烏倫古河貝加爾雅羅魚人工繁殖技術(shù)研究

林夢(mèng)陽++張健++劉長(zhǎng)龍++李勝忠

摘要 為了探究貝加爾雅羅魚（Leuciscus baicalensis）的人工繁殖技術(shù)，提高苗種生產(chǎn)效率。本試驗(yàn)采用催產(chǎn)法對(duì)貝加爾雅羅魚人工催產(chǎn)、受精、孵化進(jìn)行了研究，研究結(jié)果表明：使用促黃體素釋放激素類似物A2（LRH-A2）10 μg/kg，效應(yīng)時(shí)間為24～48 h，平均催產(chǎn)率達(dá)72.49%±2.01%；平均受精率為83.04%±2.37%；平均孵化率為76.16%±5.84%。強(qiáng)化親魚的產(chǎn)前培育、掌控孵化條件、避免親魚應(yīng)激刺激是貝加爾雅羅魚人工繁殖成敗的3個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

關(guān)鍵詞 烏倫古河；貝加爾雅羅魚；人工繁育技術(shù)

中圖分類號(hào) S965 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2017）01-0229-02

Study on Artificial Breeding Technique of Leuciscus baicalensis in Ulungur River

LIN Meng-yang 1 ZHANG Jian 2 LIU Chang-long 3 LI Sheng-zhong 1 *

（1 College of Animal Science，Xinjiang Agricultural University，Urumqi Xinjiang 830052； 2 Mudanjiang City Fisheries Technology Extension Station； 3 Fuhai County Haifu Special Fish Breeding Limited Liability Company）

Abstract The artificial oxytocin，fertilization and hatching about Leuciscus baicalensis were studied by using the method of oxytocin in this paper，in order to improve producing efficiency of Leuciscus Baicalensis fries.The results showed that the oxytocin hormone′s effect time was 24-48 h and the average rate of oxytocin was 72.49%±2.01% after using A2（LRH-A2）10 μg/kg.The average fertilization rate was 83.04%±2.37%.The average hatching rate was 76.16%±5.84%.Strengthening the prenatal breeding broodstock，controlling the incubation conditions，avoiding brood-stock stress stimulus are the three key links in the artificial breeding of Leuciscus baicalensis.

Key words Ulungur River；Leuciscus baicalensis；artificial breeding technique

貝加爾雅羅魚（Leuciscus baicalensis），地方名又稱小白魚、小白條。屬于鯉科、雅羅魚屬，在我國(guó)僅分布于新疆額爾齊斯河水系和烏倫古河水系[1]。貝加爾雅羅魚有春季溯河產(chǎn)卵的習(xí)性，食性為以水生昆蟲為主的雜食性，成熟個(gè)體尾重?cái)?shù)十克不等。貝加爾雅羅魚肉質(zhì)細(xì)嫩鮮美，肌間刺少，營(yíng)養(yǎng)豐富，價(jià)值高，是新疆地區(qū)最有發(fā)展前途的名優(yōu)經(jīng)濟(jì)魚類之一。近10年來受到過度捕撈以及水利工程施工的影響，貝加爾雅羅魚的種群數(shù)量已非常稀少，貝加爾雅羅魚人工繁殖過程中存在的主要技術(shù)問題是溯河刺激性發(fā)情減少及孵化產(chǎn)卵率不高。因此，研究適宜的貝加爾雅羅魚人工繁殖技術(shù)，對(duì)貝加爾雅羅魚的種群保護(hù)和養(yǎng)殖推廣具有十分重要的意義。

