如何利用唾液對(duì)豬藍(lán)耳病進(jìn)行監(jiān)測(cè)與馴化

黎先偉 編譯 By Piotr Biernacki

如何利用唾液對(duì)豬藍(lán)耳病進(jìn)行監(jiān)測(cè)與馴化

黎先偉 編譯 By Piotr Biernacki

到目前為止，豬繁殖與呼吸綜合征（又稱豬藍(lán)耳病，PRRS）仍是全球養(yǎng)豬業(yè)中的一種頭號(hào)疾病，嚴(yán)重阻礙仔豬和生長(zhǎng)育肥豬的生長(zhǎng)性能，同時(shí)嚴(yán)重影響種豬群繁殖性能的穩(wěn)定性，給養(yǎng)豬場(chǎng)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。雖然大量研究已對(duì)豬藍(lán)耳?。≒RRS）的流行特定和發(fā)病機(jī)理有了一定的認(rèn)識(shí)，但是對(duì)于全球的眾多養(yǎng)豬場(chǎng)來說，要想成功的控制豬藍(lán)耳病（PRRS）仍然面臨著嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。通常來說，豬藍(lán)耳?。≒RRS）的有效控制需要把完善的生產(chǎn)管理措施（如適當(dāng)?shù)纳锇踩胧?、全進(jìn)全出和單向豬群流動(dòng)）和疫苗接種方案相結(jié)合。豬群感染或接種豬藍(lán)耳病活病毒（弱毒）并產(chǎn)生高水平的抗體后，對(duì)日后再感染同源性高的豬高致病性藍(lán)耳病病毒具有較好保護(hù)效果。但是，由于豬藍(lán)耳病病毒（PRRSv）是單鏈的RNA病毒，其要比其他DNA病毒（如豬偽狂犬病毒）更容易發(fā)生重組變異，因此，疫苗毒株往往與田間分離野毒株，在同源性方面存在一定的差異。豬藍(lán)耳病病毒（PRRSv）的這種特性使得一些養(yǎng)豬場(chǎng)在接種疫苗后仍不能很好的控制豬藍(lán)耳病（PRRS），這種情況很大程度上歸因于豬場(chǎng)并沒針對(duì)自身的實(shí)際情況選擇合適的（安全性好、同源性高的）豬藍(lán)耳病疫苗。目前，市面上豬藍(lán)耳病活病毒疫苗的毒株多達(dá)7種，這給養(yǎng)豬戶在疫苗的選擇上帶來很大的煩惱，以至于很多豬場(chǎng)利用藥物來替代接種疫苗，而這往往更不能達(dá)到防控豬藍(lán)耳?。≒RRS）的預(yù)期效果。另一方面，定期的對(duì)豬群進(jìn)行病原（豬藍(lán)耳病病毒）檢測(cè)可清楚的掌握豬場(chǎng)內(nèi)病原的實(shí)際狀況，了解場(chǎng)內(nèi)豬藍(lán)耳病的主要流行毒株及變異程度，同時(shí)有助于我們選擇合適的疫苗來更好地防控豬藍(lán)耳病。

本文主要闡述如何使用唾液來在后備母豬的馴化過程中進(jìn)行豬藍(lán)耳病（PRRS）的控制。

自從2015年下半年以來，全國的豬價(jià)行情一直維持在較高的水平，養(yǎng)豬人迎來了前所未有的春天。在這波行情下，一些豬場(chǎng)會(huì)選擇擴(kuò)大自家的飼養(yǎng)規(guī)模，從生物安全和疫病防控來說，通過自繁自養(yǎng)的方式來逐步擴(kuò)增母豬群的數(shù)量是最為理想的，不過這需要耗費(fèi)較長(zhǎng)的時(shí)間。因此，很多人會(huì)選擇從一些知名的種豬場(chǎng)來選購后備母豬來快速擴(kuò)增自家豬場(chǎng)的飼養(yǎng)規(guī)模。眾所周知，豬場(chǎng)在引入后備母豬之前有兩個(gè)重要的步驟是必不可少的，即后備母豬的隔離和馴化。隔離的主要目的是為了防止外來疫病通過新引入的后備母豬感染原有的經(jīng)產(chǎn)母豬。一般建議隔離的時(shí)間應(yīng)達(dá)到20～45 d。而后備母豬馴化則是通過一定時(shí)間讓后備母豬熟悉本場(chǎng)經(jīng)產(chǎn)母豬的環(huán)境，包括內(nèi)環(huán)境和外環(huán)境。一般普遍認(rèn)為，后備母豬馴化的時(shí)間應(yīng)至少持續(xù)60～120 d。在這段時(shí)間里，我們可以讓這些動(dòng)物接觸感染豬場(chǎng)內(nèi)已有的病毒（如藍(lán)耳病）和其他病原菌。要想打破經(jīng)產(chǎn)母豬的病毒循環(huán)，首先第一步是要使用已接觸藍(lán)耳病病毒（PRRSv，疫苗毒或弱毒）且早已產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)免疫力的動(dòng)物來替代原有的動(dòng)物。這主要的目標(biāo)是讓所有新引入的動(dòng)物感染豬場(chǎng)內(nèi)特定的藍(lán)耳病病毒（PRRSv），值得注意的是確保后備母豬在混入經(jīng)產(chǎn)母豬之前已產(chǎn)生足夠的抗體保護(hù)水平。因此，針對(duì)抗原和抗體的檢測(cè)均顯得尤為重要。

