育程度：初中至高中159例， 大專至本科175例， 本科以上140例。本文方案均得到醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)， 對象均自愿簽署同意書。

1. 2 儀器與檢測方法

1. 2. 1 TCT 將患者宮頸表面的黏液擦除， 把宮頸細(xì)胞刷置入距離宮頸管內(nèi)約1 cm位置， 進(jìn)行順時針旋轉(zhuǎn)， 圈數(shù)為5圈， 將其取出置于細(xì)胞保存液當(dāng)中， 針對瓶中收集的細(xì)胞通過Prep 2000系統(tǒng)予以薄片涂片染色， 待TCT制片之后由經(jīng)驗豐富醫(yī)師進(jìn)行閱片。

1. 2. 2 HR-HPV DNA PCR 選擇由蘇州天隆生物科技有限公司提供的核酸擴(kuò)增儀檢測系統(tǒng)對PCR進(jìn)行擴(kuò)增和顯色等， 用原裝的配套試劑HR-HPV核酸定量加以檢測， 采取PCR熒光分析方法， 且將宮頸刷置患者宮頸口， 轉(zhuǎn)4圈， 將宮頸刷置于備有1 ml洗脫液的洗脫管中， 置零下20℃冰箱待檢或者立即送檢。檢測時把宮頸刷于洗脫管中漂洗， 將洗脫液完全轉(zhuǎn)移至1.50 ml微量離心管內(nèi)， 進(jìn)行離心， 時間維持10 min， 將上清液去除， 對管底細(xì)胞快予以保留， 且加50 μl裂解液沉淀， 用100℃水浴加熱10 min， 進(jìn)行離心， 時間為10 min， 將上清液保留待用。取1 μl DNA抽提溶液， 置HPV PCR的擴(kuò)增體系， 嚴(yán)格遵照擴(kuò)增程序予以擴(kuò)增。

1. 2. 3 病理學(xué) 針對TCT與HR-HPV DNA PCR檢測結(jié)果均通過宮頸錐切下或者借助電子陰道鏡實施病理性活檢， 組織病理學(xué)子宮頸上皮內(nèi)新生病灶分級依據(jù)Riehart標(biāo)準(zhǔn)[5]對診斷結(jié)果進(jìn)行評定。

1. 3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS21.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 TCT檢測結(jié)果 宮頸癌前病變篩查的474例患者中， 有270例患者TCT結(jié)果存在異常， 而通過活檢顯示存在72例異常者， TCT檢測符合率為26.67%（72/270）。

2. 2 宮頸癌前病變不同類型HPV感染率 宮頸癌前病變篩查的474例患者中， 有130例（27.43%）TCT陽性并HPV陽性者患者， 其中鱗狀細(xì)胞癌、高及低度鱗狀上皮內(nèi)病變、非典型鱗狀上皮細(xì)胞HPV、低危型HPV、HR-HPV感染率對比， 差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義 （P<0.05）。見表1。

2. 3 TCT與HR-HPV DNA PCR單用和聯(lián)合檢測特異度、敏感度和陽性預(yù)測值 通過活檢確診子宮頸上皮內(nèi)新生病灶分級Ⅱ級以上患者36例， TCT 30例陽性， HR-HPV 33例陽性， 且HR-HPV DNA PCR與TCT聯(lián)合檢測敏感度100.00%和陽性預(yù)測值27.69%均較單純TCT、HR-HPV高（P<0.05）。

3 討論

臨床相關(guān)研究表明：系統(tǒng)性宮頸篩查可有效降低疾病患病率， 對患者生存率提高至關(guān)重要， 臨床需引起臨床醫(yī)師和患者重視， 并積極尋求可靠檢測方法[6-12]。

本研究結(jié)果顯示：宮頸癌前病變篩查的474例患者中， 有270例患者TCT結(jié)果存在異常， 而通過活檢顯示存在72例異常者， TCT檢測符合率為26.67%（72/270）。表明臨床對宮頸癌前病變篩查者應(yīng)用TCT檢測的異常檢測符合率較低， 易出現(xiàn)漏診， 單一檢測價值不高。宮頸癌前病變篩查的474例患者中， 有130例（27.43%）TCT陽性并HPV陽性者患者， 其中鱗狀細(xì)胞癌、高及低度鱗狀上皮內(nèi)病變、非典型鱗狀上皮細(xì)胞HPV、低危型HPV、HR-HPV感染率對比， 差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義 （P<0.05） 。鱗狀細(xì)胞癌與高、低度鱗狀上皮內(nèi)病變及非典型鱗狀上皮細(xì)胞HPV、低危型HPV、HR-HPV感染率顯示高度差異， 其中非典型鱗狀上皮細(xì)胞HPV感染幾率60.00%均較鱗狀細(xì)胞癌3.08%與高、低度鱗狀上皮內(nèi)病變6.15%、30.77%高， HR-HPV感染率18.18均較鱗狀細(xì)胞癌100.00%與高度鱗狀上皮內(nèi)病變71.43%低， 且HR-HPV DNA PCR與TCT聯(lián)合檢測敏感度100.00%和陽性預(yù)測值27.69%均較單純TCT、HR-HPV高， 和鄧弘[5]研究結(jié)果具有較高一致性。提示：伴隨宮頸癌前病變的級別升高， HR-HPV感染率也不斷升高， HR-HPV感染和宮頸病變嚴(yán)重度呈現(xiàn)正相關(guān)性， 且感染HPV危險類型和細(xì)胞學(xué)分級存在一致性， 高危型患者細(xì)胞分化較差， 低危型患者細(xì)胞分化較好[13-20]。

總之， 臨床對宮頸癌前病變者應(yīng)用HR-HPV DNA PCR與TCT聯(lián)合檢測具有較高價值， 屬于宮頸病變篩查一種可靠方法， 有利于盡早發(fā)現(xiàn)宮頸存在的異常細(xì)胞， 為疾病防治舉措開展提供重要依據(jù)， 從而促進(jìn)患者病情改善和生存率提高， 臨床應(yīng)用及推廣價值較高。

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[收稿日期：2017-01-09]