淺述高脂飼料構(gòu)建大鼠肥胖模型過程中需注意問題

胡孝躍，楊 碩*，孫 澤，黃 敏，張禮憲

（1.貴陽中醫(yī)學(xué)院，貴州 貴陽 550002；2.貴陽中醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院，貴州 貴陽 550002）

?實驗研究?

淺述高脂飼料構(gòu)建大鼠肥胖模型過程中需注意問題

胡孝躍1，楊 碩1*，孫 澤1，黃 敏1，張禮憲2

（1.貴陽中醫(yī)學(xué)院，貴州 貴陽 550002；2.貴陽中醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院，貴州 貴陽 550002）

目的 高脂飼料誘導(dǎo)大鼠肥胖過程中容易被忽視問題的總結(jié)。方法 ①將SD大鼠20只，分籠喂養(yǎng)。②分組：20只SD大鼠按雌雄隨機分為：普通飼料對照組（A、C），高脂飼料組（B、D），高脂飼料喂養(yǎng)5周后將體重超過普通飼料喂養(yǎng)大鼠平均體重20%以上的作為肥胖模型大鼠。結(jié)果 A、C兩組體重較B、D兩組重。結(jié)論 在高脂飼料誘導(dǎo)大鼠肥胖造模過程中，高脂飼料配方的選擇與保存方法直接影響著造模的結(jié)果。

肥胖模型；大鼠；高脂飼料

目前國內(nèi)外研究顯示單純性肥胖患者主要是與過多的攝入高能量、高脂肪的食物密切相關(guān)，因此，利用高脂、高能飲食誘導(dǎo)的單純性肥胖大鼠模型是研究人類肥胖的首選模型，而單純性肥胖大鼠模型造模成功率主要取決于高脂飼料的配方和制作[1]。本研究通過目前國內(nèi)外研究中主要選用自配的高脂飼料構(gòu)建成年SD大鼠單純性肥胖模型過程中總結(jié)一些容易被忽視的問題。

1 造模方法

1.1 動物來源

28日齡的SD大鼠20只（雌雄各半），體重（180±20）g。購自于重慶滕鑫生物公司。分籠喂養(yǎng)，自由飲食，常規(guī)喂養(yǎng)隔一天更換墊料一次，室內(nèi)通風(fēng)良好，室溫，相對濕度50%，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周。

1.2 分組

20只SD大鼠按雌雄隨機分為以下4組，每組5只，分別為：A.雄性正常組；B.雄性肥胖模型組；C.雌性正常組；D.雌性肥胖模型組。

1.3 造模

將雄性大鼠隨機分為A、B兩組，將雌性大鼠隨機分為C、D兩組。普通飼料對照組（A、C兩組每組各5只），給予標(biāo)準(zhǔn)普通飼料，飼料能量組成成分為：55%碳水化合物、5%脂肪、7%灰分、22%蛋白質(zhì)、5%纖維素，飼料熱含量為3.80 kcal/g（購自重慶騰鑫公司）[2]。高脂飼料組（B、D兩組每組各5只），給予高脂飼料喂養(yǎng)，高脂飲料成分為：高脂高糖飼料：40%普通飼料、10%豬油、30%白糖、4%奶粉、16%雞蛋。所有大鼠均自由飲水、進食，光照周期為正常晝夜交替，室內(nèi)溫度（22±2）℃，室內(nèi)濕度40%～70%，定時測量并記錄體重。為保證飼料的一致，所有高脂飼料與普通飼料均購買于正規(guī)動物飼料廠（重慶騰鑫公司），采用我們提供的高脂飼料配方嚴(yán)格按配方比例制作而成；為保證飼料的新鮮，每次購買高脂飼料25 kg。定時觀察大鼠的體重。造模期間，各組大鼠自由攝食，飲食、飲水每日更換。高脂飼料喂養(yǎng)5周后將體重超過普通飼料喂養(yǎng)大鼠平均體重20%以上的大鼠作為肥胖模型大鼠。先適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，均使用普通飼料，從第2周開始將雌雄肥胖組換成高脂飼料喂養(yǎng)，第3、第4周體重均差異不大，但從第5周后稱重，發(fā)現(xiàn)普通飼料組大鼠體重比高脂飼料組大鼠體重有增長趨勢，繼續(xù)觀察2周后稱重，普通飼料組平均體重超過高脂飼料組14.36 g，有少部分大鼠雖攝入高脂飼料，但體重增長緩慢，有肥胖抵抗的特性，不納入研究對象。雌性組普通飼料組大鼠比造模組大鼠明顯重超過20 g左右，后尋找雌性組體重差距原因可能與雌性激素分泌有關(guān)。喂養(yǎng)10周后，雄性普通飼料組大鼠體重明顯增加，雄性高脂組體重與普通組相差不大，后從第11周開始改成高脂飼料加普通飼料混合喂養(yǎng)，但每天大鼠均只吃完普通飼料，高脂飼料仍剩余較多。此后連續(xù)觀察5周，雄性肥胖模型組體重仍然不及普通飼料組，雌性組也一樣。

2 討 論

經(jīng)觀察后發(fā)現(xiàn)高脂飼料不受大鼠喜愛，每次均剩余較多，而大鼠們較青睞普通飼料，仔細分析原因后考慮可能跟高脂飼料的制作和保存有關(guān)，聞起來有較刺激的氣味，正值夏天，飼料沒有保存于-4℃冰箱，導(dǎo)致高脂飼料變質(zhì)，因此大鼠不食用高脂飼料，每天處于饑餓狀態(tài)，致體重較喂食普通飼料組輕。本實驗發(fā)現(xiàn)接受日光較少的大鼠進食量明顯低于接受日光較多的大鼠，因此要保證每一籠的大鼠每日接受日光的時間均等，以免造成作息時間的不同，影響造模結(jié)果。通過觀察發(fā)現(xiàn)大鼠有儲存食物的習(xí)性（將飼料格中的飼料取出，轉(zhuǎn)移至籠中的角落），故在動物籠的選擇上應(yīng)選取不易將整顆飼料取出的型號，以免飼料堆積在籠中被大鼠的排泄物污染，影響進食量。

綜上所述，在造模過程中，高脂飼料配方的選擇是重中之重，是單純性肥胖模型建立成功與否的關(guān)鍵所在，而一些細節(jié)的問題，比如：高脂飼料的口食性，飼料的投放量，每日接受日光的時間，動物籠的選擇，房間的溫度、濕度等，同樣也會影響著造模的結(jié)果。

[1] 湯錦花，嚴(yán)海東.營養(yǎng)性肥胖大鼠模型的建立及評價.[J].同濟大學(xué)學(xué)報,2010,31(1):32-34.

[2] 趙 湘,嵇水玉,陸建紅,等.改良的肥胖大鼠模型的建立及其腎臟病理特點[J].中華臨床醫(yī)師雜志,2013,7(20):9215-9219.

本文編輯：吳 衛(wèi)

R589.2

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ISSN.2095-8242.2017.037.7151.01

國家自然科學(xué)基金（項目批準(zhǔn)號：81560798）

楊碩，男，貴陽中醫(yī)學(xué)院教授，研究方向為穴位埋線對單純性腹型肥胖患者內(nèi)臟脂肪改變的臨床影響