在分子標(biāo)記、生化和生態(tài)等方面已有許多關(guān)于雅羅魚的研究報(bào)道。劉金亮等[2]開展了東北雅羅魚微衛(wèi)星分子標(biāo)記的篩選及特征分析研究，從56對(duì)引物中擴(kuò)增出了清晰條帶，其中23對(duì)具有多態(tài)性。路李鵬等[3]分析了10尾準(zhǔn)噶爾雅羅魚（Leuciscus merzbacheri）眼睛、鰓、肝胰臟等6種組織10種同工酶的差異表達(dá)，對(duì)部分同工酶基因位點(diǎn)及表達(dá)酶譜表型進(jìn)行了分析?；籼帽蟮萚4]對(duì)新疆3種雅羅魚生長(zhǎng)模型進(jìn)行了比較，擬合了烏倫古湖貝加爾雅羅魚、額爾齊斯河高體雅羅魚和賽里木湖新疆雅羅魚等3種雅羅魚的體長(zhǎng)生長(zhǎng)和體重生長(zhǎng)。

目前，國(guó)內(nèi)外關(guān)于貝加爾雅羅魚親魚培育、催產(chǎn)、繁殖尚屬空白。本研究旨在通過開展貝加爾雅羅魚親魚的培育、人工催產(chǎn)和繁殖的研究，從而解決貝加爾雅羅魚種質(zhì)資源保護(hù)和養(yǎng)殖推廣中貝加爾雅羅魚苗種生產(chǎn)效率不高的技術(shù)難題。

1 材料與方法

1.1 親魚來源

本試驗(yàn)所用親魚來自福海縣海富特種魚養(yǎng)殖有限責(zé)任公司。體長(zhǎng)18～22 cm，體重75～120 g，檢查、挑選成熟度發(fā)育較好的雌魚和雄魚進(jìn)行試驗(yàn)。

1.2 親魚產(chǎn)前培育

親魚培育池面積1.0～1.3 hm2，放養(yǎng)密度1 500～2 250 kg/hm2，溶氧量5～10 mg/L。人工投喂自制膨化飼料，投飼率1%～3%。培育親魚時(shí)池塘保持常流水，培育池保持水質(zhì)清新，水色為淡綠色或淡黃綠色。

1.3 雌雄鑒別

從外部形態(tài)上看，很容易識(shí)別雌魚和雄魚。一般雌魚比雄魚個(gè)體大，腹部膨大；雄魚身體短小，腹部相對(duì)狹窄。另外，也可使用擠壓法識(shí)別雌魚和雄魚。

1.4 人工催產(chǎn)

選取性腺發(fā)育至Ⅳ期末的貝加爾雅羅魚親魚，使用促黃體素釋放激素類似物A2（LRH-A2）為催產(chǎn)藥物，以0.6%的NaCl生理鹽水為溶劑，按照雌魚10 μg/kg的劑量，每條魚胸鰭基部注射0.5～1.5 mL；雄魚藥物用量減半。人工催產(chǎn)進(jìn)行1～2 d后，隨機(jī)抽取若干批次的雌魚，統(tǒng)計(jì)分析雌魚產(chǎn)卵情況。

1.5 受精

按照1.0∶（1.0～1.2）的雌雄配比，將注射催產(chǎn)針后的雌魚和雄魚放入水深80～100 cm的產(chǎn)卵池，池底和池壁鋪設(shè)有產(chǎn)卵網(wǎng)片，池內(nèi)有曝氣裝置。每隔6～12 h檢查網(wǎng)片上的產(chǎn)卵情況。產(chǎn)卵1 d后，隨機(jī)抽取若干批次的10 cm×15 cm大小的網(wǎng)片，統(tǒng)計(jì)受精情況。

1.6 孵化

將產(chǎn)卵后的網(wǎng)片移入孵化池中孵化，水溫9～17 ℃，溶氧量5 mg/L以上，8～9 d后破膜。隨機(jī)抽取若干批次的10 cm×15 cm大小的網(wǎng)片，統(tǒng)計(jì)孵化情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 催產(chǎn)試驗(yàn)結(jié)果