據(jù)大量的研究證實(shí)，豬藍(lán)耳病病毒（PRRSv）可在多種不同類型的樣品中檢測(cè)到，包括肺臟、扁桃體、血液、精液、尿液、糞便、常乳、初乳和唾液等。在國外一些國家，部分養(yǎng)豬場(chǎng)會(huì)選擇讓后備母豬人工感染豬藍(lán)耳病病毒（PRRSv），即讓后備母豬直接接觸PRRSv陽性豬的排泄物，或反飼。值得注意的是，豬藍(lán)耳病病毒（PRRSv）的排毒時(shí)間可長(zhǎng)達(dá)99天。因此，采取這種人工感染措施的前提是，必須清楚了解自家豬群的實(shí)際病原感染狀態(tài)，真正做到針對(duì)性的馴化過程。

圖1 唾液收集的工具一次性手套、棉繩和連有塑料袋的膠管

在一個(gè)PRRSv陽性群體的情況下，采用唾液收集的方法可能會(huì)增加病毒（PRRSv）從經(jīng)產(chǎn)母豬傳遞給后備母豬的可能。該方法的基礎(chǔ)是從處于病毒血癥的豬群中收集唾液。為了確定病毒（PRRSv）的類型，重要的是將收集的唾液進(jìn)行分子生物學(xué)（PCR）檢測(cè)，以鑒別豬場(chǎng)內(nèi)主要流行的病毒（PRRSv）毒株。為了達(dá)到這個(gè)目的，我們可以采用血清或唾液樣本從不同年齡段具有代表性的幾欄豬中進(jìn)行取樣。檢測(cè)結(jié)果將表明，豬藍(lán)耳病病毒（PRRSv）在哪個(gè)年齡段的豬群中較為活躍（不穩(wěn)定）。當(dāng)確定具有病毒血癥的豬群后，我們可以從特定年齡段的幾欄豬群中收集唾液樣本來進(jìn)行下一步的馴化工作。

對(duì)于唾液的收集，我們可以使用一條棉繩，直徑1.5～2 cm，將其懸掛在遠(yuǎn)離飲水器的位置，以免水浸泡繩索影響唾液收集的效果。通常來說，一條棉繩在欄舍內(nèi)懸掛20～30 min就足夠讓一欄（約20頭左右）內(nèi)的每個(gè)動(dòng)物啃咬棉繩。而對(duì)于更大的動(dòng)物群體，則需要適當(dāng)懸掛更多的棉繩。這將增加欄舍內(nèi)虛弱和發(fā)病動(dòng)物啃咬棉繩的機(jī)會(huì)。越多的動(dòng)物啃咬到棉繩，病毒傳播的機(jī)會(huì)就越大。20～30 min后，將棉繩收集起來并及時(shí)懸掛在后備母豬的欄舍內(nèi)。動(dòng)物都應(yīng)該被這些新奇且具有特殊氣味的物體所吸引。我們應(yīng)該可以觀察到，是否大多數(shù)后備母豬都有機(jī)會(huì)啃咬到棉繩。在某些情況下，即便個(gè)別豬會(huì)對(duì)這些棉繩不感興趣，但是在短時(shí)間內(nèi)同圈的其他豬也會(huì)水平感染這些豬，讓全部動(dòng)物都感染上特定的豬藍(lán)耳病病毒（PRRSv）。最理想的狀態(tài)是讓疫苗毒株成為豬場(chǎng)的優(yōu)勢(shì)毒株，而野毒株則控制在可控的范圍之內(nèi)。

圖2 斷奶仔豬在啃咬棉繩

圖3 后備母豬對(duì)這新奇的物體很有興趣

要想驗(yàn)證這種方法是否成功，我們建議在后備母豬馴化結(jié)束后進(jìn)行血清學(xué)的檢測(cè)，并可通過收集唾液樣本進(jìn)行PCR檢測(cè)，以確保動(dòng)物不再排泄與本場(chǎng)不同的野毒株。要明白，新引入的后備母豬仍然繼續(xù)排泄與本場(chǎng)不一樣的野毒株，整個(gè)豬群可能會(huì)使陷入不穩(wěn)定的狀態(tài)，造成更為嚴(yán)重的損害。如果對(duì)新引入后備母豬的病毒水平監(jiān)測(cè)失敗的話，那么之前所做的隔離馴化工作將功虧一簣。

總的來說，將新引入后備母豬針對(duì)豬藍(lán)耳病病毒（PRRSv）進(jìn)行一致的馴化，可顯著的保證種豬群臨床癥狀的穩(wěn)定，生產(chǎn)參數(shù)的優(yōu)化，并可獲得高健康水平的斷奶仔豬。因此，對(duì)于引入后備母豬來說，完善的管理措施以及正確的免疫方案和檢測(cè)手段將是控制豬藍(lán)耳病病毒（PRRSv）的。與此同時(shí)，基于其方便性和實(shí)用性，唾液樣本將會(huì)是日后檢測(cè)各種病原（包括豬藍(lán)耳病病毒）的一種有力工具。