PCR檢驗(yàn)法用于細(xì)菌檢驗(yàn)的效果評(píng)價(jià)研究

楊東興

（青海省互助縣疾病預(yù)防控制中心，青海 海東 810500）

陰道炎是女性人群中常發(fā)的一類感染性疾病，陰道內(nèi)的各類細(xì)菌相互制約、相互作用，一起維持著動(dòng)態(tài)平衡，一旦失去平衡，就會(huì)導(dǎo)致陰道疾病[1]。陰道炎會(huì)影響患者的健康，所以必須做好準(zhǔn)確及時(shí)的檢查，才能及時(shí)給予患者針對(duì)性的治療。本研究主要分析PCR檢驗(yàn)法用于細(xì)菌檢驗(yàn)中的效果，現(xiàn)對(duì)研究結(jié)果進(jìn)行整理，在下文進(jìn)行詳細(xì)報(bào)道。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月～2016年5月我院收治的陰道炎患者80例，隨機(jī)按照平均分配原則分為觀察組和對(duì)照組。其中觀察組40例，年齡21歲～48歲，平均年齡（38.2±4.2）歲，平均病程（9.8±2.3）月。對(duì)照組40例，年齡22歲～49歲，平均年齡（39.1±4.4）歲，平均病程（9.9±2.5）月。所有患者均存在白帶分泌物增多、陰道異味、外陰瘙癢等臨床表現(xiàn)；均排除妊娠期、月經(jīng)期患者，參與研究前一個(gè)月有陰道藥物使用史，參與研究前三天有過(guò)夫妻生活。2組各項(xiàng)基本資料比較，無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。

1.2 方法

采集陰道分泌物：選擇醫(yī)用無(wú)菌棉簽深入患者陰道后穹窿位置，輕輕旋轉(zhuǎn)是棉球上粘上陰道分泌物，取出棉簽置于2 mL無(wú)菌生理鹽水中保存。檢測(cè)方法：對(duì)照組選擇細(xì)菌培養(yǎng)法檢測(cè)，將陰道分泌物標(biāo)本與陰道瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行接種，截至二置于二氧化碳恒溫箱進(jìn)行持續(xù)2天時(shí)間的培養(yǎng)，等到培養(yǎng)基有菌落出現(xiàn)后，選取露滴狀、光滑、灰色、半透明樣的菌群實(shí)施生化鑒定。觀察組選擇PCR法檢測(cè)，將溶有陰道分泌物的生理鹽水實(shí)施離心處理，轉(zhuǎn)速設(shè)置為每分鐘1200r，持續(xù)離心15分鐘，選擇離心后的上清液，將堿性裂解液加入上清液中。然后放入溫度為60℃的水浴中進(jìn)行15分鐘的加熱，以每分鐘1200r的轉(zhuǎn)速進(jìn)行持續(xù)10分鐘的離心。結(jié)束后再次選取上清液完成DNA模版制作，置于PCR儀中實(shí)施循環(huán)。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察兩組檢測(cè)結(jié)果中的各類菌落數(shù)，比較兩組檢測(cè)陽(yáng)性率，陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)：邊緣整齊，有1 mm及以下的條帶；條帶與期望的堿基符合，如果不處于這個(gè)范圍內(nèi)，視作人工假象，不給予計(jì)數(shù)；背景未出現(xiàn)引物二聚體以及SMEARS。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用Epidata3.0軟件建立數(shù)據(jù)庫(kù)，將數(shù)據(jù)進(jìn)行錄入，然后再將數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為SPSS 16.0數(shù)據(jù)庫(kù)，以“（n/%），x2”代表文中相關(guān)計(jì)數(shù)資料，以“t，（±s）”檢驗(yàn)文中相關(guān)計(jì)量資料，對(duì)照兩組相關(guān)信息，若結(jié)果表現(xiàn)出顯著性的特征，則表明（P＜0.05）。

2 結(jié) 果

觀察組利用PCR法檢出陽(yáng)性37例，其中5例為腸球菌，占13.51%，23例為加特納菌，占62.16%，9例為棒狀桿菌，占24.32%，另外3例結(jié)果為陰性，占7.5%，觀察組PCR法檢測(cè)陽(yáng)性率為92.5%；對(duì)照組利用細(xì)菌培養(yǎng)法檢出陽(yáng)性28例，其中4例為腸球菌，占14.29%，18例為加特納菌，占64.29%，6例為棒狀桿菌，占21.43%，另外12例結(jié)果為陰性，占30%，觀察組PCR法檢測(cè)陽(yáng)性率為70%。觀察組檢出陽(yáng)性率結(jié)果明顯高于對(duì)照組，差異比較存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討 論

由于當(dāng)前生活方式的改變，生活節(jié)奏不斷加快，人們生活中存在越來(lái)越多的不良習(xí)慣，對(duì)于女性人群而言，不良生活習(xí)慣導(dǎo)致了更高的婦科疾病發(fā)生率[2]。陰道炎是婦科疾病中發(fā)生率較高的一種，由于陰道炎缺乏特異性臨床癥狀，病情進(jìn)展不明顯，所以很容易被女性忽略，沒(méi)有及時(shí)就診。隨著病情逐漸的嚴(yán)重，患者可能出現(xiàn)腹部以及盆腔感染，嚴(yán)重的情況下可能導(dǎo)致不孕或者出現(xiàn)異位妊娠的情況[3]。所以，臨床對(duì)于疑似陰道炎的患者，必須盡快做好診斷，以便能夠及時(shí)采取針對(duì)性治療[4]。臨床對(duì)于陰道炎的診斷一般都是檢驗(yàn)陰道分泌物，白帶是檢驗(yàn)中最常用到的標(biāo)本，研究發(fā)現(xiàn)，白帶能夠在一定程度上對(duì)女性的健康情況進(jìn)行反映，所以臨床建議，女性如果發(fā)現(xiàn)自己白帶分泌物增多或者出現(xiàn)其他異常，應(yīng)該盡快到醫(yī)院就診進(jìn)行進(jìn)一步檢查，避免潛在的疾病進(jìn)一步惡化，影響健康。