本試驗(yàn)對(duì)5個(gè)批次981尾貝加爾雅羅魚雌魚親魚的催產(chǎn)情況進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)。結(jié)果表明，使用促黃體素釋放激素類似物A2（LRH-A2）催產(chǎn)劑對(duì)貝加爾雅羅魚催產(chǎn)的效應(yīng)時(shí)間為24～48 h，催產(chǎn)率范圍為70.20%～74.68%，平均為72.49%±2.01%（表1）。

2.2 受精試驗(yàn)結(jié)果

產(chǎn)卵1 d后，隨機(jī)抽樣檢查了5個(gè)批次產(chǎn)卵網(wǎng)片的受精率。結(jié)果表明，受精率為80.39%～86.67%，平均受精率為83.04%±2.37%（表2）。

2.3 孵化試驗(yàn)結(jié)果

經(jīng)過8～9 d的孵化，貝加爾雅羅魚魚苗開始破膜孵化。隨機(jī)抽樣檢查了5個(gè)批次產(chǎn)卵網(wǎng)片的孵化率。結(jié)果表明孵化率范圍在70.19%～83.15%之間，平均為76.16%±5.84%（表3）。

3 結(jié)論與討論

3.1 貝加爾雅羅魚的繁殖季節(jié)與時(shí)間

任慕蓮[5]指出新疆額爾齊斯河水系貝加爾雅羅魚的繁殖期在4月中下旬，較為集中，產(chǎn)卵期約15 d，有溯河產(chǎn)卵的習(xí)性。郭 焱等[6]的研究表明，貝加爾雅羅魚在新疆賽里木湖生長(zhǎng)緩慢，性腺成熟度延長(zhǎng)，繁殖期在5月底至6月底。本試驗(yàn)所用貝加爾雅羅魚來自新疆阿勒泰地區(qū)福海縣，與新疆額爾齊斯河水系貝加爾雅羅魚同屬一個(gè)水系，它們?cè)诜敝臣竟?jié)和時(shí)間上存在相同的繁殖屬性。因此，本試驗(yàn)選擇在3月底4月初開展貝加爾雅羅魚人工繁殖是合適和可行的。

3.2 影響貝加爾雅羅魚孵化率的關(guān)鍵點(diǎn)

3.2.1 精子和卵子的質(zhì)量。本研究作者認(rèn)為魚類精子和卵子的質(zhì)量狀況是影響貝加爾雅羅魚孵化率高低的首要關(guān)鍵點(diǎn)。國(guó)外許多文獻(xiàn)報(bào)道指出，親魚個(gè)體規(guī)格、繁殖時(shí)間、營(yíng)養(yǎng)狀況、催產(chǎn)劑使用、繁殖頻率等對(duì)魚類的精子和卵子質(zhì)量有很大的影響[7-10]。因此，貝加爾雅羅魚人工繁殖成敗的第一步是做好親魚的產(chǎn)前培育，只有做好產(chǎn)前培育，才能獲得優(yōu)質(zhì)的精子和卵子，才能得到身體結(jié)實(shí)、強(qiáng)壯的魚苗，確保破膜時(shí)強(qiáng)勁有力。樓允東[11]指出魚類胚胎的孵化破膜與胚體的運(yùn)動(dòng)有關(guān)，也證實(shí)了本文作者的觀點(diǎn)。

3.2.2 孵化環(huán)境條件。孵化時(shí)的溫度、溶氧、氨氮等孵化條件的控制狀況是影響貝加爾雅羅魚孵化率高低的第二個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)。樓允東[11]指出魚類孵化酶具有溶解胚膜的作用。樊廷俊等[12]證實(shí)孵化酶的分泌與水體的孵化溫度有著明顯的關(guān)聯(lián)性，在孵化酶分泌過程中當(dāng)溫度降低時(shí)，不僅顯著延遲孵化，而且胚胎的存活率也降低至6.5%～47.0%。因此，魚類孵化時(shí)孵化設(shè)備的選擇、孵化時(shí)的溫度、溶氧、氨氮等孵化條件對(duì)魚苗的孵化起著至關(guān)重要的作用。