菌群平衡被打亂是導(dǎo)致陰道炎的主要原因，一般機(jī)體處于健康狀態(tài)下，陰道中的各類菌群形成相互的制約，分泌出的各類物質(zhì)使得陰道環(huán)境維持有效平衡，如果這個(gè)平衡被破壞，大量桿菌出現(xiàn)死亡，就會(huì)導(dǎo)致大量繁殖致病菌，從而使得陰道上皮細(xì)胞出現(xiàn)死亡，原本存在的保護(hù)屏障失去[5]。檢驗(yàn)菌群是陰道炎診斷的重要方法，PCR檢驗(yàn)法以及細(xì)菌培養(yǎng)法是臨床應(yīng)用較廣的兩種方法。其中PCR檢驗(yàn)法也就是聚合酶鏈反應(yīng)檢驗(yàn)法，屬于新型檢驗(yàn)技術(shù)的一種，實(shí)際上是通過(guò)熒光定量進(jìn)行檢測(cè)，其融合了PCR的敏感性及DNA雜交特異性特點(diǎn)，其原理是在機(jī)體外面通過(guò)體外酶復(fù)制細(xì)菌DNA，操作簡(jiǎn)便，能夠快速得出結(jié)果，具有較高的特異性以及靈敏度[6]。細(xì)菌培養(yǎng)法以往一直是診斷陰道菌群的標(biāo)準(zhǔn)方法，但是隨著研究的深入，逐漸發(fā)現(xiàn)了該方法在檢驗(yàn)中存在的一些問(wèn)題，該方法進(jìn)行檢驗(yàn)需要花費(fèi)較長(zhǎng)時(shí)間，一般最少需要花費(fèi)超過(guò)2天的時(shí)間，而且，該方法對(duì)于檢驗(yàn)的環(huán)境要求以及設(shè)備要求都很高，另外，在細(xì)菌培養(yǎng)期間必須保證無(wú)菌操作，一旦有細(xì)菌侵入，就容易出現(xiàn)染菌，影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性[7]。最重要的是，細(xì)菌培養(yǎng)法用于細(xì)菌檢驗(yàn)中沒(méi)有較高的陽(yáng)性率，患者必須接受多次檢驗(yàn)才能保證診斷的準(zhǔn)確性，難以保證患者的依從性。

本研究對(duì)陰道炎患者分別利用細(xì)菌培養(yǎng)法以及PCR檢驗(yàn)法進(jìn)行細(xì)菌檢驗(yàn)，比較兩組檢驗(yàn)結(jié)果，觀察組檢出陽(yáng)性率為92.5%，明顯高于對(duì)照組70%；觀察組陰性檢出率為7.5%，明顯低于對(duì)照組30%，兩組結(jié)果差異比較均明顯（P＜0.05）。

綜上所述，PCR檢驗(yàn)法用于細(xì)菌檢驗(yàn)中的效果要優(yōu)于細(xì)菌培養(yǎng)法，更能夠保證檢驗(yàn)準(zhǔn)確性，減少誤診，值得臨床推廣應(yīng)用。

[1]趙波濤.陰道細(xì)菌檢驗(yàn)應(yīng)用PCR檢驗(yàn)法和細(xì)菌培養(yǎng)法的價(jià)值分析[J].中國(guó)保健營(yíng)養(yǎng),2015,25(17):401-402.

[2]趙建萍.對(duì)比分析PCR檢驗(yàn)法和細(xì)菌培養(yǎng)法用于陰道細(xì)菌檢驗(yàn)的效果[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥,2015,10(15):85-86.

[3]王傳海.臨床細(xì)菌檢驗(yàn)中PCR檢驗(yàn)法的準(zhǔn)確性分析[J].中國(guó)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)管理,2016,7(6):150-152.

[4]趙彥叢.PCR檢驗(yàn)法和細(xì)菌培養(yǎng)法在陰道細(xì)菌檢驗(yàn)中的應(yīng)用價(jià)值[J].世界臨床醫(yī)學(xué),2016,10(9):248.

[5]常新劍,裴秋玲.淺析PCR檢驗(yàn)法在陰道炎患者細(xì)菌檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果[J].當(dāng)代醫(yī)藥論叢,2015,13(19):44-45.

[6]成樹(shù)芳.PCR檢驗(yàn)法和細(xì)菌培養(yǎng)法用于陰道細(xì)菌檢驗(yàn)的效果[J].中國(guó)處方藥,2016,14(2):107-107.

[7]邱可清,沈?qū)W群,高麗華,等.分析陰道細(xì)菌檢驗(yàn)應(yīng)用PCR檢驗(yàn)法和細(xì)菌培養(yǎng)法的臨床應(yīng)用價(jià)值[J].中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用,2015,9(12):74-75.