魚類胚胎的孵化出膜主要靠?jī)煞矫娴淖饔茫号唧w的運(yùn)動(dòng)和孵化酶的作用[11]。孵化酶的分泌和作用受溫度的影響較明顯[11]。

3.3 應(yīng)激刺激對(duì)親魚產(chǎn)卵的影響

在人工繁殖中，親魚的捕撈、挑選、激素注射等行為均會(huì)構(gòu)成對(duì)親魚的應(yīng)激刺激，這些應(yīng)急刺激對(duì)親魚的性腺發(fā)育、卵和子代的質(zhì)量都有一定的影響。急性應(yīng)激刺激會(huì)直接增加或降低親魚血液中促性腺激素的含量，從而影響親魚的繁殖[13]。本研究在實(shí)施貝加爾雅羅魚人工繁殖時(shí)，盡可能減輕對(duì)貝加爾雅羅魚親魚的應(yīng)激刺激，從親魚的捕撈、挑選、運(yùn)輸?shù)酱弋a(chǎn)激素的注射，都采取了輕捉、輕放、遮眼、安撫等一系列措施，避免了人工繁殖操作時(shí)的應(yīng)激刺激，從而取得了較好的繁殖效果。

4 參考文獻(xiàn)

[1] 任慕蓮.伊犁河魚類資源及漁業(yè)[M].哈爾濱：黑龍江科學(xué)技術(shù)出版社，1998：142-146.

[2] 劉金亮，常玉梅，徐麗華，等.東北雅羅魚微衛(wèi)星分子標(biāo)記的篩選及特征分析[J].華北農(nóng)學(xué)報(bào)，2011（1）：87-93.

[3] 路李鵬，董艷艷，胡文革，等.準(zhǔn)噶爾雅羅魚組織同工酶表達(dá)特性[J].動(dòng)物學(xué)雜志，2012（2）：105-111.

[4] 霍堂斌，馬波，唐富江，等.新疆3種雅羅魚生長(zhǎng)模型的比較研究[J].水產(chǎn)學(xué)雜志，2008（2）：8-14.

[5] 任慕蓮.中國(guó)額爾齊斯河魚類資源及漁業(yè)[M].烏魯木齊：新疆科技衛(wèi)生出版社，2002：119-124.

[6] 郭焱，吐爾遜，蔡林鋼，等.賽里木湖貝加爾雅羅魚Leuciscus baicalensis生長(zhǎng)研究[J].新疆大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2003，20（3）：272-276.

[7] ALAVI S M H，COSSON J.Sperm motility in fishes.I.Effects of temperature and pH：a review[J].Cell Biol Int，2005，29：101-110.

[8] SANSONE G，F(xiàn)ABBROCINI A，LEROPOLI S，et al.Effects of extender composition，cooling rate and freezing on the motility of sea bass spermatozoa after thawing[J].Cryobiology，2002，44：229-239.

[9] CHRIST S A，TOTH G P，MCCARTHY H W，et al.Monthly variation in sperm motility in common carp assessed using computer-assisst-ed sperm analysis（CASA）[J].J Fish Biology，1996，48：1210-1222.

[10] VLADIC T，JARVI T. Sperm motility and fertilization time span in Atlantic salinon and brown trout-the effect of water temperature[J].J Fish Biology，1997，50：1088-1093.

[11] 樓允東.魚類的孵化酶[J].動(dòng)物學(xué)雜志，1965，7（3）：97-101.

[12] 樊廷俊，史振萍.魚類孵化酶的研究進(jìn)展及其應(yīng)用前景[J].海洋與湖沼通報(bào)，2002（1）：48-56.

[13] 王吉橋.應(yīng)激刺激對(duì)養(yǎng)殖魚類繁殖的影響[J].北京水產(chǎn)，2002（2）：12-14.